醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)材料

醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)材料

2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試生化檢驗(yàn)輔導(dǎo)：膽道疾病的臨床意義

正常時(shí)肝細(xì)胞內(nèi)ALT.AST的一部分可通過(guò)肝細(xì)胞膜到肝竇狀隙而進(jìn)入

血液，一部分通過(guò)溶酶體分泌進(jìn)入毛細(xì)膽管排人小腸，故當(dāng)各種原因引起

膽道梗阻時(shí)，后部分酶反流入血，可致ALT中度升高，梗阻緩解后I?2周

即可恢復(fù)正常。

2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)知識(shí)講解：精液檢查的要求

如果取精液檢查，應(yīng)在檢查前5天內(nèi)不排精。一般收集精液，可以用

自慰取得，用避孕套通過(guò)性交時(shí)收集也可以。精液取到后應(yīng)盛放在干燥、

清潔的瓶?jī)?nèi)，并立即送檢。

精液是體液的一種。因此，很多性病可以通過(guò)精液傳染給對(duì)方。艾滋

病病人的精液含有艾滋病的病毒，因此可以通過(guò)性交傳染給對(duì)方。肛交是

一種危險(xiǎn)的性行為，因?yàn)楦亻T(mén)附近的組織比較容易受傷害，如果有傷口破

裂，那么帶有艾滋病病毒的精液就可以通過(guò)傷口傳染給被肛交的一方。這

也是為什么同性戀的男性比較容易得艾滋病的原因。只要有體液的交流,

異性戀的性行為也是可以傳播性病的。

醫(yī)生為了鑒定男性生育能力，常囑男方作精液檢查，正常精液顏色為

灰白色或乳白色。如節(jié)欲時(shí)間長(zhǎng)者，可呈淡黃色，若出現(xiàn)鮮紅色。暗紅色，

則提示患者有炎癥或生殖道損傷。每次排精量為2?6毫升，常受排精次

數(shù)與頻率的影響。新鮮精液呈稠厚膠凍狀，1小時(shí)之內(nèi)應(yīng)液化為稀薄的液

體，用一根小玻璃棒插入精液中再提起，所形成的精液絲長(zhǎng)度一般不超過(guò)

2厘米，否則視為異常。精液呈弱堿性，PH值為7.2?7.8.正常精子數(shù)應(yīng)超

過(guò)2000萬(wàn)/毫升。排精后1小時(shí)內(nèi)活動(dòng)精》=50%.世界衛(wèi)生組織推薦精子活

動(dòng)力分為四級(jí)：0級(jí)：不活動(dòng)；1級(jí)：精子原地?cái)[動(dòng)；2級(jí)：有中等的前向

運(yùn)動(dòng)；3級(jí)：前向運(yùn)動(dòng)活躍，快速直線(xiàn)運(yùn)動(dòng)。正常的精子活動(dòng)力為2?3級(jí)

的精子》=40%?50%.精子形態(tài)：畸形精子小于50%.分析男性生育能力不能

單從精液的一項(xiàng)指標(biāo)定論，應(yīng)對(duì)精子數(shù)量、活力、活動(dòng)率、液化時(shí)間、畸

形率等多方面進(jìn)行綜合能力分析。

2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)知識(shí)講解：精液常規(guī)檢查

精液由精子和精漿組成，其中精子占10%,其余為精漿。它除了含有

水、果糖、蛋白質(zhì)和脂肪外，還含有多種酶類(lèi)和無(wú)機(jī)鹽。精液中含有鋅元

素。

精子由睪丸產(chǎn)生。精漿由前列腺、精囊腺和尿道球腺分泌產(chǎn)生。精漿

里含有果糖和蛋白質(zhì)，是精子的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。另外，精漿中還含有前列腺素

和一些酶類(lèi)物質(zhì)。正常的精液呈乳白色、淡黃色或者無(wú)色，每毫升為精液

中的精子數(shù)一般在6千萬(wàn)至2億個(gè)。有活動(dòng)能力的精子占總數(shù)的60%以上。

畸形精子應(yīng)總數(shù)的10%以下。在室溫下精子活動(dòng)力持續(xù)3-4小時(shí)。

精液是堿性，女性生殖器內(nèi)部則為酸性。因此，精液進(jìn)入女性?xún)?nèi)部,

就會(huì)被中和。

有生育力的正常男性一次射精最為2-6毫升，平均3.5ml.一次射精量

與射精頻度呈負(fù)相關(guān)。若禁欲5-7天射精量仍少于2毫升，視為精液減少；

若不射精，稱(chēng)為無(wú)精液癥(aspermia)o精漿是精子活動(dòng)的介質(zhì)，并可中和

陰道的酸性分泌物，以免影響精子活力。精液量減少(精漿不足)不利于

精通過(guò)陰道進(jìn)入子宮和輸卵管，影響受精。若一次射精量超過(guò)8毫升，精

子被稀釋?zhuān)膊焕谏?。此可因垂體前葉促性腺素的分泌功能亢進(jìn)，使

雄激素的水平升高所

致亦可見(jiàn)于禁欲時(shí)間過(guò)長(zhǎng)者。

精液內(nèi)含有一種可與青霉素相媲美的抗菌物質(zhì)精液胞漿素。專(zhuān)

家們指出，精液胞漿素是一種具有獨(dú)特功能的蛋白質(zhì)，此物質(zhì)一旦進(jìn)入細(xì)

胞內(nèi)部，就可以阻止核糖核酸的合成，從而殺死細(xì)菌。從實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)中觀(guān)

察到，精液胞漿素能殺死葡萄球茵、鏈球菌等多種致病菌。

精液呈灰白色，自行液化后為半透明的乳白色，久未射精者可略顯淺

黃色。凡精液呈鮮紅、淡紅、暗紅或醬油色并含有大量紅細(xì)胞者稱(chēng)為血精，

可能由于前列腺和精非特異性炎癥、生殖系結(jié)核、腫瘤或結(jié)石所致黃色或

棕色膿性精液見(jiàn)于前列腺炎和精囊炎。對(duì)于普通的健康男性，如果沒(méi)有不

潔的性行為，或者性病，精液是什么顏色，形狀，根本是無(wú)關(guān)緊要的。男

性疾病不是從表面研究精液，就可以診斷出來(lái)的。精液中的精子和女性的

卵子結(jié)合，用來(lái)繁衍后代，這就是精液的唯一的功能。因此，如果吞食了

精液，是絕對(duì)不可能導(dǎo)致女人懷孕的。對(duì)于單身男性來(lái)說(shuō)，如果連對(duì)象也

沒(méi)有，根本就沒(méi)有必要擔(dān)心自己的精液?jiǎn)栴}，完全就是庸人自擾。如果結(jié)

婚一年以后，女方仍然沒(méi)有懷孕，那時(shí)才是應(yīng)該看醫(yī)生，找出不孕的原因。

有些男性，受到一些封建迷信的宣傳，所以對(duì)于自己的精液特別重視。

古人因?yàn)橛廾翢o(wú)知，所以有“一滴精，十滴血”，“精盡人亡”之類(lèi)的錯(cuò)誤

說(shuō)法。這是完全沒(méi)有科學(xué)根據(jù)的。古代太監(jiān)，因?yàn)椴G丸被割掉，連一個(gè)精

子都沒(méi)有。有些太監(jiān)還很長(zhǎng)壽。現(xiàn)代科學(xué)研究，證明精液根本就不是所謂

男性的精華所在。精液也絕對(duì)不是什么美容佳品。

2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試生化檢驗(yàn)基礎(chǔ)輔導(dǎo)：m-AST的意義

m-AST可協(xié)助判斷肝實(shí)質(zhì)損害的嚴(yán)重程度。

當(dāng)急性肝炎病變嚴(yán)重累及線(xiàn)粒體時(shí)，AST/ALT比值升高，此時(shí)應(yīng)注意

是否發(fā)展為慢性肝炎。肝硬化時(shí)可達(dá)2.0.在Reye綜合征、妊娠脂肪肝、心

肌梗死、做導(dǎo)管肝動(dòng)脈栓塞術(shù)后，m-AST也可升高

2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試臨檢基礎(chǔ)輔導(dǎo)：腎前性少尿

腎前性少尿：由于各種原因造成腎血流量不足，腎小球?yàn)V過(guò)率減低所

致；如①腎缺血：各種原因引起的休克、過(guò)敏、失血過(guò)多、心力衰竭、腎

動(dòng)脈栓塞、腫瘤壓迫等。②血液濃縮：嚴(yán)重腹瀉、嘔吐、大面積燒傷、高

熱等。③血容量減低：重癥肝病、低蛋白血癥引起全身水腫。④應(yīng)激狀態(tài)：

嚴(yán)重創(chuàng)傷、感染（如敗血癥）等。

2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試臨檢基礎(chǔ)輔導(dǎo)：病理性多尿

1）內(nèi)分泌疾?。喝缒虮腊Y，指抗利尿激素（ADH）嚴(yán)重分泌不足或缺

乏（中樞性尿崩癥），或腎臟對(duì)ADH不敏感或靈敏度減低（腎源性尿崩癥），

患者24h尿量可多達(dá)5~15L,尿比密常為1.005以下，尿滲透壓在50?

200mmol/L之間。多尿還見(jiàn)于甲狀腺功能亢進(jìn)、原發(fā)性醛固酮增多癥等。

2）代謝性疾?。喝缣悄虿。―M）引起的多尿，主要機(jī)制是滲透性利

尿所致，患者尿比密、尿滲透壓均增高。

3）腎臟性疾病：如慢性腎炎、慢性腎盂腎炎、慢性腎功能衰竭早期、

腎小管酸中毒I型、

急性腎功能衰竭多尿期、失鉀性腎病等。腎小管破壞致腎濃縮功能逐

漸減退均可引起多尿。腎性多尿常具有晝夜尿量的比例失常、夜尿量增多

的特點(diǎn)，即晝夜間尿量比《2：1.

