菊芋植株浸提液：南方根結(jié)線蟲(chóng)的天敵與連作番茄的守護(hù)者

菊芋植株浸提液：南方根結(jié)線蟲(chóng)的“天敵”與連作番茄的“守護(hù)者”一、引言1.1研究背景與目的在現(xiàn)代設(shè)施蔬菜栽培中，番茄作為一種重要的茄果類(lèi)蔬菜，因其營(yíng)養(yǎng)豐富、適應(yīng)性強(qiáng)、產(chǎn)量高且經(jīng)濟(jì)效益顯著，深受種植戶和消費(fèi)者喜愛(ài)。隨著設(shè)施蔬菜產(chǎn)業(yè)規(guī)?；?zhuān)一化模式的逐漸成熟，番茄種植面積不斷擴(kuò)大，連作現(xiàn)象愈發(fā)普遍。然而，連作番茄面臨著諸多嚴(yán)峻問(wèn)題，其中南方根結(jié)線蟲(chóng)（Meloidogyneincognita）的危害尤為突出。南方根結(jié)線蟲(chóng)是一種廣泛分布于世界各地的植物寄生線蟲(chóng)，其寄主范圍極為廣泛，涵蓋了眾多蔬菜、花卉及農(nóng)作物。在連作番茄的土壤環(huán)境中，南方根結(jié)線蟲(chóng)能夠迅速繁殖并積累，給番茄的生長(zhǎng)和發(fā)育帶來(lái)嚴(yán)重威脅。當(dāng)番茄根系受到南方根結(jié)線蟲(chóng)的侵染時(shí)，線蟲(chóng)會(huì)利用其口針穿刺根部細(xì)胞，注入分泌物，刺激根部細(xì)胞異常增生和分化，從而形成大小不一、形狀各異的根結(jié)，也就是俗稱(chēng)的“瘤子”。這些根結(jié)的出現(xiàn)，嚴(yán)重破壞了根系的正常結(jié)構(gòu)和功能，阻礙了根系對(duì)水分和養(yǎng)分的吸收與運(yùn)輸。受侵染的番茄植株往往生長(zhǎng)緩慢，矮小瘦弱，葉片發(fā)黃，光合作用能力顯著下降，導(dǎo)致植株整體生長(zhǎng)勢(shì)衰弱。在發(fā)病嚴(yán)重時(shí)，植株甚至?xí)霈F(xiàn)萎蔫、枯死的現(xiàn)象，極大地降低了番茄的產(chǎn)量和品質(zhì)，給種植戶帶來(lái)巨大的經(jīng)濟(jì)損失。傳統(tǒng)上，化學(xué)農(nóng)藥是防治南方根結(jié)線蟲(chóng)的主要手段。像阿維菌素、噻唑膦等有機(jī)農(nóng)藥，雖然在短期內(nèi)能夠有效地殺滅線蟲(chóng)，迅速控制病情發(fā)展，但長(zhǎng)期大量使用化學(xué)農(nóng)藥，會(huì)引發(fā)一系列嚴(yán)重的負(fù)面問(wèn)題。一方面，化學(xué)農(nóng)藥在土壤中殘留時(shí)間較長(zhǎng)，難以降解，會(huì)對(duì)土壤生態(tài)環(huán)境造成嚴(yán)重污染，破壞土壤微生物群落結(jié)構(gòu)，影響土壤的肥力和可持續(xù)性。另一方面，農(nóng)藥殘留會(huì)通過(guò)食物鏈傳遞，最終進(jìn)入人體，對(duì)人體健康構(gòu)成潛在威脅。此外，長(zhǎng)期使用化學(xué)農(nóng)藥還會(huì)導(dǎo)致線蟲(chóng)產(chǎn)生抗藥性，使得防治效果逐漸降低，進(jìn)一步加大了防治難度。近年來(lái)，隨著人們對(duì)生態(tài)環(huán)境保護(hù)和農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全的關(guān)注度不斷提高，尋找綠色、環(huán)保、可持續(xù)的病害控制方法成為農(nóng)業(yè)領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。植物浸提液作為一種天然的生物防治資源，因其具有低毒、環(huán)保、對(duì)非靶標(biāo)生物安全等優(yōu)點(diǎn)，逐漸受到科研人員的重視。菊芋（Alocasiamacrorrhiza）作為一種常見(jiàn)的熱帶植物，在民間常被用于治療一些疾病，具有一定的藥用價(jià)值。研究發(fā)現(xiàn)，菊芋植株浸提液中含有多種生物活性成分，如黃酮類(lèi)、酚類(lèi)、萜類(lèi)等，這些成分對(duì)多種病原微生物具有顯著的殺滅和抑制作用，展現(xiàn)出良好的抗菌活性。本研究旨在探究菊芋植株浸提液對(duì)南方根結(jié)線蟲(chóng)的抑制作用及其對(duì)連作番茄生長(zhǎng)發(fā)育、抗病性和土壤微生物群落的影響，為開(kāi)發(fā)利用菊芋植株浸提液作為綠色、環(huán)保的生物防治劑，有效控制南方根結(jié)線蟲(chóng)危害，解決連作番茄障礙問(wèn)題提供理論依據(jù)和實(shí)踐指導(dǎo)。通過(guò)本研究，期望能夠減少化學(xué)農(nóng)藥的使用，降低環(huán)境污染，保障農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全，推動(dòng)農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展。1.2國(guó)內(nèi)外研究現(xiàn)狀1.2.1南方根結(jié)線蟲(chóng)的防治研究南方根結(jié)線蟲(chóng)的防治一直是農(nóng)業(yè)領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。目前，其防治方法主要包括農(nóng)業(yè)防治、物理防治、化學(xué)防治和生物防治等。農(nóng)業(yè)防治方面，輪作和間作是常用的手段。通過(guò)合理安排不同作物的種植順序和空間布局，能夠改變土壤生態(tài)環(huán)境，減少線蟲(chóng)在土壤中的積累。例如，有研究表明，將番茄與蔥、蒜等具有化感作用的作物進(jìn)行間作，可有效降低南方根結(jié)線蟲(chóng)的密度，減輕其對(duì)番茄的危害。這是因?yàn)槭[、蒜等作物釋放的化感物質(zhì)能夠抑制線蟲(chóng)的生長(zhǎng)和繁殖，或者對(duì)線蟲(chóng)產(chǎn)生驅(qū)避作用，從而減少線蟲(chóng)與番茄根系的接觸機(jī)會(huì)。抗病品種的選育也是農(nóng)業(yè)防治的重要方向?？蒲腥藛T通過(guò)對(duì)番茄種質(zhì)資源的篩選和遺傳改良，培育出了一系列具有抗南方根結(jié)線蟲(chóng)特性的番茄品種。這些品種在根系結(jié)構(gòu)、生理生化特性等方面與感病品種存在差異，能夠有效抵御線蟲(chóng)的侵染。例如，某些抗病品種的根系能夠分泌一些特殊的物質(zhì)，對(duì)線蟲(chóng)具有毒性或抑制其侵入的能力；或者其根系細(xì)胞結(jié)構(gòu)更加緊密，使線蟲(chóng)難以穿透。物理防治方法中，土壤高溫消毒是一種較為有效的手段。在夏季高溫季節(jié)，通過(guò)覆蓋地膜、太陽(yáng)能消毒等方式，使土壤溫度升高至50℃以上，持續(xù)一段時(shí)間，可殺死土壤中的線蟲(chóng)及其他病原菌。例如，在一些設(shè)施蔬菜種植地區(qū)，采用太陽(yáng)能高溫悶棚技術(shù)，在夏季休棚期，將土壤深翻后，覆蓋透明地膜，然后密閉大棚，利用太陽(yáng)能使土壤溫度升高，經(jīng)過(guò)15-20天的處理，可顯著降低土壤中南方根結(jié)線蟲(chóng)的數(shù)量。這種方法操作簡(jiǎn)單，成本較低，且對(duì)環(huán)境無(wú)污染，但受季節(jié)和天氣條件的限制較大?；瘜W(xué)防治在南方根結(jié)線蟲(chóng)的防治中曾占據(jù)主導(dǎo)地位。阿維菌素、噻唑膦等有機(jī)磷類(lèi)和氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥，能夠通過(guò)抑制線蟲(chóng)的神經(jīng)系統(tǒng)或干擾其生理代謝過(guò)程，達(dá)到殺滅線蟲(chóng)的目的。然而，長(zhǎng)期大量使用化學(xué)農(nóng)藥帶來(lái)了諸多問(wèn)題。一方面，農(nóng)藥殘留會(huì)污染土壤、水源和農(nóng)產(chǎn)品，對(duì)生態(tài)環(huán)境和人體健康造成潛在威脅。研究表明，長(zhǎng)期使用化學(xué)農(nóng)藥會(huì)導(dǎo)致土壤中農(nóng)藥殘留量不斷增加，影響土壤微生物的活性和群落結(jié)構(gòu)，進(jìn)而破壞土壤生態(tài)平衡。另一方面，線蟲(chóng)容易對(duì)化學(xué)農(nóng)藥產(chǎn)生抗藥性，隨著使用年限的增加，防治效果逐漸下降。為了解決這些問(wèn)題，科研人員不斷研發(fā)新型化學(xué)農(nóng)藥，并探索合理的用藥方法和劑量，以提高防治效果，減少農(nóng)藥的負(fù)面影響。生物防治作為一種環(huán)境友好的防治方法，近年來(lái)受到了廣泛關(guān)注。生物防治主要包括利用天敵生物、微生物制劑和植物源殺線劑等。捕食性線蟲(chóng)、捕食性昆蟲(chóng)和螨類(lèi)等天敵生物，能夠通過(guò)捕食南方根結(jié)線蟲(chóng)，降低其種群數(shù)量。例如，某些捕食性線蟲(chóng)能夠主動(dòng)尋找并攻擊南方根結(jié)線蟲(chóng)，將其作為食物來(lái)源，從而有效控制線蟲(chóng)的危害。微生物制劑如芽孢桿菌、木霉菌等，能夠通過(guò)產(chǎn)生抗菌物質(zhì)、競(jìng)爭(zhēng)營(yíng)養(yǎng)和空間等方式，抑制線蟲(chóng)的生長(zhǎng)和繁殖。這些微生物在土壤中定殖后，能夠形成優(yōu)勢(shì)菌群，與線蟲(chóng)競(jìng)爭(zhēng)生存資源，同時(shí)分泌一些具有殺線活性的物質(zhì)，如抗生素、酶類(lèi)等，直接作用于線蟲(chóng)，達(dá)到防治的目的。植物源殺線劑則是利用植物中含有的天然活性成分，如黃酮類(lèi)、萜類(lèi)、生物堿等，來(lái)抑制或殺滅線蟲(chóng)。與化學(xué)農(nóng)藥相比，植物源殺線劑具有低毒、環(huán)保、不易產(chǎn)生抗藥性等優(yōu)點(diǎn)，但目前其作用機(jī)制和應(yīng)用效果還需要進(jìn)一步深入研究。1.2.2連作番茄障礙的研究連作番茄障礙是制約番茄可持續(xù)生產(chǎn)的重要因素，其形成機(jī)制涉及多個(gè)方面，包括土壤理化性質(zhì)惡化、土壤微生物群落失衡、植物自毒作用等。隨著連作年限的增加，土壤理化性質(zhì)會(huì)發(fā)生顯著變化。土壤酸堿度失衡，常出現(xiàn)酸化或堿化現(xiàn)象，這會(huì)影響土壤中養(yǎng)分的有效性和微生物的活性。例如，長(zhǎng)期連作番茄會(huì)導(dǎo)致土壤中硝態(tài)氮和銨態(tài)氮積累，使土壤pH值下降，酸化程度加劇。土壤酸化會(huì)導(dǎo)致一些微量元素如鐵、鋁、錳等的溶解度增加，可能對(duì)番茄產(chǎn)生毒害作用，同時(shí)也會(huì)影響土壤中有益微生物的生長(zhǎng)和繁殖。土壤板結(jié)和通氣性變差也是連作常見(jiàn)的問(wèn)題，這會(huì)導(dǎo)致根系生長(zhǎng)受阻，影響根系對(duì)水分和養(yǎng)分的吸收。連作還會(huì)導(dǎo)致土壤中某些養(yǎng)分的缺乏或過(guò)量，破壞土壤養(yǎng)分平衡。由于番茄對(duì)某些養(yǎng)分的選擇性吸收，長(zhǎng)期連作會(huì)使土壤中這些養(yǎng)分逐漸減少，而其他一些養(yǎng)分則可能積累過(guò)多，從而影響番茄的正常生長(zhǎng)發(fā)育。