實(shí)驗(yàn)室風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估文件

BSL-2實(shí)驗(yàn)室生物平安風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估

一、檢驗(yàn)職業(yè)感染的現(xiàn)狀經(jīng)血、呼吸道、粘膜傳播疾病直接危害著檢驗(yàn)工作者

身體健康。我國(guó)是HBV感染的高發(fā)區(qū)，約有1.3億人攜帶HBV,HBV外表抗原(HBsAg)的攜帶率為8%-20%;

自90年代以來(lái)HCV感染也呈上升趨勢(shì)，其感染率為3吼目前艾滋病感染在我國(guó)的流行已進(jìn)入增長(zhǎng)期。在

無(wú)償獻(xiàn)血人群中檢出乙型肝炎、丙型肝炎、梅毒、艾滋病等病毒感染占有一定的比例。經(jīng)調(diào)查顯示，針

頭和玻璃碎片是主要銳器致傷因子,經(jīng)常接觸針頭者發(fā)生銳器傷的危險(xiǎn)是不經(jīng)常接觸者的23倍-多種傳

染病是通過(guò)血液傳染的，而血液檢驗(yàn)中的職'也暴露大多數(shù)來(lái)自實(shí)驗(yàn)室工作人員在實(shí)驗(yàn)操作和標(biāo)本采集過(guò)

程中，意外被帶病原體的血液污染破損的皮膚或被病原體感染的針頭、血常規(guī)采血針、采血玻璃管、吸

頭等銳器刺破皮膚，呼吸道吸入氣溶膠也是傳播方式之一。因此，檢驗(yàn)人員面臨著嚴(yán)峻的職業(yè)暴露危險(xiǎn)。

校驗(yàn)人員感染疾病的一般傳染途徑有：

(1)皮膚破損:帶有HIV、HBV、HCV,梅毒等病原體的It液,長(zhǎng)時(shí)間接觸小傷口、潰揚(yáng)、擦傷等破

損皮膚，將會(huì)造成機(jī)體的感染。

(2)穿刺：由于針頭、刀片等對(duì)皮膚的意外損傷,使帶有病毒的全血、血清或血漿進(jìn)入皮下或循

環(huán)系統(tǒng)，造成感染。這種針頭意外損傷是職業(yè)性HBV和HIV感奧最重要的原因。帶有HIV的針頭意外穿

刺皮膚后,HIV感染的可能性在0—0.9%之間，平均為0.4%。而對(duì)］'-11BV,這個(gè)可能性在6%-30%之間，平均

為18%。有學(xué)者進(jìn)行了相應(yīng)的統(tǒng)計(jì)推算,每1000個(gè)艾滋病病人,每年會(huì)產(chǎn)生1例由于針頭意外造成的職業(yè)

性HIV感染;而每1000個(gè)乙肝患者,每年會(huì)產(chǎn)生45例類似職業(yè)性HBV感染。由于HBV在人群中的感染率

比HIV高得多,在一定人群中，每年產(chǎn)生的因針頭意外造成的職業(yè)性IIBV感染比HIV多得多。

(3)粘膜：由于試管未封閉、離心意外等造成的血液飛濺，帶有病原體的血液與II腔、鼻腔端膜或眼結(jié)

膜等接觸，可以造成感染。還有被HIV、HBV.HCV\梅毒等病原體污染的、儀器、工作臺(tái)面等接觸，

也可以造成感染。

(4)吸入含病原體的氣溶膠引起感染:在采血窗口或發(fā)放化驗(yàn)單時(shí),直接與病人面對(duì)面接觸交談，易感染

呼吸道疾病。此外，能引起氣溶膠的操作或事故有離心、溢出或?yàn)R灑、混合、混旋、研磨、超聲以及開(kāi)

瓶時(shí)兩個(gè)界面的別離等。

(1)血源性危害:調(diào)查研究發(fā)現(xiàn)，檢驗(yàn)人員被針刺傷占第2位。最常見(jiàn)危害較大的職業(yè)傳染病有以

下3種：

1)乙型肝炎：HBV是檢驗(yàn)人員面臨傳播危險(xiǎn)性最大的血源性疾病,HBV在血液中的濃度可以高達(dá)

10匚1()9拷貝/ml,檢驗(yàn)人員感染率較高。HBV主要傳播途徑是經(jīng)血液的傳播,病毒攜帶者血液中HBV的濃

度很高,針刺傷時(shí)，只需0.004ml,帶有HBV的血液足以使受傷者感染HBV。

2)丙型肝炎：丙肝病毒(HCV)在血液中的濃度在102-107ml左右，主要經(jīng)血液傳播，因此通過(guò)注射、

針刺、含HCV血液污染的傷口和其他密切接觸傳播。丙型肝炎大多數(shù)患者的病癥不明顯，往往不容易被

發(fā)現(xiàn),可表現(xiàn)為流感樣病癥,有時(shí)會(huì)造成比HBV更嚴(yán)重的后果。

3)艾滋病(AIDS):近年來(lái)我國(guó)AIDS的流行對(duì)檢驗(yàn)人員造成了日益嚴(yán)峻的職業(yè)性感染威脅。11IV

在血液中的濃度通常在100T0；拷貝/ml,被HIV污染的銳器刺傷而感染的比率為0.3%o美國(guó)疾病控制中

心最新資料顯示,截止到2000年底美國(guó)醫(yī)護(hù)人員中已有57人被確診感染/HIV,其中實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員19

人。

(2)呼吸道、接觸及節(jié)肢動(dòng)物叮咬危害因素

病原微生物感染：病原微生物實(shí)驗(yàn)室、特別是高致病性病原微生物實(shí)驗(yàn)室內(nèi)操作的任何疏忽、失誤都可

能造成難以彌補(bǔ)的損失。常見(jiàn)感染：結(jié)核分枝桿菌、腸道致病菌等。

3.防護(hù)措施

(1)增強(qiáng)檢驗(yàn)工作人員的防護(hù)意識(shí)及防護(hù)行為：為了最大限度地減少危害,檢驗(yàn)工作人員應(yīng)主動(dòng)

地從多方面了解關(guān)于HBV、HCV、H1V等相關(guān)的知識(shí)，了解各種病毒的傳播方式，使自己知道采取什么樣的

防護(hù)措施。醫(yī)院和檢驗(yàn)科應(yīng)高度重視,定期加強(qiáng)教育，讓檢驗(yàn)工作人員都意識(shí)到自我防護(hù)的重要性，自覺(jué)

地養(yǎng)成良好的習(xí)慣。

(2)標(biāo)準(zhǔn)操作程序：各類醫(yī)療廢物、垃圾必須分類放置，及時(shí)消毒后，再由衛(wèi)生清潔人員取走。

特別注意對(duì)損傷性醫(yī)療廢物的及時(shí)處理。嚴(yán)格防止感染或致病因子外泄而污染環(huán)境,要嚴(yán)格規(guī)章制度，

養(yǎng)成良好的工作習(xí)慣。檢驗(yàn)科應(yīng)制定一套有關(guān)衛(wèi)生防護(hù)的規(guī)章制度,人人都應(yīng)自覺(jué)遵守。如在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)

禁止吸煙、吃東西、接聽(tīng)：在免疫學(xué)檢驗(yàn)室和細(xì)菌室工作，要戴口罩和手套。防止各種液體飛濺，必需

防止手或皮膚直接接觸，假設(shè)有意外污染應(yīng)及時(shí)消毒、沖洗并擦干匕濺出的液體。在離心機(jī)停止轉(zhuǎn)動(dòng)前

時(shí),不要翻開(kāi)頂蓋，以減少氣溶膠的產(chǎn)生。更不要用手去使離心機(jī)減速，防止機(jī)械損傷的發(fā)生。

(3)防止銳器損傷，熟練掌握銳利器械的使用：感染性的各種針管、吸管、吸頭、試管、玻片等

用后及時(shí)放在專用容器內(nèi)；用過(guò)的針頭不要套回針帽，防止刺傷。銳器損傷后立即擠出傷口處的血液,用

肥皂水和流水清洗傷口，2%碘伏消毒后紗布包扎，可套橡皮指套(或橡皮手套)，卜班前洗手再重新消毒包

扎,并準(zhǔn)確記錄上報(bào),確認(rèn)損傷器械是否來(lái)自有傳染性疾病的患者，以使受傷者及時(shí)得到監(jiān)測(cè)和治療。