2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試生化檢驗(yàn)輔導(dǎo)：其他疾病的臨床意義

ALT廣泛存在于各組織中，機(jī)體器官有實(shí)質(zhì)性損害時(shí)，ALT均可增高。

如急性心肌梗死、右心功能不全、多發(fā)性肌炎、肌營(yíng)養(yǎng)不良、急性腎盂腎

炎、大葉性肺炎、支氣管炎、傳染性單核細(xì)胞增多癥、潰瘍性結(jié)腸炎、細(xì)

菌性或阿米巴性肝膿瘍等疾病、瘧疾、血吸蟲(chóng)病，外傷、手術(shù)等均可造成

血清ALT和AST增高。

某些化學(xué)藥物如異菸肺、氯丙嗪、利福平、環(huán)磷酰胺和某些抗生素等

也可引起血清ALT增高，所以ALT單項(xiàng)增高，需要結(jié)合病情綜合分析。

2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)知識(shí)講解：血清學(xué)試驗(yàn)的應(yīng)用

血清學(xué)試驗(yàn)在醫(yī)學(xué)和獸醫(yī)學(xué)領(lǐng)域已廣泛應(yīng)用，可直接或間接從傳染病、

寄生蟲(chóng)病、腫瘤、自身免疫病和變態(tài)反應(yīng)性疾病的感染組織、血清、體液

中檢出相應(yīng)的抗原或抗體，從而作出確切診斷。對(duì)傳染病來(lái)說(shuō)，幾乎沒(méi)有

不能用血清學(xué)試驗(yàn)確診的疾病。實(shí)驗(yàn)室只要備有各種診斷試劑盒和相應(yīng)的

設(shè)備，即可對(duì)多種疾病作出確切診斷。在動(dòng)物疫病的群體檢疫、疫苗免疫

效果監(jiān)測(cè)和流行病學(xué)調(diào)查中，也已廣泛應(yīng)用了血清學(xué)試驗(yàn)以檢測(cè)抗原或抗

體。血清學(xué)試驗(yàn)還廣泛應(yīng)用于生物活性物質(zhì)的超微定量、物種及微生物鑒

定和分型等方面。此外，血清學(xué)試驗(yàn)也用于基因分離，克隆篩選，表達(dá)產(chǎn)

物的定性、定量分析和純化等，已經(jīng)成為現(xiàn)代分子生物學(xué)研究的重要手段。

2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試血液檢驗(yàn)輔導(dǎo)：嗜酸性粒細(xì)胞的計(jì)數(shù)

嗜酸性粒細(xì)胞起源于骨髓內(nèi)CFU-s。經(jīng)過(guò)單向嗜酸性祖細(xì)胞（CFU-EO）

階段，在有關(guān)生成素誘導(dǎo)下逐步分化，成熟為嗜酸性粒細(xì)胞，在正常人外

周血中少見(jiàn)，僅為0.5-5%.

嗜酸性粒細(xì)胞有微弱的吞噬作用，但基本是無(wú)殺菌力，它的主要作用

是抑制嗜石破天驚生粒細(xì)胞和肥大細(xì)胞合成與釋放其活性物質(zhì)，吞噬其釋

出顆粒，并分泌組胺酶發(fā)破壞組胺，從而起到限制過(guò)敏反應(yīng)的作用。此外，

實(shí)驗(yàn)癥明它還參加與對(duì)嚅蟲(chóng)的免疫反應(yīng)。嗜酸性粒細(xì)胞的趨化因子至少有

六大來(lái)源：

①?gòu)姆蚀蠹?xì)胞或嗜堿性粒細(xì)胞而來(lái)的組胺(histamine)；

②由補(bǔ)體而來(lái)的C3A\C5A、C567,其中以C5a最為重要；

③從致敏淋巴細(xì)胞而來(lái)的嗜酸性細(xì)胞趨化因子；

④從寄生蟲(chóng)而來(lái)的嗜酸性粒細(xì)胞趨化因子；

⑤從某些細(xì)菌而的嗜酸性粒細(xì)胞趨化因子(如乙型溶血性鏈球菌等);

⑥從腫瘤細(xì)胞而來(lái)的嗜酸性粒細(xì)胞趨化因子。

以上務(wù)因素均可引起的嗜酸性粒細(xì)胞增多。由于嗜酸性粒細(xì)胞在外周

血中百分率很低，故經(jīng)白細(xì)胞總數(shù)和嗜酸性粒細(xì)胞百分率換算而來(lái)的絕對(duì)

值誤差較大，因此，在臨床上需在了解嗜酸性粒細(xì)胞的變化時(shí)，應(yīng)采用直

接計(jì)數(shù)法。

2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)知識(shí)講解：血清學(xué)試驗(yàn)的概念

抗原抗體反應(yīng)是指抗原與相應(yīng)的抗體之間發(fā)生的特異性結(jié)合反應(yīng)。它

既可以發(fā)生在體內(nèi)，也

可以發(fā)生在體外。在體內(nèi)發(fā)生的抗原抗體反應(yīng)是體液免疫應(yīng)答的效應(yīng)

作用。體外的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)主要用于檢測(cè)抗原或抗體，用于免疫學(xué)診

斷。因抗體主要存在于血清中，所以將體外發(fā)生的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)稱(chēng)為

血清學(xué)反應(yīng)或血清學(xué)試驗(yàn)。血清學(xué)試驗(yàn)具有高度的特異性，廣泛應(yīng)用于微

生物的鑒定、傳染病及寄生蟲(chóng)病的診斷和監(jiān)測(cè)。

2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試臨檢基礎(chǔ)知識(shí)輔導(dǎo)：尿紅細(xì)胞形態(tài)分析的臨床意

義

1.畸形紅細(xì)胞標(biāo)準(zhǔn)

Birech報(bào)告畸形紅細(xì)胞分類(lèi)紅細(xì)胞大小不等，形態(tài)異常多樣，歸為以

下7種［6］：①酵母菌樣紅細(xì)胞：在紅細(xì)胞外膜有小泡突出或細(xì)胞呈霉菌

抱子樣改變。②炸面包卷樣紅細(xì)胞：紅細(xì)胞膜呈明顯的內(nèi)外兩圈、四周肥

厚、形似炸面包卷。③古錢(qián)樣紅細(xì)胞：形似中國(guó)古錢(qián)幣。④膜缺損紅細(xì)胞：

紅細(xì)胞膜不完整，部分血紅蛋白(Hb)丟失。⑤大紅細(xì)胞：細(xì)胞體增大，

中心淡，無(wú)雙盤(pán)凹陷感。⑥小紅細(xì)胞：胞體小，外膜增厚，折光增強(qiáng)。⑦

手鐲樣紅細(xì)胞：胞體較大，呈明顯內(nèi)外兩層膜改變。

黃鋒先等關(guān)于畸形紅細(xì)胞分類(lèi)①面包圈樣紅細(xì)胞。②古錢(qián)樣紅細(xì)胞。

③紅細(xì)胞膜呈顆粒樣、串珠樣。④紅細(xì)胞大小不等，大者為正常的

倍，小者為其1/2,顏色變淺。⑤殘碎紅細(xì)胞。⑥芽抱樣紅細(xì)胞。⑦棘狀

樣紅細(xì)胞。⑧其他形狀，如細(xì)胞膜破裂成各種形狀，馬蹄形、月牙型等。

其他如紅細(xì)胞呈鋸齒型、固縮型、大小一致的均稱(chēng)均一型。

2.均一型紅細(xì)胞標(biāo)準(zhǔn)

紅細(xì)胞大小一致，變化均一，圖相在兩種以?xún)?nèi)，多數(shù)為正常及桑根樣

紅細(xì)胞，部分可出現(xiàn)影子紅細(xì)胞。此型多屬于非腎小球性血尿。

3.混合型紅細(xì)胞標(biāo)準(zhǔn)

根據(jù)畸形和均一型紅細(xì)胞所占比例的不同，可分為畸形為主的混合型

紅細(xì)胞血尿（畸形紅細(xì)胞》50%）和以均一型紅細(xì)胞為主的混合型紅細(xì)胞

血尿（均一型紅細(xì)胞所占》50%）兩種。

4.判定界限

畸形紅細(xì)胞占80%以上為腎小球性血尿；畸形紅細(xì)胞《20%,均一型

紅細(xì)胞》80%以上為非腎小球性血尿；畸形紅細(xì)胞》20%、《80%,為混合

型血尿。

5.畸形紅細(xì)胞形態(tài)變化與腎小球性血尿

畸形紅細(xì)胞各種變化形狀分為7?8種。腎小球性血尿，絕大多數(shù)為

畸形紅細(xì)胞，占80%以上；非腎小球性血尿絕大多數(shù)為均一型紅細(xì)胞，占

80%以上；以及以畸形紅細(xì)胞為主（》50%）的混合型和以均一型紅細(xì)胞

為主（》50%）的混合型。以上畸形紅細(xì)胞、均一型紅細(xì)胞和混合型紅細(xì)

胞3型結(jié)果均有趨向性，不存在可逆行，當(dāng)然結(jié)合臨床癥狀觀(guān)察更為客觀(guān)。

畸形紅細(xì)胞的形成：一般認(rèn)為，紅細(xì)胞通過(guò)腎小球基底膜時(shí)受損和經(jīng)

腎小球毛細(xì)血管壁漏出時(shí)受擠壓而變形，同時(shí)還與尿滲透壓、pH等因素有

關(guān)。因此來(lái)自腎臟的紅細(xì)胞，除外形發(fā)生圖相變化外，其體積的大小也有

顯著性差異。采用顯微鏡觀(guān)察檢查尿內(nèi)紅細(xì)胞形態(tài)的變化，對(duì)診斷腎小球

疾病引起的血尿和鑒別診斷是有一定價(jià)值和臨床意義的。棘形、靶形紅細(xì)

胞的出現(xiàn)更具有臨床診斷價(jià)值。

2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試質(zhì)量管理與控制輔導(dǎo)：如何制定允許總誤差

（1）Tonks于1963年從理論上研究此問(wèn)題，提出根據(jù)參考值與參考

值范圍而設(shè)定，其公式是:

允許總誤差（％）=（1/4）［（參考值上界-參考值下界）/參考值均值］

100%

（2）目前國(guó)際上常推薦根據(jù)生物學(xué)變異制定不精密度標(biāo)準(zhǔn)。生物學(xué)

變異或稱(chēng)生理變異（CVB）,包括個(gè)體內(nèi)變異（CVI）和個(gè)體間變異（CVG）,

也就是所說(shuō)的生理波動(dòng)。生物學(xué)變異可用來(lái)導(dǎo)出臨床實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)項(xiàng)目的不

精密度、不準(zhǔn)確度和總誤差的分析質(zhì)量。體內(nèi)和個(gè)體間變異分量表達(dá)為變

異系數(shù)（分別為CVI和CVG）

2012醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試質(zhì)量管理與控制輔導(dǎo)：準(zhǔn)確度的總誤差概念

測(cè)定結(jié)果與真值的差異是隨機(jī)誤差（BE）和系統(tǒng)誤差（SE）的總和，

即總誤差（TE）。也可用TE=1.96s+Bias表示（95%允許誤差限）。所選用的

檢測(cè)方法的總誤差必須在臨床可接受的水平范圍內(nèi)（也就是允許總誤差，

）

TEao

2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試臨檢基礎(chǔ)輔導(dǎo)：精液的精子活動(dòng)率檢測(cè)

【正常參考值】正常精子活力一般在III級(jí)（活動(dòng)較好，有中速運(yùn)動(dòng)，

但波形運(yùn)動(dòng)的較多）以上,射精后1小時(shí)內(nèi)有m級(jí)以上活動(dòng)能力的精于應(yīng)》

0.60.

