2025年浙教版選擇性必修3生物下冊月考試卷含答案

…………○…………內…………○…………裝…………○…………內…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年浙教版選擇性必修3生物下冊月考試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五總分得分評卷人得分一、選擇題(共6題，共12分)1、下列關于植物組織培養(yǎng)的敘述中，錯誤的是（）A.其原理是細胞的全能性B.必須在無菌條件下進行C.再分化的過程中需要一定光照D.一般需用培養(yǎng)液進行培養(yǎng)2、下面是四種不同質粒的示意圖，其中ori為復制必需的序列，amp為氨芐青霉素抗性基因，tet為四環(huán)素抗性基因，箭頭表示一種限制性核酸內切酶的酶切位點。若要得到一個能在四環(huán)素培養(yǎng)基上生長而不能在氨芐青霉素培養(yǎng)基上生長的含重組DNA的細胞，應選用的質粒是A.B.C.D.3、下圖是科研人員將藥物與單克隆抗體連接形成的抗體一藥物偶聯(lián)物（ADC）的示意圖；它由抗體；接頭和小分子藥物三部分組成，能實現(xiàn)對腫瘤細胞的選擇性殺傷。例如用于治療乳腺癌的Kadcyla是由阿多曲妥珠單抗和藥物美坦新偶聯(lián)的ADC。敘述錯誤的是（）

A.單克隆抗體從免疫過的B淋巴細胞釋放，體現(xiàn)了生物膜的流動性B.Kadcyla兼具有靶向投遞和抗腫瘤的作用C.ADC實現(xiàn)精準殺傷腫瘤細胞的基礎是抗體與抗原特異性結合D.ADC中接頭穩(wěn)定性偏低會導致其在循環(huán)過程中藥物分子脫落造成“脫靶毒性”4、有關PCR技術，下列敘述不正確的是（）A.是聚合酶鏈式反應，是以DNA聚合酶在體外擴增DNA片段的技術B.在用PCR技術擴增DNA時，DNA的復制過程與細胞內DNA的復制類似C.PCR反應只需在一定的緩沖溶液中提供DNA模板以及四種脫氧核苷酸D.PCR一般經(jīng)歷三十多次循環(huán)，每次循環(huán)分為變性、復性、延伸5、新型冠狀病毒可通過表面的刺突蛋白（S蛋白）與人呼吸道黏膜上皮細胞的ACE2受體結合；侵入人體，引起肺炎。單克隆抗體可阻斷病毒對細胞的粘附或入侵，故抗體藥物的研發(fā)已成為治療新冠肺炎的研究熱點之一。圖為篩選；制備抗S蛋白單克隆抗體的示意圖。下列相關敘述，不正確的是（）

A.給圖中小鼠注射S蛋白，一段時間后從小鼠的脾臟中提取B細胞，與骨髓瘤細胞融合B.經(jīng)HAT培養(yǎng)篩選出來的雜交瘤細胞在體外擴大培養(yǎng)，便可大量生產出抗S蛋白單克隆抗體C.單克隆抗體可以制成診斷盒，用于疾病的診斷D.與血清抗體相比，該方法制備的單克隆抗體靈敏度更高6、1958年，美國科學家斯圖爾德應用植物組織培養(yǎng)技術，將二倍體胡蘿卜韌皮部的一些細胞進行離體培養(yǎng)，最終發(fā)育成完整的新植株（如圖）。關于這一科學事實，下列敘述中錯誤的是（）

①實驗需要無菌和人工控制的條件②培養(yǎng)基中需添加植物激素、無機鹽、糖類等物質③取胡蘿卜的其他部分（如莖、葉、花）不能培養(yǎng)成小植株④圖中培養(yǎng)瓶1和試管2中的成分相同A.①②B.③④C.②③D.①④評卷人得分二、多選題(共9題，共18分)7、下圖1表示的是某DNA分子上的一些限制性內切酶的酶切位點。用XhoI和SalI兩種限制酶分別處理該DNA分子；經(jīng)電泳分離結果如圖2。以下敘述正確的是（）

A.所用兩種限制性核酸內切酶識別的核苷酸序列可能相同B.限制酶通過作用于磷酸二酯鍵和氫鍵得到相應產物C.根據(jù)泳道②電泳示意圖可知使用的限制性內切酶為XhoID.用兩種限制酶同時處理后進行電泳，條帶可多于6條8、根據(jù)某基因上游和下游的堿基序列；設計合成了用于該基因PCR的兩段引物（單鏈DNA）。引物與該基因變性DNA（單鏈DNA）結合為雙鏈DNA的過程稱為復性。下圖是兩引物的Tm（引物熔解溫度，即50%的引物與其互補序列形成雙鏈DNA分子時的溫度）測定結果，以下分析正確的是（）

A.兩引物分別與DNA的兩條互補單鏈結合，是子鏈延伸的起點B.PCR過程中，復性溫度應低于引物的Tm值以提高PCR效率C.若兩引物的脫氧核苷酸數(shù)相同，推測引物2的（G＋C）含量較高D.適當減少引物2的脫氧核苷酸數(shù)，可使其Tm值接近引物19、大多數(shù)哺乳動物的早期胚胎具有調節(jié)發(fā)育的功能，去掉早期胚胎的一半，仍可以發(fā)育成一個完整的胎兒，調節(jié)能力隨著發(fā)育進程逐漸減弱甚至消失。晚期桑椹胚分割后分離的卵裂球仍具有調整發(fā)育的能力，重新致密化使卵裂球重新分布而發(fā)育至囊胚。下列說法正確的是（）A.桑椹胚的每一個細胞都具有發(fā)育成完整胚胎的潛能B.桑椹胚不同部位的細胞致密化程度不同C.胚胎分割屬于無性繁殖或克隆的范疇D.胚胎發(fā)育到原腸胚階段，可將其取出向受體移植10、下列有關動物細胞培養(yǎng)的敘述正確的是（）A.用于培養(yǎng)的細胞大都取自胚胎或幼齡動物的器官或組織B.將所取的組織先用胃蛋白酶等進行處理使其分散成單個細胞C.在培養(yǎng)瓶中要定期用胰蛋白酶使細胞從瓶壁上脫離，制成懸浮液D.動物細胞培養(yǎng)只能傳50代左右，所培養(yǎng)的細胞全部衰老死亡11、下列關于土壤中纖維素分解菌的分離與計數(shù)，敘述正確的是（）A.可從富含腐殖質的林下土壤中篩選產纖維素酶菌B.培養(yǎng)基中應含大量的葡萄糖或蔗糖提供生長營養(yǎng)C.培養(yǎng)微生物的試劑和器具都要進行高壓蒸汽滅菌D.菌種分離和菌落計數(shù)都可以使用固體培養(yǎng)基12、理垃圾的有效方法之一是用微生物對其進行降解，下圖表示篩選高效降解淀粉菌種的過程。下列敘述錯誤的是（）