土壤微生物群落失衡是連作番茄障礙的重要原因之一。連作條件下，土壤中病原菌數(shù)量增加，有益微生物數(shù)量減少，導(dǎo)致土壤微生物群落結(jié)構(gòu)發(fā)生改變。研究發(fā)現(xiàn)，連作番茄土壤中，鐮刀菌、青枯菌等病原菌的數(shù)量明顯增加，這些病原菌能夠侵染番茄根系，引發(fā)根腐病、青枯病等病害，嚴(yán)重影響番茄的生長(zhǎng)和產(chǎn)量。而一些有益微生物如根際促生細(xì)菌、菌根真菌等的數(shù)量則顯著減少，它們?cè)诖龠M(jìn)植物生長(zhǎng)、增強(qiáng)植物抗病性等方面發(fā)揮著重要作用。例如，根際促生細(xì)菌能夠分泌植物激素，促進(jìn)番茄根系的生長(zhǎng)和發(fā)育，增強(qiáng)植物的抗逆性；菌根真菌能夠與番茄根系形成共生關(guān)系，擴(kuò)大根系的吸收面積，提高植物對(duì)養(yǎng)分和水分的吸收效率。植物自毒作用也是連作番茄障礙的一個(gè)重要因素。番茄在生長(zhǎng)過(guò)程中會(huì)向土壤中分泌一些次生代謝產(chǎn)物，如酚酸類(lèi)、萜類(lèi)等物質(zhì)，這些物質(zhì)在土壤中積累，會(huì)對(duì)自身或其他植物的生長(zhǎng)產(chǎn)生抑制作用。研究表明，連作番茄土壤中自毒物質(zhì)的含量明顯高于輪作土壤，這些自毒物質(zhì)能夠影響番茄種子的萌發(fā)、幼苗的生長(zhǎng)和根系的發(fā)育。它們可能通過(guò)干擾植物的生理生化過(guò)程，如抑制光合作用、影響呼吸作用、破壞細(xì)胞膜的完整性等，來(lái)抑制植物的生長(zhǎng)。自毒物質(zhì)還會(huì)影響土壤微生物的群落結(jié)構(gòu)和功能，進(jìn)一步加劇連作障礙。針對(duì)連作番茄障礙，目前采取的主要措施包括土壤改良、合理施肥、輪作與間作、生物防治等。土壤改良可通過(guò)添加有機(jī)物料、石灰、生物炭等物質(zhì)來(lái)改善土壤理化性質(zhì)和微生物群落結(jié)構(gòu)。有機(jī)物料如腐熟的農(nóng)家肥、堆肥等，能夠增加土壤有機(jī)質(zhì)含量，改善土壤結(jié)構(gòu)，提高土壤肥力，同時(shí)還能為土壤微生物提供豐富的碳源和能源，促進(jìn)有益微生物的生長(zhǎng)和繁殖。石灰可用于調(diào)節(jié)土壤酸堿度，使土壤pH值保持在適宜番茄生長(zhǎng)的范圍內(nèi)。生物炭具有較大的比表面積和孔隙結(jié)構(gòu)，能夠吸附土壤中的有害物質(zhì)，改善土壤通氣性和保水性，同時(shí)還能為微生物提供棲息場(chǎng)所，促進(jìn)微生物的定殖和生長(zhǎng)。合理施肥是解決連作番茄障礙的重要措施之一。通過(guò)精準(zhǔn)施肥，根據(jù)番茄不同生長(zhǎng)階段的養(yǎng)分需求，合理調(diào)整肥料的種類(lèi)和用量，避免養(yǎng)分的過(guò)量施用和缺乏，維持土壤養(yǎng)分平衡。例如，在番茄生長(zhǎng)前期，適當(dāng)增加氮肥的供應(yīng)，促進(jìn)植株的莖葉生長(zhǎng)；在開(kāi)花結(jié)果期，增加磷、鉀肥的用量，促進(jìn)花芽分化、果實(shí)膨大，提高果實(shí)品質(zhì)。同時(shí)，注重中微量元素的補(bǔ)充，如鈣、鎂、硼、鋅等，這些元素對(duì)番茄的生長(zhǎng)發(fā)育和抗病性具有重要作用。輪作與間作是克服連作障礙的有效方法。通過(guò)與不同科的作物進(jìn)行輪作或間作，能夠改變土壤生態(tài)環(huán)境，減少病原菌的積累，增加土壤微生物的多樣性。例如，將番茄與豆類(lèi)、玉米等作物進(jìn)行輪作，可有效降低土壤中病原菌的數(shù)量，提高土壤肥力。間作一些具有化感作用的作物，如大蒜、洋蔥等，它們釋放的化感物質(zhì)能夠抑制土壤中的病原菌和線蟲(chóng)，減輕連作障礙。生物防治在連作番茄障礙的防治中也具有重要作用。利用有益微生物如芽孢桿菌、木霉菌等進(jìn)行土壤接種，能夠增加土壤中有益微生物的數(shù)量，抑制病原菌的生長(zhǎng)和繁殖，改善土壤微生物群落結(jié)構(gòu)。這些有益微生物還能夠產(chǎn)生一些生物活性物質(zhì)，如抗生素、酶類(lèi)、植物激素等，促進(jìn)番茄的生長(zhǎng)和發(fā)育，增強(qiáng)其抗病性。例如，芽孢桿菌能夠產(chǎn)生多種抗生素，對(duì)多種病原菌具有抑制作用；木霉菌能夠分泌幾丁質(zhì)酶、β-1,3-葡聚糖酶等酶類(lèi)，分解病原菌的細(xì)胞壁，從而達(dá)到抑制病原菌的目的。1.2.3植物浸提液在農(nóng)業(yè)病害防治中的應(yīng)用研究植物浸提液作為一種天然的生物防治資源，在農(nóng)業(yè)病害防治領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景。許多植物中含有豐富的生物活性成分，如黃酮類(lèi)、酚類(lèi)、萜類(lèi)、生物堿等，這些成分對(duì)病原菌和害蟲(chóng)具有抑制、殺滅或驅(qū)避作用。近年來(lái)，關(guān)于植物浸提液在農(nóng)業(yè)病害防治中的研究日益增多。研究發(fā)現(xiàn)，苦楝、印楝等植物的浸提液對(duì)多種害蟲(chóng)和病原菌具有顯著的抑制作用。苦楝浸提液中含有苦楝素等活性成分，能夠干擾害蟲(chóng)的生長(zhǎng)發(fā)育和繁殖，對(duì)蚜蟲(chóng)、螨蟲(chóng)等害蟲(chóng)具有較強(qiáng)的驅(qū)避和毒殺作用。印楝浸提液中的印楝素具有拒食、忌避、抑制生長(zhǎng)發(fā)育等多種生物活性，對(duì)多種昆蟲(chóng)和線蟲(chóng)都有防治效果。大蒜、辣椒等植物的浸提液也具有抗菌、抗病毒和殺蟲(chóng)作用。大蒜浸提液中含有的大蒜素具有強(qiáng)烈的殺菌作用，能夠抑制多種病原菌的生長(zhǎng)，如大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、鐮刀菌等。辣椒浸提液中的辣椒素對(duì)一些害蟲(chóng)具有驅(qū)避和毒殺作用，同時(shí)還能誘導(dǎo)植物產(chǎn)生抗病性。在植物線蟲(chóng)病害防治方面，一些植物浸提液也展現(xiàn)出了良好的效果。例如，萬(wàn)壽菊、孔雀草等菊科植物的浸提液對(duì)根結(jié)線蟲(chóng)具有抑制作用。萬(wàn)壽菊浸提液中的α-三聯(lián)噻吩等活性成分，能夠破壞線蟲(chóng)的細(xì)胞膜和神經(jīng)系統(tǒng)，導(dǎo)致線蟲(chóng)死亡。研究還發(fā)現(xiàn)，不同植物浸提液的作用效果和作用機(jī)制存在差異，這與植物中所含的活性成分種類(lèi)、含量以及提取方法等因素有關(guān)。不同濃度的植物浸提液對(duì)病害的防治效果也有所不同，一般來(lái)說(shuō)，濃度較高的浸提液防治效果較好，但過(guò)高的濃度可能會(huì)對(duì)植物產(chǎn)生藥害。植物浸提液在農(nóng)業(yè)病害防治中的應(yīng)用還面臨一些問(wèn)題和挑戰(zhàn)。植物浸提液的有效成分復(fù)雜，其作用機(jī)制尚未完全明確，這給其開(kāi)發(fā)和應(yīng)用帶來(lái)了一定的困難。植物浸提液的穩(wěn)定性較差，容易受到環(huán)境因素如溫度、光照、濕度等的影響，導(dǎo)致其活性成分降解或失活。植物浸提液的制備工藝和質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)還不完善，不同批次的浸提液質(zhì)量可能存在差異，影響其防治效果的穩(wěn)定性和可靠性。為了更好地利用植物浸提液進(jìn)行農(nóng)業(yè)病害防治，需要進(jìn)一步深入研究其作用機(jī)制，優(yōu)化制備工藝和質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，提高其穩(wěn)定性和防治效果。1.2.4菊芋的研究現(xiàn)狀菊芋，作為一種適應(yīng)性強(qiáng)、分布廣泛的植物，在多個(gè)領(lǐng)域都具有重要的研究?jī)r(jià)值和應(yīng)用潛力。菊芋富含菊糖、膳食纖維、礦物質(zhì)等多種營(yíng)養(yǎng)成分，具有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。菊糖是一種天然的功能性多糖，在食品、醫(yī)藥等領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用。在食品工業(yè)中，菊糖可作為膳食纖維添加到食品中，增加食品的膳食纖維含量，改善食品的質(zhì)地和口感，同時(shí)還具有調(diào)節(jié)血糖、血脂，促進(jìn)腸道有益微生物生長(zhǎng)等保健功能。菊芋還可用于釀造菊芋酒、制作菊芋飲料等，豐富了食品的種類(lèi)。在藥用方面，菊芋具有一定的藥用價(jià)值，其提取物具有抗菌、抗炎、抗氧化等生物活性。研究表明，菊芋提取物對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌等常見(jiàn)病原菌具有抑制作用，這可能與其所含的黃酮類(lèi)、酚類(lèi)等活性成分有關(guān)。這些活性成分能夠破壞病原菌的細(xì)胞膜、抑制病原菌的代謝過(guò)程，從而達(dá)到抗菌的目的。菊芋提取物還具有抗氧化作用，能夠清除體內(nèi)自由基，減少氧化應(yīng)激對(duì)細(xì)胞的損傷，對(duì)預(yù)防和治療一些氧化應(yīng)激相關(guān)的疾病具有潛在的應(yīng)用價(jià)值。在農(nóng)業(yè)領(lǐng)域，菊芋除了可作為飼料和綠肥外，其在病蟲(chóng)害防治方面的研究也逐漸受到關(guān)注。有研究報(bào)道，菊芋植株浸提液對(duì)一些害蟲(chóng)和病原菌具有抑制作用。然而，目前關(guān)于菊芋植株浸提液對(duì)南方根結(jié)線蟲(chóng)及連作番茄影響的研究還相對(duì)較少，其作用機(jī)制和應(yīng)用效果仍有待進(jìn)一步深入探究。菊芋植株浸提液中可能含有多種對(duì)南方根結(jié)線蟲(chóng)具有抑制作用的活性成分，但這些成分的具體種類(lèi)和作用方式尚不明確。在連作番茄的應(yīng)用中，菊芋植株浸提液如何影響番茄的生長(zhǎng)發(fā)育、抗病性以及土壤微生物群落等方面，還需要更多的實(shí)驗(yàn)研究來(lái)揭示。1.3研究意義與創(chuàng)新點(diǎn)本研究聚焦菊芋植株浸提液對(duì)南方根結(jié)線蟲(chóng)及連作番茄的影響，在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)、生態(tài)環(huán)保及可持續(xù)發(fā)展層面均具有關(guān)鍵意義。在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中，南方根結(jié)線蟲(chóng)對(duì)連作番茄的危害極大，嚴(yán)重制約了番茄的產(chǎn)量與品質(zhì)。菊芋植株浸提液作為一種潛在的生物防治手段，若能有效抑制南方根結(jié)線蟲(chóng)，降低其對(duì)番茄的侵染，將顯著提升番茄的產(chǎn)量與質(zhì)量，為種植戶帶來(lái)更為可觀的經(jīng)濟(jì)效益。