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文檔簡介
肥西縣2024-2025學(xué)年高三(下)月考試卷(二)生物試題注意事項(xiàng):1.答題前,考生先將自己的姓名、準(zhǔn)考證號碼填寫清楚,將條形碼準(zhǔn)確粘貼在條形碼區(qū)域內(nèi)。2.答題時請按要求用筆。3.請按照題號順序在答題卡各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答,超出答題區(qū)域書寫的答案無效;在草稿紙、試卷上答題無效。4.作圖可先使用鉛筆畫出,確定后必須用黑色字跡的簽字筆描黑。5.保持卡面清潔,不要折暴、不要弄破、弄皺,不準(zhǔn)使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1.某小組為了解某種加酶洗衣粉對蛋白質(zhì)的水解作用,將相同大小的蛋白塊置于等量相同適宜濃度的洗衣粉溶液中,蛋白塊消失所需的時間與溫度的關(guān)系如下圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是()A.該洗衣粉水解脂肪的最適溫度也是45℃B.B和C兩點(diǎn)催化效率相同的原因是酶的空間結(jié)構(gòu)相同C.若改變洗衣粉溶液的pH,則A點(diǎn)會向左或向右移動D.若減小洗衣粉的濃度,A、B、C點(diǎn)均向上移動2.將生長狀態(tài)一致的某種植物幼苗分成甲、乙兩組,分別移人同種適宜的營養(yǎng)液中在光下培養(yǎng),并給甲組的營養(yǎng)液適時通人空氣,乙組不進(jìn)行通氣處理。一定時間后測得甲組的根對a離子的吸收速率遠(yuǎn)大于乙組的。由此說明根細(xì)胞對a離子的吸收過程屬于()A.主動運(yùn)輸 B.被動運(yùn)輸C.自由擴(kuò)散 D.協(xié)助擴(kuò)散3.2019年12月8日在重慶舉行國際半程馬拉松比賽,人們在運(yùn)動過程中,機(jī)體會發(fā)生一系列生理活動以維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)。下列與此相關(guān)敘述正確的是()A.內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)是指內(nèi)環(huán)境中的各種成分和理化性質(zhì)都處于動態(tài)平衡B.運(yùn)動過程中,線粒體內(nèi)的葡萄糖氧化分解加快,體溫略有升高C.劇烈運(yùn)動時會產(chǎn)生大量乳酸進(jìn)入血液,與血漿中H2CO3緩沖物質(zhì)發(fā)生中和,血漿pH保持相對穩(wěn)定D.大量流汗使細(xì)胞外液滲透壓降低,引起抗利尿激素分泌增多,尿量減少4.如圖是3種抗生素影響某種細(xì)菌繁殖的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。下列相關(guān)敘述不正確的是()A.各組實(shí)驗(yàn)所用培養(yǎng)基均需要滅菌B.各實(shí)驗(yàn)組需分別加入等量的抗生素C.實(shí)驗(yàn)需要設(shè)置不加抗生素的對照組D.氯霉素對此種細(xì)菌沒有抑制作用5.下列與葉綠體相關(guān)的敘述,錯誤的是()A.用高倍顯微鏡觀察葉綠體時不需要對葉綠體進(jìn)行染色B.胡蘿卜素在層析液中溶解度最小,隨層析液擴(kuò)散的速度最快C.恩格爾曼用實(shí)驗(yàn)證明了葉綠體主要吸收紅光和藍(lán)紫光D.可用差速離心法將葉肉細(xì)胞中的葉綠體分離出來6.蛋白質(zhì)是生命活動的主要承擔(dān)者。下列關(guān)于蛋白質(zhì)的說法,正確的是()A.生物膜外側(cè)上均有糖蛋白,其主要作用是參與信息交流B.細(xì)胞中核糖體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體都參與了蛋白質(zhì)的加工和運(yùn)輸C.胰島B細(xì)胞的細(xì)胞膜上沒有運(yùn)輸胰島素的載體蛋白,有感受血糖的受體蛋白D.溶酶體的膜不會被自身水解酶破壞,是因?yàn)椴缓械鞍酌?.有關(guān)酶的敘述,正確的是()A.唾液淀粉酶隨唾液流人胃后仍能催化淀粉的水解B.與光合作用有關(guān)的酶分布在類囊體薄膜上和葉綠體基質(zhì)中C.