A.圖中培養(yǎng)基應以淀粉為唯一碳源，將菌液接種到培養(yǎng)基應使用平板劃線法B.菌落①與②周圍透明圈的大小不同原因可能是兩個菌群對碘液分解能力不同C.若菌落①與②分屬細菌和真菌，則二者結構上最主要區(qū)別是有無核膜包被的細胞核D.實驗結束后，為防止造成環(huán)境污染，使用過的培養(yǎng)基應滅菌處理后再倒掉13、克隆動物常用的核移植方法主要有細胞質內注射法和透明帶下注射法兩種。前者是用微型注射針將供體細胞的細胞核吸出注入去核卵母細胞質內；后者是直接將供體細胞注入去核卵母細胞透明帶內，然后促使兩個細胞融合。世界首例體細胞克隆北極狼的供體細胞來自哈爾濱極地公園的一只野生北極狼的皮膚樣本，卵母細胞來自一只處于發(fā)情期的母犬，代孕母體則是一只比格犬。下列敘述錯誤的是（）A.克隆北極狼的性狀由野生北極狼、發(fā)情期的母犬和比格犬的基因共同決定B.相比之下，透明帶下注射法對供體細胞核和卵母細胞的損傷更小C.供體細胞注入卵母細胞透明帶內后，就可自行進入卵母細胞D.細胞分裂、分化形成克隆胚胎的過程中發(fā)生了基因重組14、下列關于現(xiàn)代生物技術的敘述正確的是（）A.從酵母菌細胞中提取到人干擾素說明相應的目的基因完成了在受體細胞中的表達B.在植物細胞與組織培養(yǎng)中，花藥不能作為組織培養(yǎng)的材料C.在動物細胞培養(yǎng)中，用胰蛋白酶處理肝組織可獲得單個肝細胞D.多種顯微操作和處理技術使體外受精、胚胎移植和胚胎分割成為可能15、2019年，中國科學院神經(jīng)科學研究所利用CRISPR—Cas9基因編輯技術，用基因敲除的猴的體細胞通過克隆技術培育出5只克隆疾病猴。下列相關敘述錯誤的是（）A.克隆猴基因組成差異小，可減少個體差異對實驗的干擾B.受精卵經(jīng)基因編輯后形成的胚胎都成功發(fā)育為克隆疾病猴C.克隆疾病猴有助于研究該疾病致病機制和開發(fā)相應藥物D.可以運用該基因編輯技術進行生殖性克隆人的研究評卷人得分三、填空題(共5題，共10分)16、動物細胞融合的意義：克服了______，成為研究_____、_____、腫瘤和生物新品種培育的重要手段。17、利用DNA和蛋白質等其它成分在___________中的溶解度不同，選擇適當?shù)柠}濃度就能使_______充分溶解，而使___________沉淀，或相反。18、沙門氏菌是一種常見的食源性致病菌；被感染了沙門氏菌的人或帶菌者的糞便污染的食品，會使人發(fā)生食物中毒。沙門氏菌的最適繁殖溫度為37°C，在20℃以上即能大出繁殖，其對熱抵抗力不強，在60℃的條件下15min就能被殺死。肉桂精油是從肉桂樹中提煉獲得的，具有不溶于水；易溶于有機溶劑且易揮發(fā)的特性，能抑制沙門氏菌的繁殖?；卮鹣铝袉栴}：

（1）培養(yǎng)沙門氏菌時要進行無菌操作，常用的滅菌方法有________（答出兩種）。用平板培養(yǎng)沙門氏菌時一般需要將平板________（填“倒置”或“正置”）。單個細菌在平板上會形成菌落，研究人員通常可根據(jù)菌落的形狀、大小和顏色等特征來初步區(qū)分不同種的微生物，原因是________。

（2）從雞糞便取樣，經(jīng)選擇培養(yǎng)后需要經(jīng)過一系列________才能將樣品涂布到鑒別培養(yǎng)基上。對獲得的沙門氏菌常采用________的方法長期保存。

（3）根據(jù)題干信息，為避免食用被沙門氏菌污染的食品而引發(fā)的食物中毒，家庭中儲存、加工食品的方法是________。

（4）根據(jù)肉桂精油的化學特性，可采用________法來提取，提取過程中影響精油品質的因素有________。19、細胞產物的工廠化生產。

組織培養(yǎng)技術除了在農業(yè)上的應用外，還廣泛應用于另一個重要的領域，即______。20、今年年初；爆發(fā)了全球性新型肺炎疫情。初步研究表明，新型冠狀病毒通過其表面的S-蛋白與人細胞膜上的ACE2相互識別，感染人的呼吸道上皮細胞。請分析回答問題：

（1）新型冠狀病毒表面的S-蛋白作為_________剌激淋巴細胞，使機體產生_________性免疫反應，人細胞膜上的ACE2的化學本質是_________。

（2）感染病毒后，免疫系統(tǒng)對肺細胞強烈攻擊引發(fā)肺炎，此時可通過適度使用_________對病人進行治療；使其免疫功能下降，以避免肺部嚴重受損。

（3）科學家采集了感染新型冠狀病毒并已康復的甲、乙兩人的血液，檢測相關抗體的水平，結果如圖1。據(jù)此分析，應選取_________的B淋巴細胞用以制備單克隆抗體（單抗）。

（4）將制備的多種單抗分別與病毒混合，然后檢測病毒對宿主細胞的感染率，結果如圖2。據(jù)此分析，對病毒抑制效果最好的單抗是__________號。

（5）患者康復后一段時間，若再次受到該病毒的攻擊，機體內相應的__________細胞迅速增殖分化，產生大量的漿細胞和細胞毒性T細胞。評卷人得分四、實驗題(共4題，共28分)21、某化工廠為了處理排出污水中的一種有害的；難以降解的有機化合物A；其研究團隊用化合物A、磷酸鹽鎂鹽和微量元素等配制了培養(yǎng)基，成功地篩選出能高效降解化合物A的細菌（目的菌）。實驗的主要步驟如下圖所示，請分析回答問題。

（1）在培養(yǎng)基中加入化合物A的目的是______________，這種培養(yǎng)基屬于____________培養(yǎng)基。

（2）培養(yǎng)若干天后，應選擇培養(yǎng)瓶中化合物A含量__________的培養(yǎng)液，接入新的培養(yǎng)液中連續(xù)培養(yǎng)，使目的菌的數(shù)量____________。

（3）若要研究目的菌的生長規(guī)律，可挑取單個菌落進行液體培養(yǎng)，再采用______方法進行計數(shù)。請你預測目的菌的種群數(shù)量會發(fā)生怎樣的變化。

（4）將目的菌用于環(huán)境保護實踐時，還有哪些問題需要解決？_______

（5）有人提出，可以通過改造細菌的基因來獲得能夠降解化合物A的細菌，請分析這種方法是否可行。_______22、丙肝病毒引起的丙型肝炎可導致肝臟慢性炎癥壞死和纖維化；部分患者可能發(fā)展為肝硬化甚至肝癌。為研制丙肝病毒的單克隆抗體，某研究者以小鼠為實驗材料設計了以下實驗流程?；卮鹣铝袉栴}：

(1)為使單細胞懸液中的B淋巴細胞產生的抗體中一定含有能與丙肝病毒結合的抗體，需要進行的操作是______。融合之前的兩種細胞中，能通過動物細胞培養(yǎng)大量增加數(shù)量的是____

(2)誘導細跑融合時利用的病毒表面含有的糖蛋白和一些酶，能夠與細胞膜上的______（填化學本質）發(fā)生作用，使得細胞互相凝聚，細胞膜上的______重新排布，細胞發(fā)生融合。篩選1利用______進行篩選，而篩選2通過多次的_______來完成。

(3)得到大量丙肝病毒單克隆抗體的方法之一是將雜交瘤細胞在體外培養(yǎng)液中進行培養(yǎng)，接入培養(yǎng)液中雜交瘤細胞的量是單克隆抗體產量的重要影響因素之一，為探究一定培養(yǎng)液中接種雜交瘤細胞的最佳數(shù)量，實驗思路為_______。23、玉米是重要的糧食作物；其葉片細胞中的P蛋白是一種水通道蛋白，由P基因編碼，在植物生長發(fā)育過程中對水分的吸收具有重要的調節(jié)功能。科研人員成功培育出超量表達P蛋白轉基因玉米，所用DNA片段和Ti質粒的酶切位點如圖所示，請回答下列問題：

