血液成分分離基本知識(shí)課件

1、血液成分分離基本知識(shí),血液成分分離機(jī)的應(yīng)用,1,PPT學(xué)習(xí)交流,主要內(nèi)容,一、血液成分分離相關(guān)基礎(chǔ)知識(shí)簡(jiǎn)介 二、血液成分分離方法 三、血液成分分離方法相關(guān)技術(shù)簡(jiǎn)介,2,PPT學(xué)習(xí)交流,一、血液成分分離相關(guān)基礎(chǔ)知識(shí)簡(jiǎn)介,3,PPT學(xué)習(xí)交流,血站的職能,血站是指不以營(yíng)利為目的，采集、提供臨床用血的且經(jīng)國(guó)家授權(quán)、由國(guó)家撥款運(yùn)行的公益性衛(wèi)生機(jī)構(gòu)。,4,PPT學(xué)習(xí)交流,血站成分科的職責(zé),負(fù)責(zé)制備各種成分的血液制品 。,5,PPT學(xué)習(xí)交流,血液制品的分類,血液制品,全血 成分血,紅細(xì)胞類 病院體滅火血漿 濃縮血小板 新鮮冰凍血漿 冷凝沉淀凝血因子 輻照成分血 單采成分,濃縮紅細(xì)胞 懸浮紅細(xì)胞 濃縮少白細(xì)胞

2、紅細(xì)胞 懸浮少白細(xì)胞紅細(xì)胞 洗滌紅細(xì)胞 冰凍解凍去甘油紅細(xì)胞,單采血小板 單采少白細(xì)胞血小板 單采粒細(xì)胞 單采新鮮冰凍血漿 單采紅細(xì)胞,6,PPT學(xué)習(xí)交流,成分科分離的血液制品,血液制品,全血 成分血,紅細(xì)胞類 病原體滅火血漿 濃縮血小板 新鮮冰凍血漿 冷凝沉淀凝血因子 輻照成分血 單采成分,濃縮紅細(xì)胞 懸浮紅細(xì)胞 濃縮少白細(xì)胞紅細(xì)胞 懸浮少白細(xì)胞紅細(xì)胞 洗滌紅細(xì)胞 冰凍解凍去甘油紅細(xì)胞,單采血小板 單采少白細(xì)胞血小板 單采粒細(xì)胞 單采新鮮冰凍血漿 單采紅細(xì)胞,7,PPT學(xué)習(xí)交流,濃縮紅細(xì)胞,將采集到多聯(lián)袋內(nèi)的全血中大部分血漿在全封閉的條件下分離出后剩余的部分所制成的紅細(xì)胞成分血。 1.制備方

3、法： （1）原料全血的要求：有效保存期內(nèi)的全血均可，建議采血后68小時(shí)內(nèi)內(nèi)制備。 （2）塑料袋要求：雙聯(lián)袋、三聯(lián)袋均可。 （3）聯(lián)袋全血平衡后對(duì)稱裝入離心機(jī)中。 （4）離心條件設(shè)置：5000g，7min,溫度26，剎車56 min。 （5）離心后的血液應(yīng)輕輕拿出，放入分漿夾內(nèi)或用虹吸方式將血漿分出。 2.濃縮紅細(xì)胞的特點(diǎn)： （1）體積大約是全血的一半左右； （2）血細(xì)胞比容0.650.80； （3）紅細(xì)胞含量幾乎和全血相同； （4）白細(xì)胞的含量也和全血基本相同； 3.用途： （1）一般用于各種血容量正常的貧血病人； （2）急性出血或手術(shù)病人失血低于1500ml者； （3）心肝腎功能不全者； （

4、4）小兒或老人輸血； （5）妊娠晚期伴有貧血者和一氧化碳中毒者等。 4.輸入劑量及方法： 對(duì)于一個(gè)60公斤體重的成年人，每輸入2個(gè)單位濃縮紅細(xì)胞（每單位由200ml全血制備）可以提高血紅蛋白10g/L。輸注前需交叉配血，必要時(shí)可用生理鹽水稀釋后輸注。,8,PPT學(xué)習(xí)交流,懸浮紅細(xì)胞,也稱為紅細(xì)胞懸液，是全血經(jīng)離心除去大部分血漿后，加入紅細(xì)胞保存液制備而成。是目前臨床上用量最大的一種紅細(xì)胞制劑。 1.制備方法 基本與濃縮紅細(xì)胞相同，只是最后血漿分出后，將紅細(xì)胞添加劑加入到濃縮紅細(xì)胞袋中并混勻。 2.懸浮紅細(xì)胞的特點(diǎn)： （1）血細(xì)胞比容0.500.65； （2）紅細(xì)胞含量和濃縮紅細(xì)胞相同； （3）

