分子生物學(xué)期末考試重點(diǎn)

1、1.重組DNA技術(shù)定義根據(jù)人類的設(shè)計(jì)方向，將不同的DNA片段連接起來，然后在特定受體細(xì)胞中與載體同時(shí)復(fù)制和表達(dá)，產(chǎn)生影響受體細(xì)胞的新遺傳性狀。說出分子生物學(xué)的主要研究?jī)?nèi)容。1.DNA重組技術(shù)2?；虮磉_(dá)研究調(diào)節(jié)3。生物大分子的結(jié)構(gòu)功能研究4。基因組、功能基因組和生物信息學(xué)研究DNA的一、二、三級(jí)結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)述第一階段：四種核苷酸的連接和排列順序顯示其DNA分子的化學(xué)成分二次：兩個(gè)多核苷酸連續(xù)逆平行線圈形成的雙螺旋結(jié)構(gòu)第3級(jí)：DNA雙螺旋進(jìn)一步扭曲線圈形成的特定空間結(jié)構(gòu)原核DNA的特征是什么？DNA雙螺旋纏繞在兩個(gè)相互平行的脫氧核苷酸長鏈上，多核苷酸的方向由核苷酸間磷酸根結(jié)合的方向決定。一個(gè)是5-3，

2、另一個(gè)是3 - 5DNA雙螺旋中脫氧核糖和磷酸交替連接在一起，形成外部的基本骨架，堿基行從內(nèi)部組合成堿基對(duì)5.DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型是誰制造的？華生和克里克6.DNA是怎樣復(fù)制的？它如何保證DNA復(fù)制的準(zhǔn)確性？線性DNA的雙鏈復(fù)制：把線性復(fù)制因子轉(zhuǎn)換成環(huán)或多邊形分子，在DNA末端形成針發(fā)行式結(jié)構(gòu)，分子沒有自由端，在某些蛋白質(zhì)的介入下，在實(shí)際端開始復(fù)制。環(huán)DNA復(fù)制：類型，滾動(dòng)環(huán)類型，d類型以親代DNA分子為主題的半保存克隆也嚴(yán)格遵循克隆時(shí)的堿基對(duì)原則DNA聚合酶I非主要聚合酶保證了DNA合成的準(zhǔn)確性DNA恢復(fù)系統(tǒng)：不匹配修復(fù)、切除修復(fù)、重組修復(fù)、DNA直接修復(fù)、SOS系統(tǒng)原核DNA復(fù)制的特征簡(jiǎn)述

3、只有一個(gè)復(fù)制起點(diǎn)，可以在復(fù)制起點(diǎn)連續(xù)開始新的DNA復(fù)制。只有一個(gè)復(fù)制單元，但可以有多個(gè)復(fù)制叉8.真核生物DNA的復(fù)制控制在什么級(jí)別？調(diào)節(jié)細(xì)胞生命周期水平；染色體水平調(diào)節(jié)；復(fù)制器級(jí)別調(diào)節(jié)9.細(xì)胞通過什么樣的修復(fù)系統(tǒng)修復(fù)DNA損傷？不一致恢復(fù)，不一致恢復(fù)；突變堿和核苷酸片段的切除和修復(fù)；重組修復(fù)，復(fù)制后修復(fù)；DNA直接修復(fù)，嘧啶二聚體修復(fù)；SOS系統(tǒng)，DNA的修復(fù)導(dǎo)致變異10.什么是轉(zhuǎn)座子？分為什么種類？是染色體DNA中存在的可以自主復(fù)制和移動(dòng)的基本單位?？梢苑譃椴迦胄蛄泻蛷?fù)合轉(zhuǎn)座子11.什么是編碼鏈？什么是模板鏈？與mRNA序列相同的DNA鏈稱為編碼鏈，另一種原堿互補(bǔ)配對(duì)原理將MRNA合成DNA