(1)強啟動子是一段有特殊結構的DNA片段，能被_______識別并結合，驅動基因的持續(xù)轉錄，如將強啟動子插入到玉米葉綠體某基因內部，可獲得該基因_______突變株。為使P基因在玉米植株中超量表達，應優(yōu)先選用_______酶組合，將Ti質粒切開后構建重組表達載體。T-DNA在該實驗中的作用是_______。

(2)將農桿菌浸泡過的玉米愈傷組織去菌后進行組織培養(yǎng)，培養(yǎng)基中需加入_______進行篩選，此物質屬于氨基糖苷類抗生素，它能抑制蛋白質在葉綠體和線粒體中合成，使植物的光合作用和_______受到干擾；從而引起植物細胞死亡。

(3)愈傷組織是一種相對沒有分化的_______團，經(jīng)液體懸浮培養(yǎng)叮以分散成胚性細胞，在適宜的培養(yǎng)基中，這種單細胞可以發(fā)育成_______；再繼續(xù)發(fā)育成轉基因玉米株系。

(4)影響玉米愈傷組織能否成功再生出植株的因素有植物激素的配比、愈傷組織繼代次數(shù)以及_______等。目前，組織培養(yǎng)過程中培養(yǎng)瓶常用透氣封口膜封口，目的是_______。24、下圖是某同學設計的傳統(tǒng)發(fā)酵裝置示意圖。比較傳統(tǒng)發(fā)酵技術與現(xiàn)代發(fā)酵工程；回答下列問題：

(1)傳統(tǒng)發(fā)酵釀酒與現(xiàn)代工業(yè)發(fā)酵釀酒的原理是______。請設計簡單的實驗驗證發(fā)酵過程中產生了酒精（不考慮發(fā)酵液中葡萄糖的影響），寫出實驗思路并預期實驗結果與結論______。

(2)傳統(tǒng)發(fā)酵技術一般以天然存在的______發(fā)酵，品質不一，現(xiàn)代工業(yè)發(fā)酵一般為單一菌種發(fā)酵，品質較高。自制的果酒并非商品意義上的產品，在實際生產中還需要經(jīng)過______裝瓶等過程才能獲得成品酒。

(3)若要測定發(fā)酵罐中酵母菌的種群密度，取10mL發(fā)酵液稀釋1000倍，利用25×16的血細胞計數(shù)板，觀察并統(tǒng)計到中方格中的酵母菌平均數(shù)為9個，則每毫升發(fā)酵液中酵母菌數(shù)量約是______個。

(4)利用上圖中裝置釀酒與釀醋時，操作上的最主要的區(qū)別是______。評卷人得分五、綜合題(共4題，共28分)25、為了研究低溫誘導對某基因的啟動子P活性的影響；科研人員進行了啟動子P的PCR提??；特定表達載體的構建和轉基因煙草的功能鑒定。該基因及其啟動子P的結構及相應限制酶的切割位點如下圖所示，圖中灰色區(qū)域堿基序列是已知的，啟動子P（圖中黑色區(qū)域）及上游堿基序列未知，片段I和片段II中的字母A~F均表示引物。請回答下列問題。

（1）啟動子是_________的位點。不能直接根據(jù)片段I擴增啟動子P的原因是_________。

（2）為了能擴增正常啟動子P，科研人員先用_________酶處理上圖中的片段I，使片段I成為環(huán)狀DNA；再將環(huán)狀DNA用_________（填“酶1”或“酶2”）處理得到了片段II，如下圖所示。根據(jù)片段II能不能擴增出啟動子P？若能，請寫出可選用的引物組合（用C、D、E、F表示），若不能請說明理由_________。

（3）已知卡那霉素可抑制煙草細胞的生長，基因M可在煙草的根部正常表達，其表達產物可將X－Gluc水解生成藍色物質。將啟動子P和基因M結合并與含有卡那霉素抗性基因的Ti－質粒重組構建基因表達載體。將表達載體和酚類物質混合后加人含有煙草細胞的培養(yǎng)基中，酚類物質的作用是________。再用含有________的培養(yǎng)基篩選出所需的煙草細胞，然后經(jīng)過________獲得轉基因煙草植株。

（4）將上述轉基因煙草植株分為A、B兩組，A組在常溫（25℃，對照組）下培養(yǎng)，B組在低溫（4℃，實驗組）下培養(yǎng)，一段時間后取A、B的幼根，浸入適量________溶液中，觀察煙草細胞中基因M的表達情況（表達強度越大，細胞表現(xiàn)的藍色越深）。若A、B組的結果分別為________，則說明低溫抑制啟動子P的功能。26、胰島素A、B鏈分別表達法是生產胰島素的方法之一。圖1是該方法所用的基因表達載體,圖2表示利用大腸桿菌作為工程菌生產人胰島素的基本流程(融合蛋白A、B分別表示-半乳糖苷酶與胰島素A；B鏈融合的蛋白)。請回答下列問題:

(1)圖1基因表達載體中沒有標注出來的基本結構是______________。

(2)圖1中啟動子是_________酶識別和結合的部位，有了它才能啟動目的基因的表達；氨芐青霉素抗性基因的作用是__________________。

(3)構建基因表達載體時必需的工具酶有___________________。

(4)β-半乳糖苷酶與胰島素A鏈或B鏈融合表達,可將胰島素肽鏈上蛋白酶的切割位點隱藏在內部,其意義在于_____________________________________。

(5)溴化氰能切斷肽鏈中甲硫氨酸羧基端的肽鍵,用溴化氰處理相應的融合蛋白能獲得完整的A鏈或B鏈,且-半乳糖苷酶被切成多個肽段,這是因為___________________________________。

(6)根據(jù)圖2中胰島素的結構,請推測每個胰島素分子中所含游離氨基的數(shù)量。你的推測結果是_____,理由是____。27、回答下列問題：

（1）取少量酸奶，用無菌蒸餾水稀釋后，再用______蘸取少量的稀釋液，在MRS乳酸菌專用培養(yǎng)基的平板上劃線，以獲得乳酸菌單菌落。如圖所示的劃線分離操作，正確的是______。

（2）國標規(guī)定牛奶中的細菌含量不能超過200萬個/mL。牛奶罐裝時需要實時檢測其中的細菌含量，此時不宜采用稀釋涂布平板法接種來計數(shù)菌落，原因是______。

（3）制作饅頭時；可以先用酵母菌和面，隨后放置約1h，而發(fā)了之后再揉面并制成饅頭劑子，將饅頭劑子放置約10min，然后將饅頭劑子置于蒸鍋中蒸。

①面發(fā)了之后體積會增大，原因是______。

②小明制作的饅頭經(jīng)常會發(fā)酸，推測饅頭中的酸味可能是醋酸桿菌或乳酸菌等產酸的微生物所導致的。小明用保鮮膜將發(fā)面的容器密封起來，饅頭劑子也用保鮮膜涂油覆蓋，結果饅頭就不酸了。據(jù)此判斷導致饅頭發(fā)酸的微生物主要是______，判斷的依據(jù)是______。28、研究發(fā)現(xiàn)，實體腫瘤內部通常是缺氧的環(huán)境，蓖麻毒素蛋白（RTA）可作用于核糖體，使蛋白合成受阻，從而引起細胞死亡。TAT是一種短肽，可轉導蛋白進入細胞，含有氧依賴性降解區(qū)域ODD（多肽）的融合蛋白可以適應低氧條件穩(wěn)定存在，但在常氧條件下會被蛋白酶降解?？蒲腥藛T以RTA作為抑制腫瘤細胞增殖的活性分子，利用TAT的作用將融合蛋白轉運進入腫瘤細胞，并利用ODD的作用減輕RTA對正常細胞的毒性，分別構建了含TAT-RTA（660bp）和TAT-RTA-ODD（870bp）融合基因的表達載體；并成功得到相關融合蛋白。

