第13章 遺傳病的診斷課件

第13章遺傳病的診斷ch13遺傳病的診斷由于遺傳病的治療還沒有理想的方法，目前臨床遺傳的重點(diǎn)是如何診斷遺傳病，特別是產(chǎn)前診斷，以達(dá)到防止有遺傳缺陷的患兒出生。遺傳病診斷方法除普遍性診斷原則（即通過對(duì)病史、癥狀、體征并進(jìn)行必要的輔助性檢查外，還必需要有遺傳學(xué)的特殊診斷手段（家系分析、染色體檢查、膚紋分析、攜帶者的檢出等）。ch13遺傳病的診斷遺傳病診斷的分類臨床上的遺傳病診斷主要包括：①產(chǎn)前診斷②癥狀前診斷③現(xiàn)癥患者診斷（prenataldiagnosis）ch13遺傳病的診斷是醫(yī)務(wù)工作者根據(jù)已出現(xiàn)癥狀的患者的各種臨床表現(xiàn)進(jìn)行分析，并進(jìn)行疾病的診斷和遺傳方式的判斷，是遺傳病臨床診斷的主要內(nèi)容。第一節(jié)現(xiàn)癥患者診斷ch13遺傳病的診斷一、常規(guī)臨床診斷1、病史遺傳病大多有家族聚集現(xiàn)象,因此病史的采集尤為重要。采集過程中要本著準(zhǔn)確和詳盡的原則。除詢問一般病史外，應(yīng)著重患者的家族史、婚姻史和生育史。如流產(chǎn)史、死胎、兒童的收養(yǎng)、過繼、近親婚配和非婚生育等情況。對(duì)于一些先天性畸形，還需要詳細(xì)詢問懷孕時(shí)父母身體健康狀況和年齡、孕早期是否有病毒感染史、致畸物接觸史以及是否順產(chǎn)等有關(guān)資料。ch13遺傳病的診斷2、癥狀和體征遺傳病有和其它疾病相同的體征和癥狀，往往又有其本身特異性癥侯群，為診斷提供初步線索。如：①智力發(fā)育不全伴有特殊腐臭尿液苯丙酮尿癥②智力發(fā)育不全伴有白內(nèi)障，肝硬化半乳糖血癥③智力低下伴有眼距寬、眼裂小、外眼角上斜先天愚型ch13遺傳病的診斷大部分遺傳病都是一般臨床癥狀和該病特有的臨床癥狀混雜，需要臨床醫(yī)生在實(shí)踐中積累經(jīng)驗(yàn)，分出主要矛盾、次要矛盾，結(jié)合病史、家族史和實(shí)驗(yàn)室檢查確診！ch13遺傳病的診斷二、系譜分析系譜分析是臨床醫(yī)生在診斷遺傳病時(shí)應(yīng)掌握的一項(xiàng)基本功。系譜分析的作用①有助于區(qū)分單基因病屬于哪一種遺傳方式，以及患病風(fēng)險(xiǎn)的計(jì)算；②有助于區(qū)分某些表型相似的遺傳病，以及同一遺傳病的不同類型，也可鑒別由于遺傳異質(zhì)性而出現(xiàn)的不同遺傳方式。ch13遺傳病的診斷系譜的系統(tǒng)性、完整性和可靠性。完整的系譜要包括三代以上各成員的患病資料。