酶分子在最適宜溫度和pH下催化效率高,體現(xiàn)了酶的高效性D.可用纖維素酶和果膠酶去除植物細(xì)胞細(xì)胞壁及細(xì)菌的細(xì)胞壁8.(10分)下列關(guān)于生長素及其發(fā)現(xiàn)歷程的敘述,正確的是()A.生長素是在核糖體中由色氨酸合成的B.幼苗的向光性體現(xiàn)了生長素作用的兩重性C.生長素能夠促進(jìn)果實(shí)成熟、扦插枝條生根D.波森·詹森的實(shí)驗(yàn)可檢驗(yàn)達(dá)爾文的化學(xué)物質(zhì)假說二、非選擇題9.(10分)膠原蛋白廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)、化妝品、化工原料等領(lǐng)域,科研人員開展利用家蠶生產(chǎn)人膠原蛋白的研究。請回答下列問題:(1)家蠶核型多角體病毒(BmNPV)專性寄生于鱗翅目昆蟲,將人膠原蛋白基因與___重組后,構(gòu)建___。體外克隆目的基因的方法是____。(2)BmNPV的pl0基因是極強(qiáng)的啟動子,將目的基因連接在pl0基因的下游,目的是____。目的基因與pl0基因連接時,斷裂與連接的化學(xué)鍵都是____。(3)重組BmNPV感染家蠶幼蟲后,在幼蟲淋巴液中提取蛋白質(zhì),用____的方法檢測目的基因是否成功表達(dá)。相比于大腸桿菌,選擇家蠶作為人膠原蛋白的生物反應(yīng)器,其優(yōu)點(diǎn)是_______。10.(14分)OKT3為第一個用于臨床的抗T細(xì)胞的單克隆抗體,該抗體是針對T細(xì)胞上CD3抗原,能抑制免疫系統(tǒng)的功能,有利于器官移植,回答下列問題:(1)OKT3的制備過程中所依據(jù)的生物學(xué)原理是________________,________________。(2)制備OKT3時,首先要將OKT3抗原注入小鼠體內(nèi),以獲得相應(yīng)的______________,該細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞雜交后要經(jīng)過兩次篩選,最終獲得的雜交瘤細(xì)胞具有___________________________的特點(diǎn)。(3)OKT3能作用于T細(xì)胞,T細(xì)胞的功能受到影響時會導(dǎo)致小鼠體內(nèi)的抗體合成量下降,其原因是_____________________________________________________________。(4)由于通常所用的OKT3單抗為鼠源性,臨床上可能產(chǎn)生免疫排斥反應(yīng),因此可以對OKT3進(jìn)行人工改造,獲得一種新型蛋白應(yīng)用于人類,該技術(shù)屬于_______________工程,該項(xiàng)工程是以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)和功能的關(guān)系,通過_________________________,對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造。11.(14分)PRSV是單鏈RNA病毒,由蚜蟲傳播危害木瓜,華南農(nóng)業(yè)大學(xué)通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法成功培育出中國首例抗PRSV轉(zhuǎn)基因木瓜。通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育植物抗病毒品種是目前常用的方法,請回答:(1)基因與染色體的關(guān)系是:一條染色體上有多個基因,基因在___________________。(2)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的核心步驟是基因表達(dá)載體的構(gòu)建,該步驟必須用到的工具酶包括限制酶和_______________,基因表達(dá)載體中含有啟動子和終止子,這兩者是___________(填“復(fù)制”或“轉(zhuǎn)錄”)過程所必須的。此步驟中一般用兩種___________處理,目的是防止Ti質(zhì)?;騙_____________自身環(huán)化、防止目的基因和Ti質(zhì)粒反向連接。