(4)重:視手部清潔：院內(nèi)感染病原體傳播最主要媒介是污染的手。戴醫(yī)用乳膠手套可以為醫(yī)務(wù)

人員提供很好的保護(hù)。乳膠手套盡管不能防止針頭造成的機(jī)械損傷,但可以在很大程度上減少皮膚與血

液的接觸。而且，當(dāng)針頭造成意外損傷后，乳膠手套還可以起到一種阻擋、封閉作用，減少進(jìn)入傷口的血

量,從而降低感染。正確的洗手方法可使手外表的暫居菌減少100()倍,用普通肥皂和清水擦揉15s以上,

可去除暫居菌或降低其在皮膚上的密度,搓洗15s,手外表的金黃色葡萄球菌可下降77%,洗2分鐘可降低

85%;對(duì)銅綠假單胞菌效果更好,搓洗12s便可去除92%,洗2分鐘可去除97.8機(jī)

(5)職業(yè)暴露的局部處理：工作中職業(yè)暴露后現(xiàn)場(chǎng)急救處理非常重要，假設(shè)黏膜暴露應(yīng)用生理鹽水或

清水反復(fù)沖洗干凈;皮膚意外接觸到血液等污染物,應(yīng)立即以肥皂和清水沖洗;假設(shè)被血液污染的針頭或

儀器等銳器刺傷,對(duì)傷口進(jìn)行輕輕擠壓，盡可能擠出損傷處的血液，用肥皂和流水清洗傷口，用70%酒精、

0.2%-0.5%過(guò)氯乙酸、0.5%碘伏等浸泡或涂抹消毒,并包扎傷口、帶手套等，發(fā)生意外傷害暴露后要立即進(jìn)

行傷口局部處理，并立即報(bào)告預(yù)防保健部門，受傷者及患者進(jìn)行HBV、HCV、HIV和梅毒等檢測(cè)。依據(jù)檢

測(cè)結(jié)果盡快采取相應(yīng)的補(bǔ)救措施，減少職業(yè)感染率的發(fā)生。

二、實(shí)驗(yàn)室風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估目的

風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的目的就是確定實(shí)驗(yàn)室防護(hù)等級(jí)，建立生物平安防護(hù)機(jī)制，配備適當(dāng)?shù)姆雷o(hù)用品，采取相應(yīng)的

防護(hù)措施。

評(píng)估的范圍是科室所有涉及到的病原微生物，以及對(duì)化學(xué)、物理、輻射、電氣、水災(zāi)、火災(zāi)、自然災(zāi)害

和噪音等進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估,科室管理機(jī)構(gòu)要統(tǒng)籌安排。

評(píng)估的結(jié)論要十清楚確，包括危險(xiǎn)程度極低的微生物。

可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)室工作特點(diǎn)、儀器使用，打包評(píng)估。

危害性評(píng)估始于實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)建造之前，實(shí)施于實(shí)驗(yàn)活動(dòng)之中，在使用之后還需進(jìn)行定期的階段性再評(píng)估。

當(dāng)發(fā)生實(shí)驗(yàn)室意外，或新發(fā)傳染病，或嚴(yán)重疫情時(shí)，應(yīng)特別注意要安排此項(xiàng)工作。

緊急、意外事故應(yīng)對(duì)方案提供以下操作標(biāo)準(zhǔn)：

1.防范火災(zāi)、洪水、地震和爆炸等自然災(zāi)害

2.意外暴露的處理和污染去除

3.意外事故發(fā)生時(shí)的繼續(xù)操作、人員緊急撤離

4.人員暴露和受傷的緊急醫(yī)療處理，如醫(yī)療監(jiān)護(hù)、臨床處理和流行病學(xué)調(diào)查。

三、風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估內(nèi)容

(一)生物因子危害評(píng)估

生物因子(biologicalagents)概念：可能引起感染、過(guò)敏或中毒的所有微小生物體，包括基因修飾

的、細(xì)胞培養(yǎng)的和寄生于人體的。

(1)危害評(píng)估內(nèi)容包括生物因子或未知的特性，如生物因子的種類、來(lái)源、傳染性、傳播途徑、易感

性、潛伏期、劑量一效應(yīng)關(guān)系、致病性、變異性、在環(huán)境中的穩(wěn)定性、與其他生物和環(huán)境的交互作用、

流行病學(xué)資料、預(yù)防和治療方案等。

(2)制定評(píng)估報(bào)告：各種因素的風(fēng)險(xiǎn)發(fā)生概率程度、針對(duì)這些風(fēng)險(xiǎn)采取的預(yù)防措施以及風(fēng)險(xiǎn)發(fā)生后的

補(bǔ)救方法。

依據(jù)2006年1月11日中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部公布的《人間傳染的病原微生物名錄》，對(duì)醫(yī)院檢驗(yàn)科可

能接觸的病原體進(jìn)行評(píng)估。。

實(shí)驗(yàn)室主要實(shí)臉活動(dòng)

序號(hào)實(shí)驗(yàn)室活動(dòng)涉及的病原微生物危害程度分類活動(dòng)類別生物平安級(jí)別

7抗酸染色結(jié)核分枝桿菌第二類樣本檢測(cè)BSL-2

11細(xì)菌培養(yǎng)魯氏不動(dòng)桿菌第三類大量活菌操作BSL-2

12細(xì)菌培養(yǎng)鮑氏不動(dòng)桿菌第三類大量活菌操作BSL-2

73細(xì)菌培養(yǎng)大腸桿菌第三類大量活菌操作BSL-2

83細(xì)菌培養(yǎng)產(chǎn)酸克雷伯菌第三類大量活菌操作BSL-2

84細(xì)菌培養(yǎng)肺炎克雷伯菌第三類大量活菌操作BSL-2

90細(xì)菌培養(yǎng)摩氏摩根菌第三類大量活菌操作BSL-2

107革蘭染色淋病奈瑟菌第三類大量活菌操作BSL-2

121細(xì)菌培養(yǎng)奇異變形菌第三類大量活菌操作BSL-2

123細(xì)菌培養(yǎng)普通變形菌第三類大量活菌操作BSL-2

124細(xì)菌培養(yǎng)產(chǎn)堿普羅威登斯菌第三類大量活菌操作BSL-2

125細(xì)菌培養(yǎng)雷氏普羅威登斯菌第三類大量活菌操作BSL-2

126細(xì)菌培養(yǎng)銅綠假單胞菌第三類大量活菌操作BSL-2

130細(xì)菌培養(yǎng)腸沙門菌第三類大量活菌操作BSL-2

132細(xì)菌培養(yǎng)甲乙丙型副傷寒沙第三類大量活菌操作BSL-2

133細(xì)菌培養(yǎng)傷寒沙門菌第三類大量活菌操作BSL-2

137細(xì)菌培養(yǎng)粘質(zhì)沙畜菌第三類大量活菌操作BSL-2

138細(xì)菌培養(yǎng)志賀菌屬第三類大量活菌操作BSL-2

139細(xì)菌培養(yǎng)金黃色葡萄球菌第三類大量活菌操作BSL-2

142細(xì)菌培養(yǎng)肺炎鏈球菌第三類大量活菌操作BSL-2

147抗體檢測(cè)梅毒螺旋體第三類樣本檢測(cè)BSL-2

45抗體檢測(cè)艾滋病毒第二類樣本檢測(cè)BSL-2

107抗體檢測(cè)甲型肝炎病毒第三類樣本檢測(cè)BSL-2

108抗體檢測(cè)乙型肝炎病毒第三類樣本檢測(cè)BSL-2

1.艾滋病抗體樣本檢測(cè)的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估

一，一般生物學(xué)特性

1981年6月5日美國(guó)亞特蘭大市疾病控制中心在當(dāng)天出版的《發(fā)病率與死亡率周刊》中刊登了一篇

只有幾負(fù)的報(bào)告,簡(jiǎn)要介紹了5位病人的病史。這5個(gè)人本來(lái)很健康，但他們得了一種十分罕見(jiàn)的威脅

生命的疾病。

第一位病人是33歲的美國(guó)人。他以前很健康，1981年1月突然發(fā)燒，再加上干咳，呼吸困難。3

月份，他被洛杉磯一家醫(yī)院接收。醫(yī)生診斷認(rèn)為，這種新的流行病是典型的肺炎，是由對(duì)健康人沒(méi)有危

降的病原體卜氏肺囊蟲引起的。此外，醫(yī)生肯定，這種病是巨細(xì)胞病毒傳染的，化驗(yàn)結(jié)果是白血球數(shù)目

減少。盡管用最現(xiàn)代化的方法進(jìn)行治療，但這位33歲的美國(guó)人仍然于1981年5月3日死了，

這5位病人的共同特點(diǎn)是：大約3()歲左右，發(fā)燒、咳嗽.患卡氏肺囊蟲肺炎，被認(rèn)為是由巨細(xì)胞

病毒傳染的。

這種病的最終定名，還得感謝法國(guó)里昂的巴斯德研究所。以蒙特尼爾為首的研究小組在過(guò)去研究的

根底上設(shè)想；別離病毒最好的時(shí)機(jī)不是在病情已深人開(kāi)展的時(shí)候，而是在病之初期，先兆病癥剛剛出現(xiàn)