有些遺傳病家系除先證者外，家庭中找不到其他患者，此時(shí)應(yīng)考慮是否為新的基因突變。對(duì)系譜的分析要注意區(qū)別：孟德爾遺傳病、非孟德爾遺傳病、遺傳異質(zhì)性和一些特殊的遺傳現(xiàn)象。系譜分析注意事項(xiàng)ch13遺傳病的診斷三、細(xì)胞遺傳學(xué)檢查染色體檢查亦稱核型分析，是確診染色體病的主要方法。隨著顯帶技術(shù)的應(yīng)用以及高分辯率染色體顯帶技術(shù)的出現(xiàn)和改進(jìn)，能更準(zhǔn)確地判斷和發(fā)現(xiàn)更多的染色體數(shù)目和結(jié)構(gòu)異常綜合征，還可以發(fā)現(xiàn)新的微畸變綜合征。ch13遺傳病的診斷主要取自胎兒的皮膚、臍帶血、受精卵卵裂細(xì)胞、絨毛和羊水中胎兒脫落細(xì)胞從而進(jìn)行產(chǎn)前的染色體診斷；亦可取患者的外周血和身體的各種組織進(jìn)行現(xiàn)癥病人的檢查。①標(biāo)本來源ch13遺傳病的診斷★②染色體檢查的適應(yīng)證智能低下、生長(zhǎng)遲緩或伴有其他先天畸形者；夫婦之一有染色體異常，如平衡易位、嵌合體等；家族中已有染色體異?；蛳忍旎蔚膫€(gè)體；多發(fā)性流產(chǎn)婦女及其丈夫；原發(fā)性閉經(jīng)和男女不育癥者；34歲以上的高齡孕婦（產(chǎn)前診斷）。兩性內(nèi)外生殖器畸形者；身材高大，性情粗暴的男性；惡性血液病患者；長(zhǎng)期接受Ｘ線、電離輻射的人員。ch13遺傳病的診斷性染色質(zhì)檢查性染色質(zhì)（X染色質(zhì)、Y染色質(zhì)）檢查方法簡(jiǎn)單，不僅可以①鑒別性別，還可用于②疑為兩性畸形或性染色體數(shù)目異常的疾病診斷或產(chǎn)前診斷。發(fā)根鞘細(xì)胞，皮膚或口腔上皮細(xì)胞，女性的陰道上皮細(xì)胞，也可取自絨毛和羊水的胎兒脫落細(xì)胞。標(biāo)本來源ch13遺傳病的診斷四、生化檢查基因突變引起的單基因病往往表現(xiàn)在酶和蛋白質(zhì)的質(zhì)和量的改變或缺如。因此，酶和蛋白質(zhì)的定性定量分析是診斷單基因病或分子代謝病的主要方法。ch13遺傳病的診斷臨床上經(jīng)常應(yīng)用的生物化學(xué)檢測(cè)方法是檢測(cè)酶的缺陷和代謝中間產(chǎn)物。產(chǎn)前診斷中常采集絨毛、羊水、臍帶血和皮膚。新生兒的篩查最常用的標(biāo)本是血和尿。測(cè)定患者尿中苯丙酮酸、苯乙酸濃度或血清中苯丙氨酸的濃度是否增高，可獲知是否缺乏苯丙氨酸羥化酶，從而診斷是否患有苯丙酮尿癥。

苯丙酮尿癥可使患兒神經(jīng)系統(tǒng)受到不可逆轉(zhuǎn)損害，如能早期發(fā)現(xiàn)并在出生后3－6周內(nèi)開始治療，可使患兒正常發(fā)育。舉例ch13遺傳病的診斷五、基因診斷基因診斷是利用DNA重組技術(shù)直接從DNA水平檢測(cè)類遺傳性疾病的基因缺陷。概念特點(diǎn)A、針對(duì)直接病因診斷；B、目的基因無組織和發(fā)育特異性ch13遺傳病的診斷分子雜交PCR及相關(guān)技術(shù)DNA測(cè)序基因芯片技術(shù)基因診斷方法ch13遺傳病的診斷分子雜交是根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)的原則，利用標(biāo)記探針鑒定DNA或ＲＮＡ中特定基因順序的一種方法。PCR技術(shù)是在體外快速擴(kuò)增特異性DNA片斷地技術(shù)，使能夠達(dá)到足夠分析的純度和量。PCR的模板DNA可以來自一個(gè)細(xì)胞，一根頭發(fā)、一滴精斑等都可以得到有效的擴(kuò)增。ch13遺傳病的診斷Southernblotch13遺傳病的診斷ch13遺傳病的診斷限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性