5、白細(xì)胞的含量也和濃縮紅細(xì)胞基本相同； （4）它是在濃縮紅細(xì)胞的基礎(chǔ)上加入紅細(xì)胞添加液,降低了紅細(xì)胞的粘稠度使輸注時(shí)更加順利,全部操作在密閉條件下完成。 3.用途： 與濃縮紅細(xì)胞相同。 4.輸入劑量及方法： 與濃縮紅細(xì)胞相同。,9,PPT學(xué)習(xí)交流,懸浮少白細(xì)胞紅細(xì)胞,1.制備方法： （1）離心去白膜法：先按制備濃縮紅細(xì)胞的程序離心，然后將紅細(xì)胞與血漿交界 處的白膜層與血漿一起擠出。 （2）過(guò)濾法：過(guò)濾的方式基本上分為以下三種：一個(gè)是血液采集后24小時(shí)內(nèi)過(guò)濾，我們稱為貯存前過(guò)濾；另一個(gè)是血液輸注前先過(guò)濾；第三種是在輸血時(shí)過(guò)濾；后兩種都可以稱為保存后過(guò)濾。（研究數(shù)據(jù)表明最好的過(guò)濾時(shí)機(jī)應(yīng)該是血液貯存前

6、，它不但可以減除白細(xì)胞的數(shù)量，還可以防止由于細(xì)胞因子和炎性因子應(yīng)起的發(fā)熱反應(yīng)。） 2.少白細(xì)胞紅細(xì)胞的特點(diǎn)： 它是在濃縮紅細(xì)胞或懸浮紅細(xì)胞的基礎(chǔ)上去除絕大部分的白細(xì)胞從而降低了由白細(xì)胞引起的免疫性輸血反應(yīng)和疾病的傳播。用過(guò)濾法制備的少白細(xì)胞紅細(xì)胞殘存白細(xì)胞數(shù)量2.5106/200ml全血。 3.用途： （1）該成分適用于各類需要輸注紅細(xì)胞的病人； （2）特別適合于已有白細(xì)胞抗體的病人、骨髓移植和器官移植的病人,10,PPT學(xué)習(xí)交流,洗滌紅細(xì)胞,1.洗滌紅細(xì)胞的特點(diǎn)： 洗滌紅細(xì)胞是在少白細(xì)胞紅細(xì)胞的基礎(chǔ)上用無(wú)菌生理鹽水反復(fù)洗滌三遍以上制備而成。經(jīng)過(guò)洗滌的紅細(xì)胞去除了80以上的白細(xì)胞和98的血漿蛋

7、白，也去除了大量的細(xì)胞碎屑、代謝產(chǎn)物、抗凝劑、乳酸鹽、鉀、氨和微聚物，同時(shí)也損失了大約20以上的紅細(xì)胞。 2.適應(yīng)證： （1）該成分適用于各類需要輸注紅細(xì)胞的病人； （2）更適合于對(duì)血漿蛋白有嚴(yán)重過(guò)敏反應(yīng)的病人； （3）自身免疫性溶血性貧血； （4）陣發(fā)性血紅蛋白尿； （5）高血鉀癥及肝腎功能障礙者以及新生兒換血等。 3.注意事項(xiàng)： （1）開放制備的洗滌紅細(xì)胞應(yīng)在制備后24小時(shí)內(nèi)輸注。 （2）由于該成分內(nèi)已基本不含抗A抗B抗體，輸注前可只做主側(cè)配血。 （3）輸注劑量要比濃縮紅細(xì)胞增加30左右。,11,PPT學(xué)習(xí)交流,冰凍解凍去甘油紅細(xì)胞,紅細(xì)胞加入甘油保護(hù)劑后，在80或196 低溫條件下保存，