之時(shí)。接著他們從?患者身上取出淋巴結(jié)組織進(jìn)行培養(yǎng)，并采取有利于病毒繁殖的措施。15天后，漂浮

在培養(yǎng)液上層的淋巴結(jié)細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)了具有特征的逆轉(zhuǎn)錄酶。不久，乂在電子顯微鏡下觀察到了這種新病

原。1983年5月，他們?cè)凇犊茖W(xué)》雜志上報(bào)

HIV呈2()面體立體對(duì)稱球形顆粒網(wǎng)，外表有刺突狀結(jié)構(gòu)的糖蛋白，直徑約為lOOnm,分為包膜與

核心兩局部，包膜以脂質(zhì)雙層結(jié)構(gòu)為框架，gp41蛋白橫跨脂質(zhì)雙層，gp41外端連接gpl2O,包膜下有一

層基質(zhì)蛋白P17,附著脂質(zhì)雙層膜的內(nèi)層，起穩(wěn)定作用。病毒的核心呈錐形，核衣殼由核心蛋白p24組

成，和其它逆轉(zhuǎn)錄病毒基因組一樣為二倍體基因，核心內(nèi)有兩條相同的單股RNA鏈，由氫鍵將兩個(gè)RNA

分子連接成7OsRNA,重要的蛋白質(zhì)有逆轉(zhuǎn)錄酶(p66/51)和整合酶(p34)(見(jiàn)圖1)。HIV基因組又稱HIV

RNA,由約9200個(gè)堿基組成，其RNA中含有g(shù)ag、env和pol三種結(jié)構(gòu)蛋白的基因以及6種調(diào)控法囚

(tat,vif,vpr,vpu(在HIV-2型為vpx),nef,rev)。gag基因先編碼一個(gè)55KD的前體蛋白(p55)然后在

蛋白醐作用下裂解形成衣殼蛋白(CA)p24和基質(zhì)蛋白pl7,p24形成病毒蛋白的錐體核。pol基因一局部

與gag重疊，表達(dá)融合蛋白pl60,然后水解成3個(gè)片段，從S到3,分別是pll,p66/51和p32。pll是

蛋白水解酶，從前體裂解后獲得活性，是蛋白酸抑制劑的抗病毒位點(diǎn)，p66/51是逆轉(zhuǎn)錄酶，具有逆轉(zhuǎn)錄

前、核糖核酸酶H、DNA多聚酶活性，p32是整合酶.env基因編碼包膜糖蛋白，先編碼一個(gè)88KD的

蛋白，經(jīng)糖基化后分子量增至160KD,即包膜糖蛋白的前體gpl60,該前體蛋白在蛋白酶作用下，裂解

成gpl20和gp41。p24、gpl20、gp41及p55是H【V免疫學(xué)診斷的主要檢測(cè)抗原。調(diào)控基因編碼輔助蛋

白，調(diào)節(jié)病毒蛋白合成和復(fù)制⑶，tat等6個(gè)基因被稱為調(diào)控基因，分別表達(dá)6種蛋白質(zhì)，對(duì)病毒復(fù)制起

調(diào)控作用，它們分別是lat(transaclivator)反式激活因子，rcv(rcgulatorofexpressionofvirionproteins)毒粒

蛋白表達(dá)調(diào)節(jié)因子,nef(negativeregulatoryfactor)負(fù)調(diào)控因子,vpr(viralproteinr)病毒i?蛋白,vpu(vira)

proteinu)病毒u蛋白,vif(virioninfectivityfactor)病毒感染因子。

HTLV-HI的病毒粒子是直徑約1000埃［長(zhǎng)度單位，0.0000000010厘米)的圓球。粒子外包裹著由

兩層脂質(zhì)組成的膜。這種脂質(zhì)取之于清主細(xì)胞的外膜。由糖蛋白(附有糖鏈的蛋白質(zhì))拴住這層膜。每

個(gè)糖蛋白有兩種組分：覆蓋著膜的GP4I和伸出膜外的GP120.這種由膜和蛋白質(zhì)組成的被膜包裹著一

個(gè)由蛋白質(zhì)P24和P18組成的核。病毒RNA被攜帶在核內(nèi)。此外還有逆轉(zhuǎn)錄酶的幾個(gè)挎貝，其功能是

催化病毒DNA的裝配。

4.培養(yǎng)特性

以經(jīng)植物血凝素激活的正常人外周血T淋巴細(xì)胞為滋養(yǎng)細(xì)胞，與含有HIV的淋巴細(xì)胞共同培養(yǎng)，

同時(shí)加白細(xì)胞介素一2以支持T細(xì)胞的生長(zhǎng)，加聚寧胺膠以促使病毒的吸附，加氫化可的松以抑制細(xì)胞

的免疫反響。這是，HIV便可在培養(yǎng)的細(xì)胞內(nèi)大量繁殖，然后進(jìn)行病毒檢測(cè)。

不管怎么說(shuō)艾滋病是20世紀(jì)下半葉最嚴(yán)重的一種傳染病。至今全世界已有4000多萬(wàn)人感染了艾滋

病病毒。至1997年6月30日，全世界艾滋病患者已達(dá)1644183名，預(yù)計(jì)未來(lái)10年將超過(guò)1億。目前

全球每分鐘有II人感染艾滋病病毒。截至1998年9月底，我國(guó)感染HIV者為11170人，艾滋病患者

338例，死亡184例。實(shí)際上感染者已超過(guò)30萬(wàn)，預(yù)計(jì)兩年后超過(guò)120萬(wàn)

二、致病性和感染劑量

1、致病性

一定量的病毒進(jìn)入體循環(huán)中的淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞以及周圍淋巴結(jié)，病毒迅速?gòu)?fù)制和繁殖，病毒量

急劇猛增,每毫升血漿中病毒RNA可達(dá)10萬(wàn)至100拷貝(10的5次方-10的6次方拷貝/ML血漿)，

因此急性期在血清中可以發(fā)現(xiàn)把當(dāng)高水平的HIV抗原，但抗體不能被檢測(cè)到。大約5()%-70%的感染者

會(huì)出現(xiàn)臨床病癥，主要表現(xiàn)為發(fā)熱、皮疹、咽炎、淋巴結(jié)腫大、惡心、嘔吐、腹瀉等病癥。這些病癥一

般都很輕微短暫，持續(xù)2-4周左右，經(jīng)對(duì)癥處理甚至不經(jīng)治療即可恢復(fù)正常。隨即機(jī)體的免疫系統(tǒng)迅速

進(jìn)入戰(zhàn)斗狀態(tài)，產(chǎn)生相應(yīng)的抗體，由于免疫系統(tǒng)的防衛(wèi)功能，在短短幾個(gè)星期內(nèi)，病毒RNA會(huì)降低，

降低程度與免疫能力有密切關(guān)系，免疫能力越強(qiáng)病毒RNA降低越多，預(yù)后越佳。末梢血檢查，白細(xì)胞

總數(shù)正?；驕p少，單核細(xì)胞增加。急性HIV感染期后，有一個(gè)較長(zhǎng)的沒(méi)有任何臨床病癥，能夠維持正常

的免疫狀態(tài)的時(shí)期，即為無(wú)病癥期，又稱臨床潛伏期，多為7-10年，平均8年。在潛伏期內(nèi)，HIV在

人體內(nèi)一直維持著高度復(fù)制平衡狀態(tài)，也就是病毒每天大量產(chǎn)生，但同時(shí)也大量的被去除，不斷的感染

和殺傷T淋巴細(xì)胞，也不斷的突變來(lái)逃防止疫系統(tǒng)的追擊，結(jié)果HIV感染者身上會(huì)整體表現(xiàn)出在長(zhǎng)時(shí)

