TNAIA 0337-2024 葡萄和葡萄酒中15種殺蟲劑的測定 高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法

ICSCCSC151

T/NAIA團 體 標(biāo) 準(zhǔn)T/NAIA0337—2024葡萄和葡萄酒中15種殺蟲劑的測定高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法DeterminationofFifteenInsecticideResiduesinGrapeandWineHPLC-MS/MS2024-11-25發(fā)布 2024-12-01實施寧夏化學(xué)分析測試協(xié)會 發(fā)布T/NAIA0337—2024T/NAIA0337—2024II前 言GB/T1.1-20201編寫。本文件由寧夏化學(xué)分析測試協(xié)會提出并歸口。（國家市場監(jiān)督管理總局重點實驗室（及葡萄酒質(zhì)量安全））、寧夏化學(xué)分析測試協(xié)會。本文件主要起草人：湯麗華、朱燕燕、呂毅、郭陽、劉競擇、楊建興、吳明、馬桂娟、張小飛。PAGEPAGE1葡萄和葡萄酒中15種殺蟲劑的測定高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法范圍本文件規(guī)定了葡萄和葡萄酒中15種殺蟲劑（吡蟲啉、敵百蟲、敵敵畏、苯線磷、除蟲脲、丙溴磷、吡丙醚、阿維菌素、啶蟲脒、毒死蜱、對硫磷、氟胺氰菊酯、氟蟲脲、環(huán)蟲酰肼、甲拌磷）的高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜檢測方法。本文件適用于葡萄和葡萄酒中15種殺蟲劑的測定和確證。規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和實驗方法GB2763食品中農(nóng)藥最大殘留限量術(shù)語和定義本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。原理試樣經(jīng)乙腈超聲提取，提取液經(jīng)分散固相萃取凈化，反相色譜柱分離，液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀測定，外標(biāo)法定量。試劑和材料本方法所用的試劑，除另有規(guī)定外，均為分析純，水為GB/T6682規(guī)定的一級水。試劑乙腈：色譜純。甲醇：色譜純。甲酸：色譜純。甲酸銨：色譜純。無水硫酸鎂（MgSO4）：分析純。氯化鈉（NaCl）：分析純。石墨化碳黑（GCB）：100μm。無水硫酸鎂（MgSO4）：50μm。5.1.90.02%甲酸溶液：取甲酸（5.1.3）0.2mL1000mL，搖勻。5.1.10甲酸銨-甲酸溶液（2mmo/L0.126g0.02%甲酸溶液（5.1.9溶解并稀釋T/NAIA0337—2024T/NAIA0337—2024PAGEPAGE2至1000mL，搖勻。標(biāo)準(zhǔn)品吡蟲啉（純度：≥95%，CAS：105827-78-9）、敵百蟲（CAS：52-68-6）、敵敵畏（CAS：62-73-7）、苯線磷（CAS22224-92-6）、除蟲脲（CAS35367-38-5）、丙溴磷（CAS：41198-08-7）、吡丙醚（CAS：95737-68-1）、阿維菌素（CAS：71751-41-2）、啶蟲脒（CAS：160430-64-8）、毒死蜱（CAS：2921-88-2）、對硫磷（CAS：56-38-2）、氟胺氰菊酯（CAS：298-02-2），純度均≥95%，濃度為1.0mg/mL。標(biāo)準(zhǔn)溶液配制混合標(biāo)準(zhǔn)儲備液（10.0μg/mL）：1.0mg/mL15100μL，用乙腈（5.1.1）10.0mL，于-18℃1個月?；|(zhì)混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液：分別準(zhǔn)確吸取混合標(biāo)準(zhǔn)儲備液（5.3.1）1.0ng/mL~500.0ng/mL的標(biāo)準(zhǔn)工作液，臨用現(xiàn)配。儀器和設(shè)備液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀：配備電噴霧離子源。0.1mg0.01g。渦旋混合器。9000r/min。超聲波發(fā)生器。10000r/min。0.22μm，或相當(dāng)者。分析步驟試樣制備葡萄樣品樣品按照GB2763附錄A中的規(guī)定進行制備。將葡萄樣品混勻均一化，制備好的試樣均分成2份，放入聚乙烯瓶中，密封并標(biāo)明標(biāo)記，于-18℃冷凍保存。葡萄酒樣品取代表性樣品搖勻分裝，密閉常溫或冷藏保存。測定步驟葡萄樣品2g（50mL15mL3gMgSO4（5.1.5）2gNaCl（5.1.6），1min10min，8000r/min5min。移取上500mgMgSO4（5.1.8）50mgGCB（5.1.7）5min，8000r/min5min0.22μmHPLC-MS/MS分析。葡萄酒樣品10g（0.01g50mL具塞離心管中，加入15mL乙腈（5.1.1）、3gMgSO4（5.1.5）2gNaCl（5.1.6），1min10min，8000r/min5min。移取上500mgMgSO4（5.1.8）50mgGCB（5.1.7）5min，8000r/min5min0.22μmHPLC-MS/MS分析。儀器參考條件液相色譜參考條件a）色譜柱：C18，2.1mm×100mm，粒徑3.5μm或性能相當(dāng)者。b）柱溫：30℃。c）流動相：A：甲酸銨-甲酸溶液（2mmol/L），B：甲醇；梯度洗脫見表1。d）流速：0.3mL/min。e）進樣量：2μL。表1 流動相及梯度洗脫條件時間/min流速/（mL/min）流動相A/%流動相B/%0.000.39553.000.39553.010.3505010.000.3505016.000.3307024.000.359524.010.395526.000.3955質(zhì)譜參考條件a）離子源：電噴霧離子源（ESI）。b）掃描方式：正離子掃描。c）檢測方式：多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）d）鞘氣溫度：350℃。e）鞘氣流速：11.0L/min。f）霧化器壓力：45psi。g）噴嘴電壓：500V。h）毛細(xì)管電壓：3000V。i）定性離子對、定量離子對、碎裂電壓、碰撞能量等參數(shù)參見附錄A。定量測定7.3.17.3.2間有峰出現(xiàn)，則對其進行確證。15種殺蟲劑標(biāo)準(zhǔn)品的多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）B，采用基質(zhì)溶液校準(zhǔn)曲線外標(biāo)法定量。定性測定許偏差之內(nèi)（2），則可判定樣品中存在對應(yīng)的被測物。表2 定性確證時相對離子豐度的最大允許偏差相對離子豐度＞50%＞20%至50%＞10%至20%≤10%允許的相對偏差±20%±25%±30%±50%空白試驗除不加試樣外，均按上述步驟進行。分析結(jié)果的表述試樣中15種殺蟲劑的含量按式（1）進行計算：X cV 1000式中：