【臨床意義】如果。級(jí)（死精子，無(wú)活動(dòng)能力，加溫后仍不活動(dòng)）和

【級(jí)（活動(dòng)不良，精子原地旋轉(zhuǎn)、擺動(dòng)或抖動(dòng)，運(yùn)動(dòng)遲緩）精子在0.40以

上，常為男性不育癥的重要原因之一。

2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試臨床檢驗(yàn)技師綜合輔導(dǎo)：酶的作用機(jī)理

一、酶作用在于降低反應(yīng)活化能

在任何化學(xué)反應(yīng)中，反應(yīng)物分子必須超過(guò)一定的能閾，成為活化的狀

態(tài)，才能發(fā)生變化，形成產(chǎn)物。這種提高低能分子達(dá)到活化狀態(tài)的能量，

稱(chēng)為活化能。催化劑的作用，主要是降低反應(yīng)所需的活化能，以致相同的

能量能使更多的分子活化，從而加速反應(yīng)的進(jìn)行。

酶能顯著地降低活化能，故能表現(xiàn)為高度的催化效率。例如前述的

H2O2酶的例子，可以顯著地看出，酶能降低反應(yīng)活化能，使反應(yīng)速度增

高千百萬(wàn)倍以上。

二、中間復(fù)合物學(xué)說(shuō)

目前一般認(rèn)為，酶催化某一反應(yīng)時(shí)，首先在酶的活性中心與底物結(jié)合

生成酶一底物復(fù)合物，此復(fù)合物再進(jìn)行分解而釋放出酶，同時(shí)生成一種或

數(shù)種產(chǎn)物，此過(guò)程可用下式表示：ES的形成，改變了原來(lái)反應(yīng)的途徑，

可使底物的活化能大大降低，從而使反應(yīng)加速。

三、酶作用高效率的機(jī)理

詳細(xì)機(jī)制仍不太清楚，主要有下列四種因素：

1.趨近效應(yīng)和定向效應(yīng)

酶可以將它的底物結(jié)合在它的活性部位由于化學(xué)反應(yīng)速度與反應(yīng)物

濃度成正比，若在反應(yīng)系統(tǒng)的某一局部區(qū)域，底物濃度增高，則反應(yīng)速度

也隨之提高，此外，酶與底物間的靠近具有一定的取向，這樣反應(yīng)物分子

才被作用，大大增加了ES復(fù)合物進(jìn)入活化狀態(tài)的機(jī)率。

2.張力作用

底物的結(jié)合可誘導(dǎo)酶分子構(gòu)象發(fā)生變化，比底物大得多的酶分子的三、

四級(jí)結(jié)構(gòu)的變化，也可對(duì)底物產(chǎn)生張力作用，使底物扭曲，促進(jìn)ES進(jìn)入活

性狀態(tài)。

3.酸堿催化作用

酶的活性中心具有某些氨基酸殘基的R基團(tuán)，這些基團(tuán)往往是良好的

質(zhì)子供體或受體，在水溶液中這些廣義的酸性基團(tuán)或廣義的堿性基團(tuán)對(duì)許

多化學(xué)反應(yīng)是有力的催化劑。

4.共價(jià)催化作用

某些酶能與底物形成極不穩(wěn)定的、共價(jià)結(jié)合的ES復(fù)合物，這些復(fù)合物

比無(wú)酶存在時(shí)更容易進(jìn)行化學(xué)反應(yīng)。

例如：無(wú)酶催化的反應(yīng)RX+H20-ROH+Hx慢

有酶存在時(shí)RX+E根H-ROH+EX快

EX+H2O-E根H+HX快

2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試臨床檢驗(yàn)技師綜合輔導(dǎo)：蛋白質(zhì)的變性

天然蛋白質(zhì)的嚴(yán)密結(jié)構(gòu)在某些物理或化學(xué)因素作用下，其特定的空間

結(jié)構(gòu)被破壞，從而導(dǎo)致理化性質(zhì)改變和生物學(xué)活性的喪失，如酶失去催化

活力，激素喪失活性稱(chēng)之為蛋白質(zhì)的變性作用。變性蛋白質(zhì)只有空間構(gòu)象

的破壞，一般認(rèn)為蛋白質(zhì)變性本質(zhì)是次級(jí)鍵，二硫鍵的破壞，并不涉及一

級(jí)結(jié)構(gòu)的變化。

變性蛋白質(zhì)和天然蛋白質(zhì)最明顯的區(qū)別是溶解度降低，同時(shí)蛋白質(zhì)的

粘度增加，結(jié)晶性破壞，生物學(xué)活性喪失，易被蛋白酶分解。

引起蛋白質(zhì)變性的原因可分為物理和化學(xué)因素兩類(lèi)。物理因素可以是

加熱、加壓、脫水、攪拌、振蕩、紫外線(xiàn)照射、超聲波的作用等；化學(xué)因

素有強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、尿素、重金屬鹽、十二烷基磺酸鈉（SDS）等。在臨床

醫(yī)學(xué)上，變性因素常被應(yīng)用于消毒及滅菌。反之，注意防止蛋白質(zhì)變性就

能有效地保存蛋白質(zhì)制劑。

變性并非是不可逆的變化，當(dāng)變性程度較輕時(shí)，如去除變性因素，有

的蛋白質(zhì)仍能恢復(fù)或部分恢復(fù)其原來(lái)的構(gòu)象及功能，變性的可逆變化稱(chēng)為

復(fù)性。例如，前述的核糖核酸酶中四對(duì)二硫鍵及其氫鍵。在8疏基乙醇和

8M尿素作用下，發(fā)生變性，失去生物學(xué)活性，變性后如經(jīng)過(guò)透析去除尿

素，8-毓基乙醇，并設(shè)法使疏基氧化成二硫鍵，酶蛋白又可恢復(fù)其原來(lái)的

構(gòu)象，生物學(xué)活性也幾乎全部恢復(fù)，此稱(chēng)變性核糖核酸酶的復(fù)性。

許多蛋白質(zhì)變性時(shí)被破壞嚴(yán)重，不能恢復(fù)，稱(chēng)為不可逆性變性。

2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試血液檢驗(yàn)輔導(dǎo)：異型淋巴細(xì)胞

在傳染性單核增多癥、病毒性肺肝炎、流行性出血熱等病毒感染或過(guò)

敏原則刺激下，可使淋巴細(xì)胞增生，并出現(xiàn)某些形態(tài)學(xué)變化，稱(chēng)為異型淋

巴細(xì)胞。Downey將其按形態(tài)特征分為三型：

1型（空泡型）：最多見(jiàn)。胞體比正常淋巴細(xì)胞稍大，多為圓形、橢圓

形或不規(guī)則形。核圓形、腎形或分葉狀、常偏位。染色質(zhì)粗糙，呈粗網(wǎng)狀

或小塊狀，排列不規(guī)則。胞質(zhì)豐富，染深藍(lán)色，含空泡或呈泡沫狀。

II型（幼稚型）：胞體較大，核圓形或卵圓形。染色質(zhì)細(xì)致呈網(wǎng)狀排

列，可見(jiàn)1?2個(gè)至發(fā)生母細(xì)胞化的結(jié)果。

III型（不規(guī)則型）：胞體較大，外形常不規(guī)則，可有多數(shù)足。核形狀

及結(jié)構(gòu)與1型相同或更不殊途同歸，染色質(zhì)較粗糙致密。胞質(zhì)量豐富，染

色淡藍(lán)或灰藍(lán)色，有透明感，邊緣處著色較深藍(lán)色?？捎猩贁?shù)空泡。

2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試生化檢驗(yàn)輔導(dǎo)：胎兒血型的預(yù)測(cè)

羊水中存在A(yíng)BH（O）血型物質(zhì)，故可在妊娠期預(yù)測(cè)胎兒的血型，以

便對(duì)母體胎兒血型不合者進(jìn)行圍生期監(jiān)護(hù)、治療和對(duì)新生兒的作好搶救準(zhǔn)

備。

一、ABH分泌型血型的預(yù)測(cè)

本試驗(yàn)是根據(jù)羊中分泌的血型物質(zhì)可將相應(yīng)抗血清中抗體中和原理

設(shè)計(jì)的。將羊水與0.2毫升最適稀釋度的抗A抗B抗H血清0.2毫升分別

混勻，馮分作用lOmin后，便血型物質(zhì)將抗體中和完全，再于各管加入相

對(duì)應(yīng)的2%標(biāo)準(zhǔn)A型，B型，。型紅細(xì)胞懸液各0.2mL充分混勻。置室溫

30min,低速離心1分鐘觀(guān)察有無(wú)凝集。

本試驗(yàn)最關(guān)鍵的部分是要選擇好抗血清的最適稀釋度。即選擇抗血清

與2%標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞懸液恰能產(chǎn)生4+凝集的最高稀釋度，這樣才能在加入羊

水后將相應(yīng)抗體中和掉不再出現(xiàn)4+凝集。通常是將抗血清0.2ml用生理鹽

水做1：1-1：256倍比稀釋后，將2%A,B,。型標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞加入0.2ml混

勻，置室溫1小時(shí)后觀(guān)察結(jié)果，以出現(xiàn)4+凝塊的最高稀釋度定為最適稀釋

度。實(shí)驗(yàn)中要注意控制溫度，以免由于抗血清中冷凝集素未被完全吸收而

造成結(jié)果判斷錯(cuò)誤。

二、ABH(0)血型酶的測(cè)定

羊水ABH血型物質(zhì)的測(cè)定，無(wú)法預(yù)測(cè)非分泌型胎兒的血型。已知由A

基因產(chǎn)生的N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移酶能將N-乙酰氨基半乳聯(lián)接在H物質(zhì)

末端的半乳糖上，形成A血型物質(zhì)，B基因產(chǎn)生的D-半乳糖轉(zhuǎn)移酶將D-

半乳糖聯(lián)接在H物質(zhì)末端的半乳糖上，形成B血型物質(zhì)。當(dāng)有糖供體、二

價(jià)鎬離子與0型紅細(xì)胞共同孵育時(shí)，羊水中的轉(zhuǎn)移酶可在紅細(xì)胞膜上合億

A或B物質(zhì)，利用血型測(cè)定的方法可檢測(cè)埋分泌型胎兒的血型。這時(shí)有嚴(yán)

重ABO同種免疫史的孕婦非分泌型的胎兒血型鑒定提供了可能，也為在位

于A(yíng)BO基因部位的遺傳性疾病的產(chǎn)前診斷提供了可能，而可不必考慮胎兒

是否為分泌型。

2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試臨檢基礎(chǔ)知識(shí)輔導(dǎo)：精液的男性生育力指數(shù)測(cè)定

【計(jì)算公式】

l=M(NXV)/(AX106)式中I為男性生育力指數(shù)；M為活動(dòng)精子百

分率；N為每毫升的精子數(shù)；V為精子運(yùn)動(dòng)的速度；A為畸形精子的百分

率。

【正常參考值】

正常人生育力指數(shù)》1.