(1)可采用PCR的方法獲取融合基因TAT-RTA，需要根據(jù)TAT和RTA基因設計引物，引物的作用是____________。已知RTA基因和欲得到的TAT-RTA融合基因的結構如圖1所示，TAT基因編碼鏈序列5'ATGAGCTACGGCCGTAAAAAGAGACGCCAACGTAGA3′，為順利構建表達載體，需要在引物1的5′端加入____________酶切位點，引物2的5′端加入____________酶切位點，利用TAT和RTA核酸序列設計引物時，要求在RTA蛋白的前端引人TAT短肽，請根據(jù)要求寫出引物1____________（寫出引物5′端的12個堿基即可）。

(2)載體的部分結構如圖2所示，His標簽由連續(xù)的6個組氨酸構成，可用于對重組融合蛋白進行分離純化，將PCR得到的TAT-RTA融合基因和載體雙酶切后，再用____________酶連接。但是在研究時，發(fā)現(xiàn)融合蛋白中沒有His標簽蛋白，據(jù)圖分析原因是____________?？赏ㄟ^引物2的特殊設計使His標簽正常表達，請結合圖1和圖2寫出引物2____________（引物中如需添加堿基補足對應的密碼子；可以添加任意堿基）。

(3)科研人員將得到的重組融合蛋白經(jīng)腹腔給藥荷瘤小鼠（患實體腫瘤的小鼠稱為荷瘤小鼠）；研究荷瘤小鼠腫瘤體積變化，結果如圖3所示；

請寫出本實驗的結果____________。

產生該實驗結果的原因是____________。參考答案一、選擇題(共6題，共12分)1、D【分析】【分析】

1；植物組織培養(yǎng)的原理：植物細胞具有全能性。

2；植物組織培養(yǎng)的條件：①細胞離體和適宜的外界條件（如適宜溫度、適時的光照、pH和無菌環(huán)境等）；②一定的營養(yǎng)（無機、有機成分）和植物激素（生長素和細胞分裂素）。決定植物脫分化和再分化的關鍵因素是植物激素的種類和比例；特別是生長素和細胞分裂素的協(xié)同作用在組織培養(yǎng)過程中非常重要，被稱為“激素杠桿”。

【詳解】

A；植物組織培養(yǎng)所依據(jù)的原理是細胞的全能性；A正確；

B；為保證實驗成功；植物組織培養(yǎng)技術必須在無菌條件下進行，B正確；

C；由愈傷組織再分化過程中需要光照；原因是葉肉細胞中的葉綠素的合成需要光照，C正確；

D；植物組織培養(yǎng)一般需要用MS的固體培養(yǎng)基；D錯誤。

故選D。2、C【分析】【分析】

基因表達載體的元件：復制原點；啟動子、終止子、目的基因和標記基因。

【詳解】

質粒中amp和tet均為標記基因；若要得到一個能在四環(huán)素培養(yǎng)基上生長而不能在氨芐青霉素培養(yǎng)基上生長的含重組DNA的細胞，目的基因應該插入到amp上，破壞amp，保證tet的完整性。綜上所述，ABD不符合題意，C符合題意。故選C。

【點睛】

標記基因的作用：為了鑒別受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來，如amp和tet。3、A【分析】【分析】

由于單克隆抗體的特異性強；能特異性識別抗原，因此可以把抗癌細胞的單克隆抗體跟放射性同位素；藥物等相結合，制成“生物導彈”，借助單克隆抗體的定位導向作用將藥物定向帶到癌細胞，在原位殺死癌細胞，療效高，副作用小，位置準確。

【詳解】

A；單克隆抗體由免疫過的B淋巴細胞（漿細胞）與瘤細胞形成的雜交瘤細胞合成并分泌；分泌過程為胞吐過程，體現(xiàn)了生物膜的流動性，A錯誤；

B；Kadcyla中的抗體能實現(xiàn)靶向投遞（濃縮效應）；藥物能實現(xiàn)抗腫瘤的作用，B正確；

C；ADC是采用特定技術將具有生物活性的小分子藥物連接到單克隆抗體上；實現(xiàn)對腫瘤細胞精準的選擇性殺傷，ADC實現(xiàn)精準殺傷腫瘤細胞的基礎是抗體與抗原特異性結合，C正確；

D；由圖可知；ADC中接頭的作用是連接藥物分子，其穩(wěn)定性偏低可能會導致藥物分子脫落，進而與正常細胞接觸，造成“脫靶毒性”，D正確。

故選A。4、C【分析】【分析】

PCR技術：

1；概念：PCR全稱為聚合酶鏈式反應；是一項在生物體外復制特定DNA的核酸合成技術。

2；原理：DNA復制。

3；前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對引物。

4；條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）；

5；過程：①高溫變性：DNA解旋過程（PCR擴增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶；高溫條件下氫鍵可自動解開）；低溫復性：引物結合到互補鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。

【詳解】

A；聚合酶鏈式反應；是用DNA聚合酶在體外擴增DNA片段的技術，A正確；

B；在用PCR技術擴增DNA時；DNA的復制過程與細胞內DNA的復制類似，B正確；

C；PCR反應需在一定的緩沖溶液中進行；需提供DNA模板、一對引物、四種脫氧核苷酸及熱穩(wěn)定DNA聚合酶等，C錯誤；

D；PCR一般經(jīng)歷三十多次循環(huán)；每次循環(huán)均分為變性、復性和延伸三個階段，D正確。

故選C。

【點睛】5、B【分析】【分析】

單克隆抗體的制備時動物細胞融合技術的應用之一；此過程中需要先注射抗原，使生物體產生具有免疫能力的B淋巴細胞，再將B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合，并篩選出能產生特異性抗體和大量增殖的雜交瘤細胞，最后經(jīng)過體內和體外培養(yǎng)獲取單克隆抗體。單克隆抗體具有特異性強；靈敏度高，并可能大量制備的優(yōu)點。

【詳解】

A；給圖中小鼠注射S蛋白；檢測到小鼠血清出現(xiàn)S蛋白抗體之后，說明小鼠已經(jīng)產生了相應的體液免疫過程，這時從脾臟中獲得相應B淋巴細胞，并誘導其與骨髓瘤細胞融合，A正確；

B；經(jīng)HAT培養(yǎng)基篩選得到雜交瘤細胞經(jīng)克隆化培養(yǎng)后還需進行抗體檢測才能用于單克隆抗體的生產；B錯誤；

C；根據(jù)抗原-抗體特異性結合的原理；將單克隆抗體制成診斷盒，用于疾病的診斷，C正確；

D；一般抗血清中的抗體是一群識別不同抗原部位的抗體混合物；而單克隆抗體識別抗原部位具有專一性，所以單克隆抗體比血清抗體的靈敏度更高，D正確。

故選B。

【點睛】6、B【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)就是在無菌和人工控制的條件下；將離體的植物器官；組織、細胞，培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上，給予適宜的培養(yǎng)條件，誘導其產生愈傷組織、叢芽，最終形成完整的植株。

【詳解】

①植物組織培養(yǎng)需要在無菌；無毒的條件下進行；培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上，給予適宜的培養(yǎng)條件，①正確；

②培養(yǎng)基中需添加植物激素（主要是生長素和細胞分裂素）調節(jié)生命活動；無機鹽、蔗糖等營養(yǎng)物質滿足植物代謝的需求；②正確；

③植物組織培養(yǎng)利用植物細胞的全能性；胡蘿卜的其他部分（如莖；葉、花）也具有全能性，因此能培養(yǎng)成小植株，③錯誤；

④圖中培養(yǎng)瓶1中進行的是脫分化過程；而試管2中是再分化過程，因此二者的成分不完全相同，④錯誤。

③④錯誤。

故選B。二、多選題(共9題，共18分)7、C:D【分析】【分析】

題圖分析：限制酶SalⅠ有三處切割位點；切割后產生4個DNA片段，泳道①中是用SalⅠ處理得到的酶切產物；限制酶XhoⅠ有2處切割位點，切割后產生3個DNA片段，泳道②中是用XhoⅠ處理得到的酶切產物。