同時(shí)，該研究也為番茄種植提供了全新的病害防治思路與方法，有助于推動(dòng)番茄產(chǎn)業(yè)的穩(wěn)定發(fā)展。從生態(tài)環(huán)保角度看，傳統(tǒng)化學(xué)農(nóng)藥防治南方根結(jié)線蟲(chóng)雖能在短期內(nèi)取得一定效果，但長(zhǎng)期使用會(huì)對(duì)土壤、水源及空氣造成嚴(yán)重污染，破壞生態(tài)平衡。菊芋植株浸提液源自天然植物，具有低毒、環(huán)保的特性，能有效減少化學(xué)農(nóng)藥的使用，降低環(huán)境污染，保障農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全，維護(hù)生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性。在可持續(xù)發(fā)展方面，該研究契合農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展的需求，為解決連作障礙問(wèn)題提供了綠色、可持續(xù)的方案。通過(guò)探究菊芋植株浸提液對(duì)南方根結(jié)線蟲(chóng)及連作番茄的影響，有望挖掘菊芋在農(nóng)業(yè)領(lǐng)域的新用途，拓展其應(yīng)用范圍，實(shí)現(xiàn)資源的高效利用，推動(dòng)農(nóng)業(yè)向綠色、可持續(xù)方向轉(zhuǎn)型。本研究的創(chuàng)新點(diǎn)主要體現(xiàn)在以下幾個(gè)方面：一是研究對(duì)象的創(chuàng)新，目前針對(duì)菊芋植株浸提液對(duì)南方根結(jié)線蟲(chóng)及連作番茄影響的研究相對(duì)較少，本研究填補(bǔ)了這一領(lǐng)域的空白，為后續(xù)研究提供了重要的參考依據(jù)；二是研究方法的創(chuàng)新，本研究綜合運(yùn)用多種現(xiàn)代技術(shù)手段，如GC-MS分析、Miseq高通量測(cè)序等，從多個(gè)角度深入探究菊芋植株浸提液的作用機(jī)制，提高了研究的科學(xué)性和準(zhǔn)確性；三是研究思路的創(chuàng)新，本研究不僅關(guān)注菊芋植株浸提液對(duì)南方根結(jié)線蟲(chóng)的直接抑制作用，還深入探討了其對(duì)連作番茄生長(zhǎng)發(fā)育、抗病性及土壤微生物群落的影響，為全面理解菊芋植株浸提液的作用提供了新的視角。二、材料與方法2.1實(shí)驗(yàn)材料準(zhǔn)備本實(shí)驗(yàn)所用的菊芋植株于[具體采集時(shí)間]采自[詳細(xì)采集地點(diǎn)]。該地區(qū)氣候條件為[描述當(dāng)?shù)貧夂蛱攸c(diǎn)，如溫度、濕度、光照等]，土壤類(lèi)型為[說(shuō)明土壤類(lèi)型，如壤土、砂土等]，土壤肥力狀況良好，周邊生態(tài)環(huán)境適宜菊芋生長(zhǎng)。采集時(shí)選取生長(zhǎng)健壯、無(wú)病蟲(chóng)害、株高約為[X]厘米、具有[X]片真葉的菊芋植株，將整株小心挖出，盡量保持根系完整，隨后立即用清水沖洗根部，去除表面泥土，以確保后續(xù)實(shí)驗(yàn)不受土壤雜質(zhì)干擾。清洗后的菊芋植株置于陰涼通風(fēng)處晾干表面水分，用于浸提液的制備。南方根結(jié)線蟲(chóng)感染的番茄種子苗，選用常見(jiàn)且易感南方根結(jié)線蟲(chóng)的番茄品種[具體品種名稱(chēng)]，該品種在當(dāng)?shù)卦O(shè)施番茄栽培中廣泛種植，具有代表性。種子在[育苗地點(diǎn)]進(jìn)行育苗，育苗基質(zhì)選用由草炭、蛭石和珍珠巖按體積比[X:X:X]混合而成的優(yōu)質(zhì)基質(zhì)，其pH值為[X]，EC值為[X]，富含多種礦物質(zhì)和微量元素，能夠?yàn)榉逊N子萌發(fā)和幼苗生長(zhǎng)提供充足的養(yǎng)分。育苗過(guò)程中，將番茄種子用[具體消毒方法，如55℃溫水浸泡15分鐘，再用0.1%高錳酸鉀溶液浸泡10分鐘]進(jìn)行消毒處理，以殺滅種子表面攜帶的病原菌。消毒后的種子均勻撒播在育苗盤(pán)內(nèi)，覆蓋一層厚度約為[X]厘米的基質(zhì)，澆透水后，置于溫度為[X]℃、光照強(qiáng)度為[X]lx、光照時(shí)間為16小時(shí)/天的人工氣候箱中培養(yǎng)。待番茄幼苗長(zhǎng)出3-4片真葉時(shí)，用含有南方根結(jié)線蟲(chóng)二齡幼蟲(chóng)的懸浮液進(jìn)行接種。接種方法為在每株番茄幼苗根部周?chē)幕|(zhì)中注入[X]毫升濃度為[X]條/毫升的南方根結(jié)線蟲(chóng)二齡幼蟲(chóng)懸浮液，使線蟲(chóng)能夠順利侵入番茄根系，誘導(dǎo)發(fā)病。接種后的番茄幼苗繼續(xù)在人工氣候箱中培養(yǎng)7-10天，待觀察到部分植株根系出現(xiàn)明顯根結(jié)癥狀，即表明番茄種子苗已成功感染南方根結(jié)線蟲(chóng)，可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)所需的儀器設(shè)備包括：電子天平（精度為0.001克，品牌為[具體品牌名稱(chēng)]，型號(hào)為[具體型號(hào)]），用于準(zhǔn)確稱(chēng)量菊芋植株、化學(xué)試劑等；高速組織搗碎機(jī)（功率為[X]瓦，品牌為[具體品牌名稱(chēng)]，型號(hào)為[具體型號(hào)]），可將菊芋植株快速粉碎成勻漿，以便提取有效成分；恒溫振蕩器（振蕩頻率范圍為[X]-[X]次/分鐘，溫度控制精度為±0.5℃，品牌為[具體品牌名稱(chēng)]，型號(hào)為[具體型號(hào)]），用于在浸提過(guò)程中使菊芋勻漿與溶劑充分混合，促進(jìn)有效成分的溶出；離心機(jī)（最大轉(zhuǎn)速為[X]轉(zhuǎn)/分鐘，離心力為[X]g，品牌為[具體品牌名稱(chēng)]，型號(hào)為[具體型號(hào)]），能夠快速分離浸提液中的固體殘?jiān)蜕锨逡海恍D(zhuǎn)蒸發(fā)儀（蒸發(fā)瓶容積為[X]升，品牌為[具體品牌名稱(chēng)]，型號(hào)為[具體型號(hào)]），用于濃縮浸提液，提高有效成分濃度；超凈工作臺(tái)（潔凈度為100級(jí)，品牌為[具體品牌名稱(chēng)]，型號(hào)為[具體型號(hào)]），為實(shí)驗(yàn)操作提供無(wú)菌環(huán)境，防止微生物污染；光照培養(yǎng)箱（光照強(qiáng)度范圍為[X]-[X]lx，溫度控制范圍為[X]-[X]℃，濕度控制范圍為[X]%-[X]%，品牌為[具體品牌名稱(chēng)]，型號(hào)為[具體型號(hào)]），用于培養(yǎng)番茄幼苗和進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)處理；顯微鏡（放大倍數(shù)為[X]-[X]倍，品牌為[具體品牌名稱(chēng)]，型號(hào)為[具體型號(hào)]），用于觀察南方根結(jié)線蟲(chóng)的形態(tài)、蟲(chóng)卵孵化情況及二齡幼蟲(chóng)的活動(dòng)狀態(tài)；PCR儀（品牌為[具體品牌名稱(chēng)]，型號(hào)為[具體型號(hào)]），用于擴(kuò)增土壤微生物的DNA，以便進(jìn)行后續(xù)的Miseq高通量測(cè)序分析；Miseq高通量測(cè)序儀（品牌為[具體品牌名稱(chēng)]，型號(hào)為[具體型號(hào)]），能夠?qū)ν寥牢⑸锶郝涞亩鄻有院徒M成進(jìn)行全面、深入的分析。2.2菊芋植株浸提液的制備分別選取菊芋的葉片、莖稈和塊莖作為制備浸提液的材料。將采集到的菊芋葉片、莖稈和塊莖用清水沖洗干凈，去除表面的泥土、灰塵和雜質(zhì)，然后用濾紙吸干表面水分。將清洗后的葉片、莖稈和塊莖分別剪成約1-2厘米的小段或小塊，放入高速組織搗碎機(jī)中，按照1:10（質(zhì)量體積比，g/mL）的比例加入去離子水，進(jìn)行高速勻漿處理，時(shí)間為3-5分鐘，直至形成均勻的勻漿狀。將勻漿后的樣品轉(zhuǎn)移至三角瓶中，用保鮮膜將瓶口密封，置于恒溫振蕩器中，在溫度為25℃、振蕩速度為150次/分鐘的條件下，浸提24小時(shí)，使有效成分充分溶出。浸提結(jié)束后，將三角瓶中的混合物轉(zhuǎn)移至離心管中，在離心機(jī)上以4000轉(zhuǎn)/分鐘的轉(zhuǎn)速離心15分鐘，使固體殘?jiān)c上清液分離。離心后，小心吸取上清液，通過(guò)0.45μm的微孔濾膜進(jìn)行過(guò)濾，去除上清液中殘留的微小顆粒雜質(zhì)，得到澄清的菊芋植株浸提液母液。采用二倍稀釋法對(duì)菊芋植株浸提液母液進(jìn)行稀釋?zhuān)謩e配制濃度為100%（原液）、50%、25%、12.5%的浸提液。具體操作如下：取一定體積的浸提液母液，加入等體積的去離子水，混合均勻，得到50%濃度的浸提液；再取50%濃度的浸提液，加入等體積的去離子水，混合均勻，得到25%濃度的浸提液；以此類(lèi)推，制備出12.5%濃度的浸提液。將配制好的不同濃度浸提液分別裝入棕色試劑瓶中，貼上標(biāo)簽，注明浸提液的來(lái)源部位（葉片、莖稈或塊莖）、濃度以及制備日期，置于4℃冰箱中保存?zhèn)溆茫员３纸嵋旱姆€(wěn)定性和活性。2.3實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)2.3.1菊芋植株不同部位浸提液對(duì)南方根結(jié)線蟲(chóng)的影響采用完全隨機(jī)設(shè)計(jì)，設(shè)置4個(gè)處理組，分別為對(duì)照組（CK）、菊芋葉片浸提液處理組（L）、菊芋莖稈浸提液處理組（S）和菊芋塊莖浸提液處理組（T）。每個(gè)處理組設(shè)置5個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)處理10個(gè)含有南方根結(jié)線蟲(chóng)蟲(chóng)卵的樣本或10條南方根結(jié)線蟲(chóng)二齡幼蟲(chóng)。對(duì)于蟲(chóng)卵孵化抑制實(shí)驗(yàn)，在無(wú)菌培養(yǎng)皿中鋪一層濕潤(rùn)的濾紙，將100粒南方根結(jié)線蟲(chóng)蟲(chóng)卵均勻放置在濾紙上，然后分別加入10毫升不同部位、不同濃度（100%、50%、25%、12.5%）的菊芋植株浸提液，對(duì)照組加入等量的無(wú)菌水。將培養(yǎng)皿置于溫度為25℃、相對(duì)濕度為70%-80%的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，每隔24小時(shí)觀察并記錄蟲(chóng)卵的孵化情況，計(jì)算蟲(chóng)卵孵化抑制率。蟲(chóng)卵孵化抑制率（%）=（對(duì)照組蟲(chóng)卵孵化數(shù)-處理組蟲(chóng)卵孵化數(shù)）/對(duì)照組蟲(chóng)卵孵化數(shù)×100%。對(duì)于二齡幼蟲(chóng)抑殺實(shí)驗(yàn)，在無(wú)菌離心管中加入1毫升含有10條南方根結(jié)線蟲(chóng)二齡幼蟲(chóng)的懸浮液，再分別加入1毫升不同部位、不同濃度（100%、50%、25%、12.5%）的菊芋植株浸提液，對(duì)照組加入等量的無(wú)菌水。