間的無(wú)病癥期后，病人可出現(xiàn)不明原因的進(jìn)行性消瘦，乏力，這個(gè)時(shí)期感染者開(kāi)始出現(xiàn)艾滋病相關(guān)綜合

征(ARC)和較輕微的感染，維而發(fā)生“時(shí)機(jī)性感染〃，大多數(shù)表現(xiàn)為卡氏肺囊蟲肺炎或中樞神經(jīng)系統(tǒng)

的感染，這是大多數(shù)AIDS病人死亡的直接原因。血漿病毒載量開(kāi)始上升，CD4+減少速度明顯加快。

HIV病毒不僅進(jìn)入淋巴細(xì)胞，同樣也進(jìn)入血液循環(huán)中的其他細(xì)胞，比方單核細(xì)胞。同時(shí)亦可進(jìn)入人體各

個(gè)臟器包括腦、胃腸道、肝、脾、腎及其他部位患者表現(xiàn)出嚴(yán)重的細(xì)胞免疫缺陷，發(fā)生各種致命的時(shí)機(jī)

性感染和/或惡性腫瘤，CD4+細(xì)胞記數(shù)＜200t/pLo

主要與感染的途徑有關(guān)

三、感染途徑及潛在暴露結(jié)果

人是唯一的傳染源，包括AIDS患者和HIV感染者。人體受HIV病毒感染后直到發(fā)病死亡，體內(nèi)

一直攜帶病毒。感染者的血液、精液、唾液、眼淚、尿、腦脊液、羊水、乳汁、宮頸及陰道分泌物中均

能別離到HIV病毒，但在自然傳播中起主要作用的是血液、精液和宮頸及陰道分泌物。因此：實(shí)驗(yàn)室工

作者應(yīng)穿工作服、戴手套，防止皮膚劃傷，并嚴(yán)格按照規(guī)程操作，做好自我保護(hù)和對(duì)污染物的消毒。

性接觸是主要傳播途徑，其中男性同性戀的性接觸最易感染。美國(guó)成年AIDS有63%是同性戀男人,

10%是通過(guò)異型性生活的男人和女人。在某些地區(qū)妓女在AIDS的傳播中起主導(dǎo)作用。輸注帶病毒的血

液或血液成分是另一種主要傳播途徑，使用未經(jīng)消毒的注射器和針頭是靜脈注射毒物者中傳播AIDS的

主要途徑。與血液有關(guān)的另一種傳播方式是器官或骨髓移植。母嬰傳播是嬰幼兒感染HIV的主要方式,

可通過(guò)血液經(jīng)胎盤感染、產(chǎn)道羊水感染和哺乳時(shí)的母乳感染。到FI前為止還沒(méi)有發(fā)現(xiàn)HIV通過(guò)空氣、食

物、飲水、食具或U常生活接觸而傳播的報(bào)道。

四、環(huán)境中的穩(wěn)定性

HIV能耐受低溫而對(duì)高溫敏感，煮沸可迅速滅活?，室溫下液體環(huán)境中HIV可存活15天，被HIV污

染的物品至少3日內(nèi)有傳染性,液體中的HIV加熱56℃10分鐘即可滅活?？菰餇顟B(tài)下外界蛋白質(zhì)對(duì)HIV

有顯著保護(hù)作用，真空冷凍枯燥的血制品加熱68c72小時(shí)才能保證所含HIV被火活，HIV對(duì)甲醛、戊

二醛、乙醇、鹵族化合物敏感。37c時(shí)，以下消毒劑處理1()分鐘，可滅活HIV,常用的消毒劑如70%

酒精、10%漂白粉、2%戊二醛、4%福爾馬林、35%異丙醇、0.5%來(lái)蘇和0.3%過(guò)氧化氫等均能滅活病毒。

消毒效果受以下因素制約：溫度、消毒劑濃度、作用時(shí)間、病毒數(shù)量、病毒株別、有無(wú)其它蛋白質(zhì)及雜

質(zhì)。HIV對(duì)紫外線不敏感

五、被操作微生物的濃度和劑量的影響

在進(jìn)行HIV抗體檢測(cè)時(shí)要防止血清污染。

六、自然宿主和易感人群

非洲叢林中，有人患怪病死去，其病癥與那5個(gè)人很相似。于是人們把過(guò)去50年冷凍保存的叨萬(wàn)

份血樣進(jìn)行化驗(yàn)發(fā)現(xiàn)：在非洲綠猴的血液里存在一種病毒”猴艾滋病病毒”，這種病毒與人艾滋病病毒很

相似。因而“猴艾滋病病毒”可能是人艾滋病病毒的祖先。但是綠猴只帶毒，不發(fā)病。后來(lái)人們又在貓、

牛體內(nèi)發(fā)現(xiàn)了“貓艾滋病病毒”和“牛艾滋病病毒，因此有人推測(cè)艾滋病病毒是由于人與猴在玩耍中不小

心被抓傷，”猴艾滋病病毒”從小小的傷口進(jìn)入人體，經(jīng)過(guò)變異在人的體內(nèi)繁殖、生存、傳染。當(dāng)然，這

只是一個(gè)推測(cè)，也有人持不同意見(jiàn)。究竟”艾滋病病毒”來(lái)自哪里，現(xiàn)在還不十分清楚.

都是易感人群

七、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究,實(shí)驗(yàn)室感染和院內(nèi)感染信息

云南境內(nèi)的北平頂猴對(duì)人類HIV—1病毒可感和易感，并不限制HIV-1在細(xì)胞內(nèi)的復(fù)制c該發(fā)現(xiàn)說(shuō)

明，在現(xiàn)有的靈長(zhǎng)類動(dòng)物中，北平頂猴是較為理想和適宜的艾滋病模型動(dòng)物。

八、實(shí)驗(yàn)活動(dòng)評(píng)估

1.樣品采集

HIV抗體檢測(cè)主要采集血液樣品，樣品采集的工作人員應(yīng)掌握相關(guān)專業(yè)知識(shí)和操作技能，能有效地

防止病原微生物擴(kuò)散和感染。樣品采集過(guò)程中，工作人員必須清楚意識(shí)到待檢樣品的潛在感染性，操作

時(shí)須戴手套（如果采集的HIV感染者或病人的樣本時(shí)，應(yīng)戴雙層手套），提倡使用真空采血器，假設(shè)使

用普通的注射器，采血后，不得用手摘取針頭，不得給注射器重新“戴帽”，防止刺傷手。針筒內(nèi)的血

要小心緩慢地沿管壁注入試管內(nèi)，防止血液外濺。盛有血液的試管必須及時(shí)加蓋，并放置于穩(wěn)妥的試管

架上，防止傾倒。試管在注入血液前應(yīng)認(rèn)真檢查試管底、管壁有否裂紋和破損。使用后的真空采血器或

普通注射器及止血棉球都含有待檢樣本的血液，必須立即放入內(nèi)含消毒液的容器內(nèi)，按有關(guān)要求消毒一

定期限后，作為醫(yī)療廢棄物處理，或放置于生物廢棄袋中，在密封的情況下送去作高壓滅菌處理。

如果因流行病學(xué)調(diào)查及疾病監(jiān)測(cè)需要，在現(xiàn)場(chǎng)采集樣本時(shí)必須注意：（1）大面積采血時(shí)，盡可能不污染

采血現(xiàn)場(chǎng)，工作臺(tái)面應(yīng)采用一次性的臺(tái)布鋪墊；（2）受檢人員較多時(shí)，可能出現(xiàn)較混亂場(chǎng)面，應(yīng)有工作

人員注意維持工作秩序，防止人群弄翻已采好的血液樣本；（3）必須備足消毒液，以便對(duì)被污染的環(huán)境

及時(shí)有效地進(jìn)行消毒處理；（4）工作完畢，應(yīng)該將所有的樣本采集的剩余物質(zhì)用一次性臺(tái)布包裹集中放

置于生物廢物袋（注意：針頭等銳器應(yīng)放置于耐扎的容器內(nèi)）帶回單位高壓滅菌后作無(wú)害化處理；15）

離開(kāi)現(xiàn)場(chǎng)前，對(duì)現(xiàn)場(chǎng)進(jìn)行一次徹底的消毒處理；（6）采集的血液樣本要按照有關(guān)規(guī)定運(yùn)輸回本單位。