【詳解】

A；酶具有專一性；不同的限制酶識別并切割不同的核苷酸序列，A錯誤；

B；限制酶通過作用于磷酸二酯鍵得到相應產物；B錯誤；

C；分析圖1；限制酶XhoⅠ有2處切割位點，切割后產生3個DNA片段，泳道②中是用XhoⅠ處理得到的酶切產物，C正確；

D；用兩種限制酶同時處理后進行電泳；若某些位點未被切割，則條帶可多于6條，D正確。

故選CD。8、A:B:C:D【分析】【分析】

分析曲線圖：引物2的Tm高于引物1；說明引物2的熱穩(wěn)定性較高。

【詳解】

A；PCR過程是目的基因DNA受熱變性后解鏈為單鏈；引物與單鏈互補結合，合成的子鏈在Taq聚合酶的作用下進行延伸，所以兩引物分別與DNA的兩條互補單鏈結合，是子鏈延伸的起點，A正確；

B；PCR過程中；復性溫度應低于引物的Tm值以提高PCR效率，B正確；

C；DNA含有的氫鍵數(shù)越多；其熱穩(wěn)定性越高，而A和T堿基對間有兩個氫鍵，C和G堿基對間有三個氫鍵，曲線圖顯示：引物2的Tm高于引物1，說明引物2的熱穩(wěn)定性較高，因此若兩引物的脫氧核苷酸數(shù)相同，推測引物2的（G＋C）含量較高，C正確；

D；適當減少引物2的脫氧核苷酸數(shù)；會降低引物2的熱穩(wěn)定性，可使其Tm值接近引物1，D正確。

故選ABCD。9、A:C【分析】【分析】

當胚胎細胞數(shù)目達到32個左右時；胚胎形成致密的細胞團，形似桑椹，叫做桑椹胚；實驗證實，這一階段前的每一個細胞都具有發(fā)育成完整胚胎的潛能，屬于全能細胞，這些細胞都是由受精卵經(jīng)有絲分裂產生的。

【詳解】

A；桑椹胚前的每一個細胞都具有發(fā)育成完整胚胎的潛能；屬于全能細胞，A正確；

B；囊胚期細胞可分化內細胞團和滋養(yǎng)層兩部分；不同部位的細胞致密化程度有差異，桑椹胚不同部位的細胞致密化程度相同，B錯誤；

C；胚胎分割是指采用機械方法將早期胚胎切割成2等分、4等分或8等分等；經(jīng)移植獲得同卵雙胚或多胚的技術，胚胎分割屬于無性繁殖或克隆的范疇，C正確；

D；胚胎移植一般選擇桑椹胚或囊胚期進行；D錯誤。

故選AC。10、A:C【分析】【分析】

動物細胞培養(yǎng)條件：（1）無菌、無毒的環(huán)境：①消毒、滅菌②添加一定量的抗生素③定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物。（2）營養(yǎng)物質：糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質。（3）溫度和pH。（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細胞代謝必需的）和5%的CO2（維持培養(yǎng)液的pH）。

【詳解】

A；用于培養(yǎng)的細胞大都取自胚胎或幼齡動物的器官或組織；因為胚胎或幼齡動物的器官或組織分裂能力旺盛，A正確；

B；動物細胞培養(yǎng)中需先用胰蛋白酶使所取的組織分散成單個細胞；胃蛋白酶的最適pH值呈酸性，而細胞培養(yǎng)液的pH大多數(shù)是7.2-7.4，B錯誤；

C；細胞存在接觸抑制；因此在培養(yǎng)瓶中要定期用胰蛋白酶使細胞從瓶壁上脫離，制成懸浮液進行傳代培養(yǎng)，C正確；

D；動物細胞培養(yǎng)傳到50左右不能再繼續(xù)傳代；部分細胞遺傳物質改變，具有癌變細胞的特點，可以在培養(yǎng)條件下無限制的傳代下去，D錯誤。

故選AC。

【點睛】11、A:D【分析】【分析】

纖維素分解菌能合成和分泌纖維素酶，纖維素酶是一種復合酶，包括C1酶；Cx酶和葡萄糖苷酶；前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖，第三種酶將纖維二糖分解成葡萄糖。用以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基可以篩選出纖維素分解菌。

【詳解】

A；木材、秸稈中富含纖維素；故可以從富含腐殖質的林下土壤中篩選產纖維素酶菌，A正確；

B；應該用以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基篩選纖維素分解菌；只有纖維素分解菌能夠存活，B錯誤；

C；接種室、接種箱等常用紫外線消毒法處理；接種環(huán)等常用灼燒滅菌法處理，吸管、培養(yǎng)皿等常用干熱滅菌法處理，培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌法處理，C錯誤；

D；菌落只能在固體培養(yǎng)基中形成；菌種分離和菌落計數(shù)都可以使用固體培養(yǎng)基，D正確。

故選AD。12、A:B【分析】【分析】

1.微生物接種常用的兩種方法：

①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過足夠稀釋后；均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后，可形成單菌落。

2.選擇培養(yǎng)基中培養(yǎng)基中加入某種化學成分；根據(jù)某種微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某化學；物理因素的抗性而設計的培養(yǎng)基使混合菌樣中的劣勢菌變成優(yōu)勢菌，從而提高該菌的篩選率。

【詳解】

A；篩選高效降解淀粉的菌種；則選擇培養(yǎng)基中的碳源應為淀粉，根據(jù)圖示可知，圖中菌株采用稀釋涂布平板法進行接種，目的是使菌落分布較均勻，然后放在相同且適宜條件下培養(yǎng)，A錯誤；

B；高效降解淀粉的菌種可以產生淀粉酶將培養(yǎng)基中的淀粉水解；因此可以用碘液鑒定培養(yǎng)基中淀粉的分解情況，菌落形成后加入碘液染色，比較菌株菌落周圍透明圈的大小。產生的淀粉酶活性越高，淀粉分解量越多，培養(yǎng)基中篩選菌落周圍透明圈越大，因此圖中菌落①與菌落②周圍透明圈的大小不同，說明分泌的淀粉酶活性不同，B錯誤；

C；①②分別屬于真菌和細菌；真菌屬于真核生物，有以核膜為界限的細胞核，細菌屬于原核生物，沒有以核膜為界限的細胞核，只有擬核，C正確；

D；實驗結束后；對使用過的培養(yǎng)基要滅菌處理后再倒掉，以防止雜菌污染環(huán)境，D正確。

故選AB。13、A:C:D【分析】【分析】

動物核移植是指將動物的一個細胞的細胞核；移入一個已經(jīng)去掉細胞核的卵母細胞中，使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發(fā)育成為動物個體。

【詳解】

A；克隆北極狼的供體細胞來自野生北極狼；卵母細胞來自發(fā)情期的母犬，因此性狀由野生北極狼、發(fā)情期的母犬的基因共同決定，比格犬只是代孕母體，不提供遺傳物質，A錯誤；

B；透明帶下注射法不抽取供體細胞的細胞核；操作簡單且對供體細胞核損傷小，同時注射的位置是卵母細胞外的透明帶，然后誘導兩個細胞融合，對卵母細胞的損傷小，B正確；

C；供體細胞注入卵母細胞透明帶內后；還需要電融合法等誘導才能使供體細胞進入卵母細胞形成重構胚，C錯誤；

D；細胞分裂、分化形成克隆胚胎的過程是有絲分裂過程；而基因重組發(fā)生在減數(shù)分裂過程，D錯誤。

故選ACD。14、A:C:D【分析】【分析】

1；動物細胞培養(yǎng)過程：取動物組織塊--剪碎組織--用胰蛋白酶處理分散成單個細胞--制成細胞懸液--轉入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）--放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)--貼滿瓶壁的細胞用酶分散為單個細胞；制成細胞懸液--轉入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）--放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