【臨床意義】

1.生育指數(shù)為0,表明完全無(wú)生育能力。

2.生育指數(shù)為51之間，表明有不同程度的生育障礙。

2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試血液檢驗(yàn)復(fù)習(xí)輔導(dǎo)：HIV-抗體常見(jiàn)檢測(cè)方法

目前作為診斷手段使用的檢測(cè)主要包括抗HIV病毒抗體檢測(cè)、病毒培

養(yǎng)、核酸檢測(cè)和抗原

檢測(cè)。其中對(duì)病毒抗體的檢測(cè)是最常規(guī)使用的方法，這不但是由于這

類(lèi)檢測(cè)特異性、敏感性較高，方法相對(duì)簡(jiǎn)便、成熟，更重要的原因是HIV

抗體在病毒感染后除早期短暫的“窗口期”外的整個(gè)生命期間長(zhǎng)期穩(wěn)定地

存在并可被檢測(cè)到。

在一些特殊情況下，當(dāng)抗體檢測(cè)無(wú)法滿(mǎn)足HIV感染診斷的需要時(shí)，病

毒分離及測(cè)定、核酸檢測(cè)、抗原檢測(cè)可作為輔助手段使用，這包括對(duì)非典

型血清學(xué)反應(yīng)樣品的診斷、HIV感染的窗口期診斷、新生兒早期診斷和對(duì)

特殊樣品的診斷。

2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試血液檢驗(yàn)復(fù)習(xí)輔導(dǎo)：HIV-抗體確認(rèn)實(shí)驗(yàn)

免疫印跡試驗(yàn)（WB）、條帶免疫試驗(yàn)（LIATEKHIVin）、放射免疫沉淀

試驗(yàn)（RIPA）及免疫熒光試驗(yàn)（IFA）o國(guó)內(nèi)常用的確認(rèn)試驗(yàn)方法是WB.

（-）免疫印跡實(shí)驗(yàn)（WB）

免疫印跡實(shí)驗(yàn)是廣泛用于許多傳染病診斷的實(shí)驗(yàn)方法，就HIV的病原

學(xué)診斷而言，它是首選的用以確認(rèn)HIV抗體的確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方法，WB的檢測(cè)

結(jié)果常常被作為鑒別其他檢驗(yàn)方法優(yōu)劣的“金標(biāo)準(zhǔn)二

確認(rèn)試驗(yàn)流程：

有HIV-1/2混合型和單一的HIV-1或HIV-2型。先用HIV-1/2混合型試

劑進(jìn)行檢測(cè)，如果呈陰性反應(yīng)，則報(bào)告HIV抗體陰性；如果呈陽(yáng)性反應(yīng)，

則報(bào)告HIV-1抗體陽(yáng)性；如果不滿(mǎn)足陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)，則判為HIV抗體檢測(cè)結(jié)果

不確定。如果出現(xiàn)HIV-2型的特異性指示條帶，需用HIV-2型免疫印跡試

劑再做HIV-2的抗體確認(rèn)試驗(yàn)，呈陰性反應(yīng)，報(bào)告HIV-2抗體陰性；呈陽(yáng)

性反應(yīng)則報(bào)告HIV-2抗體血清學(xué)陽(yáng)性，并將樣品送國(guó)家參比實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行核

酸序列分析，WB的敏感性一般不低于初篩實(shí)驗(yàn)，但它的特異性很高，這

主要是基于HIV不同抗原組分的分離以及濃縮和純化，能夠檢測(cè)針對(duì)不同

抗原成分的抗體，因而能夠用WB方法鑒別初篩實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性。從WB確

認(rèn)試驗(yàn)結(jié)果看出，初篩試驗(yàn)盡管選擇質(zhì)量較好的試劑，如第三代ELISA,仍

會(huì)有假陽(yáng)性出現(xiàn)，必須通過(guò)確認(rèn)試驗(yàn)才能得出準(zhǔn)確結(jié)果。

（二）免疫熒光實(shí)驗(yàn)（IFA）

IFA法經(jīng)濟(jì)、簡(jiǎn)便、快速，曾被FDA推薦用于WB不確定樣品的診斷。

但需要昂貴的熒光顯微鏡，需要受過(guò)良好訓(xùn)練的技術(shù)人員、觀(guān)察和解釋結(jié)

果易受主觀(guān)因素的影響，結(jié)果不宜長(zhǎng)期保存，IFA不宜在一般的實(shí)驗(yàn)室開(kāi)

展和應(yīng)用。

2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試臨檢基礎(chǔ)知識(shí)輔導(dǎo)：重視血常規(guī)的復(fù)檢工作

目前血細(xì)胞分析儀己經(jīng)普及到縣醫(yī)院或衛(wèi)生院，這對(duì)提高血細(xì)胞常規(guī)

的準(zhǔn)確性和重復(fù)性，減輕工作人員勞動(dòng)強(qiáng)度起促進(jìn)作用。但是我們應(yīng)該認(rèn)

識(shí)到血細(xì)胞分析儀還是一個(gè)過(guò)篩工具，至今最先進(jìn)的全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀

還不能完全取代人工檢查，仍然有部分標(biāo)本需要復(fù)檢。據(jù)我所知有的醫(yī)院

有了血細(xì)胞分析儀，把人工操作的工具、試劑全丟棄，基本上不再?gòu)?fù)檢了。

有的單位即使復(fù)檢，也沒(méi)有復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)，隨心所欲，其復(fù)檢率只有百分之幾，

這顯然是不負(fù)責(zé)任的。現(xiàn)就此問(wèn)題談?wù)剛€(gè)人看法。

一、為什么要復(fù)檢？考試用書(shū)

血細(xì)胞分析儀測(cè)定原理雖有不同，但它的各種項(xiàng)目的閾值是人設(shè)定的,

而且是固定的，可是病人血細(xì)胞變化是千姿百態(tài)，有部分細(xì)胞難以識(shí)別或

認(rèn)錯(cuò)干擾其它細(xì)胞計(jì)數(shù)，如有核紅細(xì)胞可影響白細(xì)胞計(jì)數(shù)；細(xì)胞碎片、血

小板聚集可影響血小板計(jì)數(shù)等。尤其是白細(xì)胞形態(tài)學(xué)分類(lèi)與血細(xì)胞分析儀

的白細(xì)胞分類(lèi)有本質(zhì)上的不同，三分群僅僅是根據(jù)細(xì)胞大小來(lái)分而己，即

使先進(jìn)的五分類(lèi)也與形態(tài)學(xué)也有很大差異，又如中性粒細(xì)胞毒性病變、變

異淋巴細(xì)胞、瘧原蟲(chóng)等臨床需要的指標(biāo)無(wú)法顯示；有的幼稚細(xì)胞、有核紅

細(xì)胞也不能區(qū)分；各參數(shù)之間有時(shí)還存在互相干擾?？傊?，血細(xì)胞分析儀

的結(jié)果僅僅是屬于過(guò)篩而己，不能完全代替人工鏡檢。

根據(jù)1987年我赴日本考察時(shí)，日本對(duì)三分群儀器白細(xì)胞分類(lèi)是不收

費(fèi)的，而且每一例仍然需要涂片染色，在顯微鏡下重新分類(lèi)后才能報(bào)告。

1989年Coulter公司制定了復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)，調(diào)查了11個(gè)床位及性質(zhì)不同的醫(yī)療

單位，它們均使用該公司的三分群血細(xì)胞分析儀，根據(jù)該公司的復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)，

其復(fù)檢率為15%?60%,平均為40%,使手工分類(lèi)減少40?85%,平均減

少了60%,也就是說(shuō)用節(jié)省下來(lái)的時(shí)間好好為40%需要分類(lèi)的病人服務(wù)。

最近日本名古屋大學(xué)醫(yī)學(xué)部附屬醫(yī)院報(bào)告，他們用SysmexXE-2100（五

分類(lèi)）儀器的總復(fù)檢率為32.3%.再次證明當(dāng)前最先進(jìn)血細(xì)胞分析儀也不能

完全替代人工檢查。

由于沒(méi)有復(fù)檢而產(chǎn)生的漏檢白血病、異常淋巴細(xì)胞、瘧原蟲(chóng)，還有EDTA

依賴(lài)性血小板假性降低等己引起的醫(yī)療糾紛，應(yīng)該引起我們深思。

二、復(fù)檢內(nèi)涵尚待統(tǒng)一

有人認(rèn)為“復(fù)檢”就是要在鏡下重新進(jìn)行白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)而己，這是

偏面的。復(fù)檢內(nèi)涵應(yīng)包據(jù)：

1、對(duì)血細(xì)胞分析儀測(cè)定的全部結(jié)果進(jìn)行評(píng)估，必要時(shí)包括原標(biāo)本重

查，或重新用人工復(fù)查

等。因此血常規(guī)手工操作不能丟；

2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試臨檢基礎(chǔ)知識(shí)輔導(dǎo)：精液檢查的具備條件

受檢者，經(jīng)歷一段經(jīng)常排精過(guò)程后，禁房事5—7天（上次排精到取

標(biāo)本間隔時(shí)間至少不得少于100小時(shí)）；備大口有蓋清潔干燥容器一個(gè)，

以手淫方式獲取精液，一次全部射入容器，蓋上蓋，記錄標(biāo)本離體時(shí)間；

貼身保溫，30分鐘內(nèi)送到化驗(yàn)室，并向檢驗(yàn)員提供標(biāo)本取出時(shí)間。精液常

規(guī)觀(guān)察：精液總?cè)萘浚ê辽?，精子活?dòng)情況，精子密度（個(gè)/毫升），精液

液化時(shí)間（標(biāo)本取出到精液液化的時(shí)間），不動(dòng)精子（個(gè)/高倍視野）等。

見(jiàn)不動(dòng)精子，須染色方可區(qū)分：不活動(dòng)的精子、死精子、未成熟精子

等。

找不到精子必須離心后檢驗(yàn)，仍然找不到精子；方可報(bào)告無(wú)精。經(jīng)三

次取樣化驗(yàn)，結(jié)果仍然找不到精子方可確認(rèn)無(wú)精子癥。

2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試免疫檢驗(yàn)輔導(dǎo)：血漿的鑒別方法

血漿是血液的液體成分，血細(xì)胞懸濁于其中。人體含有2750-3300毫

升血漿，約占血液總體積的55%.血漿的絕大部分是水（體積的90%）,其

中溶解的物質(zhì)主要是血漿蛋白，還包括葡萄糖、無(wú)機(jī)鹽離子、激素以及二

氧化碳。血漿的主要功能是運(yùn)載血細(xì)胞，同時(shí)也是運(yùn)輸分泌產(chǎn)物的主要媒

介。

將新鮮血液離心，使血細(xì)胞沉降，上層淡黃色清液即是血漿。血漿與

血清的區(qū)別是血清中不含纖維蛋白原等凝血因子。

2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試免疫檢驗(yàn)輔導(dǎo)：血漿的主要作用

提供基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：氨基酸、維生素、無(wú)機(jī)物、脂類(lèi)物質(zhì)、核酸衍生