2、樣品轉(zhuǎn)移

.單位內(nèi)部運(yùn)輸一般單位的采血點(diǎn)與實(shí)驗(yàn)室都有一定的距離，可能是在同一樓，或在另一樓內(nèi)，采

好的樣本放在規(guī)定的容器內(nèi)送到實(shí)驗(yàn)室，不得徒手拿到實(shí)驗(yàn)室內(nèi)。

實(shí)驗(yàn)室間遠(yuǎn)程運(yùn)輸需利用車、船、飛機(jī)等交通工具運(yùn)輸?shù)臉悠?，?yīng)采用世界衛(wèi)生組織（WTO）提

出的三級(jí)包裝系統(tǒng)，根據(jù)衛(wèi)生部2005年第45號(hào)令《可感染人類的高致病性病原微生物菌［毒）種或樣

本運(yùn)輸管理規(guī)定》的要求，高致病性病原微生物事先應(yīng)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)適宜的包裝和標(biāo)記，辦妥必要的運(yùn)輸申

請(qǐng)手續(xù)，方可實(shí)施運(yùn)輸。

3、樣品接收、開(kāi)啟

實(shí)驗(yàn)室接收樣本應(yīng)在生物平安柜內(nèi)開(kāi)啟包裝件，并檢查盛裝樣品的試管有尢破損或滲出的情況，如

發(fā)現(xiàn)溢漏應(yīng)立即將存留的樣品移出，對(duì)被污染的試管、試管架和盛器均需作嚴(yán)格消毒。

4、樣品別離

離心機(jī)別離血清樣品在離心前，最好在實(shí)驗(yàn)室自然放置l-2h。在離心時(shí)，最好使用帶有密封離心

桶［平安杯）或者密封轉(zhuǎn)頭的離心機(jī)別離血清?，離心后，應(yīng)在生物平安柜里開(kāi)啟試管蓋。在生物平安柜

內(nèi)別離血清，操作時(shí)，盡量防止產(chǎn)生氣溶膠，工作人員的手臂動(dòng)作幅度不能太大，以免影響平安柜內(nèi)的

空氣層流。如果是無(wú)蓋的試管，應(yīng)在離心完畢后，靜止30min后，再開(kāi)啟離心機(jī)蓋，如發(fā)生試管破損，

要對(duì)離心機(jī)進(jìn)行嚴(yán)格的消毒。

血清別離器械的處理操作完畢后，所有的吸管、Tip吸頭、含血球的試管等廢棄物應(yīng)置于規(guī)定的

已含適當(dāng)消毒液的容器內(nèi)，小心的移出生物平安柜，高壓和/或燃燒。如使用濾紙片作為載體收集的樣本,

在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)使用緩沖液浸泡、離心收集樣本的操作，亦參照上述要求處理。要求工作人員將所有實(shí)驗(yàn)操

作移至生物平安柜中間進(jìn)行，平安柜內(nèi)工作臺(tái)面由左到右分別為相對(duì)清潔和污染區(qū)域。

消毒應(yīng)備有適宜的消毒液，以隨時(shí)去除濺出物及溢出物。

5、樣品檢測(cè)

HIV抗體篩查檢測(cè)（1）手工操作：①加樣、混勻用移液器將別離好的血清在生物平安柜內(nèi)加

樣至酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）或其它試劑的反響孔中，小心混勻，盡可能防止氣溶膠的產(chǎn)生.，封蓋

后，用托盤平移至溫箱孵育；②洗滌、溢出洗滌儀使用前應(yīng)檢查吸液針孔是否已阻塞，如發(fā)現(xiàn)阻塞應(yīng)

盡快疏通，在洗滌過(guò)程中要注意洗滌液不能溢出；每次洗滌完畢，用蒸儲(chǔ)水洗滌幾次，以免洗液中的成

分產(chǎn)生結(jié)晶而阻塞針孔，造成實(shí)驗(yàn)環(huán)境污染；吸入廢液瓶中的液體，應(yīng)按量參加適量的消毒劑，作用規(guī)

定時(shí)間后處置：（2）自動(dòng)化酶標(biāo)儀檢測(cè):該儀器操作中存在有加祥探針及洗滌的廢液均應(yīng)根據(jù)每次廢液的

量參加足夠的消毒劑，作用規(guī)定的時(shí)間后處理。

HIV抗體確認(rèn)檢測(cè)（1）手工操作：必須注意，需確認(rèn)的樣品陽(yáng)性概率非常高。加好樣品以后，

小心的將反響槽放于搖床上，啟動(dòng)搖床，緩慢地提高轉(zhuǎn)速，直至到達(dá)規(guī)定的轉(zhuǎn)速，不要啟動(dòng)后馬上到達(dá)

轉(zhuǎn)速，將可能導(dǎo)致液體急促濺出，如搖床失常，液體溢出或泄漏，應(yīng)及時(shí)用消毒劑處理；對(duì)每次反響后

的廢液，應(yīng)集中收集于容器內(nèi)，參加足量的消毒劑，作用規(guī)定時(shí)間后棄之；（2）自動(dòng)化蛋白印跡儀：儀

器使用后收集的廢液應(yīng)按照上述要求處理。

如需保藏的血清或血漿樣本，應(yīng)設(shè)有專用冰箱、登記造冊(cè)入檔、專人保管。假設(shè)專庫(kù)保藏的，必須

按照國(guó)家高致病性樣本管理要求保藏。不需保藏的所有樣本，按實(shí)驗(yàn)室廢棄物處置。

廢棄物處置標(biāo)準(zhǔn)成棄物處置應(yīng)符合《實(shí)驗(yàn)室生物平安通用要求》（GB19489-2004）和《消毒技術(shù)

標(biāo)準(zhǔn)》（2002年版）。

廢棄物處置從實(shí)驗(yàn)室出來(lái)的所有廢棄物，包括不再需要的樣品（血球、血清等）、反響板、試劑

陰陽(yáng)性對(duì)照、ELISA標(biāo)記物、試劑包裝盒等，均應(yīng)視為感染性廢棄物，應(yīng)置于專用的密封防漏容器或生

物廢物袋中，經(jīng)高壓無(wú)害化處理后，密封容器或扎緊廢物袋口，按環(huán)衛(wèi)部門要求處置。所有廢棄物應(yīng)按

照HIV污染物品處理，由專人按特定程序和方法進(jìn)行清潔和消毒，污染或可能造成污染的材料在帶出實(shí)

驗(yàn)室前均應(yīng)嚴(yán)格進(jìn)行消毒。

記錄廢棄物的處理應(yīng)做好記錄。

消毒效果監(jiān)測(cè)可使用化學(xué)、生物指示帶/劑法，每次高壓滅菌需用化學(xué)指示帶、每月用生物指示劑

來(lái)監(jiān)測(cè)滅菌效果。

九、重組DNA操作和可能擴(kuò)大的宿主范圍

目前，尚未見(jiàn)到對(duì)應(yīng)的操作和文獻(xiàn)資料

十、預(yù)防和治療措施

對(duì)于艾滋病，至今尚無(wú)根治之術(shù)。但科學(xué)家經(jīng)過(guò)潛心研究，利用多種技術(shù)，取得了不少喜人的成果。

其中最引人注目的就是美籍華人何大一推出的“雞尾酒”療法。他認(rèn)為：多種藥物合用療效遠(yuǎn)大于單一藥

物。他將兩種逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑與一種病毒蛋白能抑制劑合在一起，使被測(cè)者體內(nèi)艾滋病病毒數(shù)量到達(dá)測(cè)

不出來(lái)的水平。

十一、人員平安狀況評(píng)估

制定和完善烈性傳染病實(shí)驗(yàn)室生物平安技術(shù)操作規(guī)程;加強(qiáng)可能暴露于HIV病毒或潛在感染性材料

的相關(guān)業(yè)務(wù)人員牛.物平安知識(shí)培訓(xùn)；預(yù)防和治療措切實(shí)落實(shí)和項(xiàng)管理制度；預(yù)防和控制實(shí)驗(yàn)室等渠道造

