《微生物的選擇培養(yǎng)與計(jì)數(shù)》第2課時(shí) 導(dǎo)學(xué)案2

學(xué)而優(yōu)·教有方PAGEPAGE11.2微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用二、微生物的選擇培養(yǎng)與計(jì)數(shù)學(xué)案學(xué)習(xí)目標(biāo)解釋選擇培養(yǎng)基篩選微生物的原理土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離和計(jì)數(shù)運(yùn)用無(wú)菌操作技術(shù)和微生物分離、培養(yǎng)的方法初步分離出目標(biāo)菌嘗試解決生產(chǎn)、生活中與微生物選擇培養(yǎng)、計(jì)數(shù)等有關(guān)的實(shí)際問(wèn)題一、選擇培養(yǎng)基實(shí)驗(yàn)室中微生物篩選的基本原理：人為提供有利于，同時(shí)抑制或阻止其他微生物的生長(zhǎng)選擇培養(yǎng)基的概念：在微生物學(xué)中，將特定種類的微生物生長(zhǎng)，同時(shí)或其他種類微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基，叫選擇培養(yǎng)基尿素分解菌分解尿素的原理：微生物的選擇培養(yǎng)稀釋涂布平板法的操作步驟：①②③④⑤⑥2.微生物的培養(yǎng)條件：三、微生物的數(shù)量測(cè)定1.稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)的原理：當(dāng)樣品的稀釋足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)單菌落，來(lái)源于2.稀釋涂布平板計(jì)數(shù)法統(tǒng)計(jì)的平板菌落數(shù)范圍：3.稀釋涂布平板法的統(tǒng)計(jì)方法：在同一稀釋度下，應(yīng)至少對(duì)個(gè)平板進(jìn)行重復(fù)計(jì)數(shù)，然后求出平均值4.稀釋涂布平板計(jì)數(shù)的特點(diǎn)及原因分析：統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目，這是因?yàn)閮蓚€(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是。因此。統(tǒng)計(jì)結(jié)果一般用而不是用來(lái)表示課堂檢測(cè)一、單選題1.尿素分解菌是生活在土壤中能分泌脲酶的一種細(xì)菌，脲酶能將尿素分解成NH3。玉米根細(xì)胞從土壤中吸收用于植物生長(zhǎng)。下列敘述正確的是()A.玉米根細(xì)胞和尿素分解菌的DNA分子均與蛋白質(zhì)結(jié)合形成染色體B.玉米根細(xì)胞從土壤中吸收需要載體蛋白的參與C.中的N可作為玉米根細(xì)胞中蛋白質(zhì)、糖類等的構(gòu)成元素D.細(xì)胞中大多數(shù)無(wú)機(jī)鹽以化合物的形式存在，對(duì)維持生命活動(dòng)有重要作用2.下列有關(guān)血細(xì)胞計(jì)數(shù)板的敘述中，錯(cuò)誤的是()A.利用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)的方法屬于顯微鏡直接計(jì)數(shù)法B.血細(xì)胞計(jì)數(shù)板的一個(gè)方格網(wǎng)中有九個(gè)大方格C.血細(xì)胞計(jì)數(shù)板上的雙線用于區(qū)分大方格，單線用于區(qū)分中方格D.用酒精清洗后的血細(xì)胞計(jì)數(shù)板可用綢布輕輕拭干3.下面關(guān)于土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)的敘述中，正確的是()A.只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素

B.篩選分解尿素的細(xì)菌時(shí)，應(yīng)以尿素為培養(yǎng)基中唯一的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)

C.統(tǒng)計(jì)樣品中的活菌數(shù)目一般用平板劃線法

D.在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑,若指示劑變藍(lán)，則表明篩選到了分解尿素的細(xì)菌4.某些土壤細(xì)菌可將尿素(CH4N2O)分解為CO2和NH3供植物吸收和利用,但分解產(chǎn)物CO2不能為該菌提供營(yíng)養(yǎng)。下列關(guān)于配置分離這一菌種的選擇培養(yǎng)基的成分符合要求的是(