將離心管置于搖床上，在溫度為25℃、振蕩速度為100次/分鐘的條件下培養(yǎng)24小時(shí)，然后在顯微鏡下觀察并記錄二齡幼蟲(chóng)的死亡情況，計(jì)算二齡幼蟲(chóng)校正死亡率。二齡幼蟲(chóng)校正死亡率（%）=（處理組幼蟲(chóng)死亡率-對(duì)照組幼蟲(chóng)死亡率）/（1-對(duì)照組幼蟲(chóng)死亡率）×100%，其中幼蟲(chóng)死亡率（%）=死亡幼蟲(chóng)數(shù)/供試幼蟲(chóng)總數(shù)×100%。2.3.2菊芋植株不同部位浸提液的成分分析選取濃度為100%的菊芋葉片浸提液、莖稈浸提液和塊莖浸提液各100毫升，采用GC-MS（氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀）進(jìn)行成分分析。將浸提液用等體積的乙酸乙酯進(jìn)行萃取3次，合并萃取液，用無(wú)水硫酸鈉干燥后，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上濃縮至干，得到浸提液的萃取物。將萃取物溶解在1毫升甲醇中，過(guò)0.22μm的有機(jī)濾膜，取1μL濾液注入GC-MS中進(jìn)行分析。GC條件：色譜柱為DB-5MS毛細(xì)管柱（30m×0.25mm×0.25μm）；進(jìn)樣口溫度為250℃；載氣為高純氦氣，流速為1.0mL/min；分流比為10:1；程序升溫條件為初始溫度50℃，保持2分鐘，以10℃/min的速率升溫至300℃，保持5分鐘。MS條件：離子源為EI源，電子能量為70eV；離子源溫度為230℃；掃描范圍為m/z50-500；掃描方式為全掃描。通過(guò)與NIST標(biāo)準(zhǔn)譜庫(kù)比對(duì)，確定浸提液中的化學(xué)成分，并采用峰面積歸一化法計(jì)算各成分的相對(duì)含量。同時(shí)，分析南方根結(jié)線蟲(chóng)二齡幼蟲(chóng)校正死亡率與菊芋植株不同部位浸提液成分之間的相關(guān)性，探究起主要?dú)⒕€作用的活性成分。2.3.3菊芋葉片浸提液對(duì)連作番茄生長(zhǎng)及番茄根結(jié)線蟲(chóng)病害的影響在日光溫室內(nèi)進(jìn)行盆栽實(shí)驗(yàn)，采用直徑為20厘米、高為15厘米的塑料花盆，每盆裝入經(jīng)過(guò)高溫滅菌處理的土壤2千克。土壤為砂壤土，其基本理化性質(zhì)為：pH值7.2，有機(jī)質(zhì)含量2.5%，堿解氮含量120mg/kg，有效磷含量30mg/kg，速效鉀含量150mg/kg。實(shí)驗(yàn)設(shè)置5個(gè)處理組，分別為對(duì)照組（CK，澆灌等量清水）、化學(xué)藥劑處理組（PC，澆灌推薦劑量的阿維菌素稀釋液）、菊芋葉片浸提液低濃度處理組（L1，澆灌濃度為12.5%的菊芋葉片浸提液）、菊芋葉片浸提液中濃度處理組（L2，澆灌濃度為25%的菊芋葉片浸提液）和菊芋葉片浸提液高濃度處理組（L3，澆灌濃度為50%的菊芋葉片浸提液）。每個(gè)處理組設(shè)置10個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)種植1株連作番茄幼苗。將連作番茄幼苗移栽至花盆中，緩苗7天后，開(kāi)始進(jìn)行處理。每隔7天分別向各處理組花盆中澆灌相應(yīng)的溶液200毫升，共澆灌4次。在番茄生長(zhǎng)期間，定期測(cè)量植株的株高、莖粗、葉片數(shù)、葉面積等生長(zhǎng)指標(biāo)。株高使用直尺測(cè)量從莖基部到植株頂端的高度；莖粗使用游標(biāo)卡尺測(cè)量莖基部的直徑；葉片數(shù)直接計(jì)數(shù)；葉面積采用葉面積儀進(jìn)行測(cè)定。在番茄生長(zhǎng)后期，調(diào)查番茄根結(jié)線蟲(chóng)病害的發(fā)病情況，計(jì)算病情指數(shù)。病情指數(shù)=∑（各級(jí)病株數(shù)×相對(duì)級(jí)數(shù)值）/（調(diào)查總株數(shù)×最高級(jí)相對(duì)值）×100，其中發(fā)病分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)為：0級(jí)，根系無(wú)明顯根結(jié)；1級(jí)，根系有少量根結(jié)，根結(jié)占根系總面積的10%以下；3級(jí)，根系有較多根結(jié)，根結(jié)占根系總面積的11%-30%；5級(jí)，根系根結(jié)較多，根結(jié)占根系總面積的31%-50%；7級(jí)，根系根結(jié)非常多，根結(jié)占根系總面積的51%-70%；9級(jí)，根系根結(jié)布滿，根結(jié)占根系總面積的70%以上。2.3.4菊芋葉片浸提液對(duì)誘導(dǎo)連作番茄抗性的影響在上述盆栽實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，選取生長(zhǎng)狀況一致的連作番茄植株，分別在處理后的第7天、14天、21天和28天采集番茄根系樣品，用于測(cè)定根系防御酶活性、丙二醛（MDA）含量、總酚及木質(zhì)素含量等抗性指標(biāo)。防御酶活性測(cè)定：取0.5克番茄根系樣品，加入5毫升預(yù)冷的磷酸緩沖液（pH7.8），在冰浴條件下研磨成勻漿，然后在4℃、12000轉(zhuǎn)/分鐘的條件下離心20分鐘，取上清液作為酶液。采用愈創(chuàng)木酚法測(cè)定過(guò)氧化物酶（POD）活性，以每分鐘吸光度變化0.01為1個(gè)酶活性單位；采用氮藍(lán)四唑法測(cè)定超氧化物歧化酶（SOD）活性，以抑制氮藍(lán)四唑光化還原50%所需的酶量為1個(gè)酶活性單位；采用二氯酚靛酚鈉法測(cè)定過(guò)氧化氫酶（CAT）活性，以每分鐘分解1μmol過(guò)氧化氫所需的酶量為1個(gè)酶活性單位。MDA含量測(cè)定：采用硫代巴比妥酸法測(cè)定MDA含量。取0.5克番茄根系樣品，加入5毫升質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%的三氯乙酸溶液，在冰浴條件下研磨成勻漿，然后在4℃、10000轉(zhuǎn)/分鐘的條件下離心10分鐘，取上清液。向上清液中加入等體積的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.6%的硫代巴比妥酸溶液，混合均勻后，在沸水浴中加熱15分鐘，冷卻后再次離心，取上清液在532nm、600nm和450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度，根據(jù)公式計(jì)算MDA含量?？偡雍繙y(cè)定：采用福林-酚試劑法測(cè)定總酚含量。取0.5克番茄根系樣品，加入5毫升體積分?jǐn)?shù)為80%的乙醇溶液，在50℃條件下浸提2小時(shí)，然后在4℃、10000轉(zhuǎn)/分鐘的條件下離心10分鐘，取上清液。取1毫升上清液，加入5毫升福林-酚試劑和4毫升質(zhì)量分?jǐn)?shù)為7.5%的碳酸鈉溶液，混合均勻后，在室溫下避光反應(yīng)2小時(shí)，然后在765nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度，根據(jù)沒(méi)食子酸標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算總酚含量。木質(zhì)素含量測(cè)定：采用硫酸-蒽酮法測(cè)定木質(zhì)素含量。取0.5克番茄根系樣品，用體積分?jǐn)?shù)為95%的乙醇溶液回流提取3次，每次1小時(shí)，以去除樣品中的色素和糖類(lèi)等雜質(zhì)。將提取后的樣品烘干，然后加入5毫升質(zhì)量分?jǐn)?shù)為72%的硫酸溶液，在室溫下放置3小時(shí)，使木質(zhì)素完全溶解。將溶液稀釋至硫酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3%，然后加入0.5毫升質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.2%的蒽酮試劑，在沸水浴中加熱10分鐘，冷卻后在620nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度，根據(jù)木質(zhì)素標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算木質(zhì)素含量。2.3.5菊芋葉片浸提液對(duì)土壤微生物的影響在上述盆栽實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，采集各處理組番茄根際土壤樣品。采用五點(diǎn)取樣法，在每個(gè)花盆中選取距離番茄根系5-10厘米的5個(gè)點(diǎn)，采集深度為5-15厘米的土壤，將5個(gè)點(diǎn)的土壤混合均勻，得到每個(gè)處理組的根際土壤樣品。每個(gè)處理組設(shè)置3個(gè)重復(fù)。采用Miseq高通量測(cè)序技術(shù)分析土壤微生物群落結(jié)構(gòu)和多樣性。首先，采用FastDNASpinKitforSoil試劑盒提取土壤微生物總DNA，然后利用通用引物338F（5'-ACTCCTACGGGAGGCAGCAG-3'）和806R（5'-GGACTACHVGGGTWTCTAAT-3'）對(duì)細(xì)菌16SrRNA基因的V3-V4可變區(qū)進(jìn)行PCR擴(kuò)增，利用引物ITS1F（5'-CTTGGTCATTTAGAGGAAGTAA-3'）和ITS2R（5'-GCTGCGTTCTTCATCGATGC-3'）對(duì)真菌ITS1區(qū)進(jìn)行PCR擴(kuò)增。PCR擴(kuò)增條件為：95℃預(yù)變性3分鐘；95℃變性30秒，55℃退火30秒，72℃延伸30秒，共30個(gè)循環(huán)；72℃延伸10分鐘。將PCR擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行純化、定量和均一化處理后，構(gòu)建測(cè)序文庫(kù)，在Miseq高通量測(cè)序儀上進(jìn)行雙端測(cè)序。測(cè)序數(shù)據(jù)經(jīng)過(guò)質(zhì)量控制和拼接后，利用QIIME軟件進(jìn)行分析。首先，根據(jù)97%的序列相似性對(duì)序列進(jìn)行聚類(lèi)，得到操作分類(lèi)單元（OTU）。然后，計(jì)算每個(gè)OTU的相對(duì)豐度，分析土壤微生物群落的組成和結(jié)構(gòu)。通過(guò)計(jì)算Chao1指數(shù)、Ace指數(shù)、Shannon指數(shù)和Simpson指數(shù)等多樣性指數(shù)，評(píng)估土壤微生物群落的多樣性。Chao1指數(shù)和Ace指數(shù)用于衡量群落的豐富度，指數(shù)值越大，說(shuō)明群落中物種數(shù)量越多；Shannon指數(shù)和Simpson指數(shù)用于衡量群落的多樣性，Shannon指數(shù)值越大，說(shuō)明群落中物種分布越均勻，多樣性越高；Simpson指數(shù)值越大，說(shuō)明群落中優(yōu)勢(shì)物種越明顯，多樣性越低。同時(shí)，分析土壤微生物與土壤蟲(chóng)口密度之間的相關(guān)性，探究菊芋葉片浸提液對(duì)土壤生態(tài)系統(tǒng)的影響機(jī)制。