2024屆江蘇高考高三生物二輪復(fù)習(xí)專題訓(xùn)練十四：細(xì)胞工程含答案

2024屆高三生物二輪復(fù)習(xí)專題訓(xùn)練十四：細(xì)胞工程單項(xiàng)選擇題1.植物甲（2n=18）具有由核基因控制的多種優(yōu)良性狀，遠(yuǎn)緣植物乙（4n=32）的細(xì)胞質(zhì)中存在抗除草劑基因，科研人員欲利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)培育具有抗除草劑性狀的優(yōu)良品種丙，過程如圖所示。已知X射線處理會(huì)使細(xì)胞分裂功能喪失但不影響線粒體功能，丙烯酸異辛酯（IOA）處理會(huì)使線粒體失活，抑制細(xì)胞分裂（細(xì)胞仍存活）。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.取植物頂芽分生區(qū)細(xì)胞進(jìn)行體細(xì)胞雜交育種有利于獲得脫毒苗B.過程①需使用纖維素酶和膠原蛋白酶分解去除細(xì)胞壁C.過程②可用聚乙二醇誘導(dǎo)甲、乙原生質(zhì)體的融合D.在細(xì)胞融合體系中未融合的細(xì)胞不能正常分裂形成愈傷組織2.為了降低對國外奶牛種質(zhì)的過度依賴，提高優(yōu)良母牛的擴(kuò)繁速度成為關(guān)鍵，而試管牛技術(shù)產(chǎn)業(yè)化則可以有效解決這一難題。如圖是試管奶牛的生產(chǎn)流程示意圖，下列有關(guān)敘述正確的是（）A.①是核移植技術(shù)，反映了動(dòng)物細(xì)胞核具有全能性B.從優(yōu)良母牛中采集卵母細(xì)胞，通常用沖洗子宮采卵方法C.在過程①中精卵識別階段時(shí)，卵細(xì)胞正處于減數(shù)第二次分裂后期D.進(jìn)行過程②胚胎移植前，需取囊胚的滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行性別鑒定3.干細(xì)胞的應(yīng)用前景吸引著眾多科學(xué)家研究。研究人員利用阿爾茨海默癥患者自身的皮膚細(xì)胞或血細(xì)胞制成誘導(dǎo)多能干細(xì)胞，來替代患者大腦中失去功能的神經(jīng)元，這種療法被稱為自體療法。下列敘述正確的是（）A.成熟細(xì)胞被制成誘導(dǎo)多能干細(xì)胞的過程中，細(xì)胞分化程度逐漸升高B.培養(yǎng)誘導(dǎo)各種細(xì)胞的過程中，培養(yǎng)皿中需通入CO2以促進(jìn)細(xì)胞呼吸C.細(xì)胞培養(yǎng)過程中細(xì)胞會(huì)因接觸抑制而停止分裂，只能用胰蛋白酶處理后才能傳代培養(yǎng)D.利用自體細(xì)胞誘導(dǎo)的干細(xì)胞進(jìn)行器官移植和再生，可在一定程度上避免免疫排斥反應(yīng)發(fā)生4.近年來，我國科學(xué)家利用基因編輯技術(shù)改變了小鼠卵母細(xì)胞中基因的甲基化情況，獲得了許多新性狀的小鼠，下圖表示利用該方法制備轉(zhuǎn)基因鼠的基本流程。下列敘述正確的是（）A.上述基因編輯操作改變了小鼠卵母細(xì)胞內(nèi)的基因堿基序列B.②過程中要對供體母鼠和受體母鼠進(jìn)行超數(shù)排卵處理C.胚胎工程操作中，常以觀察到兩個(gè)極體或雌、雄原核作為受精的標(biāo)志D.甲基化會(huì)激活基因的活性，對某些基因進(jìn)行去甲基化處理可抑制其表達(dá)5.草木樨狀黃芪（2n=32）是一種優(yōu)良牧草，木本霸王（2n=22）是一種沙漠植物。研究者用UV照射木本霸王的原生質(zhì)體，使其染色體片段化，并將處理后的木本霸王原生質(zhì)體與草木樨狀黃芪原生質(zhì)體進(jìn)行融合，獲得染色體數(shù)為48條的雜種植株。下列說法錯(cuò)誤的是（）A.需要用滅活病毒處理原生質(zhì)體以獲得雜種細(xì)胞B.雜種植株的獲得需經(jīng)歷脫分化和再分化的過程C.雜種植株減數(shù)分裂時(shí)部分染色體可能無法聯(lián)會(huì)D.本研究可用于培育抗旱能力強(qiáng)的草木樨狀黃芪6.有限稀釋法是克隆化培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞的一種方法。將細(xì)胞懸液進(jìn)行連續(xù)倍數(shù)稀釋，最終調(diào)整密度為5個(gè)/mL；將稀釋好的細(xì)胞懸液接種于96孔板，每孔加0．1mL；24h后在顯微鏡下挑選只含一個(gè)細(xì)胞的孔，補(bǔ)加培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng)獲得細(xì)胞克隆。相關(guān)說法錯(cuò)誤的是（）A.培養(yǎng)液中需含有蔗糖、血清等物質(zhì)B.96孔板需置于CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)C.貼附型細(xì)胞獲得懸液需用胰蛋白酶處理D.該方法可用于篩選產(chǎn)特定抗體的雜交瘤細(xì)胞7.第三代試管嬰兒也稱胚胎植入前遺傳學(xué)診斷，精子和卵細(xì)胞形成受精卵發(fā)育成早期胚胎后植入子宮前對胚胎細(xì)胞進(jìn)行基因診斷和染色體檢測，再進(jìn)行胚胎移植。下列相關(guān)敘述正確的A.胚胎移植前遺傳學(xué)診斷需要進(jìn)行羊膜腔穿刺取羊水中的細(xì)胞B.