實(shí)驗(yàn)三 透析實(shí)驗(yàn)(一)——蛋白質(zhì)的透析ppt課件_第1頁
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文檔簡介

1、實(shí)驗(yàn)三 透析實(shí)驗(yàn)（一） 蛋白質(zhì)的透析,實(shí)驗(yàn)?zāi)康?掌握透析的基本原理和操作； 了解透析袋的使用方法。,實(shí)驗(yàn)原理,透析是利用小分子能通過而大分子不能通過半透膜的原理把它們分開的一種重要手段，是生物化學(xué)分離提純過程經(jīng)常使用的基本操作技術(shù)之一。 蛋白質(zhì)作為生物分子物質(zhì)，不能透過透析膜而小分子物質(zhì)（比如離子等）可以自由通過。,器具與試劑,燒杯；玻棒；試管；試管架；透析袋（寬26cm，長8-10cm），線。 0.5mol/L EDTA；2%NaHCO3 ；1AgNO3溶液；10%HNO3，10%NaOH；1%CuSO4；雞蛋清-NaCl溶液,實(shí)驗(yàn)步驟,透析袋的前處理。 將蛋白質(zhì)溶液做雙縮脲反應(yīng)。 取出透析

2、袋，用三級水清洗透析袋內(nèi)外，并檢查透析袋是否有損壞。用線將透析袋靠近末端的地方綁緊。 取8ml蛋白質(zhì)溶液放入透析袋中，并將開口端同樣用線綁住并放入盛有蒸餾水的燒杯中。隨時(shí)用玻棒攪拌液體。 每30min從燒杯中取水1ml，用10%HNO3酸化溶液，再加入1%AgNO3 1-2d,檢查氯離子的存在。另外取出1-2ml做雙縮脲反應(yīng)，檢查燒杯中是否有蛋白質(zhì)存在。 每0.5h更換一次燒杯中的三級水以加速透析過程。直到數(shù)小時(shí)后，燒杯中的水不能檢出氯離子的存在時(shí)，停止透析。并觀察和檢測透析袋內(nèi)容物是否有蛋白質(zhì)或者氯離子存在。,附：,透析袋的處理方法 用2%NaHCO3和10mM的EDTA煮沸10min后，用蒸餾水清洗透析袋內(nèi)外，重新置于1mM的EDTA溶液中煮沸10min，保存于4冰箱中。,思考：,透析是去除小

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