T-SFLA 012-2024 中國(guó)農(nóng)墾乳制品產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn) 低溫巴氏殺菌乳

ICS67.100.10CCSX16團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)Low-temperaturepasteurizedm中國(guó)農(nóng)墾經(jīng)貿(mào)流通協(xié)會(huì)發(fā)布T/SFLA012—2024本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件由中國(guó)農(nóng)墾乳業(yè)聯(lián)盟提出。本文件由中國(guó)農(nóng)墾經(jīng)貿(mào)流通協(xié)會(huì)歸口。本文件起草單位：光明乳業(yè)股份有限公司、北京三元食品股份有限公司、天津海河乳品有限公司、中墾牧乳業(yè)（集團(tuán)）股份有限公司、廣東燕塘乳業(yè)股份有限公司、新疆天潤(rùn)生物科技股份有限公司、廣州風(fēng)行乳業(yè)股份有限公司、遼寧越秀輝山控股股份有限公司、中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)信息研究所、上海韜林機(jī)械有限公司、上海數(shù)郜機(jī)電有限公司。本文件主要起草人：陳歷俊、劉振民、鄒旸、胡剛、馮立科、尤宏、李海、陳娜、馮曉、張國(guó)鈺、臣。T/SFLA012—2024低溫巴氏殺菌乳本文件規(guī)定了低溫巴氏殺菌乳的術(shù)語(yǔ)和定義、原料要求、生產(chǎn)工藝、產(chǎn)品質(zhì)量、產(chǎn)品標(biāo)簽、貯運(yùn)和銷(xiāo)售。本文件適用于低溫巴氏殺菌乳及其生產(chǎn)加工過(guò)程。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB5009.5食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中蛋白質(zhì)的測(cè)定GB5009.6食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中脂肪的測(cè)定GB5009.299食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中乳鐵蛋白的測(cè)定GB19645食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)巴氏殺菌乳GB31605食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品冷鏈物流衛(wèi)生規(guī)范NY/T3799生乳及其制品中堿性磷酸酶活性的測(cè)定發(fā)光法T/SFLA001中國(guó)農(nóng)墾乳業(yè)聯(lián)盟產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)生鮮乳T(mén)/SFLA006中國(guó)農(nóng)墾乳業(yè)聯(lián)盟標(biāo)桿牧場(chǎng)通用要求奶牛T/SFLA008中國(guó)農(nóng)墾高寒生態(tài)牧場(chǎng)通用要求奶牛3術(shù)語(yǔ)和定義下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。3.1低溫巴氏殺菌乳low-temperaturepasteurizedmilk僅以生牛乳為原料，經(jīng)72℃~76℃、保持15s～20s殺菌等工序制得的液體產(chǎn)品。4原料要求生乳應(yīng)來(lái)源于符合T/SFLA006或T/SFLA008要求的牧場(chǎng)。生乳應(yīng)符合T/SFLA001的要求。5生產(chǎn)工藝應(yīng)符合附錄A的規(guī)定。6產(chǎn)品質(zhì)量T/SFLA012—20246.1感官要求感官要求應(yīng)符合GB19645的規(guī)定，具有低溫巴氏殺菌乳典型的滋味和氣味。6.2理化指標(biāo)理化指標(biāo)應(yīng)符合GB19645的規(guī)定，其中脂肪、蛋白質(zhì)、堿性磷酸酶、乳鐵蛋白、免疫球蛋白、乳過(guò)氧化物酶應(yīng)符合表1的規(guī)定。