2；胚胎工程是指對動物早期胚胎或配子所進行的多種顯微操作和處理技術；如體外受精、胚胎分割、胚胎移植、胚胎干細胞培養(yǎng)等技術。

【詳解】

A；干擾素是人體的蛋白質；故從酵母菌細胞中提取到人的干擾素，說明目的基因已經(jīng)完成了在受體細胞中的表達，A正確；

B；在植物細胞和組織培養(yǎng)中；花藥可以進行離體培養(yǎng)成單倍體植株，B錯誤；

C；使用酶解法可以獲得單個細胞；故在動物細胞培養(yǎng)中，用胰蛋白酶處理肝組織可獲得單個肝細胞，C正確；

D；對動物早期胚胎或配子所進行的多種顯微操作和處理技術；使體外受精、胚胎移植和胚胎分割成為可能，D正確。

故選ACD。

【點睛】15、B:D【分析】【分析】

動物細胞核移植技術是指將動物的一個細胞的細胞核移入一個已經(jīng)去掉細胞核的卵母細胞中；使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發(fā)育成動物個體。用核移植的方法得到的動物稱為克隆動物。

【詳解】

A；5只克隆疾病猴是由猴的體細胞通過克隆技術（屬于無性繁殖）獲得的；所以其基因組成差異小，可減少個體差異對實驗的干擾，A正確；

B；經(jīng)基因編輯后形成的胚胎不一定都能發(fā)育成克隆疾病猴；B錯誤；

C；克隆疾病猴有助于研究該疾病致病機制和開發(fā)相應藥物；C正確；

D；不能利用該技術進行克隆人的研究；D錯誤。

故選BD。

【點睛】三、填空題(共5題，共10分)16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】遠緣雜交的不親和性細胞遺傳細胞免疫、17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】不同濃度的NaCL溶液DNA雜質18、略

【分析】【分析】

微生物實驗中常用的滅菌方法有干熱滅菌；高壓蒸汽滅菌和灼燒滅菌；其中對于培養(yǎng)基一般用高壓蒸汽滅菌，對于接種環(huán)一般用灼燒滅菌，對于培養(yǎng)皿等可以用干熱滅菌。培養(yǎng)基放入培養(yǎng)箱中需要倒置培養(yǎng)，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基造成污染。對于頻繁使用的菌種，可以采用臨時保藏的方法，即將菌種接種到試管的固體斜面培養(yǎng)基上，在合適的溫度下培養(yǎng)，當菌落長成后將試管放入4℃的冰箱中保藏，以后每3-6個月都要重新將菌種從舊的培養(yǎng)基上轉移到新鮮的培養(yǎng)基上；對于需要長期保存的菌種可以采用甘油管藏法，在3mL的甘油瓶中裝入1mL甘油后滅菌，將1mL培養(yǎng)的菌液轉移到甘油瓶中，與甘油充分混勻后放在-20℃的冷凍箱中保存。植物有效成分的提取方法主要有蒸餾法、壓榨法和萃取法，如玫瑰精油的化學性質穩(wěn)定，難溶于水，易溶于有機溶劑，能隨水蒸氣一同蒸餾，常采用蒸餾法提?。粚τ谌玳倨ぞ?，其主要儲存在橘皮部分，由于橘皮精油的有效成分在用水蒸氣蒸餾時會發(fā)生部分水解，又會產生原料焦糊問題，所以一般采用壓榨法提取。

【詳解】

（1）微生物培養(yǎng)中常用的滅菌方法有高壓蒸汽滅菌法；灼燒滅菌法、干熱滅菌法等。用平板培養(yǎng)沙門氏菌時一般需要將平板倒置；可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基造成污染。在一定的培養(yǎng)條件下，不同種微生物表現(xiàn)出各自穩(wěn)定的菌落特征，因此單個細菌在平板上會形成菌落，通常可根據(jù)菌落的形狀、大小和顏色等特征來初步區(qū)分不同種的微生物。

（2）從雞糞便取樣；經(jīng)選擇培養(yǎng)后，如果要將樣品涂布到鑒別培養(yǎng)基上，需要經(jīng)過一系列梯度稀釋。對獲得的沙門氏菌進行長期保存常采用甘油管藏法。

（3）根據(jù)題干信息；沙門氏菌的最適繁殖溫度為37°C，在20℃以上即能大出繁殖，其對熱抵抗力不強，在60℃的條件下15min就能被殺死，因此為避免食用被沙門氏菌污染的食品而引發(fā)的食物中毒，家庭中可采取低溫儲存；高溫加工方法進行處理。

（4）根據(jù)題意；肉桂精油不溶于水；易溶于有機溶劑且易揮發(fā)，故可采用水蒸氣蒸餾法進行提取，提取過程中蒸餾的溫度、時間都會影響精油品質。

【點睛】

本題主要考查現(xiàn)代生物科技的原理和運用，意在考查考生的識記能力和理解所學知識要點，把握知識間內在聯(lián)系，形成知識網(wǎng)絡結構的能力，能運用所學知識，準確判斷問題的能力。【解析】灼燒滅菌法、高壓蒸汽滅菌法、干熱滅菌法倒置在一定的培養(yǎng)條件下，不同種微生物表現(xiàn)出各自穩(wěn)定的菌落特征梯度稀釋甘油管藏低溫儲存、高溫加工水蒸氣蒸餾蒸餾的溫度、時間19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】細胞產物的工廠化生產。20、略

【分析】【分析】

分析圖1：表示多年前感染EV并已康復的甲；乙兩人的血液中抗EV-GP抗體的水平。根據(jù)曲線圖可知；多年前感染EV并已康復的甲的血液中抗EV-GP抗體水平明顯高于乙和對照組。

分析圖2：表示單抗與病毒混合后病毒對宿主細胞的感染率。根據(jù)柱形圖可知；單克隆抗體和病毒混合，加入單抗Ⅲ；Ⅴ后，病毒對宿主細胞的感染率明顯低于其他組別。

【詳解】

（1）由題意可知；新型冠狀病毒表面的S-蛋白作為抗原刺激淋巴細胞，使機體產生特異性免疫反應，人細胞膜上的ACE2的化學本質是蛋白質。

（2）免疫系統(tǒng)對被新冠病毒感染后肺細胞強烈攻擊引發(fā)肺炎；此時可通過適度使用免疫抑制劑對病人進行治療，使其免疫功能下降，以避免肺部嚴重受損。

（3）由圖1可知；多年前感染EV并已康復的甲的血液中抗EV-GP抗體水平明顯高于乙和對照組，故應選取甲的B細胞用以制備單克隆抗體。

（4）由圖2可知；單克隆抗體和病毒混合，加入單抗Ⅲ后，病毒對宿主細胞的感染率較低。因此抑制效果最好的單抗是Ⅲ。

（5）患者康復后一段時間；若再次受到該病毒的攻擊，機體內相應的記憶細胞迅速增殖分化，產生大量的漿細胞和細胞毒性T細胞。

【點睛】

本題結合圖解，考查病毒、單克隆抗體的制備等，要求考生識記病毒的結構，明確病毒沒有細胞結構；識記單克隆抗體的制備過程，掌握其優(yōu)點及相關應用，能結合圖中信息準確答題【解析】①.抗原②.特異③.糖蛋白（或蛋白質）④.免疫抑制劑⑤.甲⑥.Ⅲ⑦.記憶四、實驗題(共4題，共28分)21、略