成HIV感染和傳播,建立實(shí)驗(yàn)室工作人員可穎病癥報(bào)告制度，并保證他們能及時(shí)被告定點(diǎn)?？漆t(yī)院收治,

以防止實(shí)驗(yàn)室感染擴(kuò)散到社會(huì)。

禁忌人群：從事HIV研究的實(shí)驗(yàn)室工作人員必須在身體狀況良好的情況下才能進(jìn)入HIV初篩實(shí)驗(yàn)

室進(jìn)行工作，出現(xiàn)以下情況之一是不宜進(jìn)入：患發(fā)熱性疾?。桓忻?，上呼吸道感染或其他到致抵抗力下

降的情況；妊娠，已經(jīng)在實(shí)驗(yàn)室控制區(qū)域內(nèi)連續(xù)工作4小時(shí)以上左其他原因造成的疲勞狀態(tài)，

實(shí)驗(yàn)室工作人員必須持有上崗證進(jìn)行工作

十二、評(píng)估結(jié)論

1.病原微生物分類分級(jí)依據(jù)

按衛(wèi)生部《可感染人間的病原微生物名錄》（2006年）（簡(jiǎn)稱《名錄》），人類免疫缺陷病毒（HIV）列為

危害程度第2類病原微生物，根據(jù)國(guó)務(wù)院2004年公布的424號(hào)令《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物平安管理?xiàng)l

例》，HIV屬于高致病性病原微生物。

2.實(shí)驗(yàn)活動(dòng)、實(shí)驗(yàn)室級(jí)別以及人逐步形成防護(hù)要求

實(shí)驗(yàn)時(shí)，未經(jīng)實(shí)驗(yàn)室主任同意，限制或禁止進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室。不許在工作區(qū)域飲食、吸煙、清洗隱型眼

鏡和化裝。食物應(yīng)存放在工作區(qū)域以外專用櫥柜或冰箱中。所有的操作過(guò)程應(yīng)盡量細(xì)心，防止產(chǎn)生和濺

出氣溶膠。對(duì)于污染的銳器，必須時(shí)刻保持高度的警惕，包括針、注射器、玻片、加樣器等，注射和吸

取感染材料時(shí)，只能使用針頭固定注射器或一次性注射器（即注射器和針頭是一體的）。用過(guò)的一次性

針頭必須彎曲、切斷、破碎、重新套上針頭套、從一次性注射器上去掉，或在丟棄前進(jìn)行人工處理，要

不將之小心放入不會(huì)被刺穿的、用于收集廢棄銳器的容器中。非一次性銳器必須放置在堅(jiān)壁容器中,轉(zhuǎn)

移至處理區(qū)消毒，最好高壓殺菌。打碎的器皿不能直接用手處理，必須用其它工具處理，如刷子和簸箕、

夾子或鐐子。盛污染的針頭、銳器、碎玻璃的容器在倒掉前，立按照相關(guān)的規(guī)定進(jìn)行消毒。所有的培養(yǎng)

物、儲(chǔ)存物及其它規(guī)定的廢物在釋放前，均應(yīng)使用可行的消毒方法進(jìn)行消毒，如高壓滅菌。轉(zhuǎn)移到就近

實(shí)驗(yàn)室消毒的物料應(yīng)置于耐用、防漏容器內(nèi)，密封運(yùn)出實(shí)驗(yàn)室。離開(kāi)該系統(tǒng)進(jìn)行消毒的物料，在轉(zhuǎn)移前

應(yīng)包裝，其包裝應(yīng)符合有關(guān)的法規(guī)。濺出或偶然事件中，明顯暴露于傳染源時(shí)，要立即向?qū)嶒?yàn)室主任報(bào)

告。進(jìn)行適當(dāng)?shù)尼t(yī)學(xué)評(píng)估、觀察、治療，保存書面記錄。按日常程序、在有關(guān)傳染源的工作結(jié)束后、尤

其是傳染源濺出或?yàn)⒊龊?、或受到其他傳染源污染后，?shí)驗(yàn)室設(shè)備和工作臺(tái)面應(yīng)當(dāng)使用有效的消毒劑消

毒。污染的設(shè)備在送去修理、維護(hù)前，要按照相關(guān)的規(guī)定消毒；在離開(kāi)設(shè)施轉(zhuǎn)移前，要按照相關(guān)的規(guī)定

上包運(yùn)輸。平安設(shè)備正確使用和保養(yǎng)生物平安柜、最好是二級(jí)生物平安柜、或其他適宜的人員防護(hù)設(shè)施、

或物理遏制裝置。確定可能形成傳染性氣溶膠或?yàn)R出物的實(shí)驗(yàn)過(guò)程，包括離心、研磨、勻漿、劇烈震蕩

或混勻、超聲波破裂、開(kāi)啟裝有傳染源的容器、采集感染標(biāo)本等。涉及高濃度或大體積的傳染源時(shí)，假

設(shè)選用密封轉(zhuǎn)頭或帶平安.罩的離心機(jī)，假設(shè)轉(zhuǎn)頭或平安罩僅在生物平安柜中翻開(kāi)，那么可在開(kāi)放實(shí)驗(yàn)室

內(nèi)離心。當(dāng)必須在生物平安柜外處理標(biāo)本時(shí)，需采取面部保護(hù)措施1跟鏡、口罩、面罩、或其他防濺裝

置），以免傳染源或其他有害物濺或?yàn)⒌矫嫔?。在?shí)驗(yàn)室內(nèi)，必須使用專用的防護(hù)性外衣、大褂、年衫

或制服。人員到非實(shí)驗(yàn)室區(qū)域時(shí)，防護(hù)服必須留在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)。防護(hù)服可以在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)處理，也可以在洗

衣房中洗滌，但不能帶回家中。能接觸潛在傳染源、被污染的外表或設(shè)備時(shí)?，要戴手套。一次性手套不

用清洗、不能重復(fù)使用，不能用于接觸“潔凈〃的外表（鍵盤、等），也不應(yīng)當(dāng)戴著到實(shí)驗(yàn)室外。

要備有帶滑石粉的乳膠手套。脫掉手套后，要洗手。

實(shí)驗(yàn)人員上崗前必須接受嚴(yán)格的生物平安培以及該類病毒實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)的全面培訓(xùn).

目前尚無(wú)特效的病苗。感染后具休治療方案說(shuō)見(jiàn)衛(wèi)生部〔HIV診療方案）

由于目前對(duì)病毒感染性疾病沒(méi)有特效的治療藥物，所以對(duì)AIDS也沒(méi)有有效的治療方法。加之，HIV

病毒核酸與宿主染色體DNA整合，利用宿主細(xì)胞進(jìn)行復(fù)制，給藥物治療帶來(lái)了困難。HIV感染的早期

治療十分重要。通過(guò)治療可減緩免疫功能的衰退。HIV感染者患結(jié)核、細(xì)菌性肺炎和卡氏肺囊蟲肺炎的

危險(xiǎn)性增加，進(jìn)行早期預(yù)防十分重要。

一、支持療法、盡可能改善AIDS患者的進(jìn)行性消耗。

二、免疫調(diào)節(jié)劑治療：

（一）白細(xì)胞介素2（IL-2）：提高機(jī)體對(duì)HIV感染細(xì)胞的MHC限制的細(xì)胞毒性作用，亦提高非MHC

限制的自然殺傷細(xì)胞（NK）及淋巴因子激活的殺傷細(xì)胞（LAK）的活性。

（-）粒細(xì)胞集落刺激因子1GCSF）及粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子（GM-CSF）：增加循環(huán)中性

粒細(xì)胞，提高機(jī)體的抗感染能力。

（三）靈桿菌素：激活腦下垂體一腎上腺皮質(zhì)系統(tǒng)，調(diào)整機(jī)體內(nèi)部環(huán)境與功能，增強(qiáng)機(jī)體對(duì)外界環(huán)境

變化的適應(yīng)能力，刺激機(jī)體產(chǎn)生體液抗體，使白細(xì)胞總數(shù)增加，吞噬功能加強(qiáng)，激活機(jī)體防御系統(tǒng)抗御