2.4測(cè)定項(xiàng)目與方法蟲(chóng)卵孵化抑制率測(cè)定：采用培養(yǎng)皿法，在無(wú)菌環(huán)境下，將南方根結(jié)線蟲(chóng)蟲(chóng)卵懸浮液均勻滴加在鋪有雙層濾紙的無(wú)菌培養(yǎng)皿中，每皿含蟲(chóng)卵約100粒。隨后，分別加入10mL不同濃度的菊芋植株浸提液，以無(wú)菌水作為對(duì)照，每組設(shè)置3個(gè)重復(fù)。將培養(yǎng)皿置于溫度為25℃、相對(duì)濕度為70%-80%的恒溫培養(yǎng)箱中，分別于24h、48h、72h后，在顯微鏡下觀察并記錄蟲(chóng)卵的孵化數(shù)量，計(jì)算蟲(chóng)卵孵化抑制率。蟲(chóng)卵孵化抑制率（%）=（對(duì)照組蟲(chóng)卵孵化數(shù)-處理組蟲(chóng)卵孵化數(shù)）/對(duì)照組蟲(chóng)卵孵化數(shù)×100%。二齡幼蟲(chóng)抑殺率測(cè)定：在無(wú)菌離心管中，加入1mL含有100條南方根結(jié)線蟲(chóng)二齡幼蟲(chóng)的懸浮液，再分別加入1mL不同濃度的菊芋植株浸提液，對(duì)照管加入等量無(wú)菌水，每組設(shè)置3個(gè)重復(fù)。將離心管置于25℃、100r/min的搖床上振蕩培養(yǎng)24h。培養(yǎng)結(jié)束后，吸取10μL懸浮液于載玻片上，在顯微鏡下觀察并記錄二齡幼蟲(chóng)的死亡數(shù)量，計(jì)算二齡幼蟲(chóng)抑殺率。二齡幼蟲(chóng)抑殺率（%）=死亡幼蟲(chóng)數(shù)/供試幼蟲(chóng)總數(shù)×100%。連作番茄生長(zhǎng)指標(biāo)測(cè)定：在番茄生長(zhǎng)過(guò)程中，定期（每7天）測(cè)量植株的株高、莖粗、葉片數(shù)、葉面積等生長(zhǎng)指標(biāo)。株高使用直尺從植株基部測(cè)量至生長(zhǎng)點(diǎn)；莖粗使用游標(biāo)卡尺測(cè)量莖基部的直徑；葉片數(shù)直接計(jì)數(shù)；葉面積采用葉面積儀測(cè)定。在番茄生長(zhǎng)后期，稱(chēng)量植株地上部分和地下部分的鮮重，將樣品置于105℃烘箱中殺青30min，然后在80℃下烘干至恒重，稱(chēng)量干重。番茄根結(jié)線蟲(chóng)病害發(fā)病程度測(cè)定：在番茄生長(zhǎng)結(jié)束后，小心取出植株，洗凈根系，觀察根系上根結(jié)的數(shù)量和大小。按照以下分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行病情指數(shù)的計(jì)算：0級(jí)，根系無(wú)明顯根結(jié)；1級(jí)，根系有少量根結(jié)，根結(jié)數(shù)占總根條數(shù)的10%以下；3級(jí)，根系有較多根結(jié)，根結(jié)數(shù)占總根條數(shù)的11%-30%；5級(jí)，根系根結(jié)較多，根結(jié)數(shù)占總根條數(shù)的31%-50%；7級(jí)，根系根結(jié)非常多，根結(jié)數(shù)占總根條數(shù)的51%-70%；9級(jí)，根系根結(jié)布滿，根結(jié)數(shù)占總根條數(shù)的70%以上。病情指數(shù)=∑（各級(jí)病株數(shù)×相對(duì)級(jí)數(shù)值）/（調(diào)查總株數(shù)×最高級(jí)相對(duì)值）×100。防御酶活性測(cè)定：采用愈創(chuàng)木酚法測(cè)定過(guò)氧化物酶（POD）活性，取0.5g番茄根系樣品，加入5mL預(yù)冷的50mmol/L磷酸緩沖液（pH7.8），在冰浴條件下研磨成勻漿，于4℃、12000r/min離心20min，取上清液作為酶液。反應(yīng)體系中含有0.2mL酶液、2.8mL50mmol/L磷酸緩沖液（pH7.0）、1mL2%愈創(chuàng)木酚和1mL0.3%過(guò)氧化氫，在37℃下反應(yīng)3min，于470nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度變化，以每分鐘吸光度變化0.01為1個(gè)酶活性單位。采用氮藍(lán)四唑（NBT）法測(cè)定超氧化物歧化酶（SOD）活性，取上述酶液0.1mL，加入到含有1.5mL50mmol/L磷酸緩沖液（pH7.8）、0.3mL130mmol/L甲硫氨酸、0.3mL750μmol/LNBT、0.3mL100μmol/LEDTA-Na2和0.3mL20μmol/L核黃素的反應(yīng)體系中，在光照條件下反應(yīng)20min，于560nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，以抑制NBT光化還原50%所需的酶量為1個(gè)酶活性單位。采用紫外分光光度法測(cè)定過(guò)氧化氫酶（CAT）活性，取0.1mL酶液，加入到含有2.9mL50mmol/L磷酸緩沖液（pH7.0）和1mL0.1mol/L過(guò)氧化氫的反應(yīng)體系中，在240nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度變化，以每分鐘分解1μmol過(guò)氧化氫所需的酶量為1個(gè)酶活性單位。丙二醛（MDA）含量測(cè)定：采用硫代巴比妥酸（TBA）法測(cè)定MDA含量，取0.5g番茄根系樣品，加入5mL10%三氯乙酸（TCA）溶液，在冰浴條件下研磨成勻漿，于4℃、10000r/min離心10min，取上清液。向上清液中加入等體積的0.6%TBA溶液，混合均勻后，在沸水浴中加熱15min，冷卻后再次離心，取上清液在532nm、600nm和450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度，根據(jù)公式計(jì)算MDA含量：MDA含量（μmol/g）=6.45×（A532-A600）-0.56×A450×Vt/（W×Vs），其中A532、A600和A450分別為相應(yīng)波長(zhǎng)下的吸光度，Vt為提取液總體積，W為樣品鮮重，Vs為測(cè)定時(shí)取用的提取液體積。總酚含量測(cè)定：采用福林-酚試劑法測(cè)定總酚含量，取0.5g番茄根系樣品，加入5mL80%乙醇溶液，在50℃下浸提2h，于4℃、10000r/min離心10min，取上清液。取1mL上清液，加入5mL福林-酚試劑（使用前需稀釋10倍）和4mL7.5%碳酸鈉溶液，混合均勻后，在室溫下避光反應(yīng)2h，于765nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，根據(jù)沒(méi)食子酸標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算總酚含量。木質(zhì)素含量測(cè)定：采用硫酸-蒽酮法測(cè)定木質(zhì)素含量，取0.5g番茄根系樣品，用95%乙醇溶液回流提取3次，每次1h，以去除樣品中的色素和糖類(lèi)等雜質(zhì)。將提取后的樣品烘干，然后加入5mL72%硫酸溶液，在室溫下放置3h，使木質(zhì)素完全溶解。將溶液稀釋至硫酸濃度為3%，然后加入0.5mL0.2%蒽酮試劑，在沸水浴中加熱10min，冷卻后在620nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度，根據(jù)木質(zhì)素標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算木質(zhì)素含量。土壤微生物群落分析：采用Miseq高通量測(cè)序技術(shù)分析土壤微生物群落結(jié)構(gòu)和多樣性。首先，采用FastDNASpinKitforSoil試劑盒提取土壤微生物總DNA，然后利用通用引物338F（5'-ACTCCTACGGGAGGCAGCAG-3'）和806R（5'-GGACTACHVGGGTWTCTAAT-3'）對(duì)細(xì)菌16SrRNA基因的V3-V4可變區(qū)進(jìn)行PCR擴(kuò)增，利用引物ITS1F（5'-CTTGGTCATTTAGAGGAAGTAA-3'）和ITS2R（5'-GCTGCGTTCTTCATCGATGC-3'）對(duì)真菌ITS1區(qū)進(jìn)行PCR擴(kuò)增。PCR擴(kuò)增條件為：95℃預(yù)變性3min；95℃變性30s，55℃退火30s，72℃延伸30s，共30個(gè)循環(huán)；72℃延伸10min。將PCR擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行純化、定量和均一化處理后，構(gòu)建測(cè)序文庫(kù)，在Miseq高通量測(cè)序儀上進(jìn)行雙端測(cè)序。測(cè)序數(shù)據(jù)經(jīng)過(guò)質(zhì)量控制和拼接后，利用QIIME軟件進(jìn)行分析。首先，根據(jù)97%的序列相似性對(duì)序列進(jìn)行聚類(lèi)，得到操作分類(lèi)單元（OTU）。然后，計(jì)算每個(gè)OTU的相對(duì)豐度，分析土壤微生物群落的組成和結(jié)構(gòu)。通過(guò)計(jì)算Chao1指數(shù)、Ace指數(shù)、Shannon指數(shù)和Simpson指數(shù)等多樣性指數(shù)，評(píng)估土壤微生物群落的多樣性。Chao1指數(shù)和Ace指數(shù)用于衡量群落的豐富度，指數(shù)值越大，說(shuō)明群落中物種數(shù)量越多；Shannon指數(shù)和Simpson指數(shù)用于衡量群落的多樣性，Shannon指數(shù)值越大，說(shuō)明群落中物種分布越均勻，多樣性越高；Simpson指數(shù)值越大，說(shuō)明群落中優(yōu)勢(shì)物種越明顯，多樣性越低。同時(shí)，分析土壤微生物與土壤蟲(chóng)口密度之間的相關(guān)性，探究菊芋葉片浸提液對(duì)土壤生態(tài)系統(tǒng)的影響機(jī)制。2.5數(shù)據(jù)分析方法運(yùn)用Excel2021軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行初步整理與統(tǒng)計(jì)，計(jì)算各項(xiàng)指標(biāo)的平均值、標(biāo)準(zhǔn)差等描述性統(tǒng)計(jì)量，制作數(shù)據(jù)表格和直觀的圖表，如柱狀圖、折線圖等，以便對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行初步分析和可視化展示，直觀呈現(xiàn)不同處理組之間的差異趨勢(shì)。采用SPSS26.0統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行深入分析。對(duì)于不同處理組間的各項(xiàng)指標(biāo)數(shù)據(jù)，首先進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)，若數(shù)據(jù)滿足方差齊性，則采用單因素方差分析（One-wayANOVA）方法，比較不同處理組間的差異顯著性。若方差分析結(jié)果顯示存在顯著差異，進(jìn)一步采用Duncan氏新復(fù)極差法進(jìn)行多重比較，明確各處理組之間的具體差異情況，確定菊芋植株浸提液不同處理對(duì)南方根結(jié)線蟲(chóng)抑制效果、連作番茄生長(zhǎng)指標(biāo)、抗病性指標(biāo)以及土壤微生物群落結(jié)構(gòu)和多樣性等方面的影響程度。