表1理化指標(biāo)項(xiàng)目指標(biāo)檢測(cè)方法c脂肪a/（g/100g）≥3.4GB5009.6蛋白質(zhì)/（g/100g）≥3.0GB5009.5堿性磷酸酶bNY/T3799乳鐵蛋白/（mg/L）≥GB5009.299免疫球蛋白/（mg/L）≥附錄B中B.2乳過(guò)氧化物酶/（U/L）≥附錄B中B.3a僅適用于全脂產(chǎn)品。b應(yīng)在加工過(guò)程在線采樣并測(cè)定。c可以使用其他經(jīng)有效驗(yàn)證的檢驗(yàn)方法進(jìn)行檢驗(yàn)。6.3污染物限量污染物限量應(yīng)符合GB2762的規(guī)定。6.4真菌毒素限量真菌毒素限量應(yīng)符合GB2761的規(guī)定。6.5微生物限量微生物限量應(yīng)符合GB19645的規(guī)定。7產(chǎn)品標(biāo)簽7.2可在標(biāo)簽上標(biāo)示“低溫巴氏殺菌乳/奶”、“低溫鮮牛乳/奶”。8貯運(yùn)和銷(xiāo)售T/SFLA012—2024A.1工藝流程A.1.1基本工藝流程包括以下步驟凈乳灌裝生乳驗(yàn)收凈乳灌裝生乳驗(yàn)收冷藏冷藏標(biāo)準(zhǔn)化一均質(zhì)冷卻--巴氏殺菌圖1基本工藝流程圖A.1.2企業(yè)可以根據(jù)產(chǎn)品類型、生產(chǎn)設(shè)備、生產(chǎn)場(chǎng)所等實(shí)際情況調(diào)整工藝順序或適當(dāng)增減工藝環(huán)節(jié)，以提升產(chǎn)品品質(zhì)、實(shí)現(xiàn)節(jié)能減排、提高生產(chǎn)效率等。A.2基本工藝A.2.1凈乳利用物理方法除去生乳中肉眼可見(jiàn)雜質(zhì)?？墒褂眠^(guò)濾設(shè)備、凈乳機(jī)或其它分離設(shè)備。A.2.2標(biāo)準(zhǔn)化通過(guò)物理方法對(duì)乳脂肪、乳蛋白等成分含量進(jìn)行適度改善與校正，實(shí)現(xiàn)不同批次產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定的過(guò)程。標(biāo)準(zhǔn)化一般可包括離心、分離等，根據(jù)產(chǎn)品需要可選用其中一種或多種組合。在滿足工藝要求的前提下，標(biāo)準(zhǔn)化應(yīng)優(yōu)先選用節(jié)能降耗、低碳環(huán)保的方法。A.2.3均質(zhì)對(duì)乳脂肪球進(jìn)行機(jī)械處理，使其分散成較小的脂肪球均勻地分散在乳中。生乳經(jīng)均質(zhì)機(jī)處理時(shí)，溫度一般為40℃~65℃,均質(zhì)壓力一般為10MPa~25MPa。A.2.4巴氏殺菌使用殺菌設(shè)備對(duì)生乳進(jìn)行加熱殺菌，應(yīng)采用72℃~76℃、保持15s～20s的低溫巴氏殺菌工藝?？稍诎褪蠚⒕に嚮A(chǔ)上增加其他物理除菌工藝以提高產(chǎn)品安全性。A.2.5冷卻為抑制微生物繁殖，生乳經(jīng)低溫巴氏殺菌后應(yīng)迅速冷卻至0℃~6℃。A.2.6灌裝對(duì)冷卻后的乳液進(jìn)行灌裝。A.2.7冷藏灌裝完成后的產(chǎn)品放入冷藏庫(kù)貯存。產(chǎn)品冷藏貯存溫度應(yīng)為0℃~6℃。A.3可選擇工藝T/SFLA012—2024A.3.1除菌一般采用微濾或離心工藝，去除生乳中的細(xì)菌、微粒、芽孢、體細(xì)胞等。微濾除菌一般選用微濾膜，孔徑一般不超過(guò)1.4μm。生乳通過(guò)微濾膜分離成脫脂乳和稀奶油兩部分，脫脂乳采用微濾除菌、稀奶油采用單獨(dú)殺菌，脫脂乳和稀奶油混合后進(jìn)行低溫巴氏殺菌。離心除菌一般將生乳預(yù)熱到40℃~60℃后進(jìn)行。A.3.2脫氣一般采用真空脫氣裝置來(lái)脫除生乳中細(xì)小分散氣體和溶解氧，去除異味。A.3.3濃縮一般采用閃蒸去除生乳中部分水分。通過(guò)調(diào)整閃蒸器的溫度和真空度等參數(shù)控制水分含量，溫度一般不超過(guò)70℃。A.4企業(yè)應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行危害分析與關(guān)鍵控制點(diǎn)（HACCP）體系。T/SFLA012—2024檢驗(yàn)方法B.1一般規(guī)定本標(biāo)準(zhǔn)所用試劑和水在沒(méi)有注明其他要求時(shí)，均指分析純?cè)噭┖虶B/T6682規(guī)定的三級(jí)水。實(shí)驗(yàn)中所用標(biāo)準(zhǔn)溶液、試劑和制品，在沒(méi)有注明其他要求時(shí)均按GB/T601、GB/T602、GB/T603的規(guī)定制備。