物等，是細(xì)胞生長(zhǎng)必須的物質(zhì)。

提供激素和各種生長(zhǎng)因子：胰島素、腎上腺皮質(zhì)激素（氫化可的松、

地塞米松）、類(lèi)固醇激素（雌二醇、睪酮、孕酮）等。生長(zhǎng)因子如成纖維

細(xì)胞生長(zhǎng)因子、表皮生長(zhǎng)因子、血小板生長(zhǎng)因子等。

提供結(jié)合蛋白：結(jié)合蛋白作用是攜帶重要地低分子量物質(zhì)，如白蛋白

攜帶維生素、脂肪、以及激素等，轉(zhuǎn)鐵蛋白攜帶鐵。結(jié)合蛋白在細(xì)胞代謝

過(guò)程中起重要作用。

提供促接觸和伸展因子使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷。

對(duì)培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用：有一些細(xì)胞，如內(nèi)皮細(xì)胞、骨髓

樣細(xì)胞可以釋放蛋白酶，血清中含有抗蛋白酶成分，起到中和作用。這種

作用是偶然發(fā)現(xiàn)的，現(xiàn)在則有目的的使用血清來(lái)終止胰蛋白酶的消化作用。

因?yàn)橐鹊鞍酌敢呀?jīng)被廣泛用于貼壁細(xì)胞的消化傳代。血清蛋白形成了血清

的粘度，可以保護(hù)細(xì)胞免受機(jī)械損傷，特別是在懸浮培養(yǎng)攪拌時(shí)，粘度起

到重要作用。血清還含有一些微量元素和離子，他們?cè)诖x解毒中起重要

作用，如SeO3,硒等。

2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試生化檢驗(yàn)輔導(dǎo)：離心技術(shù)的工具

離心機(jī)(centrifuge)是實(shí)施離心技術(shù)的裝置。離心機(jī)的種類(lèi)很多，按

照使用目的，可兩類(lèi)，即制備型離心機(jī)和分析型離心機(jī)。前者主要用于分

離生物材料，每次分離樣品的容量比較大，后者則主要用于研究純品大分

子物質(zhì)，包括某些顆粒體如核蛋白體等物質(zhì)的性質(zhì)，每次分析的樣品容量

很小，根據(jù)待測(cè)物質(zhì)在離心場(chǎng)中的行為(可用離心機(jī)中的光學(xué)系統(tǒng)連續(xù)地

監(jiān)測(cè))，能推斷其純度、形狀和相對(duì)分子質(zhì)量等性質(zhì)。兩類(lèi)離心機(jī)由于用

途不同，故其主要結(jié)構(gòu)也有差異。通常所使用的離心機(jī)根據(jù)轉(zhuǎn)子轉(zhuǎn)速大小

的不同可分為普通離心機(jī)、高速離心機(jī)和超速離心機(jī)三類(lèi)

2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試生化檢驗(yàn)輔導(dǎo)：離心技術(shù)的概況

離心技術(shù)是利用物體高速旋轉(zhuǎn)時(shí)產(chǎn)生強(qiáng)大的離心力，使置于旋轉(zhuǎn)體中

的懸浮顆粒發(fā)生沉降或漂浮，從而使某些顆粒達(dá)到濃縮或與其他顆粒分離

之目的。這里的懸浮顆粒往往是指制成懸浮狀態(tài)的細(xì)胞、細(xì)胞器、病毒和

生物大分子等。離心機(jī)轉(zhuǎn)子高速旋轉(zhuǎn)時(shí)，當(dāng)懸浮顆粒密度大于周?chē)橘|(zhì)密

度時(shí)，顆粒離開(kāi)軸心方向移動(dòng)，發(fā)生沉降；如果顆粒密度低于周?chē)橘|(zhì)的

密度時(shí)，則顆粒朝向軸心方向移動(dòng)而發(fā)生漂浮。常用的離心機(jī)有多種類(lèi)型,

一般低速離心機(jī)的最高轉(zhuǎn)速不超過(guò)6000rpm,高速離心機(jī)在25000rpm以

下，超速離心機(jī)的最高速度達(dá)30000rpm以上。

根據(jù)離心原理，可設(shè)計(jì)多種離心方法，常見(jiàn)下列三大類(lèi)型：

1.差速離心法。通過(guò)逐步增加相對(duì)離心力，使一個(gè)非均相混合液內(nèi)形

狀不同的大小顆粒分步沉淀。

2.密度梯度離心法。離心前，離心管內(nèi)先裝入分離介質(zhì)（如蔗糖、甘

油等），使形成連續(xù)的或不連續(xù)的密度梯度介質(zhì)，然后加入樣品進(jìn)行離心，

具體又可分為：

1）速度區(qū)帶離心法。離心前，離心管內(nèi)先裝入蔗糖、甘油、CsCKPercoll

等密度梯度介質(zhì)，待分離樣品鋪在梯度液的頂部，離心管底部或梯度層中

間，同梯度液一起離心，利用各顆粒在梯度液中沉降速度或漂浮速度的不

同，使具有不同沉降速度的顆粒處于不同密度的梯度層內(nèi)，達(dá)到彼此分離

的目的。本法可分離各種細(xì)胞、病毒、染色體、脂蛋白、DNA和RNA等生

物樣品。

2）預(yù)制梯度等密度離心法。要求在離心前預(yù)先配制管底濃而管頂稀

的密度梯度介質(zhì)，常用介質(zhì)有蔗糖、CsCLCs2s04等，待分離樣品一般鋪

在梯度液頂上，如需挾在梯度液中間或

管底部，則需調(diào)節(jié)樣品液密度。離心后，不同密度的樣品顆粒到達(dá)與

自身密度相等的梯度層，即達(dá)到等密度的位置而獲得分離。

3）自成梯度等密度離心法。某些密度介質(zhì)經(jīng)過(guò)離心后會(huì)自成梯度，

例PercolL可迅速形成梯度，CsCLCs2s04和三碘甲酰葡萄糖胺經(jīng)長(zhǎng)時(shí)間

離心后也可產(chǎn)生穩(wěn)定的梯度。需要離心分離的樣品可和梯度介質(zhì)先均勻混

合，離心開(kāi)始后，梯度介質(zhì)由于離心力的作用逐漸形成管底濃而管頂稀的

密度梯度，與此同時(shí):可以帶動(dòng)原來(lái)混合的樣品顆粒也發(fā)生重新分布，到

達(dá)與其自身密度相等的梯度層里，即達(dá)到等密度的位置而獲得分離。

3.沉降平衡離心法。根據(jù)被分離物質(zhì)的浮力密度差別進(jìn)行分離，所用

的介質(zhì)起始密度約等于被分離物質(zhì)的密度，介質(zhì)在離心過(guò)程中形成密度梯

度，被分離物質(zhì)沉降或上浮到達(dá)與之密度相等的介質(zhì)區(qū)域中停留并形成區(qū)

市。

2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試生化檢驗(yàn)輔導(dǎo)：離心技術(shù)的概況

離心技術(shù)是利用物體高速旋轉(zhuǎn)時(shí)產(chǎn)生強(qiáng)大的離心力，使置于旋轉(zhuǎn)體中

的懸浮顆粒發(fā)生沉降或漂浮，從而使某些顆粒達(dá)到濃縮或與其他顆粒分離

之目的。這里的懸浮顆粒往往是指制成懸浮狀態(tài)的細(xì)胞、細(xì)胞器、病毒和

生物大分子等。離心機(jī)轉(zhuǎn)子高速旋轉(zhuǎn)時(shí)，當(dāng)懸浮顆粒密度大于周?chē)橘|(zhì)密

度時(shí)，顆粒離開(kāi)軸心方向移動(dòng)，發(fā)生沉降；如果顆粒密度低于周?chē)橘|(zhì)的

密度時(shí)，則顆粒朝向軸心方向移動(dòng)而發(fā)生漂浮。常用的離心機(jī)有多種類(lèi)型,

一般低速離心機(jī)的最高轉(zhuǎn)速不超過(guò)6000rpm,高速離心機(jī)在25000rpm以

下，超速離心機(jī)的最高速度達(dá)30000rpm以上。

根據(jù)離心原理，可設(shè)計(jì)多種離心方法，常見(jiàn)下列三大類(lèi)型：

L差速離心法。通過(guò)逐步增加相對(duì)離心力，使一個(gè)非均相混合液內(nèi)形

狀不同的大小顆粒分步沉淀。

2.密度梯度離心法。離心前，離心管內(nèi)先裝入分離介質(zhì)（如蔗糖、甘

油等），使形成連續(xù)的或不連續(xù)的密度梯度介質(zhì)，然后加入樣品進(jìn)行離心，

具體又可分為：

1）速度區(qū)帶離心法。離心前，離心管內(nèi)先裝入蔗糖、甘油、CsCKPercoll

等密度梯度介質(zhì)，待分離樣品鋪在梯度液的頂部，離心管底部或梯度層中

間，同梯度液一起離心，利用各顆粒在梯度液中沉降速度或漂浮速度的不

同，使具有不同沉降速度的顆粒處于不同密度的梯度層內(nèi)，達(dá)到彼此分離

的目的。本法可分離各種細(xì)胞、病毒、染色體、脂蛋白、DNA和RNA等生

物樣品。

2）預(yù)制梯度等密度離心法。要求在離心前預(yù)先配制管底濃而管頂稀

的密度梯度介質(zhì)，常用介質(zhì)有蔗糖、CsCLCs2so4等，待分離樣品一般鋪

在梯度液頂上，如需挾在梯度液中間或管底部，則需調(diào)節(jié)樣品液密度。離

心后，不同密度的樣品顆粒到達(dá)與自身密度相等的梯度層，即達(dá)到等密度

的位置而獲得分離。

3）自成梯度等密度離心法。某些密度介質(zhì)經(jīng)過(guò)離心后會(huì)自成梯度，

例Percoll,可迅速形成梯度，CsCI、Cs2s04和三碘甲酰葡萄糖胺經(jīng)長(zhǎng)時(shí)間

離心后也可產(chǎn)生穩(wěn)定的梯度。需要離心分離的樣品可和梯度介質(zhì)先均勻混

合，離心開(kāi)始后，梯度介質(zhì)由于離心力的作用逐漸形成管底濃而管頂稀的

密度梯度，與此同時(shí):可以帶動(dòng)原來(lái)混合的樣品顆粒也發(fā)生重新分布，到

達(dá)與其自身密度相等的梯度層里，即達(dá)到等密度的位置而獲得分離。

3.沉降平衡離心法。根據(jù)被分離物質(zhì)的浮力密度差別進(jìn)行分離，所用

的介質(zhì)起始密度約等于被分離物質(zhì)的密度，介質(zhì)在離心過(guò)程中形成密度梯

度，被分離物質(zhì)沉降或上浮到達(dá)與之密度相等的介質(zhì)區(qū)域中停留并形成區(qū)