進(jìn)行胚胎移植前，要對供體和受體進(jìn)行免疫檢查，以防止發(fā)生免疫排斥反應(yīng)C.試管嬰兒的早期胚胎發(fā)育經(jīng)歷了由桑葚胚→原腸胚→囊胚階段D.可取滋養(yǎng)層細(xì)胞，光鏡觀察染色體缺失情況，判斷是否患貓叫綜合征8.我國研究人員將體外培養(yǎng)的胎猴體細(xì)胞注射到去核卵母細(xì)胞，形成重構(gòu)胚，最終培育了兩只克隆猴“中中”和“華華”。以下說法正確的是（）A.體外培養(yǎng)體細(xì)胞的原理是動(dòng)物體細(xì)胞具有全能性B.核移植技術(shù)中卵母細(xì)胞應(yīng)該完成兩次分裂后去核C.體細(xì)胞注射到透明帶內(nèi)體現(xiàn)了細(xì)胞膜具有流動(dòng)性D.代孕母猴對植入的胚胎幾乎不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)9.我國科學(xué)家成功構(gòu)建了具有高比例胚胎干細(xì)胞的活產(chǎn)嵌合體猴。如圖所示，研究人員將4CL體系下培育的、可表達(dá)綠色熒光蛋白的供體獼猴的胚胎干細(xì)胞（簡稱4CL干細(xì)胞）注射至與其遺傳信息不同的獼猴胚胎中，并最終得到嵌合體猴。下列敘述正確的是A.體外培養(yǎng)至原腸胚階段再進(jìn)行移植可能更利于產(chǎn)生嵌合體猴B.桑葚胚階段注入的4CL干細(xì)胞會(huì)與其他胚胎細(xì)胞發(fā)生融合C.嵌合囊胚中的滋養(yǎng)層細(xì)胞將發(fā)育為嵌合體猴的各種組織D.嵌合體猴中僅部分位置能發(fā)出綠色熒光是基因重組的結(jié)果10.花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定劑量的紫外線處理黑芥原生質(zhì)體可使其染色體片段化，并喪失再生能力。利用此原生質(zhì)體作為部分遺傳物質(zhì)的供體與完整的花椰桌原生質(zhì)體融合，以獲得抗黑腐病雜種植株。流程如下圖，下利相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是A.融合成功的雜種細(xì)胞中染色體數(shù)目可能不同B.最終獲得的抗病植株具有完整的黑芥和花椰菜的遺傳信息C.初步篩選雜種細(xì)胞可在過程②后，以融合的活細(xì)胞中有葉綠體為標(biāo)志D.可將黑腐病菌接種到雜種植株上以鑒定其是否具有抗病性狀11.人參是一種名貴中藥材，其有效成分主要是人參皂苷。目前可以利用植物細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn)人參皂苷，大致流程如下圖所示。下列敘述正確是（）A.培養(yǎng)前對人參根切塊要進(jìn)行滅菌處理B.細(xì)胞分離過程需要用胰蛋白酶處理①C.過程②的原理是細(xì)胞增殖D.人參皂苷屬于初級代謝產(chǎn)物12.下圖是經(jīng)體外受精和胚胎分割培育優(yōu)質(zhì)奶牛過程。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.胚胎工程操作中，常以觀察到兩個(gè)極體作為受精完成的標(biāo)志B.將囊胚期的胚胎均分后，取樣內(nèi)細(xì)胞團(tuán)的部分做DNA分析和鑒定性別C.胚胎移植實(shí)質(zhì)上是早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移D.胚胎移植時(shí)，受體母牛必須經(jīng)過免疫學(xué)檢驗(yàn)以避免發(fā)生免疫排斥13.2017年中國科學(xué)家利用“聰明的化學(xué)方法和操作技巧（10s內(nèi)去核，15s內(nèi)核移植）”成功培育了體細(xì)胞克隆猴，流程如下，下列敘述錯(cuò)誤的是A．科學(xué)家多年的反復(fù)實(shí)驗(yàn)帶來的嫻熟技術(shù)使卵細(xì)胞受損減少B．核移植前用“滅活病毒短暫處理”主要目的是誘導(dǎo)細(xì)胞融合C．“聰明的化學(xué)方法”主要指圖中①②，通過調(diào)節(jié)組蛋白修飾而抑制基因表達(dá)D．上述技術(shù)有助于加速針對阿爾茨海默病、免疫缺陷、腫瘤等的新藥研發(fā)進(jìn)程14.6﹣磷酸葡萄糖脫氫酶（G﹣6PD）有F和S兩種類型，分別由一對等位基因XF和XS編碼?；蛐蜑閄FXS的女性體細(xì)胞中的兩個(gè)X染色體會(huì)有一個(gè)隨機(jī)失活，且這個(gè)細(xì)胞的后代相應(yīng)的X染色體均會(huì)發(fā)生同樣的變化。將基因型為XFXS的女性皮膚組織用胰蛋白酶處理后先進(jìn)行細(xì)胞的原代培養(yǎng)，再對不同的單細(xì)胞分別進(jìn)行單克隆培養(yǎng)。分別對原代培養(yǎng)和單克隆培養(yǎng)的細(xì)胞進(jìn)行G﹣6PD蛋白電泳檢測，結(jié)果如圖所示。有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是其他動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ) B．用胰蛋白酶處理皮膚組織可使其分散成單個(gè)細(xì)胞 C．原代培養(yǎng)細(xì)胞電泳圖有2個(gè)條帶是因?yàn)橥瑫r(shí)檢測了多個(gè)細(xì)胞 D．