病原微生物及病毒的侵襲。

［四）干擾素（IFN）：。-干擾素IIFN-a）,對(duì)局部病人可略提高CD4+T細(xì)胞，40%Kaposis肉瘤患

者有瘤體消退；②％干擾素（IFN-0）：靜脈給藥效果與IFN-a類似，但皮下注射，抗Kaposis肉瘤作

用較弱：③Y-干擾素（IFN-Y）提高單核細(xì)胞一巨噬細(xì)胞活性，抗弓形體等條件性感染可能有一定效果。

三、抗病毒制劑：

［一）抑制HIV與宿主細(xì)胞結(jié)合及穿入的藥物：可溶性rsCD4能與HIV結(jié)合，占據(jù)CD4結(jié)合部位，

使HIVgp120不能與CD4T淋巴細(xì)胞上的CD4結(jié)合，不能穿入感染CD4T淋巴細(xì)胞。

劑量：rsCD4臨床試驗(yàn)30mg/日，肌注或靜注，連續(xù)28天。

（二）抑制HIV逆轉(zhuǎn)錄酶（RT）的藥物：通過(guò)抑制逆轉(zhuǎn)錄酶，阻斷HIV復(fù)制。效果較

好的藥物有：疊氮胸背、雙脫氧胞甘。

該類病原微牛物引起人類嚴(yán)重疾病，而日比擬容易直接或間接在人與人動(dòng)物與人動(dòng)物

與動(dòng)物之間傳播，因此，對(duì)毒種的操作都必須在BSL-2實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行。

實(shí)驗(yàn)室必須隨時(shí)備有足夠應(yīng)急使用的消毒劑，消毒劑應(yīng)在有效期內(nèi)，保證消毒效果。發(fā)生意外事故

時(shí)，應(yīng)立即采取相應(yīng)緊急處理措施，并報(bào)告實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人：（1）血液溢漏、傾翻于工作臺(tái)面或?qū)嶒?yàn)地面

時(shí)，應(yīng)馬上采取消毒措施；（2）噪作人員破損的皮膚或黏膜接觸了待檢樣本或含有HIV的血清，發(fā)生了

職業(yè)暴露事故后，應(yīng)立即用消毒液或清水處理被污染的局部，病原微生物起源盡可能用力擠壓皮膚，排

出污染物，或使用洗眼裝置沖洗眼睛黏膜，然后按衛(wèi)生部《醫(yī)護(hù)人員艾滋病病毒職業(yè)暴露處理指導(dǎo)原那

么》認(rèn)真做好職業(yè)暴露危害評(píng)估及處理；（3）未破損的皮膚只需立即消毒清洗；（4）工作人員衣物污染

時(shí)，應(yīng)馬上脫去，高壓滅菌后再清洗；（5）如果發(fā)生環(huán)境大面積污染，工作人員應(yīng)及時(shí)離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室；（6）

做好意外和事故登記、報(bào)告和檢測(cè)。每次開(kāi)啟后首先檢查氣流正常與否。每次實(shí)驗(yàn)完畢后，使用適宜的

消毒液（防腐蝕）擦拭平安柜內(nèi)壁。生物平安柜應(yīng)定期檢查空氣的層流、流速、噪音、泄漏、紫外線強(qiáng)

度、高效過(guò)濾膜的破損等。假設(shè)生物平安柜出現(xiàn)正壓，或不能正常工作報(bào)警時(shí)，應(yīng)被視為房間有試驗(yàn)因

子污染并對(duì)實(shí)驗(yàn)室工作人員危害較大，應(yīng)立即關(guān)閉平安柜電源，停止工作，緩慢撤出雙手離開(kāi)工作位置,

避開(kāi)從平安柜出來(lái)的氣流。在保持房間負(fù)壓和加強(qiáng)個(gè)人防護(hù)的條件下進(jìn)行消毒處理，撤離實(shí)驗(yàn)室生物平

安柜的高效過(guò)濾膜阻塞工作無(wú)效時(shí)，必須請(qǐng)專業(yè)人員在密封狀態(tài)下用福爾馬林熏蒸后再更換，更換下的

濾膜應(yīng)放置于專用塑料袋密封后移出實(shí)驗(yàn)室，送到指定地點(diǎn)銷毀。

2,乙型肝炎病毒的生物危害評(píng)估報(bào)告

一、一般生物學(xué)特性概述

1、起源

乙型病毒性肝炎是常見(jiàn)傳染病，在我國(guó)廣泛流行，人群感染率高,是危害人民健康最嚴(yán)重的常見(jiàn)傳染

病之一。

2、基因組及基編碼產(chǎn)物

目前，己可從感染HBV病人的血清中及感染肝臟提純的病毒核心中別離出環(huán)狀雙股DNA,從而確

定HBV屬DNA病毒。目前，由于克隆化DNA完整核甘酸已經(jīng)確定，現(xiàn)已證實(shí)HBsAg和HBcAg都是

由Dane顆粒的DNA所編碼，并且二類基因存在同一DNA分子上。有人比擬病毒基因編碼能力和病毒

多少，發(fā)現(xiàn)HBVDNA負(fù)鏈能編碼全部的HBV蛋白質(zhì)，而其正鏈開(kāi)放讀碼區(qū)，不能編碼病毒蛋白。

HBVDNA負(fù)鏈有四個(gè)開(kāi)放區(qū)，分別稱為S、C、P及X,能編碼全部的HBV蛋白質(zhì)。S區(qū)可分為二局部,

S基因和前S基因。S基因能編叫主要外表蛋白。S基因之前是一個(gè)能編碼163個(gè)氨基酸的前S基因，

編碼PreSl和PreS2蛋白。C區(qū)基因包括前C基因和C基因，分別編碼HBeAg和HBcAg。P區(qū)最長(zhǎng)，

約占基因組75%以上，編碼病毒體DNA多聚酶。X區(qū)可能編碼有154個(gè)氨基酸的堿性多肽。

3、形態(tài)特征

乙型肝炎病毒屬嗜肝DNA病毒，有包膜，病毒顆粒為直徑42nm的圓球形。在病毒感染者的外周

血中還有宜徑22nm的圓形和管形顆粒。這種顆粒為乙型肝炎外表抗原，沒(méi)有核酸，無(wú)傳染性。

1.大球形顆粒：亦稱Dane顆粒，它是一種由一個(gè)囊膜和一個(gè)含有DNA分子的核衣殼組成佗病毒顆粒,

直徑約42nm。核衣殼為2（）面體對(duì)稱結(jié)構(gòu)。游離的核衣殼只能在肝細(xì)胞核內(nèi)觀察到。血中Dane顆粒濃

度以急性肝炎潛伏期后期為最高，在疾病起始后那么迅速下降。Dane顆粒外表含有HBsAg,核心中還

含有雙股有缺口的DNA鏈和依賴DNA的DNA多聚酶。目前認(rèn)為Dane顆粒即完整的HBVoHBVDNA

的兩鏈長(zhǎng)短不一，長(zhǎng)鏈（L）完整，為負(fù)鏈，長(zhǎng)度恒定，約3200個(gè)核甘酸。短鏈（S）為正鏈，長(zhǎng)度可

變，約為長(zhǎng)鏈長(zhǎng)度的50?100%,鏈的增生按5'?3’順序進(jìn)行。在不同分子中短鏈3'端的位置是可變

的，而短鏈和長(zhǎng)鏈的5'端位置固定點(diǎn)為粘性末端，通過(guò)250?300個(gè)核甘酸堿基配對(duì)，以維持DNA分

子的環(huán)狀結(jié)構(gòu)。在粘性末端兩側(cè)，兩鏈5'端各有一個(gè)由11個(gè)bp組成的直接重復(fù)序列（DirectrepeatDR）

STTCACCTCTCC,該DR位于第1824個(gè)核仔酸者稱DRI,位「第1590個(gè)核俘酸者稱DR2,在病毒

復(fù)制中起作用。

2.小形球顆粒：直徑約22nm的小球形顆粒是HBV感染后血液中最多見(jiàn)的一種。它由HBsAg,即病毒

的囊膜組成?；瘜W(xué)組成為脂蛋白，可按其特有的密度與正常血清蛋白局部別離。在此顆粒口未檢出達(dá)