)A.僅尿素

B.尿素+葡萄糖 C.僅葡萄糖

D.牛肉膏蛋白胨5.某同學(xué)利用稀釋涂布平板法進(jìn)行菌落數(shù)目的統(tǒng)計(jì)，在101、102、103倍稀釋液的平均菌落數(shù)為2760個(gè)/mL、295個(gè)/mL和46個(gè)/mL，則菌落總數(shù)（個(gè)/mL）為()A.3.76×104 B.3.95×104 C.3.6×104 D.3.775×104二、填空題6.植物秸桿中的纖維素可被某些微生物分解。回答下列問(wèn)題：（1）分解秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶，該酶是由3種組分組成的復(fù)合酶，其中可將纖維素分解為纖維二糖的是_________，可將纖維二糖分解成葡萄糖的是_________。（2）在含纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅（CR）時(shí)，CR可與纖維素形成_________色復(fù)合物。用含有CR的該種培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時(shí)，培養(yǎng)基上會(huì)出現(xiàn)以該菌的菌落為中心的__________________。（3）為從富含纖維素的土壤中分離獲得纖維素分解菌的單菌落，某同學(xué)設(shè)計(jì)了甲、乙兩種培養(yǎng)基（成分見(jiàn)下表）。酵母膏無(wú)機(jī)鹽淀粉纖維素粉瓊脂CR溶液水培養(yǎng)基甲++++-++培養(yǎng)基乙+++-+++注：“+”表示有，“-”表示無(wú)。據(jù)表判斷，培養(yǎng)基甲_________（填“能”或“不能”）用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是__________________；培養(yǎng)基乙_________（填“能”或“不能”）用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是__________________。

參考答案1.答案：B解析：2.答案：C解析：顯微鏡直接計(jì)數(shù)是測(cè)定細(xì)菌數(shù)量的常用方法，利用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)的方法屬于顯微鏡直接計(jì)數(shù)法；血細(xì)胞計(jì)數(shù)板的一個(gè)方格網(wǎng)中有九個(gè)大方格，其中只有中間的一個(gè)大方格為計(jì)數(shù)室，供計(jì)數(shù)微生物用；血細(xì)胞計(jì)數(shù)板上的雙線用于區(qū)分中方格，單線用于區(qū)分小方格；用酒精清洗后的血細(xì)胞計(jì)數(shù)板可用綢布輕輕拭干。3.答案：A解析：篩選分解尿素的細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)中，采用的是以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基，B錯(cuò)誤；統(tǒng)計(jì)樣品中的活菌數(shù)目一般用稀釋涂布平板法，C錯(cuò)誤；在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，培養(yǎng)某種細(xì)菌后，如果pH升高，指示劑變紅，這樣就能初步鑒定該種細(xì)菌能夠分解尿素，D錯(cuò)誤。4.答案：B解析：根據(jù)題意：“某些土壤細(xì)菌可將尿素（

CH4N2O）

分解為

CO2和

NH3供植物吸收和利用，但分解產(chǎn)物

CO2不能為該菌提供營(yíng)養(yǎng)”說(shuō)明該土壤細(xì)菌是異養(yǎng)型，需要含碳有機(jī)物作為碳源，以尿素作為氮源。

故選：B。5.答案：D解析：選擇平均菌落數(shù)在30~300的組別，取二者平均數(shù)即（46×103+295×102）÷2=3.775×104。6.答案：（1）C1酶和Cx酶；葡萄糖苷酶（2）紅；透明圈（3）不能；液體培養(yǎng)基不能用于分離單菌落；不能；培養(yǎng)基中沒(méi)有纖維素，不能形成CR-纖維素紅色復(fù)合物，即使出現(xiàn)單菌落也不能確定其為纖維素分解菌解析：（1）分解秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶，該酶是由3種組分組成的復(fù)合酶，包括Cx酶、C1酶和葡萄糖苷酶，其中C1酶和Cx酶可將纖維素分解成纖維二糖，葡萄糖苷酶可將纖維二糖分解成葡萄糖。（2）在含纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅（CR）時(shí)，CR可與纖維素形成紅色復(fù)合物。用含有CR的該種培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維