4、鏈稱為模型鏈簡(jiǎn)述RNA的種類和生物學(xué)作用MRNA:一個(gè)或多個(gè)多肽鏈序列已編碼。TRNA:用多肽的氨基酸信息替換mRNA的遺傳信息。RRNA:核糖體的主要成分。HnRNA: DNA轉(zhuǎn)錄生成的原始轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物。SnRNA:核小體RNA，前體mRNA加工中參與內(nèi)含子去除。SnoRNA:核糖體RNA主要參與rRNA和其他RNA的修改、加工、成熟過程。ScRNA:細(xì)胞質(zhì)小RNA在蛋白質(zhì)合成過程中起作用。13.RNA的結(jié)構(gòu)是什么？含有核糖和嘧啶，一般是單鏈線性分子。主要以單鏈形式存在于細(xì)胞中。默認(rèn)設(shè)置主要為a、g、c、u?？梢宰晕艺郫B形成局部雙螺旋。主要是A-U、G-C對(duì)，有時(shí)是G-U對(duì)。RNA雙螺旋的大小溝

5、幾乎沒有差異，不適合與蛋白質(zhì)的序列特異性相互作用?？烧郫B形成復(fù)雜的三次結(jié)構(gòu)。RNA主鏈上未配對(duì)的區(qū)域可以自由旋轉(zhuǎn)，也可以創(chuàng)建不規(guī)則堿基對(duì)。14.什么是Pribnow box？其報(bào)酬順序是什么？Pribnow box也稱為-10區(qū)域，因?yàn)樵酥械闹行奈挥谵D(zhuǎn)錄起點(diǎn)的上游10bp處。報(bào)酬序列是Tata at原核生物和真核生物mRNA的差異簡(jiǎn)述原核mRNA經(jīng)常以多純半體的形式存在。真核生物mRNA一般以單個(gè)半半自動(dòng)的形式存在原核生物mRNA的轉(zhuǎn)錄和翻譯一般是結(jié)合。真核生物轉(zhuǎn)錄的mRNA前體在轉(zhuǎn)錄后加工，成熟的mRNA和蛋白質(zhì)結(jié)合成為信息體后才能工作。原核生物mRNA半壽命很短，但一般需要幾分鐘，長幾小

6、時(shí)，真核生物mRNA的半數(shù)會(huì)很長。結(jié)構(gòu)上的特征也不同。原核生物mRNA的5 端沒有帽子，3 端只有較短的poly A結(jié)構(gòu)真核和原核基因轉(zhuǎn)錄的區(qū)別是什么？原核基因轉(zhuǎn)錄中只涉及一種RNA聚合酶，真核生物有3種以上的RNA聚合酶，負(fù)責(zé)不同種類的基因轉(zhuǎn)錄，細(xì)胞核內(nèi)沒有位置變化的RNA合成轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物有差異。原核生物的第一轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物大部分是與蛋白質(zhì)的氨基酸序列具有線性關(guān)系的編碼序列。真核生物的一次轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物很大，包含內(nèi)含子序列，成熟的mRNA只是一次轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的一小部分原核生物的一次轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物幾乎不需要接合處理，就可以直接用成熟的mRNA進(jìn)一步行使翻譯模板的功能；真核生物轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物是成熟mRNA在原核細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄和翻譯

7、的結(jié)合、修飾等轉(zhuǎn)錄加工需要成熟過程，不僅發(fā)生在同一細(xì)胞空間，而且這兩個(gè)過程幾乎同時(shí)發(fā)生，蛋白質(zhì)合成在mRNA首次轉(zhuǎn)錄時(shí)經(jīng)常發(fā)生，真核生物mRNA的合成和蛋白質(zhì)的合成在不同的空間和時(shí)間范圍內(nèi)發(fā)生大腸桿菌的終結(jié)者有哪兩大類？請(qǐng)分別介紹他們的結(jié)構(gòu)特征不依賴于p系數(shù)，而是依賴于p系數(shù)的兩類。不依賴p因子終止的特征：終止子站點(diǎn)上通常有富含GC堿基的雙對(duì)稱區(qū)域。終結(jié)器部位的前面有4-8個(gè)a組成的序列，因此轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的3 端是寡婦。p因子依賴特征：終止部位的DNA序列沒有共同點(diǎn)，不能形成強(qiáng)的發(fā)夾結(jié)構(gòu)，因此不能誘導(dǎo)戰(zhàn)士的自發(fā)終止RNA編輯是什么？其生物學(xué)意義是什么？特定RNA，特別是mRNA前體，是指經(jīng)過某些核