m 1000

(1)X ──試樣中各種化合物含量，單位為微克每千克（μg/kg）；c ──由標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出的試樣溶液濃度，單位為納克每毫升（ng/mL）；V ──試樣的最后定容體積，單位為毫升（mL）；m ──試樣質(zhì)量，單位為克（g）。注：測定結(jié)果用平行測定的算術(shù)平均值表示，保留兩位有效數(shù)字。精密度在重復(fù)性測定條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的絕對差值不得超過算術(shù)平均值的10%。其他2g15mL時，吡蟲啉、敵百蟲、敵敵畏、苯線磷、除蟲脲、丙溴磷、4.0μg/kg8.0μg/kg10g15mL1.0μg/kg3.0μg/kg。附錄A(資料性15種殺蟲劑的質(zhì)譜參數(shù)表A.1 15種殺蟲劑的質(zhì)譜參數(shù)序號被測物名稱母離子(m/z)子離子(m/z)碎裂電壓(v)碰撞能量(ev)1吡蟲啉256.1209*,1758010,102敵百蟲257221*,10912010,253敵敵畏221145*,12712010,254苯線磷304.15217*,20214020,365除蟲脲311158*,1418010,156丙溴磷373303*,1288015,537吡丙醚322.05227*,9612010,158阿維菌素895.5751.3*,449.220045,509啶蟲脒223126*,568015,1510毒死蜱350198*,9710015,3511對硫磷292264*,2361201