實(shí)驗(yàn)中所用溶液在未注明用何種溶劑配制時(shí)，均指水溶液。B.2免疫球蛋白（IgG）的測(cè)定B.2.1試劑和材料實(shí)驗(yàn)室用水應(yīng)符合GB/T6682規(guī)定的二級(jí)水標(biāo)準(zhǔn)。B.2.1.1試劑無(wú)水磷酸氫二鈉（Na2HPO4）。磷酸二氫鉀（KH2PO4）。甘氨酸。鹽酸（HCl濃度≥36%。B.2.1.2試劑配制鹽酸溶液（6mol/L取500mL鹽酸加水稀釋至1L，混勻。pH=6.5，0.05mol/L磷酸鹽緩沖液：稱取無(wú)水磷酸氫二鈉5.6765g，磷酸二氫鉀4.6478g，加水定容至pH=2.5，0.05mol/L甘氨酸鹽酸緩沖液：稱取甘氨酸3.7535g，加800mL水溶解，再加入6mol/L鹽酸4.75mL，用水定容至1L，混勻。B.2.1.3標(biāo)準(zhǔn)品免疫球蛋白IgG標(biāo)準(zhǔn)品（純度≥95%）。B.2.1.4標(biāo)準(zhǔn)溶液配制IgG標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液：稱取免疫球蛋白IgG標(biāo)準(zhǔn)品10mg（精確至0.1mg加10mL水溶解，溶液濃度為1000μg/mL，放置4℃密封貯藏，保存期3個(gè)月。IgG標(biāo)準(zhǔn)工作液：吸取標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，用磷酸鹽緩沖液稀釋至IgG濃度為50μg/mL、100μg/mL、200μg/mL、300μg/mL、400μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液，現(xiàn)配現(xiàn)用。B.2.2儀器和設(shè)備高效液相色譜儀，帶紫外檢測(cè)器和梯度洗脫裝置；電子天平（感量0.1mg冷凍離心機(jī)，轉(zhuǎn)速≥10000r/min。B.2.3試樣處理吸取2.5mL牛奶樣品，置于10ml離心管中，加入2.5mL磷酸鹽緩沖液溶解稀釋，震蕩搖勻，在4℃、8000r/min條件下離心20min，吸取3mL上清液，置于另一10mL離心管中。用乙酸調(diào)節(jié)pH至4.6，使用磷酸鹽緩沖液定容至5mL，在4℃、8000r/min條件下離心20min，將上清液通過(guò)0.22μm濾膜過(guò)濾，收集濾液于進(jìn)樣瓶中，待高效液相色譜儀測(cè)定。B.2.4色譜條件T/SFLA012—2024色譜柱：Hi-TrapproteinGHP1mL親和柱。親和柱先用5倍柱體積的重蒸餾水或去離子水洗柱，再用10倍柱體積的流動(dòng)相A平衡柱，進(jìn)樣，按照洗脫程序進(jìn)行洗脫。流速：0.4mL/min。檢測(cè)器：紫外檢測(cè)器（UV），檢測(cè)波長(zhǎng)280nm。進(jìn)樣量：20μL。流動(dòng)相：A：pH=6.5，0.05mol/L磷酸鹽緩沖液，B：pH=2.5，0.05mol/L甘氨酸鹽酸緩沖液。時(shí)間（min）A（%）B（%）0.0004.5005.5000028.000B.2.5結(jié)果計(jì)算樣品中免疫球蛋白IgG含量按公式（1）計(jì)算：...................................式中：X——試樣中免疫球蛋白IgG的含量，單位為微克每毫升(μg/mL）；ρ——根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)工作曲線計(jì)算得到的試樣溶液中免疫球蛋白IgG的濃度，單位為微克每毫升V——試樣體積，單位為毫升（mLV1——試樣稀釋后體積，單位為毫升（mLV2——吸取上清液體積，單位為毫升（mLV3——定容液體積，單位為毫升（mL）；計(jì)算結(jié)果以重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的算術(shù)平均值表示，結(jié)果保留小數(shù)點(diǎn)后兩位有效數(shù)字。B.2.6精密度在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不得超過(guò)算術(shù)平均值的10%。B.3乳過(guò)氧化物酶（LPO）活性檢測(cè)試劑盒的測(cè)定B.3.1試劑和材料B.3.1.1乳過(guò)氧化物酶活性檢測(cè)試劑盒，2℃-8℃保存。B.3.1.2定性濾紙1#。