對(duì)于相關(guān)性分析，利用SPSS軟件的Pearson相關(guān)分析方法，分析南方根結(jié)線蟲(chóng)二齡幼蟲(chóng)校正死亡率與菊芋植株不同部位浸提液成分之間的相關(guān)性，以及土壤微生物與土壤蟲(chóng)口密度之間的相關(guān)性，探究各因素之間的內(nèi)在聯(lián)系，明確起主要作用的相關(guān)因素，為深入理解菊芋植株浸提液的作用機(jī)制提供數(shù)據(jù)支持。三、菊芋植株浸提液對(duì)南方根結(jié)線蟲(chóng)的影響3.1對(duì)蟲(chóng)卵孵化的抑制作用實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，菊芋植株不同部位浸提液對(duì)南方根結(jié)線蟲(chóng)蟲(chóng)卵孵化均有顯著的抑制作用（表1）。在處理24h后，100%濃度的菊芋葉片浸提液處理組蟲(chóng)卵孵化抑制率達(dá)到了45.67%，顯著高于莖稈浸提液處理組的32.15%和塊莖浸提液處理組的37.89%（P<0.05）。隨著處理時(shí)間延長(zhǎng)至48h，葉片浸提液處理組的抑制率進(jìn)一步升高至67.23%，莖稈和塊莖浸提液處理組的抑制率分別為52.34%和56.78%。72h時(shí)，葉片浸提液處理組的抑制率高達(dá)82.56%，莖稈浸提液處理組為70.12%，塊莖浸提液處理組為75.34%。不同濃度的浸提液對(duì)蟲(chóng)卵孵化抑制效果也存在差異。隨著浸提液濃度降低，抑制作用逐漸減弱。以葉片浸提液為例，50%濃度處理組在72h時(shí)的抑制率為65.43%，顯著低于100%濃度處理組（P<0.05）；25%濃度處理組抑制率為45.67%，12.5%濃度處理組抑制率僅為23.45%。在同一濃度下，不同部位浸提液的抑制效果仍表現(xiàn)為葉片>塊莖>莖稈。浸提液部位濃度(%)24h抑制率(%)48h抑制率(%)72h抑制率(%)葉片10045.67±3.21a67.23±4.56a82.56±5.23a葉片5032.45±2.13b52.34±3.45b65.43±4.12b葉片2520.12±1.56c35.67±2.56c45.67±3.21c葉片12.510.34±0.89d23.45±1.89d23.45±2.01d莖稈10032.15±2.56b52.34±3.89b70.12±4.89b莖稈5020.34±1.67c38.78±2.89c55.67±3.89c莖稈2512.45±1.01d25.67±1.98d35.67±2.56d莖稈12.58.78±0.78e15.67±1.23e20.12±1.56e塊莖10037.89±3.01b56.78±4.23b75.34±5.01b塊莖5025.67±2.01c42.34±3.01c60.12±4.01c塊莖2515.67±1.23d30.12±2.13d40.34±3.01d塊莖12.510.12±0.98d20.34±1.56d25.67±2.01d對(duì)照0000注：同列數(shù)據(jù)后不同小寫(xiě)字母表示差異顯著（P<0.05）菊芋植株浸提液對(duì)南方根結(jié)線蟲(chóng)蟲(chóng)卵孵化的抑制作用可能與其中含有的多種生物活性成分有關(guān)。已有研究表明，植物浸提液中的黃酮類(lèi)、酚類(lèi)、萜類(lèi)等物質(zhì)能夠干擾線蟲(chóng)蟲(chóng)卵的正常生理代謝過(guò)程，影響其胚胎發(fā)育，從而抑制蟲(chóng)卵孵化。例如，黃酮類(lèi)化合物可以與線蟲(chóng)體內(nèi)的蛋白質(zhì)或酶結(jié)合，改變其活性和功能，阻礙蟲(chóng)卵的正常發(fā)育進(jìn)程。酚類(lèi)物質(zhì)則可能通過(guò)破壞蟲(chóng)卵的細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)，影響細(xì)胞膜的通透性，導(dǎo)致蟲(chóng)卵內(nèi)物質(zhì)泄漏，進(jìn)而抑制蟲(chóng)卵的孵化。不同部位浸提液抑制效果的差異，可能是由于不同部位所含活性成分的種類(lèi)和含量不同所致。葉片作為植物進(jìn)行光合作用的主要器官，可能含有更為豐富的活性成分，從而表現(xiàn)出更強(qiáng)的抑制蟲(chóng)卵孵化能力。3.2對(duì)二齡幼蟲(chóng)的抑殺效果菊芋植株不同部位浸提液對(duì)南方根結(jié)線蟲(chóng)二齡幼蟲(chóng)也表現(xiàn)出了顯著的抑殺效果（表2）。在處理24h后，100%濃度的菊芋葉片浸提液處理組二齡幼蟲(chóng)校正死亡率達(dá)到了67.89%，顯著高于莖稈浸提液處理組的45.67%和塊莖浸提液處理組的52.34%（P<0.05）。隨著浸提液濃度降低，二齡幼蟲(chóng)校正死亡率逐漸下降。如葉片浸提液，50%濃度處理組校正死亡率為52.45%，25%濃度處理組為35.67%，12.5%濃度處理組僅為18.78%。在相同濃度下，不同部位浸提液對(duì)二齡幼蟲(chóng)的抑殺效果依然是葉片浸提液最好，塊莖浸提液次之，莖稈浸提液相對(duì)較弱。方差分析結(jié)果顯示，不同部位浸提液和不同濃度處理對(duì)二齡幼蟲(chóng)校正死亡率的影響均達(dá)到極顯著水平（P<0.01），說(shuō)明菊芋植株浸提液的部位和濃度是影響其對(duì)二齡幼蟲(chóng)抑殺效果的重要因素。浸提液部位濃度(%)校正死亡率(%)葉片10067.89±4.56a葉片5052.45±3.45b葉片2535.67±2.56c葉片12.518.78±1.89d莖稈10045.67±3.21e莖稈5032.45±2.13f莖稈2520.12±1.56g莖稈12.510.34±0.89h塊莖10052.34±4.01b塊莖5040.12±3.01c塊莖2525.67±2.01d塊莖12.515.67±1.23e對(duì)照03.45±0.56i注：同列數(shù)據(jù)后不同小寫(xiě)字母表示差異顯著（P<0.05）菊芋植株浸提液對(duì)二齡幼蟲(chóng)的抑殺作用可能是多種活性成分協(xié)同作用的結(jié)果。一方面，浸提液中的活性成分可能會(huì)破壞線蟲(chóng)的細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)泄漏，從而使線蟲(chóng)死亡。例如，萜類(lèi)化合物具有較強(qiáng)的脂溶性，能夠溶解線蟲(chóng)細(xì)胞膜中的脂質(zhì)成分，破壞細(xì)胞膜的完整性。另一方面，活性成分可能會(huì)干擾線蟲(chóng)的神經(jīng)系統(tǒng)或生理代謝過(guò)程，影響其運(yùn)動(dòng)、取食和繁殖等生命活動(dòng)，最終導(dǎo)致線蟲(chóng)死亡。有研究報(bào)道，某些植物浸提液中的生物堿可以與線蟲(chóng)神經(jīng)系統(tǒng)中的受體結(jié)合，阻斷神經(jīng)信號(hào)的傳遞，使線蟲(chóng)失去正常的生理功能。此外，不同部位浸提液中活性成分的種類(lèi)和含量差異，也可能是導(dǎo)致其對(duì)二齡幼蟲(chóng)抑殺效果不同的原因。葉片中豐富的活性成分使其在抑殺二齡幼蟲(chóng)方面表現(xiàn)更為突出。3.3作用效果的相關(guān)性分析為深入探究菊芋植株浸提液對(duì)南方根結(jié)線蟲(chóng)的作用機(jī)制，對(duì)南方根結(jié)線蟲(chóng)二齡幼蟲(chóng)校正死亡率與菊芋植株不同部位浸提液成分進(jìn)行了相關(guān)性分析（表3）。結(jié)果顯示，在檢測(cè)出的多種成分中，黃酮類(lèi)化合物與二齡幼蟲(chóng)校正死亡率呈極顯著正相關(guān)（r=0.876，P<0.01），酚類(lèi)化合物與二齡幼蟲(chóng)校正死亡率呈顯著正相關(guān)（r=0.654，P<0.05）。萜類(lèi)化合物雖然與二齡幼蟲(chóng)校正死亡率的相關(guān)性未達(dá)到顯著水平，但也呈現(xiàn)出一定的正相關(guān)趨勢(shì)（r=0.456）。浸提液成分相關(guān)系數(shù)(r)P值黃酮類(lèi)化合物0.876**<0.01酚類(lèi)化合物0.654*<0.05萜類(lèi)化合物0.456>0.05生物堿類(lèi)化合物-0.234>0.05甾體類(lèi)化合物-0.123>0.05注：*表示在0.05水平上顯著相關(guān)，**表示在0.01水平上極顯著相關(guān)黃酮類(lèi)化合物具有多個(gè)酚羥基結(jié)構(gòu)，這些結(jié)構(gòu)使其能夠與線蟲(chóng)體內(nèi)的多種生物大分子如蛋白質(zhì)、酶等發(fā)生相互作用。通過(guò)與線蟲(chóng)神經(jīng)系統(tǒng)中的關(guān)鍵酶結(jié)合，黃酮類(lèi)化合物可以阻斷神經(jīng)信號(hào)的傳遞，干擾線蟲(chóng)的正常生理功能，從而導(dǎo)致線蟲(chóng)死亡。酚類(lèi)化合物則可能通過(guò)破壞線蟲(chóng)的細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)，使細(xì)胞膜的通透性增加，細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)泄漏，最終致使線蟲(chóng)無(wú)法正常生存。此外，黃酮類(lèi)和酚類(lèi)化合物還可能通過(guò)誘導(dǎo)線蟲(chóng)體內(nèi)產(chǎn)生氧化應(yīng)激反應(yīng)，促使活性氧（ROS）的積累，對(duì)細(xì)胞造成氧化損傷，進(jìn)而影響線蟲(chóng)的生長(zhǎng)和存活。雖然生物堿類(lèi)化合物和甾體類(lèi)化合物與二齡幼蟲(chóng)校正死亡率呈負(fù)相關(guān)，但相關(guān)性不顯著。這可能是因?yàn)樵诒緦?shí)驗(yàn)條件下，這兩類(lèi)化合物在菊芋植株浸提液中的含量較低，或者它們對(duì)南方根結(jié)線蟲(chóng)的作用機(jī)制較為復(fù)雜，并非直接表現(xiàn)為殺線活性，而是通過(guò)影響其他生理過(guò)程間接發(fā)揮作用。綜上所述，菊芋植株浸提液中黃酮類(lèi)和酚類(lèi)化合物可能是起主要?dú)⒕€作用的活性成分，它們通過(guò)多種途徑協(xié)同作用，對(duì)南方根結(jié)線蟲(chóng)二齡幼蟲(chóng)產(chǎn)生抑殺效果。但關(guān)于生物堿類(lèi)化合物和甾體類(lèi)化合物在其中的具體作用，還需要進(jìn)一步深入研究，以全面揭示菊芋植株浸提液對(duì)南方根結(jié)線蟲(chóng)的作用機(jī)制。四、菊芋植株浸提液對(duì)連作番茄生長(zhǎng)及根結(jié)線蟲(chóng)病害的影響4.1對(duì)番茄生長(zhǎng)指標(biāo)的影響研究結(jié)果表明，不同處理對(duì)連作番茄的生長(zhǎng)指標(biāo)產(chǎn)生了顯著影響（表4）。在株高方面，與對(duì)照組相比，化學(xué)藥劑處理組、菊芋葉片浸提液中濃度處理組（L2）和高濃度處理組（L3）的番茄株高均有顯著增加（P<0.05）。其中，L3處理組的株高最高，達(dá)到了[X]厘米，比對(duì)照組增加了[X]%，顯著高于化學(xué)藥劑處理組和L2處理組。低濃度處理組（L1）的株高雖有增加，但與對(duì)照組差異不顯著。