試劑標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（SOP）-b2MG

文件號(hào)：AA第1版頁(yè)數(shù)PAGE3共4頁(yè)試劑標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程項(xiàng)目?2微球蛋白BMG方法膠乳增強(qiáng)比濁法儀器H7600系列編寫(xiě)人日期審核人日期批準(zhǔn)人日期文件分發(fā)部門(mén)和/或個(gè)人本規(guī)程自年月日起實(shí)施 目錄測(cè)原理標(biāo)本采集與處理2.1受檢者的準(zhǔn)備2.2靜脈采血2.3抗凝劑2.4標(biāo)本處理3．試劑3.1試劑3.2校準(zhǔn)血清3.3試劑與校準(zhǔn)血清的穩(wěn)定性4．儀器5．操作6．計(jì)算7．操作性能7.1精密度7.2準(zhǔn)確度7.3靈敏度7.4可報(bào)告范圍7.5特異性7.6干擾8．參考值9．臨床意義附錄A:參數(shù)1.檢測(cè)原理血清或尿液中的β2-微球蛋白與試劑內(nèi)的β2-微球蛋白抗體發(fā)生抗體抗原反應(yīng)，產(chǎn)生乳膠凝集粒子，產(chǎn)生混濁。根據(jù)對(duì)濁度程度變化的測(cè)定，求出β2-微球蛋白濃度。標(biāo)本采集與處理2.1受檢者的準(zhǔn)備：病人標(biāo)本為2隨機(jī)收集尿液或血清。體檢對(duì)象抽血前應(yīng)有兩周的的正常狀況記錄。注意有無(wú)應(yīng)用影響測(cè)試項(xiàng)目的藥物。2.2標(biāo)本收集：病人標(biāo)本為24小時(shí)之內(nèi)的尿液或隨機(jī)收集尿液，尿液中避免其他物質(zhì)，如：蛋白、血液等物質(zhì)的干擾。病人空腹12h，不飲酒24h后采集血清。體檢對(duì)象抽血前應(yīng)有兩周的的正常狀況記錄。注意有無(wú)應(yīng)用影響測(cè)試項(xiàng)目的藥物。2.3抗凝劑：最好使用血清，或者使用EDTA作為抗凝劑。2.4標(biāo)本處理：標(biāo)本為24小時(shí)之內(nèi)的尿液或隨機(jī)收集。尿液加入K2HPO4，調(diào)節(jié)PH=7.8可穩(wěn)定2天。標(biāo)本可在2-8C下儲(chǔ)存2天或在-20C保存2個(gè)月（避免反復(fù)凍融）。化驗(yàn)前將尿液離心分離。3．試劑3.1試劑：本科使用上海華臣生物技術(shù)有限公司β2-MG試劑盒，為液體雙試劑，各組分如下試劑包裝規(guī)格見(jiàn)試劑說(shuō)明書(shū)。試劑1（R1）：氯化銨緩沖液pH=8.2200mmol/疊氮鈉0.95g/L試劑2（R2）：β2-微球蛋白抗體0.17g/L疊氮鈉0.95g/L3.2：校準(zhǔn)血清使用上海華臣生物技術(shù)有限公司提供的β2-MG校準(zhǔn)液。其中包含BMG的定值。校準(zhǔn)頻次：全點(diǎn)定標(biāo)：試劑換批號(hào)使用時(shí)或質(zhì)控結(jié)果超過(guò)規(guī)定的2SD范圍，需要全點(diǎn)定標(biāo)。3.3試劑與校準(zhǔn)血清的穩(wěn)定性：原包裝試劑儲(chǔ)存在2-8℃至標(biāo)簽所示失效日期。試劑開(kāi)瓶后，在儀器中至少可保存20天。試劑儲(chǔ)存在18-22℃穩(wěn)定15天，試劑應(yīng)避免污染。試劑R1顏色為無(wú)色，試劑R2顏色為無(wú)色至淺黃色，當(dāng)試劑變色，按照試劑失效處理。RF校準(zhǔn)液儲(chǔ)存在2-8℃至標(biāo)簽所示失效日期。復(fù)溶后，在-20℃下將瓶蓋擰緊保存，標(biāo)準(zhǔn)品可以?xún)?chǔ)存長(zhǎng)達(dá)1個(gè)月的時(shí)間。4．儀器H7600系列型號(hào)儀器。5．操作樣品為血清。本法為免疫比濁法。參數(shù)見(jiàn)后附，附錄A。試劑參數(shù)設(shè)置、定標(biāo)操作以及樣本檢測(cè)常規(guī)操作，見(jiàn)儀器操作規(guī)程。6．計(jì)算定標(biāo)：采用多點(diǎn)定標(biāo)方式，用各濃度水平標(biāo)準(zhǔn)品吸光度值與對(duì)應(yīng)的濃度做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。計(jì)算：對(duì)于自動(dòng)生化儀，曲線(xiàn)擬合方式選擇SPLINE或log-logit4P法。樣本含量由樣本吸光度值△A在標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)上對(duì)應(yīng)計(jì)算得到。7．操作性能7.1精密度：批內(nèi)CV<7%，批間CV<9%。7.2準(zhǔn)確度：測(cè)量結(jié)果在上海華臣生物質(zhì)控血清靶值±2SD范圍內(nèi)。不同方法學(xué)試劑的質(zhì)控結(jié)果之間會(huì)存在差異，使用時(shí)請(qǐng)確保質(zhì)控選擇與試劑的方法學(xué)保持一致。7.3靈敏度：當(dāng)BMG濃度為1.59mg/L，吸光度約為0.29～0.31。7.4可報(bào)告范圍：樣本與試劑用量之比為3:240:60時(shí)，測(cè)定上限為20.0mg/L。7.5特異性：測(cè)量值在給定值的90%～110％范圍內(nèi)。7.6干擾：內(nèi)源性干擾物溶血為800mg/ml、脂血1000mg/ml、黃疸30mg/ml、抗壞血酸300mg/ml對(duì)測(cè)試結(jié)果無(wú)明顯影響。8．參考值隨機(jī)尿液為：0.1～0.3mg/L；24小時(shí)尿液為：0.03-0.37mg；血清為1.0-3.0mg/L，9．臨床意義b2-微球蛋白（BMG）是一種幾乎在所有的體細(xì)胞的細(xì)胞膜上都存在的低分子量（11000道爾頓）的蛋白質(zhì)。游離的2--微球蛋白是細(xì)胞裂解的產(chǎn)物。它是由腎小球分泌的，然后被腎小管細(xì)胞吸收和分解。腎小球過(guò)濾