8、苷酸殘基的插入、刪除或替換等操作，DNA編碼的基因信息的變化導(dǎo)致RNA編輯的mRNA序列與模板DNA不同。生物學(xué)意義：在基因突變的過程中恢復(fù)丟失的遺傳信息，調(diào)節(jié)翻譯，開始構(gòu)建或去除密碼子，結(jié)束密碼子，擴(kuò)大基因信息，通過基因或新的結(jié)構(gòu)核功能幫助生物進(jìn)化19.利寶劑有什么結(jié)構(gòu)特征？根據(jù)催化功能，兩大類別是什么？生物意義是什么？具有磁剪切能力的RNA，大部分形成由3個(gè)莖組成的錘子頭結(jié)構(gòu)，莖區(qū)的局部雙鏈結(jié)構(gòu)環(huán)繞著由11-13個(gè)保守核苷酸構(gòu)成的催化中心。核糖酶分為剪切型和連接型兩種。意義：繼逆轉(zhuǎn)錄病毒后，對(duì)中心定律的重要修正，表明RNA既是基因組，又是酶；為生命起源的研究提供了新的思路20.什么是復(fù)制載

9、體？什么是表達(dá)載體？復(fù)制向量：專為擴(kuò)增插入的外源DNA序列而設(shè)計(jì)的載體表達(dá)載體：專門設(shè)計(jì)的載體，用于將插入的外源DNA序列轉(zhuǎn)錄成多肽鏈(表達(dá)向量和復(fù)制向量的區(qū)別：1.復(fù)制向量：通常只包含一個(gè)松弛復(fù)制因子、一個(gè)多重復(fù)制網(wǎng)站和一個(gè)篩選標(biāo)記，因此復(fù)制和選定的DNA序列可以大量繁殖。2.而且，表達(dá)向量除上述因素外，還需要強(qiáng)有力的啟動(dòng)子、核糖體結(jié)合部位、轉(zhuǎn)錄開始信號(hào)、轉(zhuǎn)錄結(jié)束信號(hào)、翻譯開始密碼子、翻譯結(jié)束密碼子等一系列調(diào)節(jié)序列。)，以獲取詳細(xì)信息21.PCR放大的原理和步驟原則：DNA在高溫下引起變星鏈解決方案，溫度降低時(shí)可以雙股反向折疊。通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性，將引物設(shè)計(jì)為啟動(dòng)子，添加DN

10、A酶，dNTP，就可以完成特定基因的體外受精階段。1.變性，雙股開口2。退火，底漆和模板的結(jié)合3。鏈的延伸，DNA合成簡(jiǎn)述代謝產(chǎn)物調(diào)控基因表達(dá)的兩種方法轉(zhuǎn)錄水平調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)節(jié)(mRNA加工成熟水平調(diào)節(jié)，翻譯水平調(diào)節(jié))什么是操縱器學(xué)說？關(guān)于原核基因結(jié)構(gòu)及其表達(dá)調(diào)控的學(xué)說由法國Jacob和Monod提出，其核心是將基因從抑制表達(dá)狀態(tài)中解放出來是從消極調(diào)節(jié)的角度考慮了基因表達(dá)調(diào)節(jié)方式乳糖操縱器的調(diào)節(jié)模型簡(jiǎn)述a，乳糖操縱子的組成：含有z，y，a三種基因結(jié)構(gòu)，各有半乳糖苷酶、透明酶、半乳糖乙酰轉(zhuǎn)移酶編碼，此外還有操作序列o，啟動(dòng)子p，調(diào)控基因IB.抑制蛋白的負(fù)調(diào)節(jié)：沒有乳糖的時(shí)候，抑制蛋白位于o，乳