莖粗方面，各處理組與對(duì)照組相比也存在顯著差異（P<0.05）。L3處理組的莖粗最粗，為[X]厘米，較對(duì)照組增加了[X]%，化學(xué)藥劑處理組和L2處理組的莖粗也顯著大于對(duì)照組，而L1處理組的莖粗與對(duì)照組差異不明顯。葉片數(shù)和葉面積的變化趨勢(shì)與株高和莖粗相似。L3處理組的葉片數(shù)最多，為[X]片，葉面積最大，達(dá)到了[X]平方厘米，均顯著高于其他處理組和對(duì)照組（P<0.05）?；瘜W(xué)藥劑處理組和L2處理組在葉片數(shù)和葉面積上也顯著優(yōu)于對(duì)照組，L1處理組與對(duì)照組相比無(wú)顯著差異。處理組株高(cm)莖粗(cm)葉片數(shù)(片)葉面積(cm2)CK[X]±[X]c[X]±[X]c[X]±[X]c[X]±[X]cPC[X]±[X]b[X]±[X]b[X]±[X]b[X]±[X]bL1[X]±[X]c[X]±[X]c[X]±[X]c[X]±[X]cL2[X]±[X]b[X]±[X]b[X]±[X]b[X]±[X]bL3[X]±[X]a[X]±[X]a[X]±[X]a[X]±[X]a注：同列數(shù)據(jù)后不同小寫(xiě)字母表示差異顯著（P<0.05）菊芋葉片浸提液能夠促進(jìn)連作番茄的生長(zhǎng)，可能是由于浸提液中含有的多種生物活性成分，如黃酮類(lèi)、酚類(lèi)、多糖等，這些成分可以調(diào)節(jié)植物的生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程。黃酮類(lèi)化合物可以促進(jìn)植物細(xì)胞的伸長(zhǎng)和分裂，從而增加株高和莖粗；酚類(lèi)物質(zhì)則可能參與植物的光合作用和呼吸作用，提高植物的光合效率，促進(jìn)葉片的生長(zhǎng)和發(fā)育，增加葉片數(shù)和葉面積。浸提液中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)也可能為番茄的生長(zhǎng)提供了額外的養(yǎng)分支持，促進(jìn)了植株的生長(zhǎng)。隨著浸提液濃度的增加，其對(duì)番茄生長(zhǎng)的促進(jìn)作用逐漸增強(qiáng)，但低濃度處理組由于活性成分含量較低，對(duì)番茄生長(zhǎng)的促進(jìn)效果不明顯。4.2對(duì)根結(jié)線蟲(chóng)病害的防控效果在番茄生長(zhǎng)后期，對(duì)各處理組番茄根結(jié)線蟲(chóng)病害的發(fā)病情況進(jìn)行了調(diào)查（表5）。結(jié)果顯示，對(duì)照組的根結(jié)數(shù)最多，平均每株達(dá)到了[X]個(gè)，病情指數(shù)高達(dá)[X]，表明對(duì)照組番茄受到南方根結(jié)線蟲(chóng)的侵染最為嚴(yán)重。化學(xué)藥劑處理組的根結(jié)數(shù)明顯減少，平均每株為[X]個(gè)，病情指數(shù)為[X]，對(duì)根結(jié)線蟲(chóng)病害有一定的防治效果。菊芋葉片浸提液處理組中，隨著浸提液濃度的增加，根結(jié)數(shù)和病情指數(shù)逐漸降低。L1處理組的根結(jié)數(shù)平均每株為[X]個(gè)，病情指數(shù)為[X]，與對(duì)照組相比，雖有一定程度的降低，但差異不顯著。L2處理組的根結(jié)數(shù)平均每株降至[X]個(gè)，病情指數(shù)為[X]，與對(duì)照組相比差異顯著（P<0.05），表明中濃度的菊芋葉片浸提液對(duì)根結(jié)線蟲(chóng)病害有較好的抑制作用。L3處理組的根結(jié)數(shù)最少，平均每株僅為[X]個(gè)，病情指數(shù)最低，為[X]，與對(duì)照組相比差異極顯著（P<0.01），且在降低根結(jié)數(shù)和病情指數(shù)方面，L3處理組的效果與化學(xué)藥劑處理組相當(dāng)，甚至在病情指數(shù)上略低于化學(xué)藥劑處理組。處理組根結(jié)數(shù)(個(gè)/株)病情指數(shù)CK[X]±[X]a[X]±[X]aPC[X]±[X]c[X]±[X]cL1[X]±[X]b[X]±[X]bL2[X]±[X]d[X]±[X]dL3[X]±[X]e[X]±[X]e注：同列數(shù)據(jù)后不同小寫(xiě)字母表示差異顯著（P<0.05）菊芋葉片浸提液能夠減輕番茄根結(jié)線蟲(chóng)病害，主要原因在于其對(duì)南方根結(jié)線蟲(chóng)具有直接的抑制作用。前文已述，菊芋葉片浸提液可以有效抑制南方根結(jié)線蟲(chóng)蟲(chóng)卵的孵化和二齡幼蟲(chóng)的存活，減少了線蟲(chóng)的侵染源，從而降低了番茄根系被線蟲(chóng)侵染的幾率。浸提液中的活性成分可能還會(huì)影響線蟲(chóng)在植物體內(nèi)的寄生和繁殖過(guò)程。例如，黃酮類(lèi)和酚類(lèi)化合物可能干擾線蟲(chóng)與植物根系之間的信號(hào)傳導(dǎo)，使線蟲(chóng)難以識(shí)別和侵入植物根系；或者抑制線蟲(chóng)在植物體內(nèi)的取食和繁殖活動(dòng)，從而減輕病害的發(fā)生程度。此外，菊芋葉片浸提液對(duì)番茄生長(zhǎng)的促進(jìn)作用，也有助于增強(qiáng)番茄植株自身的抵抗力，使其能夠更好地抵御線蟲(chóng)的侵害，進(jìn)一步降低根結(jié)線蟲(chóng)病害的發(fā)生和危害。4.3最佳防控濃度的篩選為了確定菊芋葉片浸提液對(duì)連作番茄根結(jié)線蟲(chóng)病害防控的最佳濃度，對(duì)不同濃度浸提液處理組的根結(jié)數(shù)和病情指數(shù)進(jìn)行了進(jìn)一步分析（圖1）。通過(guò)折線圖可以直觀地看出，隨著菊芋葉片浸提液濃度的升高，番茄根結(jié)數(shù)和病情指數(shù)呈現(xiàn)出明顯的下降趨勢(shì)。在低濃度（12.5%）處理時(shí)，根結(jié)數(shù)和病情指數(shù)雖有一定程度的降低，但與對(duì)照組相比，差異并不顯著，說(shuō)明低濃度浸提液對(duì)根結(jié)線蟲(chóng)病害的防控效果有限。當(dāng)浸提液濃度提高到25%時(shí)，根結(jié)數(shù)和病情指數(shù)顯著下降，與對(duì)照組相比差異明顯，表明中濃度浸提液對(duì)病害有較好的抑制作用。而在高濃度（50%）處理下，根結(jié)數(shù)和病情指數(shù)降至最低，與化學(xué)藥劑處理組相當(dāng)，且在病情指數(shù)上略低于化學(xué)藥劑處理組，顯示出高濃度浸提液在防控根結(jié)線蟲(chóng)病害方面具有顯著效果?！敬颂幉迦雸D1：不同濃度菊芋葉片浸提液處理下番茄根結(jié)數(shù)和病情指數(shù)的變化折線圖】綜合考慮菊芋葉片浸提液對(duì)番茄生長(zhǎng)指標(biāo)的促進(jìn)作用以及對(duì)根結(jié)線蟲(chóng)病害的防控效果，50%濃度的菊芋葉片浸提液表現(xiàn)最為突出。在該濃度下，不僅能夠顯著抑制南方根結(jié)線蟲(chóng)的侵染，有效降低根結(jié)數(shù)和病情指數(shù)，減輕根結(jié)線蟲(chóng)病害對(duì)番茄的危害，還能顯著促進(jìn)番茄植株的生長(zhǎng)，使番茄在株高、莖粗、葉片數(shù)和葉面積等生長(zhǎng)指標(biāo)上均有明顯增加。因此，50%濃度的菊芋葉片浸提液可作為防控連作番茄根結(jié)線蟲(chóng)病害的最佳濃度。這一濃度的確定，為菊芋葉片浸提液在實(shí)際生產(chǎn)中的應(yīng)用提供了重要的參考依據(jù)，有助于種植戶更科學(xué)、有效地利用菊芋葉片浸提液來(lái)防治連作番茄根結(jié)線蟲(chóng)病害，提高番茄的產(chǎn)量和品質(zhì)。五、菊芋植株浸提液誘導(dǎo)連作番茄抗性的機(jī)制5.1對(duì)防御酶活性的影響植物在遭受病原菌或害蟲(chóng)侵害時(shí)，體內(nèi)防御酶系統(tǒng)會(huì)被激活，通過(guò)一系列復(fù)雜的生理生化反應(yīng)來(lái)抵御外界脅迫。本研究中，菊芋葉片浸提液處理連作番茄后，顯著影響了番茄根系中防御酶的活性。過(guò)氧化物酶（POD）是植物體內(nèi)重要的防御酶之一，它能夠催化過(guò)氧化氫分解，清除植物體內(nèi)過(guò)多的過(guò)氧化氫，從而減輕氧化損傷。同時(shí)，POD還參與木質(zhì)素的合成，增強(qiáng)細(xì)胞壁的強(qiáng)度，阻止病原菌的侵入。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比，菊芋葉片浸提液處理組的番茄根系POD活性顯著提高（圖2）。在處理后的第7天，L3處理組的POD活性達(dá)到[X]U/gFW，是對(duì)照組的[X]倍；隨著處理時(shí)間延長(zhǎng)至14天和21天，POD活性繼續(xù)升高，分別達(dá)到[X]U/gFW和[X]U/gFW。這表明菊芋葉片浸提液能夠有效誘導(dǎo)番茄根系POD活性增強(qiáng)，且隨著浸提液濃度的增加和處理時(shí)間的延長(zhǎng)，誘導(dǎo)效果更加明顯?！敬颂幉迦雸D2：不同處理下連作番茄根系POD活性隨時(shí)間的變化折線圖】超氧化物歧化酶（SOD）也是植物防御系統(tǒng)中的關(guān)鍵酶，它能夠催化超氧陰離子自由基發(fā)生歧化反應(yīng)，生成過(guò)氧化氫和氧氣，從而清除植物體內(nèi)的超氧陰離子自由基，保護(hù)細(xì)胞免受氧化損傷。在本實(shí)驗(yàn)中，菊芋葉片浸提液處理組的番茄根系SOD活性同樣顯著高于對(duì)照組（圖3）。處理后第7天，L2和L3處理組的SOD活性分別比對(duì)照組提高了[X]%和[X]%；到第21天，L3處理組的SOD活性達(dá)到[X]U/gFW，為對(duì)照組的[X]倍。這說(shuō)明菊芋葉片浸提液能夠有效激發(fā)番茄根系SOD的活性，增強(qiáng)植物對(duì)氧化脅迫的抵抗能力?！敬颂幉迦雸D3：不同處理下連作番茄根系SOD活性隨時(shí)間的變化折線圖】過(guò)氧化氫酶（CAT）與POD和SOD協(xié)同作用，共同參與植物體內(nèi)的活性氧代謝平衡調(diào)節(jié)。CAT能夠迅速分解過(guò)氧化氫，將其轉(zhuǎn)化為水和氧氣，避免過(guò)氧化氫在植物體內(nèi)積累對(duì)細(xì)胞造成傷害。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，菊芋葉片浸提液處理顯著提高了番茄根系CAT活性（圖4）。在處理后的第14天，L3處理組的CAT活性達(dá)到[X]U/gFW，顯著高于對(duì)照組；到第28天，L3處理組的CAT活性仍維持在較高水平，為[X]U/gFW。這進(jìn)一步證明了菊芋葉片浸提液能夠誘導(dǎo)番茄根系CAT活性升高，增強(qiáng)植物對(duì)逆境脅迫的適應(yīng)性?！敬颂幉迦雸D4：不同處理下連作番茄根系CAT活性隨時(shí)間的變化折線圖】菊芋葉片浸提液能夠誘導(dǎo)連作番茄根系中POD、SOD和CAT等防御酶活性顯著提高，增強(qiáng)植物的抗氧化能力和防御能力。這可能是由于浸提液中的活性成分，如黃酮類(lèi)、酚類(lèi)等化合物，作為信號(hào)分子，激活了番茄體內(nèi)的防御信號(hào)傳導(dǎo)途徑，誘導(dǎo)防御相關(guān)基因的表達(dá)，從而促進(jìn)防御酶的合成和活性增強(qiáng)。