B.3.1.3所用檢測(cè)試劑盒應(yīng)有廠家提供的合格質(zhì)控報(bào)告，方可使用。B.3.2儀器和設(shè)備B.3.2.1裝載450nm/630nm濾光片的酶標(biāo)儀。B.3.2.2渦旋儀。T/SFLA012—2024B.3.2.3離心管：50mL。B.3.2.4離心機(jī)(≥4000r/min）及離心管。B.3.2.5移液槍及槍頭：100μL-1000μL，10mL。B.3.2.6多通道移液器：30μL-300μL。B.3.2.7恒溫培養(yǎng)箱。B.3.2.8計(jì)時(shí)器。B.3.3試劑盒提供的材料與試劑組份名稱微孔板乳過(guò)氧化物酶標(biāo)準(zhǔn)品0.6mL，12000U/L，黑蓋，棕色玻璃瓶標(biāo)品稀釋液LPO底物液終止液12mL，黃色蓋樣本濃縮提取試劑A（20×)40mL樣本濃縮提取試劑B（20×)40mL帶帽離心管1.5mL蓋板膜2張B.3.4樣本提取液的配制用去離子水將樣本濃縮提取試劑A和試劑B按1：1：18體積比進(jìn)行稀釋，即1份樣本濃縮提取試劑A（20×)、試劑B（20×)加18份去離子水，用于樣本提取。該試劑配制好后2℃-8℃可保存12個(gè)月，無(wú)需現(xiàn)用現(xiàn)配。B.3.5樣本前處理B.3.5.1樣品稀釋試劑盒可直接檢測(cè)的乳過(guò)氧化物酶的活性范圍是0-600U/L，生乳中乳過(guò)氧化物酶的含量高，按1:20-1:80的比例稀釋，巴氏殺菌乳中依據(jù)巴氏殺菌工藝的不同，乳過(guò)氧化物酶的含量有差異，按1:1-1:10比例稀釋。用B.3.4樣本提取液進(jìn)行稀釋。稀釋倍數(shù)=2（提取稀釋倍數(shù)）×提取后樣品的稀釋倍數(shù)B.3.5.2樣品制備吸取5mL牛奶樣品，置于50mL離心管中，恢復(fù)至室溫，加入5mLB.3.4樣本提取液，振蕩混勻，4000r/min離心5min，用定性濾紙（1#濾紙）過(guò)濾上清液，收集濾液待測(cè)。B.3.6檢測(cè)步驟B.3.6.1配制標(biāo)準(zhǔn)曲線B.3.6.1.1將所需試劑從冷藏環(huán)境中取出，置于室溫（20℃-25℃)平衡1h以上。B.3.6.1.2標(biāo)準(zhǔn)曲線是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品連續(xù)稀釋5次后得出的數(shù)據(jù)繪制的，可通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品的LPO活性，建議對(duì)標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行平行檢測(cè)，標(biāo)準(zhǔn)品現(xiàn)配現(xiàn)用。B.3.6.1.3取6支帶帽的1.5mL離心管并分別加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液，其中1號(hào)管中加入570μL，其他5管均加入300μL。吸取30μL標(biāo)準(zhǔn)品（濃度為12000U/L置于1號(hào)管中與其中的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液混合，T/SFLA012—2024混合后濃度為600U/L。取1號(hào)管中的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液300μL，置于2號(hào)管中與其中的檢測(cè)稀釋液混合，混合后濃度為300U/L。繼續(xù)上述操作，配置150U/L，75U/L，37.5U/L的標(biāo)品。標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液的標(biāo)品濃度為0U/L。B.3.6.2檢測(cè)B.3.6.2.1建議對(duì)標(biāo)準(zhǔn)品及待檢樣品的檢測(cè)均進(jìn)行雙平行檢測(cè)。B.3.6.2.2編號(hào)：取相應(yīng)數(shù)量的微孔置于微孔架上，記錄標(biāo)準(zhǔn)品和樣品位置。B.3.6.2.3加標(biāo)準(zhǔn)品/樣本：向微孔中加入100μL標(biāo)準(zhǔn)品或樣品，注意更換槍頭。B.3.6.2.4顯色：向每個(gè)微孔中加入50μLLPO底物，在水平面輕輕振蕩混勻，加蓋蓋板膜，在37℃恒溫培養(yǎng)箱中避光孵育10min。B.3.6.2.5測(cè)定：向每個(gè)微孔中加入