市44+：。

2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試生化檢驗(yàn)輔導(dǎo)：動(dòng)脈血?dú)鈽?biāo)本采集方法

一、抗凝劑的配制

首先推薦使用市場(chǎng)上有售的專(zhuān)用采血針，愿意自己配制抗凝采血針的

用戶(hù)，可以用0.9%NS50ml+肝素鈉針劑2支(12500U)配制成肝素稀釋液

備用，并做好無(wú)菌儲(chǔ)藏。每抽血?dú)馇?，?ml注射器抽取肝素稀釋液2ml,

完全濕潤(rùn)整個(gè)針管后棄去肝素液，殘留在針頭及針管頭部死腔內(nèi)的肝素液

即可起到抗凝作用?？鼓齽┥倭藭?huì)使血液凝集，堵塞血?dú)夥治鰞x的流路系

統(tǒng)，抗凝劑多了會(huì)影響血?dú)夂碗x子的檢測(cè)結(jié)果，大劑量的抗凝劑會(huì)嚴(yán)重使

離子鈣偏低，誤導(dǎo)臨床。

二、采血方法的選擇

成人：用肝素化的玻璃注射器或一次性注射器穿刺，采血部位首選稅

動(dòng)脈，次選股動(dòng)脈

小兒：

1、首選用潁淺動(dòng)脈或頭皮小動(dòng)脈，嚴(yán)格消毒后，用肝素化的5號(hào)頭

皮針連接2ml注射器，待動(dòng)脈血流至注射器乳頭時(shí)，立即用小止血鉗分別

夾住頭皮針?biāo)芰宪浌苁孜矁啥?約0.5ml血)，然后拔出針頭立即混勻送檢。

2、用肝素化的注射器穿刺，采血部位首選小兒稅動(dòng)脈，小嬰兒可用

顆淺動(dòng)脈取血，取完血一定要密封。

3、因技術(shù)條件限制，不能反復(fù)動(dòng)脈穿刺時(shí);早產(chǎn)兒與小嬰兒可在足

后跟用肝素化毛細(xì)管采取動(dòng)脈化毛細(xì)血管的血亦可。動(dòng)脈化毛細(xì)血管采血,

用不超過(guò)42?45℃的濕巾熱敷采血部位皮膚5?15分鐘，使血液增加，血

流加速，達(dá)到動(dòng)脈化，然后穿刺，穿刺要深，使血流快速自動(dòng)流出，棄去

第一滴血，不能擠壓，用肝素化的毛細(xì)管吸?。ńㄗh采用廠(chǎng)家配套提供的

專(zhuān)用毛細(xì)管），吸滿(mǎn)后一定要密封，混勻后立即送檢。未充分動(dòng)脈化的毛

細(xì)管血的P02偏低，對(duì)PH、PC02和HC03一的測(cè)定結(jié)果影響不明顯。

三、采血后處理

采血后針尖或毛細(xì)吸血管兩端立即用橡皮帽或橡皮泥封住，防止空氣

氣泡進(jìn)入，并立即充分混勻達(dá)到抗凝目的，并立即送檢，從采血到送檢不

宜超過(guò)20分鐘，以免血細(xì)胞代謝耗氧，使PO2和PH值下降PCO2升高。

若不能立即測(cè)定，應(yīng)將血?dú)鈽?biāo)本保存在2?8℃容器內(nèi)，但即使這樣待測(cè)時(shí)

間也不宜超過(guò)2小時(shí)。

2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試生化檢驗(yàn)輔導(dǎo)：VC影響血糖尿糖檢測(cè)

解放軍總醫(yī)院檢驗(yàn)中心主任叢玉隆指出，維生素c（VC）可以還原尿

糖檢測(cè)試劑中的酶，會(huì)導(dǎo)致尿糖檢測(cè)的結(jié)果失真，對(duì)于糖尿病患者來(lái)說(shuō),

服用維生素要謹(jǐn)慎。

第一次遇到尿糖檢測(cè)失真是在1984年，叢玉隆還是醫(yī)院檢驗(yàn)科的檢

驗(yàn)員。一天晚上急診科一患者化驗(yàn)的結(jié)果是血糖8毫克。急診醫(yī)生一看檢

驗(yàn)報(bào)告馬上產(chǎn)生疑問(wèn)：怎么會(huì)是8毫克？人的正常血糖最低是80毫克，

如果真是8毫克,那這個(gè)人早就死了。于是檢驗(yàn)科再次對(duì)病人的血樣化驗(yàn)，

結(jié)果還是8毫克，叢玉隆仔細(xì)檢查了檢驗(yàn)程序和檢驗(yàn)設(shè)備，都沒(méi)發(fā)現(xiàn)問(wèn)題，

但檢驗(yàn)結(jié)果確實(shí)與病人實(shí)際病情不符。叢玉隆再仔細(xì)檢查后，發(fā)現(xiàn)在抽取

病人血樣時(shí)，患者

正輸著VC,結(jié)果終于弄明白了，原來(lái)是患者血樣中含有的大量VC還

原了檢驗(yàn)試劑中的酶，干擾了病人的血糖檢驗(yàn)結(jié)果。

VC的影響到底有多大？叢玉隆再次做了試驗(yàn)，一組人一天吃3片VC

（每片100毫克），第二天檢測(cè)結(jié)果是每毫升尿含vc30毫克。一組人一天

吃6片vc,第二天尿含vc90毫克。一組人一天吃了9片vc,第二天尿含

vc是300毫克。叢玉隆說(shuō)，假如一個(gè)糖尿病人，沒(méi)吃vc以前的尿糖是2

個(gè)加號(hào)，吃了9片vc后，就可能是1個(gè)加號(hào)，甚至?xí)霈F(xiàn)陰性結(jié)果。

叢玉隆進(jìn)行的另一個(gè)實(shí)驗(yàn)證實(shí)，給健康人靜脈推注VC2000毫克，然后

在不同時(shí)間段取尿，30分鐘后尿含vc600多毫克、1小時(shí)500多毫克、5

小時(shí)后含幾十毫克（正常值），說(shuō)明靜脈使用大劑量vc對(duì)糖尿病人的尿糖

檢查干擾更大。試驗(yàn)也證明5個(gè)小時(shí)以后，使用vc的病人每毫升尿含vc

幾十毫克，已經(jīng)屬于正常值，不再干擾檢驗(yàn)結(jié)果。

2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試生化檢驗(yàn)輔導(dǎo)：血磷測(cè)定的參考值

參考值：血清磷：0.81?L45mmol/L

2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試生化檢驗(yàn)輔導(dǎo)：血磷的測(cè)定方法

血清無(wú)機(jī)磷的測(cè)定方法一般有磷鋁酸法、染料法和酶法。

磷鋁酸法是血清中無(wú)機(jī)磷與鋁酸鹽結(jié)合形成磷鋁酸化合物，再用還原

劑將其還原成鋁藍(lán)進(jìn)行比色測(cè)定。

染料法如孔雀綠直接顯色測(cè)定法。雖非常敏感，但影響因素多，顯色

不穩(wěn)定，重復(fù)性也較差，不能用于常規(guī)檢驗(yàn)。

酶法是一個(gè)偶聯(lián)反應(yīng)，參與反應(yīng)的酶有糖原磷酸化酶、葡萄糖磷酸變

位酶及葡萄糖6-磷酸脫氫酶，反應(yīng)中使NADP+還原成NADPH,形成NADPH

在340nm波長(zhǎng)下測(cè)定其吸光度，該方法不受有機(jī)磷酸酯的干擾。

2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試生化檢驗(yàn)輔導(dǎo)：火焰分光光度法的儀器

原始的火焰光度計(jì)由霧化器、火焰燃燒嘴、濾光片和光電池檢測(cè)器組

成?，F(xiàn)代的火焰分光光度計(jì)的基本框圖（見(jiàn)圖）示意出：試樣溶液經(jīng)霧化

后噴入火焰，溶劑在火焰中蒸發(fā)，鹽粒熔融，轉(zhuǎn)化為蒸氣，離解成原子（部

分電離），再由火焰高溫激發(fā)發(fā)光，發(fā)射的光經(jīng)切光器調(diào)制，并由單色器

（通常是光柵）分光，選擇待測(cè)波長(zhǎng)譜線(xiàn)，經(jīng)光電轉(zhuǎn)換和電信號(hào)放大后檢

出。反射鏡起聚光作用。

火焰光度法常用的火焰是在大氣恒壓下經(jīng)化學(xué)反應(yīng)而燃燒的。不同的

燃料氣體和助燃?xì)饨M分，及其配比，稱(chēng)助/燃比，決定該化學(xué)火焰能達(dá)到的

最高溫度和化學(xué)作用性質(zhì)（見(jiàn)表）。這是火焰光度法應(yīng)用中要選擇的關(guān)鍵

條件。

2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試生化檢驗(yàn)輔導(dǎo)：火焰分光光度法的簡(jiǎn)史

1859年R.W.本生利用本生燈進(jìn)行焰色反應(yīng)，就是火焰分光光度法的起

源，用此法發(fā)現(xiàn)了許多新元素。1928年瑞典植物生理學(xué)家HG龍德加德用

火焰光譜法研究植物新陳代謝作用中微量元素的定量變化，并使用了參考

元素技術(shù)。由于當(dāng)時(shí)使用照相方法記錄譜線(xiàn)，致使準(zhǔn)確

定量分析工作較為繁瑣。1935年制成第一臺(tái)火焰光譜光電直讀光度計(jì),

以及后來(lái)W.吉爾伯特制作的直接注入式燃燒器的使用，使得火焰光度法應(yīng)

用范圍進(jìn)一步擴(kuò)大。

2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試生化檢驗(yàn)輔導(dǎo)：火焰分光光度法的應(yīng)用

火焰分光光度法主要用于堿金屬和堿土金屬元素的定量分析。方法簡(jiǎn)

單迅速，組分影響較小，取樣量小，用一份溶液即可進(jìn)行多種元素分析,

每毫升10微克濃度的鈉溶液也可測(cè)定。此法不僅可作為一個(gè)光化學(xué)分析

方法獨(dú)立使用，而且可作為一個(gè)有特色的光檢測(cè)器，與氣相色譜儀聯(lián)用，

或作為一種試樣原子化裝置，用于原子吸收光譜法中。

2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試血液檢驗(yàn)復(fù)習(xí)輔導(dǎo)：骨髓標(biāo)本的采集選擇