防御酶活性的提高，有助于清除植物體內(nèi)過(guò)多的活性氧，減輕氧化損傷，同時(shí)增強(qiáng)細(xì)胞壁的強(qiáng)度，阻止南方根結(jié)線蟲(chóng)的侵入和繁殖，從而提高連作番茄對(duì)根結(jié)線蟲(chóng)病害的抗性。5.2對(duì)MDA含量的影響丙二醛（MDA）是植物細(xì)胞膜脂過(guò)氧化的主要產(chǎn)物之一，其含量高低能夠直觀反映植物細(xì)胞膜受到氧化損傷的程度。在本研究中，菊芋葉片浸提液處理對(duì)連作番茄根系中MDA含量產(chǎn)生了顯著影響（圖5）?！敬颂幉迦雸D5：不同處理下連作番茄根系MDA含量隨時(shí)間的變化折線圖】對(duì)照組番茄根系中的MDA含量在整個(gè)處理期間呈現(xiàn)出逐漸上升的趨勢(shì)。在處理后的第7天，對(duì)照組MDA含量為[X]μmol/gFW，隨著時(shí)間推移至第28天，MDA含量升高至[X]μmol/gFW。這表明在未進(jìn)行任何處理的情況下，連作番茄受到南方根結(jié)線蟲(chóng)的侵染以及連作障礙的影響，細(xì)胞膜脂過(guò)氧化程度不斷加劇，細(xì)胞膜受到的損傷逐漸加重。與對(duì)照組相比，菊芋葉片浸提液處理組的MDA含量明顯較低。在處理后的第7天，L3處理組的MDA含量為[X]μmol/gFW，顯著低于對(duì)照組（P<0.05）；隨著處理時(shí)間的延長(zhǎng)，L3處理組的MDA含量雖有一定程度的上升，但始終保持在較低水平，在第28天為[X]μmol/gFW，僅為對(duì)照組的[X]%。L2處理組的MDA含量變化趨勢(shì)與L3處理組相似，在各時(shí)間點(diǎn)均顯著低于對(duì)照組，但高于L3處理組。而L1處理組在處理初期，MDA含量與對(duì)照組差異不顯著，但隨著時(shí)間的推移，從第14天開(kāi)始，MDA含量顯著低于對(duì)照組（P<0.05）。菊芋葉片浸提液能夠降低連作番茄根系中MDA含量，主要原因在于其激活了番茄體內(nèi)的抗氧化防御系統(tǒng)。前文提到，菊芋葉片浸提液能夠誘導(dǎo)番茄根系中POD、SOD和CAT等防御酶活性顯著提高，這些防御酶能夠協(xié)同作用，及時(shí)清除植物體內(nèi)過(guò)多的活性氧，如超氧陰離子自由基和過(guò)氧化氫等，從而有效抑制細(xì)胞膜脂過(guò)氧化反應(yīng)的發(fā)生，減少M(fèi)DA的生成，降低細(xì)胞膜的損傷程度。浸提液中的黃酮類(lèi)、酚類(lèi)等活性成分可能直接參與了抗氧化過(guò)程，它們具有較強(qiáng)的抗氧化能力，能夠直接清除活性氧，或者通過(guò)調(diào)節(jié)植物體內(nèi)的抗氧化酶系統(tǒng)，增強(qiáng)植物的抗氧化防御能力，進(jìn)而降低MDA含量，保護(hù)細(xì)胞膜的完整性，提高連作番茄對(duì)根結(jié)線蟲(chóng)病害和連作逆境的抗性。5.3對(duì)總酚及木質(zhì)素含量的影響總酚和木質(zhì)素作為植物體內(nèi)重要的次生代謝產(chǎn)物，在植物抵御病原菌侵染過(guò)程中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。在本研究中，菊芋葉片浸提液處理對(duì)連作番茄根系中總酚及木質(zhì)素含量產(chǎn)生了顯著影響（圖6、圖7）?！敬颂幉迦雸D6：不同處理下連作番茄根系總酚含量隨時(shí)間的變化折線圖】【此處插入圖7：不同處理下連作番茄根系木質(zhì)素含量隨時(shí)間的變化折線圖】從總酚含量變化來(lái)看，對(duì)照組番茄根系中的總酚含量在處理初期相對(duì)較低，隨著時(shí)間的推移，雖有一定上升趨勢(shì)，但幅度較小。在處理后的第7天，對(duì)照組總酚含量為[X]mg/gFW，到第28天，僅增加至[X]mg/gFW。而菊芋葉片浸提液處理組的總酚含量顯著高于對(duì)照組，且隨著浸提液濃度的增加，總酚含量升高更為明顯。在處理后的第7天，L3處理組的總酚含量就達(dá)到了[X]mg/gFW，是對(duì)照組的[X]倍；到第21天，L3處理組的總酚含量進(jìn)一步升高至[X]mg/gFW，顯著高于其他處理組和對(duì)照組（P<0.05）。這表明菊芋葉片浸提液能夠有效誘導(dǎo)連作番茄根系中總酚含量的積累，且誘導(dǎo)效果與浸提液濃度和處理時(shí)間密切相關(guān)。木質(zhì)素含量的變化趨勢(shì)與總酚含量相似。對(duì)照組番茄根系中的木質(zhì)素含量在整個(gè)處理期間增長(zhǎng)緩慢，第7天為[X]mg/gFW，第28天增加至[X]mg/gFW。相比之下，菊芋葉片浸提液處理組的木質(zhì)素含量顯著提高。在處理后的第14天，L3處理組的木質(zhì)素含量達(dá)到[X]mg/gFW，顯著高于對(duì)照組；到第28天，L3處理組的木質(zhì)素含量繼續(xù)升高至[X]mg/gFW，為對(duì)照組的[X]倍。這說(shuō)明菊芋葉片浸提液能夠顯著促進(jìn)連作番茄根系木質(zhì)素的合成，增強(qiáng)細(xì)胞壁的強(qiáng)度。菊芋葉片浸提液誘導(dǎo)連作番茄根系總酚及木質(zhì)素含量增加，主要是因?yàn)榻嵋褐械幕钚猿煞执碳ち朔洋w內(nèi)相關(guān)次生代謝途徑。浸提液中的黃酮類(lèi)、酚類(lèi)等化合物可能作為信號(hào)分子，激活了苯丙烷代謝途徑。在苯丙烷代謝途徑中，關(guān)鍵酶如苯丙氨酸解氨酶（PAL）、肉桂酸-4-羥化酶（C4H）和4-香豆酸輔酶A連接酶（4CL）等的活性被誘導(dǎo)增強(qiáng)，從而促進(jìn)了總酚和木質(zhì)素的合成?？偡硬粌H具有抗氧化作用，能夠清除植物體內(nèi)過(guò)多的活性氧，保護(hù)細(xì)胞免受氧化損傷，還可以作為植保素的前體物質(zhì)，參與植物的防御反應(yīng)。木質(zhì)素則是植物細(xì)胞壁的重要組成成分，其含量的增加能夠增強(qiáng)細(xì)胞壁的機(jī)械強(qiáng)度，阻止南方根結(jié)線蟲(chóng)的侵入和擴(kuò)展，同時(shí)木質(zhì)素還可以作為物理屏障，限制病原菌在植物體內(nèi)的傳播，從而提高連作番茄對(duì)根結(jié)線蟲(chóng)病害的抗性。六、菊芋植株浸提液對(duì)土壤微生物的影響6.1對(duì)根際細(xì)菌群落的影響利用Miseq高通量測(cè)序技術(shù)對(duì)各處理組連作番茄根際土壤細(xì)菌群落進(jìn)行分析，結(jié)果顯示，菊芋葉片浸提液處理顯著改變了根際細(xì)菌群落的結(jié)構(gòu)和多樣性（圖8、圖9）。在門(mén)水平上，各處理組土壤細(xì)菌群落主要由變形菌門(mén)（Proteobacteria）、酸桿菌門(mén)（Acidobacteria）、放線菌門(mén)（Actinobacteria）、綠彎菌門(mén)（Chloroflexi）和擬桿菌門(mén)（Bacteroidetes）等組成。其中，變形菌門(mén)在所有處理組中均為優(yōu)勢(shì)菌門(mén)，但相對(duì)豐度存在差異。與對(duì)照組相比，菊芋葉片浸提液處理組中變形菌門(mén)的相對(duì)豐度顯著增加，L3處理組變形菌門(mén)的相對(duì)豐度達(dá)到了[X]%，比對(duì)照組提高了[X]個(gè)百分點(diǎn)。酸桿菌門(mén)的相對(duì)豐度則呈現(xiàn)相反的趨勢(shì)，在菊芋葉片浸提液處理組中顯著降低，L3處理組酸桿菌門(mén)的相對(duì)豐度為[X]%，較對(duì)照組下降了[X]個(gè)百分點(diǎn)。【此處插入圖8：不同處理下連作番茄根際土壤細(xì)菌群落門(mén)水平相對(duì)豐度柱狀圖】【此處插入圖9：不同處理下連作番茄根際土壤細(xì)菌群落多樣性指數(shù)箱線圖】在屬水平上，共檢測(cè)到[X]個(gè)屬，其中部分屬的相對(duì)豐度在不同處理組間差異顯著。有益菌屬如芽孢桿菌屬（Bacillus）、假單胞菌屬（Pseudomonas）和固氮菌屬（Azotobacter）在菊芋葉片浸提液處理組中的相對(duì)豐度明顯增加。L3處理組中芽孢桿菌屬的相對(duì)豐度為[X]%，是對(duì)照組的[X]倍；假單胞菌屬的相對(duì)豐度為[X]%，比對(duì)照組提高了[X]個(gè)百分點(diǎn)；固氮菌屬的相對(duì)豐度為[X]%，顯著高于對(duì)照組。而一些潛在病原菌屬如鐮刀菌屬（Fusarium）和鏈格孢屬（Alternaria）在菊芋葉片浸提液處理組中的相對(duì)豐度顯著降低。L3處理組中鐮刀菌屬的相對(duì)豐度為[X]%，僅為對(duì)照組的[X]%；鏈格孢屬的相對(duì)豐度為[X]%，較對(duì)照組下降了[X]個(gè)百分點(diǎn)。通過(guò)計(jì)算Chao1指數(shù)、Ace指數(shù)、Shannon指數(shù)和Simpson指數(shù)等多樣性指數(shù)，評(píng)估土壤細(xì)菌群落的多樣性。結(jié)果表明，菊芋葉片浸提液處理組的Chao1指數(shù)和Ace指數(shù)均顯著高于對(duì)照組，說(shuō)明浸提液處理增加了土壤細(xì)菌群落的豐富度，使群落中物種數(shù)量增多。L3處理組的Chao1指數(shù)為[X]，Ace指數(shù)為[X]，分別比對(duì)照組提高了[X]%和[X]%。Shannon指數(shù)在菊芋葉片浸提液處理組中也顯著升高，表明浸提液處理使土壤細(xì)菌群落中物種分布更加均勻，多樣性增加。L3處理組的Shannon指數(shù)為[X]，比對(duì)照組提高了[X]%。而Simpson指數(shù)在菊芋葉片浸提液處理組中顯著降低，說(shuō)明浸提液處理降低了群落中優(yōu)勢(shì)物種的優(yōu)勢(shì)度，使群落結(jié)構(gòu)更加穩(wěn)定。L3處理組的Simpson指數(shù)為[X]，較對(duì)照組下降了[X]%。菊芋葉片浸提液能夠改變連作番茄根際細(xì)菌群落的結(jié)構(gòu)和多樣性，增加有益菌的相對(duì)豐度，降低潛在病原菌的相對(duì)豐度，提高土壤細(xì)菌群落的豐富度和多樣性，使群落結(jié)構(gòu)更加穩(wěn)定。這可能是因?yàn)榻嵋褐械幕钚猿煞?，如黃酮類(lèi)、酚類(lèi)等化合物，為土壤微生物提供了豐富的碳源和能源，促進(jìn)了有益微生物的生長(zhǎng)和繁殖；同時(shí)，這些活性成分可能對(duì)潛在病原菌具有抑制作用，從而改變了土壤細(xì)菌群落的組成和結(jié)構(gòu)。土壤微生物群落結(jié)構(gòu)和多樣性的改善，有助于提高土壤肥力，增強(qiáng)土壤的生態(tài)功能，為連作番茄的生長(zhǎng)提供良好的土壤環(huán)境，進(jìn)一步促進(jìn)番茄的生長(zhǎng)和發(fā)育，提高其對(duì)根結(jié)線蟲(chóng)病害的抗性。6.2對(duì)根際真菌群落的影響菊芋葉片浸提液處理同樣對(duì)連作番茄根際真菌群落的結(jié)構(gòu)和多樣性產(chǎn)生了顯著影響（圖10、圖11）。在門(mén)水平上，各處理組土壤真菌群落主要由子囊菌門(mén)（Ascomycota）、擔(dān)子菌門(mén)（Basidiomycota）、被孢霉門(mén)（Mortierellomycota）和壺菌門(mén)（Chytridiomycota）等組成。其中，子囊菌門(mén)在所有處理組中均為優(yōu)勢(shì)菌門(mén)，但相對(duì)豐度有所變化。與對(duì)照組相比，菊芋葉片浸提液處理組中子