DNA多聚酶活性。目前認(rèn)為HBV的小顆粒不是HBV,可能是它感染肝細(xì)胞時(shí)合成過(guò)剩的囊膜而游離

于血循環(huán)中。

3.管形顆粒：直徑約22nm,長(zhǎng)度可在1（X）?700nm之間。實(shí)際上它是一串聚合起來(lái)的小顆粒，但同樣

具有HBsAg的抗原性。

4、培養(yǎng)特性

5、流行特性

我國(guó)約10%的人為乙型肝炎HBsAg攜帶者，約有1000萬(wàn)慢性肝炎病人，全世界共有乙肝病毒攜帶者

3.5億，我國(guó)占1/3。我國(guó)每年新發(fā)病例2（X）萬(wàn)，其中20~25%為乙型肝炎。

二、致病性和感染劑量

肝炎的前驅(qū)表現(xiàn)為突然厭食（對(duì)香煙厭惡也是早期的一個(gè)野征性表現(xiàn)），全身不適，惡心，嘔吐和發(fā)熱，有

的病人可能突發(fā)尊麻疹，關(guān)節(jié)疼脂，尤其在乙肝病毒感染患者，而感染3-10H后出現(xiàn)尿色加深，隨后出現(xiàn)黃

疸（即黃疸期）。全身病癥在黃疸期可能好轉(zhuǎn)，盡管黃疸不斷加深，但病人感覺(jué)會(huì)好?些。肝內(nèi)膽汁淤積可能

發(fā)生，而且通常在發(fā)病的1~2周內(nèi)黃疸最明顯,然后在2~4周的恢復(fù)期逐漸消退。體檢可見(jiàn)不同程度的黃

疸，通常肝腫大并觸痛，但邊緣平滑且質(zhì)軟,15%?20%的病人有輕度的脾腫大。在無(wú)并發(fā)癥的患者找不到慢

性肝病的體征。

HBV還與很多肝臟疾病有關(guān)，從亞臨床型的攜帶者到急性肝炎，慢性肝炎,肝硬化，甚至肝細(xì)胞肝癌。

它還和許多原發(fā)的非肝臟疾病，如多結(jié)節(jié)性動(dòng)脈炎，其他膠原血管疾病，膜性腎小球腎炎，混合性冷球蛋白

血癥，幼年型丘疹樣肢皮病有關(guān)，但病毒所起的作用還不清楚，但在局部患者體內(nèi)發(fā)現(xiàn)含有病毒抗原的免疫

復(fù)合物在組織中沉積。

三、感染途徑及潛在暴露結(jié)果

乙型肝炎病毒通常是經(jīng)過(guò)腸道外途徑傳播，其典型的傳播途徑是輸入污染的血及血制品。HBV的傳

染性很強(qiáng)，據(jù)報(bào)道，接種0.00004ml含病毒的血液足以使人發(fā)生感染。外科和口腔手術(shù)、針剌、使用公

用剃刀、牙刷等物品，皮膚微小操作污染含少量病毒的血液，均可成為傳染源。通過(guò)呼血吸昆蟲傳染乙

型肝炎亦有報(bào)道。對(duì)獻(xiàn)血者作HBsAg的常規(guī)檢查已使輸血后HBV感染大大降低，吸毒者共用針頭的傳

播仍是一個(gè)重要問(wèn)題。腎透析和腫瘤治療單位的患者感染此病擇的風(fēng)險(xiǎn)增加，而且醫(yī)務(wù)工作者接觸血液時(shí)

也易受感染。另外，由于乙型肝炎患者和HBsAg攜帶者的精液、陰道分泌物均可檢出HBsAg,因此，

兩性接觸傳播乙型肝炎的可能性是存在的。這種病毒也可在被囚禁者（如精神病患者和罪犯）中擴(kuò)散，但傳

染性遠(yuǎn)低于甲型肝炎病毒,而且感染的方式也不清楚。昆蟲叮咬在傳播中的作用仍不清楚。許多散在發(fā)生

的急性乙型肝炎病例沒(méi)有明確的傳染源。近來(lái)有人報(bào)告在急性乙型肝炎患者和慢性HBsAg攜帶者唾液

標(biāo)本中檢測(cè)到HBsAg及Dane顆粒，因此，HBsAg隨唾液經(jīng)口傳播的途徑應(yīng)當(dāng)重視。孕婦在妊娠后期

患急性乙型肝炎，其新生兒容易感染此病。

四、環(huán)境中的穩(wěn)定性

HBV在環(huán)境中比擬穩(wěn)定

五、被操作微生物的濃度和劑量的影響

樣本檢測(cè)不能污染皮膚。

六、自然宿主和易感人群

慢性乙肝病毒攜帶者是世界范圍的乙肝病毒傳播源，其流行性隨地理環(huán)境和其他因素不同而有很大

的差異，北美和北歐＜0.5%,而在遠(yuǎn)東地區(qū)那么＞10%。母嬰垂直傳播也是擴(kuò)散的局部原因，這種情況尤見(jiàn)

于高發(fā)區(qū)。

七、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究，實(shí)驗(yàn)室感染和院內(nèi)感染信息

尚未有資料

八、實(shí)驗(yàn)活動(dòng)評(píng)估

乙型肝炎的臨床表現(xiàn)形式多樣，診斷的依據(jù)除病人病癥，體征外，須根據(jù)流行病學(xué)，實(shí)驗(yàn)室檢查和

或肝活檢等手段進(jìn)行綜合分析，動(dòng)態(tài)觀察診斷。

1、急性型肝炎

1）流行病學(xué)資料：半年內(nèi)接受過(guò)血及血制品或曾有其他醫(yī)源性感染，生活中的密切接觸，尤其是性接

觸。

21病癥：近期出現(xiàn)的無(wú)其他原因可解釋的持續(xù)一周以上的明顯乏力和消化道病癥。

3）體征：肝腫大，伴有觸痛或卬痛：皮膚，鞏膜黃染。

Pmol/L（大于Img/dL）和/或尿膽紅素陽(yáng)性并排除其他疾病所致的黃疸。

5）HBV標(biāo)記物檢查：乙型肝炎外表抗原（HBsAg）陽(yáng)性，抗HBc-IgM高滴度11:1000稀釋仍陽(yáng)性），

兩項(xiàng)陽(yáng)性或僅后者陽(yáng)性。如患者皮膚，鞏膜無(wú)黃染，肝功能檢查血清膽紅素正常，尿膽紅素陰性為急性

無(wú)黃疸性乙型肝炎，反之為急性黃疸性乙型肝炎。

2、慢性遷延型肝炎（簡(jiǎn)稱慢遷肝）

I）急性乙肝病程超過(guò)半年尚未痊愈者：如無(wú)急性乙肝史，乙肝病程超過(guò)半年未痊愈者；病情較輕缺乏

以診斷慢性活動(dòng)性肝炎者

2）肝功能檢查ALT持續(xù)或間歇異常

3）HBV標(biāo)記物檢查：符合慢性乙肝的病原學(xué)指標(biāo)，抗HBcIgM滴度低于1：32或陰性，血清HBsAg

或HBV-DNA任何一項(xiàng)陽(yáng)性，病程持續(xù)半年以上。

4）肝臟病理組織檢查可出現(xiàn)三類情況：慢性小葉性肝炎主要是肝小葉內(nèi)的炎癥和肝細(xì)胞的變性及壞死:

慢性間隔性肝炎主要是匯管區(qū)有纖維細(xì)胞向小葉內(nèi)伸展形成間隔；慢性門脈性肝炎門脈區(qū)有少量炎性細(xì)

胞浸潤(rùn)，致使門脈區(qū)增大。

3、慢性活動(dòng)性肝炎（簡(jiǎn)稱慢活肝）有明顯的肝炎病癥。

1）體征：可有肝病面容，肝掌，蜘蛛痔，脾腫大或黃疸（排除其他原因）。

2）肝功能檢查：ALT反復(fù)和或持續(xù)升高，血漿蛋白降低，A/G蛋白比例失常，r-球蛋白升高和或膽紅素

長(zhǎng)期或反復(fù)異常。

3）HBV標(biāo)記物檢測(cè)：

4）肝臟病理組織學(xué)特征：臨床上慢活肝輕型與慢遷肝很難區(qū)別，確診須借助病理組織學(xué)特征與臨床表

現(xiàn)相結(jié)合加以鑒別。慢活肝的病理改變以碎屑狀壞死為主要特征，小葉內(nèi)點(diǎn)狀或灶狀壞死，甚至灶性融

合性壞死以及變性