【分析】【分析】

分析題干信息；該實驗的目的是篩選出高效降解化合物A的細菌，在以化合物A為唯一碳源的培養(yǎng)基中只有能降解化合物A的微生物才能以化合物A為碳源和氮源生長繁殖，不能利用化合物A的微生物因缺乏碳源和氮源，無法生長繁殖。

【詳解】

（1）由題意可知；本實驗是分離出降解的有機化合物A的菌種，所以培養(yǎng)基中加入化合物A的目的是篩選降解的有機化合物A的菌種，這種培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。

（2）由于“目的菌”有降解的有機化合物A的作用；所以培養(yǎng)若干天后，應選擇培養(yǎng)瓶中化合物A含量低的培養(yǎng)基，接入新的培養(yǎng)液中連續(xù)培養(yǎng)，使“目的菌”的數(shù)量進一步增加。

（3）若研究“目的菌”的群體生長規(guī)律；將單個菌落進行液體培養(yǎng)，再采用稀釋涂布平板方法進行計數(shù)。培養(yǎng)液中目的菌的種群數(shù)量在開始一段時間范圍內，由于營養(yǎng)充分；空間充裕，種群數(shù)量類似于“J”形增長，隨著營養(yǎng)物質的消耗，種群增長速率逐漸下降，最終會達到K值，繼續(xù)培養(yǎng)，由于營養(yǎng)物質缺乏、有害代謝物積累、pH改變等，種群數(shù)量將會下降。

（4）將目的菌用于環(huán)境保護實踐之前；還要對目的菌進行研究，檢測其是否會產生對環(huán)境有害的代謝物；當使用大量目的菌時會不會使目的菌成為優(yōu)勢菌群，對其他微生物的生存構成威脅，從而打破微生物菌群的平衡等。

（5）可以利用基因工程的方法；將能降解化合物A的基因導入受體菌中來實現(xiàn)。但在使用之前要檢驗其安全性。

【點睛】

本題考查了微生物分離與培養(yǎng)的有關知識，要求考生能夠識記培養(yǎng)基的成分和培養(yǎng)條件，掌握微生物分離與純化的方法與步驟，再結合所學知識準確判斷。【解析】篩選出能降解化合物A的細菌選擇低增多稀釋涂布平板培養(yǎng)液中目的菌的種群數(shù)量在開始一段時間范圍內，由于營養(yǎng)充分、空間充裕，種群數(shù)量類似于“J”形增長，隨著營養(yǎng)物質的消耗，種群增長速率逐漸下降，最終會達到K值，繼續(xù)培養(yǎng)，由于營養(yǎng)物質缺乏、有害代謝物積累、pH改變等，種群數(shù)量將會下降將目的菌用于環(huán)境保護實踐之前，還要對目的菌進行研究，檢測其是否會產生對環(huán)境有害的代謝物；當使用大量目的菌時會不會使目的菌成為優(yōu)勢菌群，對其他微生物的生存構成威脅，從而打破微生物菌群的平衡等可以利用基因工程的方法，將能降解化合物A的基因導入受體菌中來實現(xiàn)。但在使用之前要檢驗其安全性22、略

【分析】【分析】

單克隆抗體的制備過程：（1）制備產生特異性抗體的B淋巴細胞：向免疫小鼠體內注射特定的抗原；然后從小鼠脾內獲得相應的B淋巴細胞。（2）獲得雜交瘤細胞：①將鼠的骨髓瘤細胞與脾細胞中形成的B淋巴細胞融合；②用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞，該雜種細胞既能夠增殖又能產生抗體。（3）克隆化培養(yǎng)和抗體檢測。（4）將雜交瘤細胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內增殖。（5）提取單克隆抗體：從細胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取。

【詳解】

（1）用丙肝病毒對小鼠進行免疫后；小鼠的B淋巴細胞能產生抗丙肝病毒的抗體，從該小鼠的脾細胞中能獲得產生該抗體的B淋巴細胞。B淋巴細胞在體外培養(yǎng)條件下不能無限增殖，而骨髓瘤細胞能無限增殖，故融合之前的兩種細胞中，能通過動物細胞培養(yǎng)大量增加數(shù)量的是骨髓瘤細胞。

（2）誘導細胞融合的病毒表面含有的糖蛋白和一些酶；能夠與細胞膜上的糖蛋白發(fā)生作用，使得細胞互相凝聚，細胞膜具有一定的流動性，在滅活病毒的誘導下，其上的蛋白質分子和脂質分子重新排布，細胞膜會發(fā)生融合。細胞融合后產生的融合細胞有B細胞間的融合；骨髓瘤細胞間的融合及B細胞和骨髓瘤細胞的融合，會產生三類細胞。篩選1是指利用選擇培養(yǎng)基進行篩選得到雜交瘤細胞。由于雜交瘤細胞產生的抗體除了抗丙肝病毒的抗體外，還可能有其他類型，故篩選2是指進行多次的克隆化培養(yǎng)和專一性抗體檢測，以得到能產生所需抗體的雜交瘤細胞。

（3）實驗的自變量是培養(yǎng)液中接種雜交瘤細胞的數(shù)量，因變量為一定時間內抗丙肝病毒抗體的數(shù)量，除自變量外，其他條件要相同且適宜。所以實驗思路為：將適宜的動物細胞培養(yǎng)液分為體積相同的幾組（可自設組數(shù)）。在不同組別中接種不同量的能產生丙肝病毒的單克隆抗體的雜交瘤細胞，一定時間后測定培養(yǎng)液中的抗體含量?！窘馕觥?1)給小鼠注射丙肝病毒使小鼠產生免疫反應骨髓瘤細胞。

(2)糖蛋白蛋白質分子和脂質分子選擇培養(yǎng)基克隆化培養(yǎng)和抗體檢測。

(3)將適宜的動物細胞培養(yǎng)液分為體積相同的幾組（可自設組數(shù)）。在不同組別中接種不同量的能產生丙肝病毒的單克隆抗體的雜交瘤細胞，一定時間后測定培養(yǎng)液中的抗體含量23、略

【分析】【分析】

基因工程技術的基本步驟：

（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲?。焕肞CR技術擴增和人工合成。

（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟；基因表達載體包括目的基因；啟動子、終止子和標記基因等。

（3）將目的基因導入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同；導入的方法也不一樣。將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法。

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因——DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA——分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質——抗原—抗體雜交技術。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

（1）啟動子是RNA聚合酶識別并結合的位點；能驅動基因的轉錄；如將強啟動子插入到玉米葉綠體某基因內部，則會破壞該基因，獲得該基因沉默（失活）突變株。為使P基因在玉米植株中超量表達，則需要強啟動子和P基因不被破壞，因此應優(yōu)先選用BamHⅠ和SacⅠ酶組合，將Ti質粒切開后構建重組表達載體。農桿菌中的Ti質粒上的T-DNA可轉移至受體細胞，并且整合到受體細胞染色體的DNA上，因此T-DNA在該實驗中的作用是將強啟動子和P基因帶入玉米細胞并整合到玉米細胞染色體DNA上。

（2）由圖可知；G418抗性基因位于Ti質粒的T-DNA上，隨T-DNA一起整合到玉米細胞染色體DNA上，因此將農桿菌浸泡過的玉米愈傷組織去菌后進行植物組織培養(yǎng)，培養(yǎng)基中需加入G418進行篩選，此物質屬于氨基糖苷類抗生素，它能抑制蛋白質在葉綠體和線粒體中合成，其中葉綠體是光合作用的場所，線粒體是細胞有氧呼吸的主要場所，因此可使植物的光合作用和呼吸作用（能量代謝）受到干擾，從而引起植物細胞死亡。