(3)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法的原理是當(dāng)植物體受到損傷時,傷口處的細(xì)胞會分泌大量的_________化合物,吸引農(nóng)桿菌移向這些細(xì)胞;如果將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的_____________上,通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用,就可以使目的基因進(jìn)入植物細(xì)胞,并將其插入到植物細(xì)胞的染色體DNA上。12.某些病毒可以使人或者動物致病,有的甚至導(dǎo)致死亡。請回答問題。(1)埃博拉病毒(EBV)為單股負(fù)鏈(-RNA)病毒,其蛋白質(zhì)外殼內(nèi)包裹有RNA依賴性RNA聚合酶。該病毒侵入人體細(xì)胞后,在細(xì)胞質(zhì)中復(fù)制、裝配,以出芽方式釋放,如圖所示。①、②過程需要____________,(+)RNA指導(dǎo)EBV蛋白質(zhì)合成,子代EBV的釋放過程體現(xiàn)了細(xì)胞膜的____________。(2)2018年1月美國學(xué)術(shù)期刊《免疫》報道,記憶T細(xì)胞會儲存在脂肪組織中。如圖是研究人員進(jìn)行的有關(guān)實(shí)驗(yàn),下列相關(guān)敘述錯誤的是___________。A.記憶T細(xì)胞是由T細(xì)胞或記憶T細(xì)胞增殖分化形成的B.接受脂肪組織移植前的實(shí)驗(yàn)鼠B應(yīng)接種相應(yīng)的病原體C.實(shí)驗(yàn)鼠B不患病是非特異性免疫和特異性免疫共同作用的結(jié)果D.僅圖示實(shí)驗(yàn)還不足以證明移植脂肪組織中有記憶T細(xì)胞(3)2020年1月,武漢等地相繼出現(xiàn)新型冠狀病毒肺炎,引起此病的新型冠狀病毒是具外套膜的正鏈單股RNA病毒,目前還沒有有效預(yù)防此病的疫苗,做好個人防護(hù)是重要的方法,寫出個人防護(hù)的具體措施(寫出兩點(diǎn))。___________________________________。
參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、D【解析】
分析題圖可知,隨著溫度升高,蛋白塊消失所需時間逐漸縮短,在45℃時蛋白塊消失所需時間最短,而后隨著溫度升高,蛋白塊消失所需時間逐漸延長。結(jié)合題意可知該實(shí)驗(yàn)探究洗衣粉中蛋白質(zhì)水解酶的活性與溫度的關(guān)系,可知該酶的活性隨溫度上升先增加后減少,該酶的最適溫度為45℃?!驹斀狻緼、酶具有專一性,分析題圖可知該洗衣粉中具有蛋白質(zhì)水解酶,蛋白質(zhì)水解酶的最適溫度為45℃,但無法判斷是否含有脂肪水解酶,A錯誤;B、酶在C點(diǎn)溫度下催化效率下降是由于高溫破壞了酶的空間結(jié)構(gòu)導(dǎo)致酶的失活,B、C兩點(diǎn)的酶的空間結(jié)構(gòu)不相同,B錯誤;C、若改變洗衣粉溶液的pH值,不會使酶的最適溫度發(fā)生改變,只會改變酶的催化效率,故會使A點(diǎn)向上或向下移動,C錯誤;D、若減小洗衣粉的濃度,即降低酶的量,會延長蛋白塊消失所需的時間,則A、B、C三點(diǎn)均向上移動,D正確;故選D。2、A【解析】
小分子物質(zhì)跨膜運(yùn)輸?shù)姆绞胶吞攸c(diǎn):名
稱運(yùn)輸方向載體能量實(shí)
例自由擴(kuò)散(簡單擴(kuò)散)高濃度低濃度不需不需水,CO2,O2,甘油,苯、酒精等協(xié)助擴(kuò)散(易化擴(kuò)散)高濃度低濃度需要不需紅細(xì)胞吸收葡萄糖主動運(yùn)輸?shù)蜐舛雀邼舛刃枰枰∧c絨毛上皮細(xì)胞吸收氨基酸,葡萄糖等【詳解】分析題意可知,甲組的營養(yǎng)液適時通入空氣,乙組不進(jìn)行通氣處理。一定時間后測得甲組的根對a離子的吸收速率遠(yuǎn)大于乙組的。說明根對a離子的吸收和有氧呼吸有關(guān),是消耗能量的,應(yīng)該是主動運(yùn)輸,A正確。故選A。3、A【解析】