單克隆培養(yǎng)的細(xì)胞1、2、4、5、8、9與3、6、7所含基因不同二、多選題15．下列有關(guān)“培養(yǎng)”的敘述正確的是（）A．宜采用通氣培養(yǎng)并攪拌以獲取更多的紫杉醇B．可采用稀釋涂布平板法分離純化培養(yǎng)乳酸菌C．可在96孔板上培養(yǎng)和篩選特定的雜交瘤細(xì)胞D．采集到的卵母細(xì)胞需要在體外進(jìn)行成熟培養(yǎng)16.某實(shí)驗(yàn)室通過提高小鼠胚胎干細(xì)胞pSTAT3基因的表達(dá)水平，體外制備出桑葚胚樣全潛能細(xì)胞。該細(xì)胞在分子水平及發(fā)育潛能上均具有自然胚胎桑葚期細(xì)胞特性，并在體外成功模擬了小鼠胚胎發(fā)育至原腸胚階段。根據(jù)該研究，下列敘述正確的是（）注：pSTAT3是調(diào)控胚胎發(fā)育的關(guān)鍵基因A．桑葚胚樣細(xì)胞不可誘導(dǎo)發(fā)育至囊胚期B．誘導(dǎo)桑葚胚樣細(xì)胞時(shí)，基因的堿基序列和表達(dá)的情況都發(fā)生改變C．囊胚期細(xì)胞重置至桑葚樣細(xì)胞的過程類似于脫分化D．據(jù)圖推測，桑葚胚發(fā)育成囊胚的過程中，pSTAT3的表達(dá)下降17.下列關(guān)于菊花組織培養(yǎng)的敘述，不正確的是（）A．用自然生長的莖進(jìn)行組織培養(yǎng)須用適宜濃度的乙醇和次氯酸鈉的混合液消毒 B．培養(yǎng)瓶用專用封口膜封口可防止外界雜菌侵入并阻止瓶內(nèi)外的氣體交換 C．為防止雜菌污染，從接種外植體到生成試管苗盡量在同一個(gè)錐形瓶內(nèi)完成 D．脫分化的過程中受基因選擇性表達(dá)的調(diào)控18.在植物組織培養(yǎng)的初期，由于細(xì)胞不能進(jìn)行光合作用，需要在培養(yǎng)基中添加蔗糖作為能源物質(zhì)，而不利用葡萄糖作為能源物質(zhì)。下列相關(guān)推測合理的是（）A.蔗糖作為碳源與葡萄糖相比，可在一定程度上減少微生物的污染B.培養(yǎng)基中相同質(zhì)量分?jǐn)?shù)的蔗糖形成的滲透壓要高于葡萄糖，防止細(xì)胞脫水C.植物細(xì)胞吸收蔗糖的速率較低，有利于培養(yǎng)基滲透壓較長時(shí)間保持穩(wěn)定D.植物細(xì)胞的細(xì)胞壁可能存在蔗糖酶，能夠催化蔗糖水解以便于被吸收19.小鼠胚胎干細(xì)胞經(jīng)定向誘導(dǎo)可獲得多種功能細(xì)胞，制備流程如圖。下列敘述正確的是（）2024屆高三生物二輪復(fù)習(xí)專題訓(xùn)練十五：基因工程單項(xiàng)選擇題1.C基因編碼具有高度特異性殺蟲活性的C蛋白，V基因編碼的Ⅴ蛋白是結(jié)構(gòu)和作用機(jī)理不同于C蛋白的殺蟲蛋白。利用C-V融合基因和以下載體（如圖），獲得具有高抗蟲性的轉(zhuǎn)基因玉米。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.此載體中的T-DNA可轉(zhuǎn)移至植物細(xì)胞基因組中B.可采用含卡那霉素的培養(yǎng)基篩選轉(zhuǎn)基因植株C.可從分子水平、個(gè)體水平對轉(zhuǎn)基因玉米進(jìn)行檢測與鑒定D.與轉(zhuǎn)一種抗蟲基因相比，此玉米可延緩害蟲抗性基因頻率增加2.為研究擬南芥植株E基因的功能，科研人員將T-DNA插入到E基因中，導(dǎo)致其發(fā)生突變，突變后的基因記為e。為驗(yàn)證某擬南芥植株的基因型，科研人員根據(jù)基因E和T-DNA的序列，設(shè)計(jì)了三種引物，引物的結(jié)合位置如圖所示。已知完整的E基因和T-DNA整合后，因片段長度過大，不能完成整個(gè)融合基因的PCR擴(kuò)增?？蒲腥藛T提取該植株的總DNA，分別用引物“I+III”組合及“II+III”組合進(jìn)行PCR，兩種引物組合均能完成擴(kuò)增。擬南芥植株的基因型為（）A.Ee B.EE C.ee D.EE或Ee3.熒光定量PCR技術(shù)可定量檢測樣本中DNA含量，其原理是：在PCR反應(yīng)體系中加入引物的同時(shí)，加入與某條模板鏈互補(bǔ)的熒光探針，當(dāng)Taq酶催化子鏈延伸至探針處會(huì)水解探針，使熒光監(jiān)測系統(tǒng)接收到熒光信號，即每擴(kuò)增一次，就有一個(gè)熒光分子生成(如下圖)。下列說法不正確的是A.新冠病毒的RNA不能直接作為熒光定量PCR的模板B.DNA聚合酶只能從引物的3'端開始延伸子鏈C.若循環(huán)次數(shù)相同，熒光值越高，代表新冠病毒載量越低D.熒光定量PCR技術(shù)不需要用到解旋酶4.通過設(shè)計(jì)引物，運(yùn)用PCR技術(shù)可以實(shí)現(xiàn)目的基因的定點(diǎn)誘變。下圖是獲取突變基因的過程，其中引物1序列中含有一個(gè)堿基T不能與目的基因片段配對，但不影響引物與模板鏈的整體配對，反應(yīng)體系中在目的基因兩端的引物中分別設(shè)計(jì)增加限制酶a和限制酶b的識別位點(diǎn)。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.限制酶a和限制酶b的識別序列應(yīng)分別增加至引物1和引物2的5'端B.通過兩種限制酶將擴(kuò)增出的含突變位點(diǎn)的目的基因切割下來有利于其定向插入載體C.