生 物 化 學(xué)常德職業(yè)技術(shù)學(xué)院 劉 英

生物化學(xué)

常德職業(yè)技術(shù)學(xué)院

劉英

真核生物的轉(zhuǎn)錄過程RNA聚合酶Ⅰ（RNAPolⅠ）RNA聚合酶Ⅱ（RNAPolⅡ）RNA聚合酶Ⅲ（RNAPolⅢ）一、真核生物有三種DNA依賴的RNA聚合酶二、

轉(zhuǎn)錄因子在真核生物轉(zhuǎn)錄起始中具有重要作用

（1）真核生物的基因轉(zhuǎn)錄過程同樣分為3個階段：起始階段（RNApol和通用轉(zhuǎn)錄因子形成轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合體）延長階段轉(zhuǎn)錄終止（2）與原核生物的顯著不同是，起始和延長過程都需要轉(zhuǎn)錄因子（TF）或反式作用因子的參與。（一）轉(zhuǎn)錄前起始復(fù)合體的形成

不同物種、不同細(xì)胞或不同的基因，轉(zhuǎn)錄起始點上游都有不同的特異DNA序列，包括啟動子、增強(qiáng)子等，統(tǒng)稱為順式作用元件。

轉(zhuǎn)錄起始點TATA盒CAAT盒GC盒增強(qiáng)子順式作用元件AATAAA切離加尾轉(zhuǎn)錄終止點修飾點外顯子翻譯起始點內(nèi)含子OCT-1OCT-1：ATTTGCAT八聚體1.轉(zhuǎn)錄前起始復(fù)合體（PIC）的生成：真核生物轉(zhuǎn)錄起始也需要RNApol對起始點上游DNA序列進(jìn)行辨認(rèn)和結(jié)合。轉(zhuǎn)錄起始時，真核生物的RNApol不直接識別和結(jié)合模板的起始區(qū)，而是依靠轉(zhuǎn)錄因子識別并結(jié)合起始序列，故其起始復(fù)合體的裝配過程比原核生物復(fù)雜的多。

2.反式作用因子概念：能直接、間接辨認(rèn)和結(jié)合轉(zhuǎn)錄上游區(qū)段DNA的蛋白質(zhì)。反式作用因子中，直接或間接結(jié)合RNA聚合酶的，則稱為通用轉(zhuǎn)錄因子或基本轉(zhuǎn)錄因子。3.參與RNA-polⅡ轉(zhuǎn)錄的TFⅡ的作用轉(zhuǎn)錄因子功能TFⅡDTBP亞基結(jié)合TATA盒TFⅡA輔助TBP-DNA結(jié)合TFⅡB穩(wěn)定TFⅡD-DNA復(fù)合物，結(jié)合RNApolTFⅡE解螺旋酶,結(jié)合TFⅡHTFⅡF促進(jìn)RNApolⅡ結(jié)合及作為其他因子結(jié)合的橋梁TFⅡH解旋酶、作為蛋白激酶催化CTD磷酸化真核RNA聚合酶Ⅱ與通用轉(zhuǎn)錄因子的作用過程①由TFIID中的TBP識別TATA盒，并在TAFs的協(xié)助下結(jié)合到啟動子區(qū)，然后TFIIB與TBP結(jié)合，同時TFIIB也能與DNA結(jié)合，TFIIA可以穩(wěn)定與DNA結(jié)合的TFIIB-TBP復(fù)合體；②TFIIB-TBP復(fù)合體與RNApolII-TFIIF復(fù)合體結(jié)合，此舉可降低RNApolII與DNA的非特異部位的結(jié)合，協(xié)助RNApolII靶向結(jié)合啟動子；③TFIIE和TFIIH加入，形成閉合復(fù)合體，裝配完成。4.閉合轉(zhuǎn)錄復(fù)合體的形成步驟三、真核生物轉(zhuǎn)錄延長過程中沒有轉(zhuǎn)錄與翻譯同步的現(xiàn)象真核生物轉(zhuǎn)錄延長過程與原核生物大致相似，但因有核膜相隔，沒有轉(zhuǎn)錄與翻譯同步的現(xiàn)象。RNA-pol前移處處都遇上核小體。轉(zhuǎn)錄延長過程中可以觀察到核小體移位和解聚現(xiàn)象。RNA-PolRNA-PolRNA-Pol核小體轉(zhuǎn)錄延長中的核小體移位轉(zhuǎn)錄方向四、真核生物的轉(zhuǎn)錄終止和加尾修飾同時進(jìn)行

轉(zhuǎn)錄不是在polyA的位置上終止，而是超出數(shù)百個乃至上千個核苷酸后才停頓。已發(fā)現(xiàn)，在讀碼框架的下游，常有一組共同序列AATAAA，再下游還有相當(dāng)多的GT序列。這些序列稱為轉(zhuǎn)錄終止的修飾點。5------AAUAAA-5

------AAUAAA--核酸酶-GUGUGUGRNA-polAATAAAGTGTGTG轉(zhuǎn)錄終止的修飾點5

5

3

33加尾AAAAAAA······3mRNA轉(zhuǎn)錄終止——

和轉(zhuǎn)錄后修飾密切相關(guān)。小結(jié)與原核生物相比區(qū)別有：1.真核生物有3種RNA聚合酶；2.轉(zhuǎn)錄的起始和延長過程都需要眾多的相關(guān)蛋白因子、轉(zhuǎn)錄因子或反式作用因子的參與；3.轉(zhuǎn)錄起始上游區(qū)序列更加