水鹽平衡的調(diào)節(jié)【詳解】A、內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)的內(nèi)容是指內(nèi)環(huán)境中的各種成分和理化性質(zhì)都處于動態(tài)平衡,A正確;B、葡萄糖的氧化分解首先在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中完成第一階段,隨之第一階段的產(chǎn)物如丙酮酸進(jìn)入線粒體內(nèi)進(jìn)行氧化分解,由于運(yùn)動過程中大量消耗能量,故細(xì)胞呼吸速率加快,同時釋放的熱能增多,所以體溫略有升高,B錯誤;C、劇烈運(yùn)動時會產(chǎn)生大量乳酸進(jìn)入血液,與血漿中NaHCO3發(fā)生中和,進(jìn)而血漿pH保持相對穩(wěn)定,C錯誤;D、大量流汗使細(xì)胞外液滲透壓升高,引起抗利尿激素分泌增多,尿量減少,D錯誤。故選A。4、D【解析】
圖示顯示3種抗生素對某種細(xì)菌繁殖的影響,由圖可知,青霉素能在較短時間內(nèi)高效的抑制細(xì)菌的繁殖,其次抑菌效果較好的是鏈霉素,氯霉素的效果最差。【詳解】A、本實(shí)驗(yàn)是研究三種抗生素對某種細(xì)菌繁殖的影響,自變量是抗生素的種類,因變量是某細(xì)菌的數(shù)量,為了防止其它微生物干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果,各組實(shí)驗(yàn)所用培養(yǎng)基均需要滅菌,A正確;B、加入抗生素的量為無關(guān)變量,各組應(yīng)相同,B正確;C、為了說明抗生素的抑菌效果,實(shí)驗(yàn)中需要設(shè)置不加抗生素的對照組,C正確;D、由于沒有不加抗生素的對照組的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),所以不能說明氯霉素對此種細(xì)菌沒有抑制作用,D錯誤。故選D。5、B【解析】
葉綠體是光合作用的場所,存在于能進(jìn)行光合作用的植物細(xì)胞中,葉綠體是具有雙膜結(jié)構(gòu)的細(xì)胞器,葉綠體的類囊體膜上含有能吸收光能的光合色素,光合色素包括葉綠素a、葉綠素b、葉黃素、胡蘿卜素,不同色素在層析液中的溶解度不同,隨層析液在濾紙條上擴(kuò)散速率不同,因此可以用紙層析法將不同的光合色素分離;葉綠素主要吸收紅光和藍(lán)紫光,葉黃素和胡蘿卜素主要吸收藍(lán)紫光。【詳解】A、葉綠體本身呈現(xiàn)綠色,觀察葉綠體時不需要對其染色,A正確;B、胡蘿卜素在層析液中溶解度最大,隨層析液擴(kuò)散速度最快,B錯誤;C、恩格爾曼用透過三棱鏡的光照射水綿臨時裝片,好氧性細(xì)菌聚集在紅光和藍(lán)紫光區(qū),說明葉綠體主要吸收紅光和藍(lán)紫光,C正確;D、分離各種細(xì)胞器的方法是差速離心法,D正確。故選B。6、C【解析】
蛋白質(zhì)的功能-生命活動的主要承擔(dān)者:①構(gòu)成細(xì)胞和生物體的重要物質(zhì),即結(jié)構(gòu)蛋白,如羽毛、頭發(fā)、蛛絲、肌動蛋白;②催化作用:如絕大多數(shù)酶;③傳遞信息,即調(diào)節(jié)作用:如胰島素、生長激素;④免疫作用:如免疫球蛋白(抗體);⑤運(yùn)輸作用:如紅細(xì)胞中的血紅蛋白?!驹斀狻緼、不是所有的生物膜上均有糖蛋白,例如葉綠體類囊體薄膜,A錯誤;B、核糖體沒有參與蛋白質(zhì)的加工和運(yùn)輸,其功能是合成蛋白質(zhì),B錯誤;C、胰島B細(xì)胞分泌胰島素的方式是胞吐,不需要載體蛋白的協(xié)助,血糖濃度過高會刺激胰島B細(xì)胞分泌胰島素,所以胰島B細(xì)胞上有感受血糖的受體蛋白,C正確;D、溶酶體內(nèi)的水解酶含有蛋白酶,D錯誤。故選C。本題結(jié)合血糖調(diào)節(jié)的過程、分泌蛋白的合成過程、溶酶體和生物膜進(jìn)行綜合考查,需要考生識記相關(guān)知識。7、B【解析】
1.酶是由活細(xì)胞產(chǎn)生的具有催化作用的有機(jī)物,絕大多數(shù)酶是蛋白質(zhì),極少數(shù)酶是RNA,所以酶的基本組成單位為氨基酸或核糖核苷酸。2.酶的特性:(1)高效性:酶的催化效率大約是無機(jī)催化劑的107~1013倍。(2)專一性:每一種酶只能催化一種或一類化學(xué)反應(yīng)。(3)作用條件較溫和:高溫、過酸、過堿都會使酶的空間結(jié)構(gòu)遭到破壞,使酶永久失活;在低溫下,酶的活性降低,但不會失活。3.酶促反應(yīng)的原理:酶能降低化學(xué)反應(yīng)所需的活化能?!驹斀狻緼、唾液淀粉酶隨唾液流入胃后,因?yàn)槲钢惺撬嵝詶l件唾液淀粉酶會失活,A錯誤;B、在類囊體薄膜上分布有光合作用光反應(yīng)相關(guān)的酶,葉綠體基質(zhì)中分布有光合作用暗反應(yīng)相關(guān)的酶,B正確;C、在最適宜的溫度和pH條件下,酶的活性最高,說明酶的作用條件較溫和,C錯誤;D、植物細(xì)胞細(xì)胞壁的成分為纖維素和果膠,可用纖維素酶和果膠酶去除,細(xì)菌的細(xì)胞壁可用溶菌酶溶解,D錯誤。故選B。8、D【解析】
