分光光度計的使用生物化學(xué)基本實驗技能訓(xùn)練課件

722分光光度計的使用生物化學(xué)基本實驗技能訓(xùn)練實驗?zāi)康恼莆?22分光光度計的構(gòu)造和原理使用方法掌握722分光光度計使用方法問題：如何測定血清中某一種物質(zhì)的含量？如，葡萄糖，清蛋白，丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶，尿素…物質(zhì)特性物質(zhì)對光的吸收是選擇性的，利用被測物質(zhì)對某波長的光的吸收來了解物質(zhì)的特性，是光譜法的基礎(chǔ)。I0入射光I透過光比色分析法當(dāng)一束平行單色光通過含有吸光物質(zhì)的稀溶液時，溶液的吸光度與吸光物質(zhì)濃度、液層厚度乘積成正比。原理原理I0入射光I透過光透光率（T）=I/I0吸光值（A）=-lgT=-lgI/I0Lamber-Beer定律，是比色分析的基礎(chǔ)。定律溶液吸光度溶液吸光系數(shù)溶液濃度溶液層厚度A=K?C?LI0入射光I透過光吸光度與濃度的關(guān)系A(chǔ)=

LcA0.00光源檢測器AA0.22光源檢測器0.42光源檢測器LL推導(dǎo)A標(biāo)=KC標(biāo)L，A測=KC測LA標(biāo)／

C標(biāo)=KL，A測／C測=KLA標(biāo)／

C標(biāo)=

A測／C測722分光光度計結(jié)構(gòu)分光光度計的基本部件樣品蓋樣品架透射比吸光度濃度因子0.543按鍵MODE功能0%100%波長指示窗口拉桿500520顯示屏波長旋鈕比色皿(1)接通電源，預(yù)熱10min。(2)調(diào)節(jié)波長旋鈕至所需波長。(3)比色杯依次放入檢測室比色杯架內(nèi)，空白液對準(zhǔn)光路。(4)檢查722型分光光度計的旋鈕，使選擇鈕指向透光度“T”，按“0”鍵，蓋上檢測室蓋(光門打開)，按“100”鍵，重復(fù)數(shù)次，直至達到穩(wěn)定。(5)吸光度A的測量：調(diào)整選擇鈕顯示“A”，讀數(shù)顯示為“.000”。如果不是此值，調(diào)消光零旋鈕。再移動拉桿，使標(biāo)準(zhǔn)液和待測液分別置于光路，讀取“A”值。(6)打開檢測室蓋，取出比色杯，傾去比色液，用水沖洗干凈，倒置于鋪有濾紙的平皿中。儀器操作選擇波長拉比色桿時動作要輕。2.手持比色杯的毛面(粗糙面)，不可用手或濾紙等摩擦比色杯的透光面；比色杯先用蒸餾水沖洗后，再用比色液潤洗才能裝比色液。盛裝比色液時，約達比色杯2/3體積，不宜過多或過少；若不慎使溶液流至比色杯外，須用棉花或擦鏡紙吸干，才能放入比色架。比色杯用后應(yīng)立即用自來水沖洗干凈。3.測定溶液濃度的吸光度值在0.1~0.8之間最符合光吸收定律，線性好、讀數(shù)誤差較小。注意事項

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