骨髓標(biāo)本的采集選擇

骨髓標(biāo)本大部分采用穿刺法吸取。骨髓穿刺部位選擇一般要從以下幾

個(gè)方面考慮：①骨髓腔中紅骨髓豐富；②穿刺部位應(yīng)淺表、易定位；③應(yīng)

避開(kāi)重要臟器。臨床上常用的穿刺部位包括胸骨、棘突、骼骨、脛骨等處。

骸骨后上棘此處骨皮質(zhì)薄，骨髓腔大，進(jìn)針容易，骨髓液豐富，被血液稀

釋的可能性小，故為臨床上首選的穿刺部位。

2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試血液檢驗(yàn)復(fù)習(xí)輔導(dǎo)：骨髓涂片的檢查

骨髓涂片的檢查

（1）普通光鏡低倍鏡檢驗(yàn)：判斷骨髓增生程度；估計(jì)巨核細(xì)胞系統(tǒng)

增生情況；觀(guān)察涂片邊緣、尾部、骨髓小粒周?chē)?，有無(wú)體積較大或成堆分

布的異常細(xì)胞。

（2）油鏡：選擇滿(mǎn)意的片膜段，觀(guān)察200?500個(gè)細(xì)胞，按細(xì)胞的種

類(lèi)、發(fā)育階段分別計(jì)算，并計(jì)算它們各自的百分率；仔細(xì)觀(guān)察各系統(tǒng)的增

生程度和各階段細(xì)胞數(shù)量和質(zhì)量的變化。

2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試血液檢驗(yàn)復(fù)習(xí)輔導(dǎo)：骨髓象的分析與報(bào)告

骨髓象的分析與報(bào)告

包括骨髓有核細(xì)胞增生程度、粒細(xì)胞與有核紅細(xì)胞比例、粒系統(tǒng)細(xì)胞

改變、紅系統(tǒng)細(xì)胞改變、巨核系統(tǒng)細(xì)胞改變、淋巴系統(tǒng)細(xì)胞改變、單核系

統(tǒng)細(xì)胞改變和其他血細(xì)胞改變。

2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試綜合知識(shí)輔導(dǎo)：均相酶免疫測(cè)定

均相酶免疫測(cè)定：屬于競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合分析方法。

①酶增強(qiáng)免疫測(cè)定技術(shù)（EMIT）：了解其基本原理，反應(yīng)后酶活力大

小與標(biāo)本中的半抗原量呈一定的比例，從酶活力的測(cè)定結(jié)果就可推算出標(biāo)

本中半抗原的量。

②克隆酶供體免疫分析：DNA重組技術(shù)可分別合成某種功能酶（如B

-D半乳糖昔酶）分子的兩個(gè)片段，大片段稱(chēng)為酶受體（EA）,小分子稱(chēng)作

酶供體（ED）,兩者單獨(dú)均無(wú)酶活性，一定條件下結(jié)合形成四聚體方具酶

活性。

2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試綜合知識(shí)輔導(dǎo)：異相酶免疫測(cè)定

異相酶免疫測(cè)定：又分為液相和固相酶免疫測(cè)定。

①液相酶免疫測(cè)定：其測(cè)定靈敏度與放射免疫方法相近，近年有取代

放射免疫方法的趨勢(shì)。②固相酶免疫測(cè)定：如常用的酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)

（ELISA）

2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試生化檢驗(yàn)輔導(dǎo)：肝硬化的臨床意義

肝硬化代償期患者血清ALT可輕度增高或正常，失代償期A(yíng)LT可持續(xù)

升高。

膽汁淤積性肝硬化ALT活性較高可與黃疸平行，AST升高不及ALT顯

著。

肝硬化病變累及線(xiàn)粒體時(shí)，多數(shù)AST升高程度超過(guò)ALTo

2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)基礎(chǔ)知識(shí)輔導(dǎo)：尿的方法學(xué)評(píng)價(jià)

尿色和透明度判斷，受主觀(guān)因素影響。尿透明度還易受某些鹽類(lèi)結(jié)晶

的影響。臨床應(yīng)用僅作參考

2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)基礎(chǔ)知識(shí)輔導(dǎo)：尿的質(zhì)量控制

1.使用新鮮尿尿放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，鹽類(lèi)結(jié)晶析出、尿膽原轉(zhuǎn)變?yōu)槟蚰懰亍?/p>

細(xì)菌增殖和腐敗、尿素分解，均可使尿顏色加深、混濁度增高。

2.防止污染。

2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)基礎(chǔ)知識(shí)輔導(dǎo)：尿的生理性變化

（1）代謝產(chǎn)物：生理性影響尿顏色主要是尿色素、尿膽素（URB）、

尿膽原（URO）等。

（2）飲水及尿量：大量飲水、尿量多則尿色淡；尿色深見(jiàn)于尿量少、

飲水少或運(yùn)動(dòng)、出汗、水分丟失。

（3）藥物的影響：如服用核黃素、吠喃噪酮、痢特靈、黃連素、牛

黃、阿的平使尿呈黃色或深黃色；番瀉葉、山道年等使尿呈橙色或橙黃色；

酚紅、番瀉葉、蘆薈、氨基匹林、磺胺藥等使尿呈紅色或紅褐色。

（4）鹽類(lèi)結(jié)晶及酸堿度：生理性尿混濁的主要原因是含有較多的鹽

類(lèi)，常見(jiàn)有：①尿酸鹽結(jié)晶：在濃縮的酸性尿遇冷時(shí)，可有淡紅色結(jié)晶析

出。②磷酸鹽或碳酸鹽結(jié)晶：尿呈堿性或中性時(shí)，可析出灰白色結(jié)晶。

2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)免疫檢驗(yàn)考試輔導(dǎo)：腫瘤壞死因子的生物效應(yīng)

腫瘤壞死因子的生物效應(yīng)：TNF對(duì)多種腫瘤細(xì)胞均有殺傷或抑制作用，

敏感性因腫瘤細(xì)胞類(lèi)型而異；TNF呈劑量依賴(lài)性地抑制病毒介導(dǎo)的細(xì)胞病

變的發(fā)展，對(duì)RNA病毒和DNA病毒均有抑制作用；TNF能夠增強(qiáng)T細(xì)胞產(chǎn)

生以IL-2為主的淋巴因子，提高IL-2R的表達(dá)水平，促進(jìn)T細(xì)胞增殖；還

能促進(jìn)B細(xì)胞增殖、分化和產(chǎn)生抗體；TNF有中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞趨化

作用，并使之活化和脫顆粒，釋放炎癥介質(zhì)；TNF可刺激成骨細(xì)胞內(nèi)的堿

性磷酸酶活性，誘導(dǎo)成骨細(xì)胞吸收骨質(zhì)、使軟骨細(xì)胞進(jìn)行軟骨更新，抑制

軟骨形成。

2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)免疫檢驗(yàn)考試輔導(dǎo)：腫瘤壞死因子的應(yīng)用研究

腫瘤壞死因子的應(yīng)用研究：由于TNF的抗腫瘤和免疫調(diào)節(jié)功能，TNF

療法的研究已被許多國(guó)家開(kāi)展。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和臨床經(jīng)驗(yàn)表明，TNF對(duì)某些腫

瘤具有明顯的抑制作用，但副作用大，

建立合理的用藥方案及治療措施，可望降低用量，減輕副作用，達(dá)到

最佳治療效果。

2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)血液檢驗(yàn)輔導(dǎo)：紅細(xì)胞鐮變?cè)囼?yàn)

（1）原理：在低氧分壓條件下，HbS轉(zhuǎn)變?yōu)檫€原狀態(tài)后溶解度降低,

從而聚合成短棒狀凝膠使紅細(xì)胞變形，呈鐮刀狀。

結(jié)果：陰性，無(wú)鐮變細(xì)胞。

（2）臨床意義：陽(yáng)性見(jiàn)于鐮狀細(xì)胞貧血（HbS病）,HbBart、Hbl病可

見(jiàn)少量鐮狀細(xì)胞。

2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)知識(shí)輔導(dǎo)：埃希菌屬的常規(guī)檢驗(yàn)項(xiàng)目

CDC將大腸埃希氏菌0157：H7列為常規(guī)檢測(cè)項(xiàng)目

EHEC的血清型》50種，最具代表性的是0157：H7.在北美許多地區(qū),

0157：H7占腸道分離病原菌的第二或第三位，是從血便中分離到的最常

見(jiàn)的病原菌，分離率占血便的40%,6、7、8三個(gè)月0157：H7感染的發(fā)

生率最高。且0157是4歲以下兒童急性腎功衰的主要病原菌，所以CDC

提出應(yīng)將大腸埃希氏菌0157：H7列為常規(guī)檢測(cè)項(xiàng)目。

2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)知識(shí)輔導(dǎo)：埃希菌屬的腸道感染

埃希菌屬的腸道感染：致病性大腸埃希菌有下列五個(gè)病原群。

（1）腸產(chǎn)毒型大腸埃希菌（ETEC）：引起霍亂樣腸毒素腹瀉（水瀉）。

（2）腸致病型大腸埃希菌（EPEC）：主要引起嬰兒腹瀉。

（3）腸侵襲型大腸埃希菌（日EC）：可侵入結(jié)腸黏膜上皮，引起志賀

樣腹瀉（粘液膿血便）。

（4）腸出血型大腸埃希菌（EHEC）：又稱(chēng)產(chǎn)志賀樣毒素（VT）大腸埃

希菌（SLTEC或UTEC）,其中0157：H7可引起出血性大腸炎和溶血性尿毒

綜合征（HUS）。臨床特征為嚴(yán)重的腹痛、痙攣，反復(fù)出血性腹瀉，伴發(fā)熱、

嘔吐等。嚴(yán)重者可發(fā)展為急性腎衰竭。

（5）腸粘附（集聚）型大腸埃希菌（EAggEC）：也是新近報(bào)道的一種

能引起腹瀉的大腸埃希菌。

2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)臨床檢驗(yàn)技師考試綜合輔導(dǎo)資料：埃希菌屬的概念

埃希菌屬包括5個(gè)種，即大腸埃希菌、嶂螂埃希菌、弗格森埃希菌、

赫爾曼埃希菌和傷口埃希菌。臨床最常見(jiàn)的是大腸埃希菌。

大腸埃希菌俗稱(chēng)大腸桿菌，大多數(shù)菌株是人類(lèi)和動(dòng)物腸道正常菌群。

2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)臨床檢驗(yàn)技師考試綜合輔導(dǎo)資料：腸桿菌科的鑒定