生長素屬于植物激素的一種,它與酶、動物激素一樣都屬于微量高效物質(zhì),主要對細(xì)胞代謝有調(diào)節(jié)作用。生長素的化學(xué)本質(zhì)是吲哚乙酸,其作用有:①既能促進(jìn)生長,也能抑制生長;既能促進(jìn)發(fā)芽,也能抑制發(fā)芽;既能防止落花落果,也能疏花疏果;②促進(jìn)子房發(fā)育;③促進(jìn)生根。頂端優(yōu)勢和根的向地性體現(xiàn)了生長素的兩重性。【詳解】A、生長素的化學(xué)本質(zhì)是吲哚乙酸,不是蛋白質(zhì),A錯誤;B、幼苗向光性只體現(xiàn)生長素的促進(jìn)作用,B錯誤;C、生長素能夠促進(jìn)果實(shí)發(fā)育,不能促進(jìn)果實(shí)成熟,促進(jìn)果實(shí)成熟的植物激素是乙烯,C錯誤;D、波森·詹森的實(shí)驗(yàn)證明,胚芽鞘尖端產(chǎn)生的影響可以透過瓊脂片傳遞給下部,可以檢驗(yàn)達(dá)爾文的“可能有某種化學(xué)物質(zhì)從尖端傳遞到了下面”的假說,D正確。故選D。本題考查生長素的相關(guān)知識,意在考查能理解所學(xué)知識的要點(diǎn),把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。二、非選擇題9、BmNPV基因基因表達(dá)載體PCR技術(shù)使目的基因在pl0基因的驅(qū)動下高效表達(dá)磷酸二酯鍵抗原抗體雜交家蠶細(xì)胞的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體會對人膠原蛋白進(jìn)行加工使表達(dá)的膠原蛋白與人的膠原蛋白的結(jié)構(gòu)和功能相似【解析】
基因工程的基本步驟:1、提取目的基因;2、基因表達(dá)載體的構(gòu)建(即目的基因與運(yùn)載體結(jié)合,是實(shí)施基因工程的第二步,也是基因工程的核心);3、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞;4、目的基因的檢測和表達(dá)?!驹斀狻浚?)因?yàn)锽mNPV專性寄生于鱗翅目昆蟲,故將目的基因與BmNPV基因重組,構(gòu)建基因表達(dá)載體,更有利于將目的基因?qū)爰倚Q細(xì)胞。PCR是指在體外復(fù)制特定DNA片段,可在短時間內(nèi)大量擴(kuò)增目的基因。(2)啟動子位于基因的首端,它是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位,能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄。將目的基因與運(yùn)載體連接時,限制酶和DNA連接酶作用的都是兩個核苷酸之間的磷酸二脂鍵。(3)檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì),可用抗原抗體雜交的方法。大腸桿菌為原核細(xì)胞,家蠶為真核生物,家蠶細(xì)胞中的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體會對人膠原蛋白進(jìn)行加工,與人體內(nèi)表達(dá)的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能更相似。本題在掌握基因工程基本步驟的基礎(chǔ)上,結(jié)合具體實(shí)例解題。10、細(xì)胞增殖細(xì)胞膜的流動性B淋巴細(xì)胞既能產(chǎn)生針對CD3的抗體,又能無限增殖T細(xì)胞功能受影響,其分泌的淋巴因子減少,導(dǎo)致B細(xì)胞不能分化成漿細(xì)胞,從而使抗體的含量下降蛋白質(zhì)基因修飾或基因合成【解析】