第3輪PCR結(jié)束后，兩條鏈完全等長的且含有突變堿基對的DNA分子有1個(gè)D.PCR的一輪循環(huán)一般可分為變性、復(fù)性、延伸三步，其中延伸的溫度高于復(fù)性的溫度5.用A和B兩種限制酶同時(shí)和分別處理某DNA分子，酶切位點(diǎn)及酶切產(chǎn)物的電泳結(jié)果如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．圖中X代表的堿基對數(shù)為5500B．圖中Y是限制酶A的酶切位點(diǎn)C．用A和B兩種限制酶同時(shí)處理圖中同一DNA片段得到8個(gè)末端D．若要從上述DNA分子中通過擴(kuò)增得到X片段，至少需要3次PCR6.科學(xué)家為了提高某種果實(shí)的儲(chǔ)藏時(shí)間，從該植物體內(nèi)提取Ers1基因（乙烯受體基因），按照圖示流程將Ers1基因重新導(dǎo)回該植物，致使該植物原有Ers1基因翻譯受抑制。已知限制酶Hpal切割后為平末端，Xhol和BamH1切割后露出的黏性末端堿基序列不同，據(jù)圖分析，提取的目的基因兩端需添加的限制酶的識別序列為（）注：LB、RB分別為T-DNA的左邊界、右邊界A．目的基因A端添加Hpal的識別序列，B端添加Xhol的識別序列B．目的基因A端添加Xho1的識別序列。B端添加Hpal的識別序列C．目的基因A端添加Xhol的識別序列，B端添加BamH1的識別序列D．目的基因A端添加Hpol的識別序列，B端添加Hpol的識別序列7.生物安全是指與生物有關(guān)的各種因素對社會(huì)、經(jīng)濟(jì)、人類健康以及生態(tài)環(huán)境所產(chǎn)生的危害或潛在風(fēng)險(xiǎn)。下列敘述與我國政府相關(guān)法規(guī)或主張不符的是A.禁止人的生殖性克隆和治療性克隆B.禁止非醫(yī)學(xué)需要的胎兒性別鑒定C.銷售轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品應(yīng)有明確標(biāo)注D.全面禁止和徹底銷毀生物武器8.研究發(fā)現(xiàn)，為心梗患者注射適量t-PA蛋白會(huì)誘發(fā)顱內(nèi)出血，但若將t-PA第84位的半胱氨酸換成絲氨酸，能顯著降低出血等副作用，改良后的t-PA蛋白成為心梗和腦血栓的急救藥。下圖所示，通過基因工程大量制備改良藥物t-PA蛋白，下列說法錯(cuò)誤的是（）A.制備改良t-PA蛋白的過程屬于蛋白質(zhì)工程B.利用重組pCLY11質(zhì)?？色@得牛乳腺生物反應(yīng)器C.選用限制酶XmaI和BglⅡ切割質(zhì)粒pCLY11，構(gòu)建重組質(zhì)粒D.成功導(dǎo)入重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞在含有新霉素的培養(yǎng)基上能存活，且呈現(xiàn)藍(lán)色9.T4溶菌酶（記作“L0”）是一種工業(yè)用酶，但在溫度較高時(shí)容易失活?？茖W(xué)家利用蛋白質(zhì)工程技術(shù)，將T4溶菌酶的第3位異亮氨酸變?yōu)榘腚装彼?，獲得了耐高溫的T4溶菌酶（記作“L1”）。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.該技術(shù)首先需依據(jù)L1的預(yù)期功能設(shè)計(jì)其結(jié)構(gòu)B.按照預(yù)期的氨基酸序列推得的mRNA的堿基序列可能不同C.完成L0中氨基酸的替換需要通過改造或合成基因來實(shí)現(xiàn)D.獲得L1的操作過程不需要酶和載體作為工具10.研究發(fā)現(xiàn)，水稻蠟質(zhì)基因（Wx）編碼直鏈淀粉合成酶。若Wx基因中第226位堿基是正常的G，該位點(diǎn)所在的內(nèi)含子能被正常剪接，胚乳中直鏈淀粉含量最高，基因型記做GG；若該位點(diǎn)突變成T，則不能被正常剪接，胚乳中直鏈淀粉的合成水平會(huì)降低，基因型記做TT。為檢測Wx基因該位點(diǎn)堿基是G或T，研究人員以待測水稻葉片總DNA為材料，以Wx基因片段設(shè)計(jì)引物如圖所示，對PCR擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)AccⅠ酶切后電泳。已知引物1為5＇-GCTTCACTTCTCTGCTTGTG-3＇，兩引物之間無另外的AccI酶的識別位點(diǎn)。下列敘述正確的是（）A.組成上述兩種淀粉合成酶的氨基酸的種類不同，數(shù)目相同B.GT雜合型水稻品種酶切電泳結(jié)果為2條條帶C.若酶切產(chǎn)物只能觀察到大約460bp的DNA條帶，則表明該水稻品種為TT型D.該實(shí)驗(yàn)中需設(shè)計(jì)的引物2為5＇-TTCAACTCTCGTTAAATCAT-3＇11.蜘蛛絲（絲蛋白）被稱為“生物鋼”，有著超強(qiáng)的抗張強(qiáng)度，下圖為蛛絲蛋白基因?qū)?yīng)的DNA片段結(jié)構(gòu)示意圖，其中1-4表示DNA上引物可能結(jié)合的位置，目前利用現(xiàn)代生物技術(shù)生產(chǎn)蜘蛛絲已取得成功。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.