11、糖操作員處于不能合成分解乳糖的三種酶的抑制狀態(tài)。有乳糖時(shí)，不能與誘導(dǎo)抑制蛋白變形，使乳糖操作者打開分解乳糖的三種酶的操作序列結(jié)合C.CAP的積極調(diào)整D.調(diào)節(jié)調(diào)節(jié)調(diào)節(jié)：抑制蛋白對(duì)乳糖操縱者I基因代碼的負(fù)調(diào)節(jié)和CAP的正調(diào)節(jié)兩種機(jī)制相互調(diào)節(jié)和相互約束什么是葡萄糖效應(yīng)？有葡萄糖的時(shí)候，即使有他的糖，相應(yīng)的操作者也不會(huì)啟動(dòng)，不產(chǎn)生調(diào)節(jié)這種糖的酶的現(xiàn)象稱為葡萄糖效應(yīng)什么是弱化效應(yīng)？當(dāng)培養(yǎng)基中色氨酸濃度低的時(shí)候：裝載色氨酸的tRNA也較少，通過2個(gè)相鄰色氨酸的翻譯速度慢，4個(gè)區(qū)域轉(zhuǎn)錄時(shí)，核糖體進(jìn)行到1個(gè)區(qū)域，這時(shí)核糖體結(jié)構(gòu)沒有形成3-4對(duì)終止結(jié)構(gòu)，因此轉(zhuǎn)錄可以繼續(xù)，直到Trp操作者的結(jié)構(gòu)基因全部轉(zhuǎn)錄，培養(yǎng)

12、基中色氨酸濃度高的時(shí)候：核糖體是兩個(gè)相鄰的貼圖終止，Trp操縱器關(guān)閉。27.anti-terminator監(jiān)管機(jī)制簡(jiǎn)述RNA聚合酶與RNA聚合酶相結(jié)合，直到到達(dá)終止符。因?yàn)榻K結(jié)者上游有抗終結(jié)者信號(hào)序列，只有與抗終結(jié)者因子結(jié)合的RNA聚合酶才能成功通過具有莖環(huán)結(jié)構(gòu)的終結(jié)者，戰(zhàn)士才能進(jìn)行反義RNA調(diào)控機(jī)制簡(jiǎn)述RNA調(diào)控是原核基因表達(dá)轉(zhuǎn)錄后調(diào)控的另一重要機(jī)制。環(huán)境壓力改變時(shí)，就會(huì)產(chǎn)生一個(gè)小的、未加密的RNA分子，把mRNA的特定序列配對(duì)，改變它的結(jié)構(gòu)，使翻譯過程打開或關(guān)閉，等等。轉(zhuǎn)錄后原核基因調(diào)控方法簡(jiǎn)述MRNA自結(jié)構(gòu)元素翻譯調(diào)整；MRNA穩(wěn)定性對(duì)轉(zhuǎn)錄水平的影響；蛋白質(zhì)調(diào)節(jié)效果調(diào)節(jié)；反義RNA調(diào)節(jié)效

13、果；稀有密碼子對(duì)翻譯的影響；重疊基因?qū)Ψg的影響；翻譯的抑制；魔法斑點(diǎn)核苷酸水平對(duì)翻譯的影響基因家族的分類及其主要表達(dá)調(diào)控模型單純多基因家族：真核生物先經(jīng)過特定甲基化，通過RNA酶切割，產(chǎn)生成熟的rRNA分子。原核生物還必須經(jīng)過核糖核酸分解才能生成成熟的rRNA分子復(fù)雜的多基因群：一般由多個(gè)相關(guān)基因群組成，基因群之間間隔分離，作為獨(dú)立的轉(zhuǎn)錄單元，可能有不同特異性的組蛋白子類和發(fā)育調(diào)控機(jī)制。具有發(fā)育調(diào)控機(jī)制的復(fù)雜多基因群：在每個(gè)基因群中，基因排列順序就是它們?cè)诎l(fā)育階段的表達(dá)順序。什么是?？松?nèi)含子和結(jié)構(gòu)特征及可變調(diào)節(jié)？大部分真核基因由蛋白質(zhì)編碼序列和非白質(zhì)編碼序列組成，編碼序列叫埃克森，非編碼