單克隆抗體的制備是將骨髓瘤細(xì)胞與漿細(xì)胞結(jié)合,經(jīng)過選擇培養(yǎng)基的篩選得到雜交瘤細(xì)胞并經(jīng)專一抗體檢測后,培養(yǎng)能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞即可得單克隆抗體。在篩選和培養(yǎng)生產(chǎn)過程中都利用了動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。【詳解】(1)單克隆抗體所涉及的生物技術(shù)是動物細(xì)胞培養(yǎng)和動物細(xì)胞融合,其原理是細(xì)胞增殖和細(xì)胞膜的流動性。(2)制備單克隆抗體時,注射抗原是為了獲得相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞,B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合后形成多種雜交細(xì)胞,雜交細(xì)胞要經(jīng)過兩次篩選最終獲得既能大量增殖,又能產(chǎn)生專一抗體的雜交瘤細(xì)胞。(3)當(dāng)T細(xì)胞受損時,T細(xì)胞無法正常分泌淋巴因子,淋巴因子分泌量減少,會導(dǎo)致B細(xì)胞不能正常分化形成漿細(xì)胞,最終導(dǎo)致抗體的生產(chǎn)量減少。(4)由題意可知,生產(chǎn)的蛋白為新型蛋白,因此屬于蛋白質(zhì)工程的范疇,蛋白質(zhì)工程是以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系,通過基因修飾或基因合成,對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造。本題考查單克隆抗體的制備的有關(guān)知識,意在考查考生識圖能力和理解所學(xué)知識的要點(diǎn),把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。11、染色體上呈線性排列DNA連接酶轉(zhuǎn)錄限制酶目的基因酚類T-DNA【解析】
基因工程技術(shù)的基本步驟:(1)目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟,基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。(3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞:根據(jù)受體細(xì)胞不同,導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法;將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法;將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。(4)目的基因的檢測與鑒定:分子水平上的檢測:①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù);②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù);③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定:抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?!驹斀狻浚?)基因在染色體上,且一條染色體含有多個基因,基因在染色體上呈線性排列。(2)基因工程的核心步驟是基因表達(dá)載體的構(gòu)建。構(gòu)建基因表達(dá)載體時,首先要用限制酶切割含有目的基因的外源DNA和運(yùn)載體,其次要用DNA連接酶將目的基因和運(yùn)載體連接形成重組DNA。基因表達(dá)載體中的啟動子是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位,這種結(jié)合完成后才能驅(qū)動目的基因通過轉(zhuǎn)錄合成mRNA,終止子是轉(zhuǎn)錄的結(jié)束部位,因此啟動子和終止子是轉(zhuǎn)錄過程所必須的。為了防止Ti質(zhì)?;蚰康幕蜃陨憝h(huán)化、防止目的基因和Ti質(zhì)
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