（1）初步鑒定：原則是：①確定腸桿菌科的細(xì)菌，應(yīng)采用葡萄糖氧

化-發(fā)酵試驗(yàn)及氧化酶試驗(yàn)與弧菌科和非發(fā)酵菌加以鑒別；②腸桿菌科細(xì)菌

的分群，多采用苯丙氨酸脫氨酶和葡萄糖酸鹽試驗(yàn)，將腸桿菌科的細(xì)菌分

為苯丙氨酸脫氨酶陽(yáng)性、葡萄糖酸鹽利用試驗(yàn)陽(yáng)性和兩者均為陰性反應(yīng)三

個(gè)類(lèi)群；③選擇生化反應(yīng)進(jìn)行屬種鑒別。

將選擇培養(yǎng)基或鑒別培養(yǎng)基上的可疑菌落分別接種克氏雙糖鐵瓊脂

（KIA）和尿素-靛基質(zhì)-動(dòng)力（MIU）復(fù)合培養(yǎng)基管中，并根據(jù)其六項(xiàng)反應(yīng)

結(jié)果，將細(xì)菌初步定屬。

（2）最后鑒定：腸桿菌科各屬細(xì)菌的最后鑒定是根據(jù)生化反應(yīng)的結(jié)

果定屬、種，或再用診

斷血清做凝集反應(yīng)才能作出最后判斷。

2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)免疫檢驗(yàn)考試輔導(dǎo)：細(xì)胞因子的類(lèi)型

細(xì)胞因子分類(lèi)按其作用大致可分為免疫調(diào)節(jié)因子和免疫調(diào)控因子兩

大類(lèi)。主要的細(xì)胞因子有：白細(xì)胞介素、干擾素、生長(zhǎng)因子、趨化因子家

族、腫瘤壞死因子、集落刺激因子、轉(zhuǎn)化因子家族以及其他細(xì)胞因子等。

2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)免疫檢驗(yàn)考試輔導(dǎo)：細(xì)胞因子共同特性

（1）化學(xué)性質(zhì)大都為糖蛋白。

（2）細(xì)胞因子可以旁分泌、自分泌或內(nèi)分泌的方式發(fā)揮作用。

（3）一種細(xì)胞可產(chǎn)生多種細(xì)胞因子，不同類(lèi)型的細(xì)胞可產(chǎn)生一種或

幾種相同的細(xì)胞因子。

2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)血液檢驗(yàn)復(fù)習(xí)指導(dǎo)：血象特點(diǎn)

血液檢驗(yàn)復(fù)習(xí)指導(dǎo)血象：血紅蛋白、紅細(xì)胞均減少，以血紅蛋白減少

更為明顯。輕度貧血時(shí)紅細(xì)胞形態(tài)無(wú)明顯異常，中度以上貧血時(shí)紅細(xì)胞體

積減小，中心淡染區(qū)擴(kuò)大，嚴(yán)重時(shí)紅細(xì)胞可呈環(huán)狀，并有嗜多色性紅細(xì)胞

及點(diǎn)彩紅細(xì)胞增多。網(wǎng)織紅細(xì)胞輕度增多或正常。白細(xì)胞計(jì)數(shù)及分類(lèi)一般

正常。血小板計(jì)數(shù)一般正常。

2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)免疫檢驗(yàn)考試輔導(dǎo)：?jiǎn)蜗驍U(kuò)散試驗(yàn)

單向擴(kuò)散試驗(yàn)：瓊脂內(nèi)混入抗體，待測(cè)抗原從局部向瓊脂內(nèi)自由擴(kuò)散,

如抗原和相應(yīng)抗體結(jié)合，則形成沉淀環(huán)。

1、試管法：將一定量的抗體混入0.7%瓊脂糖溶液中，注入小試管內(nèi)，

上層加抗原溶液使待測(cè)抗原在凝膠中自由擴(kuò)散，在抗原抗體比例恰當(dāng)位置

形成沉淀環(huán)。

2、平板法：是將抗體或抗血清混入0.9%瓊脂糖內(nèi)，未凝固前傾注成

平板，然后在上打孔，將抗原加入孔中，放37℃讓其自由擴(kuò)散，24?48h

后可見(jiàn)孔周?chē)霈F(xiàn)沉淀環(huán)，測(cè)定環(huán)的直徑或面積計(jì)算標(biāo)本中待測(cè)抗原的濃

度。有兩種計(jì)算方法：I）Mancini曲線(xiàn)：適用大分子抗原的和長(zhǎng)時(shí)間擴(kuò)散

（》48h）的結(jié)果，沉淀環(huán)直徑的平方與抗原濃度呈線(xiàn)性關(guān)系c/d2=k.（其

中c為抗原濃度d為沉淀環(huán)直徑k為常數(shù)）

3、單向擴(kuò)散試驗(yàn)檢測(cè)時(shí)的注意點(diǎn)：

（1）抗血清必須特異性強(qiáng)、效價(jià)高、親和力強(qiáng)，在良好條件下保存。

（2）每次測(cè)定都必須作標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。

（3）每次測(cè)定時(shí)必須用質(zhì)控血清作質(zhì)控。

（4）注意雙環(huán)現(xiàn)象（出現(xiàn)了兩種抗原性相同成分）。

（5）應(yīng)用單克隆抗體測(cè)量多態(tài)性抗原時(shí)，測(cè)定值偏低；用多克隆抗

體測(cè)量單克隆病時(shí)，測(cè)定值偏高

2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)免疫檢驗(yàn)考試輔導(dǎo)：雙向擴(kuò)散試驗(yàn)

雙向擴(kuò)散試驗(yàn)：在瓊脂內(nèi)抗原和抗體各自向?qū)Ψ綌U(kuò)散，在最恰當(dāng)?shù)谋?/p>

例處形成抗原抗體沉淀線(xiàn)，根據(jù)沉淀線(xiàn)的位置、形狀以及對(duì)比關(guān)系，可對(duì)

抗原或抗體作出定性分析。雙向擴(kuò)散試驗(yàn)也分為試管法和平板法。

1、試管法：在含有抗原的溶液和含有抗體瓊脂中間，加一層普通瓊

脂，讓下層抗體和上層抗原向中間自由擴(kuò)散，在抗原、抗體濃度最適時(shí)形

成沉淀線(xiàn)。

2、平板法：

是在瓊脂板上相距3?5mm打一對(duì)孔，或者梅花孔、雙排孔、三角孔

等。在相應(yīng)孔中加入抗原或抗體，待其自由擴(kuò)散后，抗原、抗體形成可見(jiàn)

的沉淀線(xiàn)。根據(jù)沉淀線(xiàn)的位置可作如下分析：①抗原、抗體是否存在及其

相對(duì)含量。一般沉淀線(xiàn)靠近抗原孔，提示抗體量大，沉淀線(xiàn)靠近抗體孔,

提示抗原量大。

②抗原、抗體相對(duì)分子量的分析；抗原或抗體在瓊脂內(nèi)自由擴(kuò)散，其

速度受分子量影響。分子量小者，擴(kuò)散快，反之較慢。由于慢者擴(kuò)散圈小，

局部濃度較大，形成沉淀線(xiàn)彎向分子量大的一方。如若兩者分子量相等,

則形成直線(xiàn)。

③抗原性質(zhì)的分析，受檢的抗原性質(zhì)可能完全相同、部分相同、完全

不同，沉淀弧可分別出現(xiàn)完全融合、部分融合、不融合三種情況；

④抗體效價(jià)的滴定?？贵w效價(jià)是抗原、抗體經(jīng)過(guò)自由擴(kuò)散形成沉淀線(xiàn),

出現(xiàn)沉淀線(xiàn)的最高抗體稀釋度為該抗體的效價(jià)。

2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)血液檢驗(yàn)復(fù)習(xí)指導(dǎo)：酸化甘油溶血試驗(yàn)

（1）原理：當(dāng)甘油存在于低滲溶液氯化鈉磷酸緩沖液時(shí)，可阻止其

中的水快速進(jìn)入紅細(xì)胞內(nèi)，使溶血過(guò)程緩慢。但甘油與膜脂質(zhì)又有親和性,

可使膜脂質(zhì)減少。當(dāng)紅細(xì)胞膜蛋白及膜脂質(zhì)有缺陷時(shí)，它們?cè)赑H6.85甘油

緩沖液中比正常紅細(xì)胞溶解速度快，導(dǎo)致紅細(xì)胞懸液的吸光度降至50%的

時(shí)間（AGLT50）明顯縮短。

參考值：AGLT50大于1800s（30min）

（2）臨床意義：減少見(jiàn)于遺傳性球形細(xì)胞增多癥（25?150s）、腎功

能衰竭、慢性白血病、自身免疫性溶貧和妊娠婦女。

2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)血液檢驗(yàn)復(fù)習(xí)指導(dǎo)：紅細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)與功能

1.紅細(xì)胞膜的組成與結(jié)構(gòu)：紅細(xì)胞膜含脂類(lèi)40%,蛋白質(zhì)50%,碳水

化合物10%.膜的主要蛋白有主體蛋白和外周蛋白。后者包括收縮蛋白、肌

動(dòng)蛋白、錨蛋白和區(qū)帶（4.1~4.5）等，即骨架系統(tǒng)，起支架作用，對(duì)維

持紅細(xì)胞的形狀、穩(wěn)定性和變形性有重要作用。膜的主要脂類(lèi)為磷脂和膽

固醇，起屏障和保持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定性作用。

2.紅細(xì)胞膜的功能：屏障作用和可變性；半透性；免疫性；受體特性：

激素類(lèi)受體、遞質(zhì)類(lèi)受體、丙種球蛋白受體、病毒受體、EP0受體和鐵蛋

白受體等。

3.影響紅細(xì)胞膜穩(wěn)定的因索：紅細(xì)胞能量代謝紊亂；紅細(xì)胞膜有遺傳

性缺陷；酶缺陷。

2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)血液檢驗(yàn)輔導(dǎo)：血紅蛋白病的定義與分類(lèi)

血紅蛋白病的定義與分類(lèi)：血紅蛋白病是一組由于生成血紅蛋白的珠

蛋白肽鏈（a、8、丫、3）的結(jié)構(gòu)異?；蚝铣呻逆溗俾实母淖?，而引起

血紅蛋白功能異常所致的疾病。血紅蛋白病多為遺傳性，如：因控制遺傳

的珠蛋白基因發(fā)生突變所致的結(jié)構(gòu)性血紅蛋白病；因指導(dǎo)珠蛋白合成速率

的遺傳基因缺陷所致的珠蛋白生成障礙性貧血或稱(chēng)海洋性貧血。另外，也

可見(jiàn)獲得性血紅蛋白病。通常是由接觸或誤服化學(xué)藥物所致。

常見(jiàn)的結(jié)構(gòu)性血紅蛋白病是因合成的珠蛋白的氨基酸序列改變而引

起血紅蛋白功能或理、化性質(zhì)異常的疾病，如：引起血紅蛋白異常聚合的

HbS?。徊环€(wěn)定血紅蛋白癥、高鐵血紅蛋白血癥等。常見(jiàn)的珠蛋白生成障

礙性貧血為a或B珠蛋白生成障礙性貧血。也有多種基因異常導(dǎo)致的血紅

蛋白病