14、序列叫內(nèi)含子。結(jié)構(gòu)特征：一個(gè)器官基因編碼特定蛋白質(zhì)不同區(qū)域的每個(gè)外顯子不連續(xù)，被不同長度的內(nèi)含子隔離，形成鑲嵌排列中斷的方式。可變調(diào)控：很多真核基因的原始轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物可以通過多種結(jié)合方法生成mRNA，并翻譯成不同的蛋白質(zhì)。另外，一些核基因是戰(zhàn)士選擇了不同的啟動(dòng)子，或戰(zhàn)士產(chǎn)物中選擇了不同的波爾雅部位，轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物形成了不同的二次結(jié)構(gòu)，影響了接合過程，最終產(chǎn)生了不同的波爾雅分子。32.DNA甲基化對(duì)基因表達(dá)的調(diào)控機(jī)制很多研究結(jié)果表明，DNA甲基化會(huì)關(guān)閉特定基因表達(dá)的活性，去甲基化會(huì)誘導(dǎo)基因的康復(fù)和表達(dá)。3種調(diào)節(jié)機(jī)制： DNA甲基化影響蛋白質(zhì)和DNA的相互作用，抑制轉(zhuǎn)錄因子和啟動(dòng)部位DNA的結(jié)合效率。促進(jìn)抑

15、制蛋白的抑制效果。 DNA甲基化還增加了該部位突變的頻率真核生物轉(zhuǎn)錄因子的組成和分類簡(jiǎn)述啟動(dòng)子、轉(zhuǎn)錄模板、RNA聚合酶基本轉(zhuǎn)錄所需的蛋白質(zhì)因子、RNA聚合酶、增強(qiáng)劑、反作用因子34.加強(qiáng)板作用機(jī)理簡(jiǎn)述強(qiáng)化者是指能與之連鎖的基因轉(zhuǎn)錄頻率明顯增加的DNA序列。有三種作用機(jī)制影響stencils附近的DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)，通過DNA雙螺旋彎曲或反作用因子的參與，將蛋白質(zhì)之間的相互作用加強(qiáng)為媒介，形成啟動(dòng)子之間的“環(huán)”連接，激活基因轉(zhuǎn)錄。將模版連接在細(xì)胞核內(nèi)的特定位置等模版固定在細(xì)胞核內(nèi)的特定位置，有助于DNA topoisomerase改變DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的張力，促進(jìn)RNA聚合酶 DNA鏈中的結(jié)合和滑動(dòng)

16、?？梢赃M(jìn)入增強(qiáng)因子或RNA聚合酶染色質(zhì)結(jié)構(gòu)的“入口”35.反應(yīng)因子的結(jié)構(gòu)特征及其對(duì)基因表達(dá)的調(diào)控反作用因子是在各種凈作用成分的核心序列中直接或間接識(shí)別或結(jié)合，調(diào)節(jié)目標(biāo)基因轉(zhuǎn)錄效率的蛋白質(zhì)。這些元素做兩個(gè)獨(dú)立的活動(dòng)。與RNA結(jié)合部位特別結(jié)合，然后激活轉(zhuǎn)錄。兩種活性可以分別指定給蛋白質(zhì)不同區(qū)域的特定蛋白質(zhì)域，稱為DNA結(jié)合域和激活域。36.舉例說明蛋白質(zhì)磷酸化如何影響基因表達(dá)蛋白質(zhì)磷酸化主要影響細(xì)胞信號(hào)傳遞，影響基因表達(dá)。例如：在糖原代謝過程中，激素及其受體與肌細(xì)胞的外表相結(jié)合，誘導(dǎo)細(xì)胞質(zhì)cAMP的合成，激活a激酶，將活化磷酸組傳遞給非活性磷酸化酶激酶，激活糖原磷酸化酶，最終通過糖原磷酸化進(jìn)入糖分解途徑提供ATP。(營中介導(dǎo)的蛋白質(zhì)磷酸化過程)組蛋白乙?；兔撘阴；绊懟蜣D(zhuǎn)錄的機(jī)制簡(jiǎn)述組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶和脫乙酰酶通過組蛋白乙?；兔撘阴；绊懟虮磉_(dá)。組蛋白n末端尾部賴氨酸殘基的乙?；欣谥泻臀膊空姾桑瑴p少與組蛋白的親和性，使細(xì)胞核結(jié)構(gòu)與轉(zhuǎn)錄蛋白結(jié)合染色質(zhì)的變化，提高基因轉(zhuǎn)錄活性。核心組蛋白H2A、H2B、H3、H4通過組蛋白尾部選擇性乙?；绊懠?xì)胞核的濃度和鄰近性。乙?；M蛋白抑制核糖體的富集，因此轉(zhuǎn)錄因子更容易接觸基因組的這一部分，增加基因的轉(zhuǎn)錄活動(dòng)。什么是癌基因，什么