若從該DNA片段中直接獲取蛛絲蛋白基因，會(huì)破壞4個(gè)磷酸二酯鍵B.若用PCR技術(shù)獲取目的基因，則圖中的1、4分別是2種引物結(jié)合的位置C.若受體細(xì)胞為大腸桿菌，則需先用Ca2+處理，更利于實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)化D.在PCR儀中根據(jù)選定的引物至少需經(jīng)過6次循環(huán)才可獲得32個(gè)符合要求的目的基因12.科研人員利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將抗病毒蛋白基因C導(dǎo)入番木瓜，培育出轉(zhuǎn)基因抗病番木瓜，所用的Ti質(zhì)粒如圖所示。下列敘述正確的是（）A.該技術(shù)的原理是農(nóng)桿菌的擬核DNA與番木瓜基因發(fā)生重組B.構(gòu)建基因表達(dá)載體需要限制酶和耐高溫的DNA聚合酶C.可利用PCR技術(shù)篩選出含有抗病毒蛋白基因C的受體細(xì)胞D.可利用卡那霉素抗性基因檢測是否成功構(gòu)建抗病毒番木瓜13.“DNA粗提取與鑒定”的實(shí)驗(yàn)步驟是：研磨→去雜質(zhì)→析出→鑒定：某研究小組欲探究不同的去雜質(zhì)方法對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下表所示。下列說法錯(cuò)誤的是（）去雜質(zhì)方式沉淀質(zhì)量（g）DNA濃度（ng/μL）OD260/OD280二苯胺鑒定離心0.06881.51.53藍(lán)色4℃冰箱靜置0.1028336.41.41（注：OD260與OD280的比值可檢查DNA純度。純DNA的OD260/OD280為1.8，當(dāng)存在蛋白質(zhì)污染時(shí)，這一比值會(huì)明顯降低）A．豬肝和菜花均可作為提取DNA的材料B．對研磨液進(jìn)行離心是為了加速DNA的沉淀C．離心法可以獲得更高純度的DNAD．析出時(shí)的離心轉(zhuǎn)速明顯高于去雜質(zhì)時(shí)14.某研究小組構(gòu)建了能表達(dá)ACTA1-GFP融合蛋白的重組質(zhì)粒，該重組質(zhì)粒的部分結(jié)構(gòu)如下圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是注：F1和F2表示上游引物，R1和R2表示下游引物A.RNA聚合酶與啟動(dòng)子結(jié)合，調(diào)控ACTA1基因和GFP基因的表達(dá)B.僅用F2和R1一對引物，即可確定ACTA1基因插入方向是否正確C.ACTA1基因轉(zhuǎn)錄的模板鏈?zhǔn)莂鏈，引物F1與a鏈的部分序列相同D.若用引物F2和R2進(jìn)行PCR，能更好地區(qū)分ACTA1-GFP基因純合子和雜合子二、多選題15．科研人員構(gòu)建了可表達(dá)J-V5融合蛋白的重組質(zhì)粒并進(jìn)行了檢測，其中V5編碼序列表達(dá)一種標(biāo)簽短肽V5。圖乙表示重組質(zhì)粒正確表達(dá)后用抗J蛋白抗體和抗V5抗體分別檢測相應(yīng)蛋白的結(jié)果。下列說法正確的是A．若用PCR法確定J基因是否正確連接到質(zhì)粒中，應(yīng)選擇的引物組合為F1和R1B．若b鏈?zhǔn)荍基因轉(zhuǎn)錄的模板鏈，則可推知引物F1與圖甲中J基因a鏈相應(yīng)部分的序列相同C．若導(dǎo)入受體細(xì)胞的啟動(dòng)子發(fā)生甲基化修飾，則可以抑制DNA聚合酶對啟動(dòng)子的識別和結(jié)合D．圖乙條帶1表明細(xì)胞內(nèi)表達(dá)了J-V5融合蛋白，條帶2所檢出的蛋白不是由重組質(zhì)粒上的J基因表達(dá)的16.基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應(yīng)用發(fā)展迅速，如圖表示利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．若某基因是從人的細(xì)胞內(nèi)提取mRNA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄形成的，則該基因中不含啟動(dòng)子序列B．?dāng)U增目的基因時(shí)，利用耐高溫的DNA連接酶從引物a、b的3′﹣端進(jìn)行子鏈合成C．導(dǎo)入人血清白蛋白基因的綿羊受體細(xì)胞是乳腺細(xì)胞 D．利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法可將含有目的基因的重組質(zhì)粒整合到植物受體細(xì)胞的染色體DNA上17.天然玫瑰沒有生成藍(lán)色翠雀花素所需的相關(guān)基因，因此藍(lán)玫瑰被認(rèn)為是不可能培育成功的。科學(xué)家利用鏈霉菌的藍(lán)色翠雀花素合成酶基因(idgS)及其激活基因(sfp)構(gòu)建基因表達(dá)載體（如圖，PmeI、BamHI、SpeI、SacI為不同限制酶），通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法導(dǎo)入天然玫瑰從而成功培育出了藍(lán)玫瑰。下列敘述不正確的是A.sfp和idgS基因表達(dá)時(shí)轉(zhuǎn)錄的模板鏈不是T-DNA的同一條B.