（restrictionfragmentlengthpolymorphism,RFLP）人群中不同個(gè)體基因的核苷酸序列存在差異，稱DNA多態(tài)性。DNＡ序列上發(fā)生變化而出現(xiàn)或丟失某一限制性酶切位點(diǎn)，使酶切產(chǎn)生的片段長(zhǎng)度和數(shù)量發(fā)生變化稱為RFLP。ch13遺傳病的診斷鐮狀細(xì)胞貧血(HbS)：第5～7位密碼子MstⅡ：CCTNAGG

A：CCTGAGGAG

S：CCTGTGGAG

A

A

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S

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S1.2Kb

0.2Kb1.40Kb1.20Kb0.20Kbch13遺傳病的診斷DNA自動(dòng)測(cè)序儀生成的序列DNA自動(dòng)測(cè)序儀采用4種不同顏色的熒光分別標(biāo)記4種雙脫氧核苷酸，基本實(shí)現(xiàn)了測(cè)序自動(dòng)化。ch13遺傳病的診斷ch13遺傳病的診斷DNA芯片指把成千上萬個(gè)寡核苷酸或cDNA探針密集、規(guī)律地排列在1cm2大小的硅片或玻璃芯片上，容量可達(dá)20～40萬個(gè)基因探針。將熒光標(biāo)記的DNA或cDNA樣品送到在芯片上與探針雜交，通過激光共聚焦顯微鏡獲取信息,以計(jì)算機(jī)系統(tǒng)對(duì)熒光信號(hào)做出比較和檢測(cè)，可迅速得出所需的信息，比常規(guī)方法快幾十到幾千倍。

