項目血漿脂蛋白的測定魏碧娜講解

項目血漿脂蛋白的測定主講人魏碧娜實訓(xùn)血清脂蛋白電泳【操作步驟】：1.血清預(yù)染取血清0.18ml于小試管中，加飽和蘇丹黑B染液0.02ml，混勻，置室溫1小時后。2.制版取普通玻璃將已融化的5g/L瓊脂糖溶液均勻涂布在載玻上，室溫下靜置待凝固。然后距玻片1.5cm處打一小槽。3.加樣洗凈槽內(nèi)水分，取預(yù)染血清加于樣品槽中。4.電泳將已加樣的瓊脂糖玻片放入電泳槽中，加樣品端接負極，用濾紙搭橋。通電，調(diào)電壓100-120V，電泳20-30分鐘。5.結(jié)果分析脂類脂肪類脂磷脂(PL)膽固醇(Ch)糖脂膽固醇酯(CE)(甘油三酯、三脂酰甘油、TG)都是雙親性分子:有親水性（極性）末端和疏水性（非極性）末端

血漿中所含的脂類物質(zhì)總稱為血脂。問題一、什么是血清脂蛋白？組成：甘油三酯、磷脂、膽固醇、膽固醇酯和游離脂肪酸。脂蛋白是血中脂類的主要運輸形式。

脂類不溶于水，在水中往往呈乳濁液。正常人的血漿雖含有較多的脂類，但卻能保持透明清澈的外觀，原因是血漿中的脂類并非以自由狀態(tài)存在，而是與水溶性強的蛋白質(zhì)結(jié)合形成脂蛋白。脂蛋白結(jié)構(gòu)示意圖蛋白質(zhì)磷脂蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)膽固醇酯TG膽固醇外周載脂蛋白（如ApoC）磷脂TG膽固醇酯整合載脂蛋白（如ApoB）游離膽固醇血漿脂蛋白的平面結(jié)構(gòu)小結(jié)脂蛋白結(jié)構(gòu)：

脂蛋白大致為球形顆粒，由兩大部分組成，即疏水性的內(nèi)核和親水性的外殼。內(nèi)核由不同量的CE與TG組成，表層由載脂蛋白、PL及FC組成，F(xiàn)C及PL的極性基團向外露在血漿中。血脂與血漿脂蛋白

血脂：是血漿中的中性脂肪（甘油三酯）和類脂（磷脂、糖脂、膽固醇、膽固醇酯）的總稱

脂蛋白：脂類難溶于水，正常血漿脂類物質(zhì)與蛋白質(zhì)結(jié)合成脂蛋白的形式存在。血漿脂蛋白的組成蛋白質(zhì)三脂酰甘油磷脂膽固醇膽固醇酯不同血漿脂蛋白組成的比例不同問題二、血清脂蛋白電泳的原理？電泳分離法原理：

由于各種脂蛋白中載脂蛋白的含量和種類不同，故其表面電荷不同，在電場中具有不同的遷移率。血漿脂蛋白的分類超速離心法：根據(jù)脂蛋白在一定密度的介質(zhì)中漂浮速率不同而進行分離的方法。

電泳法：根據(jù)不同密度的脂蛋白所含蛋白質(zhì)的表面電荷不同，利用電泳將其分離，并與血漿蛋白質(zhì)的遷移率比較以判斷其部位。

分離方法密度分類法超速離心VLDLCMLDLHDL血漿密度為1.063NaCl溶液

脂蛋白電泳分析可分為預(yù)染法和電泳后染色法兩大類。

預(yù)染法的操作比較簡單，分離效果直觀。其操作過程是先將待測血清和蘇丹黑染料按一定比例混合進行預(yù)染處理，離心后取上清液進行電泳分析。

電泳后染色法為用電泳方法先將血漿脂蛋白各成份分開，再用蘇丹黑或油紅O進行染色。臨床上比較常用的是預(yù)染法電泳。問題三、什么是預(yù)染？問題四、血清脂蛋白電泳的結(jié)果為什么只有兩條？血清脂蛋白瓊脂糖凝膠電泳：α-脂蛋白：0.30-