將sfp基因和idgS基因插入Ti質(zhì)粒時(shí)使用的限制酶分別是PmeI、BamHI和SpeI、BamHIC.可用抗原一抗體雜交法檢測idgS基因是否成功表達(dá)出了藍(lán)色翠雀花素D.農(nóng)桿菌在自然條件下可侵染單子葉植物和裸子植物，而對大多數(shù)雙子葉植物沒有侵染能力18.自然界中很少出現(xiàn)藍(lán)色的花，天然藍(lán)色花產(chǎn)生的主要原因是花瓣細(xì)胞液泡中花青素在堿性條件下顯藍(lán)色。我國科學(xué)家利用鏈霉菌的靛藍(lán)合成酶基因（idgS）及其激活基因（sfp）構(gòu)建基因表達(dá)載體（如下圖，PmeI、BamHI、SpeI、SacI為不同限制酶），通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法導(dǎo)入白玫瑰中，在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中形成穩(wěn)定顯色的靛藍(lán)。下列說法不正確的是（）A.上述獲得藍(lán)色玫瑰的方案中需轉(zhuǎn)入能調(diào)控液泡pH的基因B.將sfp基因插入Ti質(zhì)粒時(shí)使用的限制酶是PmeI和BamHIC.sfp和idgS基因表達(dá)時(shí)各以T-DNA的兩條鏈為模板進(jìn)行轉(zhuǎn)錄D.農(nóng)桿菌可將Ti質(zhì)粒上T-DNA整合到白玫瑰細(xì)胞質(zhì)基因組中防止基因擴(kuò)散19.科學(xué)家將鼠抗人大腸癌單克隆抗體基因（ND-1）與酵母胞嘧啶脫氨酶基因（CD）融合，在大腸桿菌中成功地表達(dá)了單鏈抗體與酶的融合蛋白，這類蛋白的療法稱為由抗體介導(dǎo)的酶解前藥療法（ADEPT）。ND-1—CD融合基因的構(gòu)建方法如圖所示。下列有關(guān)敘述合理的是（）A.圖中兩條雜交鏈的獲得至少需要經(jīng)過2次擴(kuò)增循環(huán)B.圖中雜交鏈延伸生成ND-1——CD融合基因的過程應(yīng)不用加入引物C.獲得的融合基因在構(gòu)建好基因表達(dá)載體后可直接被正常狀態(tài)的大腸桿菌吸收D.該融合蛋白應(yīng)是利用抗體部分特異性的識別人大腸癌細(xì)胞并將酶帶到靶部位三、非選題20.科研團(tuán)隊(duì)通過轉(zhuǎn)基因獲得了一種大腸桿菌工程菌，成為監(jiān)測殘留在生物組織或環(huán)境中的四環(huán)素水平的“報(bào)警器”，其監(jiān)測原理如圖1所示，天然大腸桿菌不具備圖1中所示基因。啟動(dòng)子有利于RNA聚合酶識別并啟動(dòng)特定基因的轉(zhuǎn)錄，CFP蛋白可在一定條件下發(fā)出熒光。（1）在上述研究中，必須導(dǎo)入天然大腸桿菌的目的基因有__________（填寫編號）。①TetR基因②GFP基因③四環(huán)素合成相關(guān)基因④RNA聚合酶基因（2）據(jù)圖1，當(dāng)環(huán)境中不含四環(huán)素時(shí)，該大腸桿菌工程菌__________（填“能發(fā)出”或“不發(fā)出”）熒光。試概述該種四環(huán)素檢測方法的原理__________。（3）圖2表示2個(gè)DNA片段、質(zhì)粒及其上的限制性內(nèi)切核酸酶的識別序列的分布情況；其中質(zhì)粒上的Ampr代表青霉素抗性基因。下表為相關(guān)限制性內(nèi)切核酸酶的識別序列與切割位點(diǎn)。限制酶EcoRIXbaISpeIBamHI識別序列及切割位點(diǎn)5'-G↓AATFC-3'3'-CTTAA↑G-5'5'-T↓CTAGA-3'3'-AGATC↑T-5'5'-A↓CTAGT-3'3'-TGATC↑A-5'5'-G↓GATCC-3'3'-CCTAG↑G-5'若要拼接DNA片段1和2，結(jié)合圖2和表中信息編號①②③④拼接位點(diǎn)處的堿基序列5'-TCTAGA-3'3'-AGATCT-5'5'-TCTAGT-3'3'-AGATCA-5'5'-ACTAGA-3'3'-TGATCT-5'5'-ACTAGT-3'3'-TGATCA-5'，在特定工具酶作用下能成功拼接的位點(diǎn)處堿基序列為__________（填寫編號）。（4）為提高對環(huán)境中四環(huán)素水平監(jiān)測的有效性，研究人員將GFP的第65位絲氨酸突變成蘇氨酸后，增加了綠色熒光穩(wěn)定性和強(qiáng)度。該項(xiàng)技術(shù)屬于__________（填寫編號）。①基因的定點(diǎn)突變②基因的定向進(jìn)化③細(xì)胞工程④蛋白質(zhì)工程21.某育種小組利用普通水稻培育抗鹽堿的“海水稻”，其過程如下：①利用PCR定點(diǎn)突變技術(shù)（通過設(shè)計(jì)含有非特異性堿基配對的引物，再通過PCR將突變位點(diǎn)引入產(chǎn)物中，過程如圖1）向抗鹽堿基因中插入一小段堿基序列，獲得抗鹽堿能力更強(qiáng)的突變基因；②將目的基因?qū)胨炯?xì)胞、培育海水稻（過程如圖2）?；卮鹣铝袉栴}：（1）圖1中引物2與3___________（填“相同”或“不相同”），合成的DNA分子經(jīng)混合、變性、雜交后選取通過引物2和3延伸形成的兩條鏈雜交在一起的片段，它們能雜交在一起的原因是______；該片段在___________酶的作用下延伸形成一個(gè)完整的DNA片段，該酶需要___________激活。