ch13遺傳病的診斷DNAmicroarraych13遺傳病的診斷Huntington舞蹈?。夯颊吆冒l(fā)年齡在40歲左右，此時(shí)患者已經(jīng)生兒育女，很有可能將致病基因傳給子代。如能在可疑雜合子生育之前就作出診斷，就能避免影響子代。主要針對(duì)某些常染色體顯性遺傳病的雜合子個(gè)體，患者往往發(fā)病年齡延遲。如第二節(jié)癥狀前診斷ch13遺傳病的診斷又稱宮內(nèi)診斷，是對(duì)胚胎或胎兒在出生前是否患有某種遺傳病或先天畸形作出準(zhǔn)確的診斷。第三節(jié)產(chǎn)前診斷ch13遺傳病的診斷一、產(chǎn)前診斷的適應(yīng)證有高風(fēng)險(xiǎn)和危害較大的遺傳病；①染色體病；②特定酶缺陷所致的遺傳性代謝病；③可進(jìn)行DNA檢測(cè)的遺傳??；④多基因遺傳的神經(jīng)管缺陷；⑤有明顯形態(tài)改變的先天畸形。ch13遺傳病的診斷35歲以上的高齡孕婦或夫婦之一有明顯致畸因素接觸史；夫婦之一有染色體數(shù)目或結(jié)構(gòu)異常者；或曾生育過染色體病患兒的孕婦；已知或推測(cè)孕婦是AR或XR攜帶者；曾生育過某種單基因病遺傳病患兒的孕婦。曾生育過先天畸形（尤其是神經(jīng)管畸形）的孕婦；有原因不明的自然流產(chǎn)，畸胎，死產(chǎn)及新生兒死亡的孕婦；★適應(yīng)證ch13遺傳病的診斷X射線檢查主要用于檢查18周以后胎兒骨骼先天畸形。X射線對(duì)胎兒有一定影響，現(xiàn)已極少使用。二、產(chǎn)前診斷的方法ch13遺傳病的診斷B超檢查是一項(xiàng)簡(jiǎn)便對(duì)母體無痛無損傷的產(chǎn)前診斷方法。B超應(yīng)用最廣?？捎糜诙嗵ト焉?，羊水過多，無腦兒、脊柱裂、腦膜膨出、多囊腎、肢體短小等發(fā)育遲緩的診斷。利用超聲波還可直接對(duì)胎心和胎動(dòng)進(jìn)行動(dòng)態(tài)觀察，并可攝像記錄分析，亦可作胎盤定位，選擇羊膜穿刺部位，可引導(dǎo)胎兒鏡操作.。ch13遺傳病的診斷ch13遺傳病的診斷胎兒鏡又稱為羊膜腔鏡或?qū)m腔鏡，是一種帶有羊膜穿刺的雙套光導(dǎo)纖維內(nèi)窺鏡。可于懷孕15~21周進(jìn)行操作。主要用于胎兒血的取樣、活檢和產(chǎn)前診斷。也可對(duì)胎兒形態(tài)異常進(jìn)行直接觀察，此外還可判定胎兒性別和對(duì)某些遺傳病進(jìn)行宮內(nèi)治療。該技術(shù)如果操作不當(dāng)，會(huì)引起流產(chǎn)、母體免疫反應(yīng)等，所以應(yīng)用受到一定的限制。ch13遺傳病的診斷羊膜穿刺術(shù)亦稱羊水取樣。抽取羊水最佳時(shí)間是妊娠16-18周，因?yàn)榇藭r(shí)羊水量多、胎兒浮動(dòng)，穿刺時(shí)進(jìn)針容易，且不易傷及胎兒。目前，羊膜腔穿刺術(shù)是胎兒產(chǎn)前診斷最常用、最有效手段之一ch13遺傳病的診斷羊膜穿刺術(shù)：ch13遺傳病的診斷絨毛吸取術(shù)可在B超監(jiān)視下經(jīng)宮頸部取樣，一般于妊娠7-9周進(jìn)行。絨毛枝經(jīng)處理或經(jīng)短期培養(yǎng)后進(jìn)行染色體分析、酶和蛋白質(zhì)檢測(cè)和基因分析。優(yōu)點(diǎn)是取樣時(shí)間早，一旦作出明確診斷，需要進(jìn)行選擇性流產(chǎn)時(shí)，不會(huì)給孕婦帶來更多的損傷和問題。ch13遺傳病的診斷絨毛吸取術(shù)ch13遺傳病的診斷臍帶穿刺術(shù)在B超引導(dǎo)下經(jīng)抽取胎兒臍靜脈血，一般于孕中期、孕晚期（17~22周）進(jìn)行。臍血可作染色體或血液學(xué)各種檢查，亦可用于因羊水細(xì)胞培養(yǎng)失敗，DNA分析無法診斷而能用胎兒血漿或血細(xì)胞進(jìn)行生化檢測(cè)的疾病，或在錯(cuò)過絨毛和羊水取樣時(shí)機(jī)下進(jìn)行。ch13遺傳病的診斷孕婦外周血分離胎兒細(xì)胞這是一項(xiàng)非創(chuàng)傷性產(chǎn)前診斷技術(shù)，并易于被孕婦接受。

胎兒循環(huán)中的淋巴細(xì)胞，粒細(xì)胞，有核紅細(xì)胞等可以通過胎盤屏障滲透漏入母體血液循環(huán)，一般在妊娠第5-6周即可出現(xiàn)，其中有核紅細(xì)胞是最佳侯選細(xì)胞。但在母體外周血細(xì)胞中胎兒細(xì)胞僅占1/105-1/106

，如何從中有效識(shí)別和富集胎兒細(xì)胞是一個(gè)尚待解決的問題。ch13遺傳病的診斷植入前診斷是利用微操作技術(shù)和DNA擴(kuò)增技術(shù)對(duì)胚泡植入前進(jìn)行檢測(cè)。植入前(著床前)遺傳診斷適用于體外受精試管嬰兒ch13遺傳病的診斷ch13遺傳病的診斷體外受精和

胚胎移植（in-vitrofertilizationembryotransfer,IVF-ET）1978年世界第一例試管嬰兒誕生。人類體外受精-胚胎移植方法的建立。ch13遺傳病的診斷ch13遺傳病的診斷胚胎移植前遺傳病診斷

preimplantationgeneticdiagnosis,PGDPGD是在體外受精技術(shù)、分子生物學(xué)和顯微操作的基礎(chǔ)上，對(duì)受精三天后的胚胎在種植前，檢查其正常后