（3）愈傷組織是一種相對沒有分化的薄壁細胞團；經(jīng)液體懸浮培養(yǎng)可以分散成胚性單細胞，在適宜的培養(yǎng)基中，這種單細胞可以發(fā)育成胚狀體，再繼續(xù)發(fā)育成轉基因玉米株系。

（4）影響玉米愈傷組織能否成功再生出植株的因素有植物激素的配比、愈傷組織繼代次數(shù)以及玉米的基因型等。目前，組織培養(yǎng)過程中培養(yǎng)瓶常用透氣封口膜封口，目的是防止雜菌污染?！窘馕觥?1)RNA聚合酶沉默##失活BamH和SacⅠ酶將強啟動子和P基因帶入玉米細胞并整合到玉米細胞的染色體DNA上。

(2)G418呼吸作用##能量代謝

(3)薄壁細胞胚狀體。

(4)玉米的基因型防止雜菌污染24、略

【分析】【分析】

參與果酒的制作的微生物主要是酵母菌；其新陳代謝的類型為異養(yǎng)兼性厭氧型，較適宜的發(fā)酵溫度為18~30℃。在無氧的環(huán)境中酵母菌把糖類分解為酒精和二氧化碳。在果酒制作過程中檢測發(fā)酵液是否含有酒精，取樣后滴加適量酸性重鉻酸鉀溶液并振蕩，若觀察到溶液顏色的變化是橙色變成灰綠色，則說明發(fā)酵液中含有酒精。

【詳解】

（1）傳統(tǒng)發(fā)酵釀酒與現(xiàn)代工業(yè)發(fā)酵釀酒都是利用了酵母菌的無氧呼吸。酵母菌屬于真核生物；其代謝類型是兼性厭氧型，在有氧條件下進行大量增殖，在無氧條件下將葡萄糖分解為酒精。

橙色的重鉻酸鉀溶液在酸性條件下與乙醇（即酒精）發(fā)生化學反應；變成灰綠色，該實驗目的是驗證發(fā)酵過程中產生了酒精，因此實驗自變量是是否加入發(fā)酵液，因變量為溶液顏色變化。對照組中應加入酒精作為陽性對照。實驗過程中應遵循等量原則；單一變量原則等，因此實驗思路是：取兩支試管分別標號A、B，A試管中各加入2ml發(fā)酵液，作為實驗組，B試管中各加入2ml酒精，作為對照組，兩試管中都加入適量酸性重鉻酸鉀，振蕩后觀察試管中顏色變化，AB兩試管都變?yōu)榛揖G色，即可驗證發(fā)酵過程中產生了酒精。

（2）傳統(tǒng)發(fā)酵技術一般不進行嚴格滅菌操作；因此其發(fā)酵菌種為天然的混合菌種?，F(xiàn)代工業(yè)發(fā)酵釀制果酒不同于自制果酒，需要經(jīng)過沉淀；過濾、滅菌、裝瓶等過程才能獲得成品酒。

（3）25×16型的血細胞計數(shù)板計算公式：酵母細胞個數(shù)/1mL=1個中方格中酵母菌數(shù)×25×10000×稀釋倍數(shù)，因此該實驗中每毫升發(fā)酵液中酵母菌數(shù)量=9×25×10000×1000=2.25×109。

（4）釀酒利用酵母菌的無氧呼吸，需要關閉充氣口，釀醋利用醋酸菌，醋酸菌是需氧型微生物，因此需向充氣孔中充入無菌空氣?！窘馕觥?1)酵母菌是兼性厭氧微生物；在無氧條件下將葡萄糖分解為酒精實驗思路：取兩支試管分別標號A；B，向A試管中各加入2ml發(fā)酵液，向B試管中各加入2ml酒精，向AB兩試管各滴加0．5ml溶有0．1g重鉻酸鉀的濃硫酸溶液（或酸性重鉻酸鉀），并輕輕震蕩，觀察試管中溶液顏色變化。

(2)混合菌種沉淀；過濾、滅菌。

(3)2.25×109

(4)釀酒時需關閉充氣口，釀醋時則需向充氣孔中充入無菌空氣五、綜合題(共4題，共28分)25、略

【分析】【分析】

1；PCR擴增目的基因需要有一段已知的堿基序列。

2；分析題圖；啟動子P左右兩端都有酶1切割位點，可用酶1切割片段I使切割后的片段I首尾兩端產生相同的末端，在用DNA連接酶處理片段Ⅰ形成環(huán)狀DNA分子。用酶2切割環(huán)狀DNA可獲得片段II。由于子鏈合成方向是從子鏈的5'-3'，用引物D和E可擴增出啟動子P。

3；將目的基因導入植物細胞的農桿菌轉化法；其依據(jù)主要是：當植物受到損傷時，傷口處的細胞會分泌大量的酚類化合物，吸引農桿菌移向這些細胞，這時農桿菌中的Ti質粒上的T-DNA可轉移至受體細胞，并且整合到受體細胞染色體的DNA上。

【詳解】

（1）啟動子是RNA聚合酶識別和結合的位點；不能直接根據(jù)片段Ⅰ擴增啟動子的原因是啟動子P左側序列未知。

（2）圖中的片段I在啟動子P的左右兩端各有一個酶1的切割位點；酶1可切割啟動子P的左右兩端產生相同的末端，再用DNA連接酶連接可形成環(huán)狀DNA的片段I；片段II的首尾兩端都有灰色區(qū)域，結合題圖分析可知，片段II是用酶2切割處理環(huán)狀DNA產生的。子鏈合成方向是從子鏈的5'-3'，所以可以用引物D和E擴增出啟動子P。

（3）在培養(yǎng)基中添加酚類物質的目的是吸引農桿菌侵染煙草細胞；有利于啟動子P和M基因成功轉化。用含有卡那霉素和X-Gluc的培養(yǎng)基可篩選出所需的煙草細胞，在卡那霉素中能存活說明獲得了質粒，能將X-Gluc水解成藍色說明獲得了基因M，篩選出的煙草細胞經(jīng)過植物組織培養(yǎng)可獲得轉基因植株。

（4）由題意可知；基因M可在煙草的根部正常表達，其表達產物可將X－Gluc水解生成藍色物質，故可用適量X－Gluc溶液檢測A；B的幼根細胞中基因M的表達情況；表達強度越大，細胞表現(xiàn)的藍色越深。若A組藍色深而B組藍色較淺，則說明B組低溫使啟動子P受抑制，表達的產物少。

【點睛】

本題考查基因工程的相關知識，解答本題的關鍵是分析題圖，明確基因工程的基本步驟和工具，并根據(jù)限制酶的切割位點判斷引物應該設計的堿基序列，結合題意明確檢測基因表達載體的方法?！窘馕觥縍NA聚合酶識別并結合啟動子P及左側的序列未知，無法合成PCR所需要的引物酶1和DNA連接酶2能，可選用的引物組合是D和E吸引農桿菌感染煙草細胞卡那霉素組織培養(yǎng)X－GlucA藍色較深、B藍色較淺26、略

【分析】【詳解】

（1）基因表達載體包括復制原點；啟動子、終止子、標記基因和目的基因；圖1基因表達載體缺少終止子。

（2）啟動子是RNA聚合酶識別和結合的部位；使目的基因轉錄；氨芐青霉素抗性基因是標記基因，能夠將含有重組質粒的大腸桿菌篩選出來。

（3）構建基因表達載體需要的工具酶是限制酶和DNA連接酶。

（4）將胰島素肽鏈上蛋白酶的切割位點隱藏在內部；可防止胰島素的A；B鏈被菌體內蛋白酶降解。

（5）由于β-半乳糖苷酶中含多個甲硫氨酸；而胰島素A；B鏈中不含甲硫