最后利用引物___________進(jìn)行PCR擴(kuò)增得到大量含有突變位點(diǎn)的DNA片段。（2）圖2中在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)最好選用___________兩種限制酶切割目的基因，用兩種限制酶切割目的基因和質(zhì)粒的優(yōu)點(diǎn)是___________。欲從個(gè)體水平上檢測轉(zhuǎn)基因水稻是否成功，方法是______。22.番茄不耐寒，冬季容易凍壞。我國科研人員從擬南芥植物中提取了一種抗凍基因AtCOR15a，經(jīng)過一系列過程獲得轉(zhuǎn)基因抗凍的番茄新品種，操作流程如圖。請回答下列問題：（1）用PCR技術(shù)擴(kuò)增AtCOR15a基因時(shí)需要添加引物，引物的作用是_______。（2）如果要將AtCOR15a基因與質(zhì)粒構(gòu)建重組DNA分子，一般選用雙酶切法，據(jù)圖分析，選用限制酶______效果最佳，雙酶切法的優(yōu)點(diǎn)有________（答出兩點(diǎn)）。（3）當(dāng)②侵染番茄細(xì)胞后，利用_______將目的基因轉(zhuǎn)移到番茄細(xì)胞中，并且將整合到該細(xì)胞的_______。（4）為了提高AtCOR15a基因的表達(dá)能力，可將AtCOR15a基因與外源強(qiáng)啟動(dòng)子連接，如圖所示。（注：圖中①、②、③、④表示引物）利用PCR檢測連接是否成功，可選擇的引物組合是______（填字母），該P(yáng)CR反應(yīng)體系中需加入______酶。A.①+③B.①+④C.③+②D.③+④23.水稻雄性不育系在育種中具有重要的應(yīng)用價(jià)值。研究者試圖尋找更多的雄性不育基因。（1）研究者獲得一株雄性不育突變株S221，與純合可育植株雜交，后代表型及分離比為不育株：可育株=1∶1，表明S221不育性為_________性狀且受核內(nèi)_________對等位基因控制。（2）對S221的不育基因進(jìn)行精細(xì)定位，發(fā)現(xiàn)不育單株8號染色體的S基因上游插入一段DNA片段（簡稱M片段）。①研究者利用_________技術(shù)擴(kuò)增得到M片段和S基因，M片段、S基因分別用限制酶_________處理，在_________的作用下形成融合片段，構(gòu)建表達(dá)載體（如圖1），最終獲得轉(zhuǎn)基因株系1．相同方法獲得只插入S基因的轉(zhuǎn)基因株系2．②觀察并比較水稻花穗、花藥和花粉粒的發(fā)育情況，發(fā)現(xiàn)與野生型植株相比，株系1的花穗變小、花藥變短、無成熟花粉粒，株系2無明顯差異。本實(shí)驗(yàn)的目的是_________。（3）為了研究M片段的功能，研究者將一系列片段分別與Luc基因融合構(gòu)建表達(dá)載體導(dǎo)入水稻原生質(zhì)體，檢測Luc基因的表達(dá)水平，操作及結(jié)果見圖2．圖2結(jié)果表明_________。（4）進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，不育株中S基因編碼的蛋白參與花藥絨氈層細(xì)胞中凋亡抑制基因的表達(dá)調(diào)控。結(jié)合本研究，推測突變株S221雄性不育的機(jī)理。_________24.番茄不耐寒，冬季容易凍壞。我國科研人員從擬南芥植物中提取了一種抗凍基因AtCOR15a，經(jīng)過一系列過程獲得轉(zhuǎn)基因抗凍的番茄新品種，操作流程如圖。請回答下列問題：（1）用PCR技術(shù)擴(kuò)增AtCOR15a基因時(shí)需要添加引物，引物的作用是_______。（2）如果要將AtCOR15a基因與質(zhì)粒構(gòu)建重組DNA分子，一般選用雙酶切法，據(jù)圖分析，選用限制酶______效果最佳，雙酶切法的優(yōu)點(diǎn)有________（答出兩點(diǎn)）。（3）當(dāng)②侵染番茄細(xì)胞后，利用_______將目的基因轉(zhuǎn)移到番茄細(xì)胞中，并且將整合到該細(xì)胞的_______。（4）為了提高AtCOR15a基因的表達(dá)能力，可將AtCOR15a基因與外源強(qiáng)啟動(dòng)子連接，如圖所示。（注：圖中①、②、③、④表示引物）利用PCR檢測連接是否成功，可選擇的引物組合是______（填字母），該P(yáng)CR反應(yīng)體系中需加入______酶。A.①+③B.①+④C.③+②D.③+④參考答案1-5：BACCA6-10:BADDC11-14:BCBC15.BD16.BCD17.BCD18.ABD19.ABD20.【答案】（1）①②（2）①.不發(fā)出②.當(dāng)環(huán)境中沒有四環(huán)素時(shí)，由于tetR基因的表達(dá)產(chǎn)物tetR蛋白對啟動(dòng)子2的抑制作用，使得GFP基因不能表達(dá)出綠色熒光蛋白（GFP蛋白）而不發(fā)光，當(dāng)環(huán)境中存在四環(huán)素時(shí)，可以解除這種抑制作用，綠色熒光蛋白得以表達(dá)并發(fā)光，（3）②③（4）①④21.【答案】（1）①.不相同②.2和3中分別含有引起基因定點(diǎn)突變的一小段堿基序列，這兩段序列的堿基能互補(bǔ)配對③.耐高溫的DNA聚合（TaqDNA聚合）④.Mg2+⑤.1和4（2）①.HindIII和SalI②.可以防止目的基因自連和質(zhì)粒自連；防止目的基因與質(zhì)粒反向連接③.用濃度較高的鹽堿水澆灌轉(zhuǎn)基因水稻幼苗，觀察水稻的生長情況22.【答案】（1）使DNA聚合酶能夠從引物的3’端開始復(fù)制（2）①.HindⅢ和EcoRⅠ②.防止目的基因和質(zhì)粒自身環(huán)化，防止目的基因和質(zhì)粒反向連接（3）①.農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法②.染色體DNA上（4）①.A②.Taq（耐高溫DNA聚合）23.【答案】（1）①.顯性②.1（2）①.PCR②.BamHI、BglII③.DNA連接酶④.水稻雄性不育是否由M片段插入S基因上游導(dǎo)致（3）M片段可以啟動(dòng)并且與S基因啟動(dòng)子共同促進(jìn)Luc基因表達(dá)（4）在雄性不育突變株中，M片段插入到S基因的上游，啟動(dòng)并增強(qiáng)S基因表達(dá)，從而導(dǎo)致花藥絨氈層細(xì)胞中凋亡抑制基因表達(dá)下調(diào)，凋亡細(xì)胞數(shù)量增加，花穗變小、花藥變短、無成熟花粉粒，進(jìn)而導(dǎo)致雄性不育24.【答案】（1）使DNA聚合酶能夠從引物的3’端開始復(fù)制（2）①.HindⅢ和EcoRⅠ②.防止目的基因和質(zhì)粒自身環(huán)化，防止目的基因和質(zhì)粒反向連接（3）①.農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法②.染色體DNA上（4）①.A②.Taq（耐高溫DNA聚合）A.用胰蛋白酶將細(xì)胞間的蛋白質(zhì)消化后可獲得分散的胚胎干細(xì)胞B.胚胎干細(xì)胞和誘導(dǎo)出的各種細(xì)胞都需在CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)C.細(xì)胞a和細(xì)胞b內(nèi)的核基因不同，所以全能性高低不同D.為獲得更多的囊胚，可給小鼠注射雄性激素以促進(jìn)雄鼠產(chǎn)生更多的精子三、非選題20.細(xì)胞工程是細(xì)胞生物學(xué)理論與現(xiàn)代工程技術(shù)相結(jié)合，綜合應(yīng)用于農(nóng)業(yè)、醫(yī)藥及食品等領(lǐng)域的科學(xué)技術(shù)。細(xì)胞工程技術(shù)的迅速發(fā)展，越來越深遠(yuǎn)地影響著人們的生活。（1）甘蔗是喜溫作物，甘蔗新臺(tái)糖22號（ROC22）具有高產(chǎn)高糖等優(yōu)良特性但耐寒性差，桂糖28號（GT28）是耐寒品種，用ROC22和GT28進(jìn)行體細(xì)胞融合，可望獲得耐寒性更強(qiáng)且農(nóng)藝性狀優(yōu)良的雜交后代。下圖為培育過程示意圖，請分析回答：①運(yùn)用體細(xì)胞融合技術(shù)培育出ROC22和GT28的雜交后代過程中，所運(yùn)用的生物學(xué)原理有___________（2分）。②過程a所需的酶是____________，細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是___________。③過程d所用培養(yǎng)基中，含有植物激素X和Y，逐漸改變培養(yǎng)基中這兩種植物激素的濃度比，未分化細(xì)胞群的變化情況如圖所示。植物激素X是____________。（2）我國中科院的研究團(tuán)隊(duì)利用細(xì)胞工程和基因編輯技術(shù)，成功培育出世界上首例只有雙母親來源的孤雌小鼠和雙父親來源的孤雄小鼠，實(shí)現(xiàn)了哺乳動(dòng)物的同性繁殖。實(shí)驗(yàn)流程如下圖所示，請分析回答：①體外培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞時(shí)，首先應(yīng)保證其處于___________的環(huán)境，除了適宜的營養(yǎng)物質(zhì)、溫度等條件外，還需要控制的氣體條件是___________。②要培育孤雄小鼠需要將精子和具卵細(xì)胞細(xì)胞核特點(diǎn)的ahESC同時(shí)注入去核的卵母細(xì)胞形成重構(gòu)胚，此卵母細(xì)胞應(yīng)在體外培養(yǎng)到___________期，得到的重構(gòu)胚通常需要發(fā)育到___________階段才能進(jìn)行胚胎移植。③利用____________的方法對乙進(jìn)行處理可以得到多只孤雄小鼠，請從遺傳物質(zhì)角度分析，利用這些孤雄小鼠作為實(shí)驗(yàn)材料進(jìn)行醫(yī)學(xué)研究的優(yōu)點(diǎn)是___________。21.野生黑芥細(xì)胞核具有黑腐病抗性基因，花椰菜細(xì)胞質(zhì)具有高產(chǎn)基因。某研究小組用野生黑芥、花椰菜兩種植物細(xì)胞進(jìn)行體細(xì)胞雜交，以獲得高產(chǎn)抗黑腐病的雜種植株，流程如圖1。圖1回答下列問題：（1）過程①所需的酶有____________。實(shí)驗(yàn)中分別用不同植物幼苗的根和葉獲取植物原生質(zhì)體，即用不同顏