8、最長(zhǎng)保存期可達(dá)10年。使用前將貯存的紅細(xì)胞放在37水浴中解凍,然后洗凈甘油，再用生理鹽水懸浮，24小時(shí)內(nèi)輸注。 該成分主要用于稀有血型血液的貯存也可用于自體血液的長(zhǎng)期貯存。 該成分內(nèi)也基本不含抗A抗B抗體，輸注前可只做主側(cè)配血。在輸注劑量上應(yīng)考慮到紅細(xì)胞損失部分。,12,PPT學(xué)習(xí)交流,濃縮血小板,1.制備方法： 先使用多聯(lián)采血袋采集全血,然后68小時(shí)內(nèi)在2024 的條件下，用大容量的離心機(jī)將血小板分離出，并懸浮在血漿內(nèi)制成濃縮血小板。 200ml全血制備的血小板含量是 2.01010，容量為2535ml。 2.用途： 濃縮血小板在臨床上主要用于止血或預(yù)防出血。 血小板數(shù)量減少如：白血病、再生

9、障礙性貧血、惡性腫瘤、特發(fā)性血小板減少性紫癜、多發(fā)性骨髓瘤、感染、化療或放療后、大量輸注庫(kù)存血等； 血小板功能障礙而如：血小板無(wú)力癥、藥物（阿斯匹林類）、白血病、DIC、尿毒癥、 發(fā)熱、感染以及創(chuàng)傷和手術(shù)病人等。 3.注意事項(xiàng)： 患有血栓性血小板減少性紫癜（TTP）患者不易輸血小板。 血小板在輸注時(shí)無(wú)需交叉配血 ,要求ABO血型相同輸注。,13,PPT學(xué)習(xí)交流,新鮮冰凍血漿 （FFP）,1.制備方法： 血液采集后6 8小時(shí)內(nèi)將血漿分離出，并在-30 以下，用具有風(fēng)冷裝置的速凍冰箱或在酒精浴中速凍而制成，也可用-196 液氮快速凍結(jié)。 2.特點(diǎn)： FFP中幾乎含有血漿中的全部蛋白成分和凝血因子,

10、包括不穩(wěn)定的第V因子和第因子。 未經(jīng)特殊處理的血漿中還含有各種抗體和一些致病物質(zhì)，如肝炎病毒。1ml新鮮正常人血漿大約含有1單位的凝血因子活性。 新鮮冰凍血漿在-18 以下可以保存1年。 3.用途： 它主要用于各種凝血因子缺乏引起的出血，同時(shí)需要補(bǔ)充血容量或血漿蛋白的患者：肝衰竭伴獲得性凝血障礙者；肝移植；口服香豆素類藥物過(guò)量引起出血者；抗凝血酶III缺乏；血栓性血小板減少性紫癜（TTP）；免疫缺陷綜合征等。 4.血漿輸注劑量: 每公斤體重1015ml,可使大多數(shù)凝血因子提高到正常人的25以上，并可達(dá)到止血效果，劑量過(guò)大可造成循環(huán)超負(fù)荷。輸注速度一般不超過(guò)10ml/min。 5.注意事項(xiàng)： 應(yīng)

11、按ABO血型相容原則輸注，不需做交叉配血。,14,PPT學(xué)習(xí)交流,普通冰凍血漿,新鮮冰凍血漿保存一年以上，或制備新鮮冰凍血漿冷沉淀后所剩余的血漿以及全血在有效期內(nèi)分離出的血漿統(tǒng)稱為普通血漿。 它主要特點(diǎn)是缺乏凝血因子V和凝血因子?？梢栽?18 以下繼續(xù)保存5年。普通冰凍血漿主要用于凝血因子V和凝血因子以外的凝血因子缺乏的患者。,15,PPT學(xué)習(xí)交流,輸成分血的好處,輸成分血有以下幾點(diǎn)好處： 1. 對(duì)病情需要選擇，缺什么輸什么，提高治療效果。如：貧血輸紅細(xì)胞，粒細(xì)胞缺乏輸粒細(xì)胞、血小板減少輸濃縮血小板，燒傷患者輸血漿等。 2. 減少輸血不良反應(yīng)，提高輸血安全性。因?yàn)檩斎氩恍枰难撼煞植粌H是浪費(fèi)

12、，而且可引發(fā)輸血不良反應(yīng)。 3. 便于保存，使用方便。不同的血液成分可以有不同的保存方式，長(zhǎng)期的如新鮮冰凍血漿、冷沉淀物可以保存1年；短期的如血小板在22C震蕩箱內(nèi)保存35天隨時(shí)可用。 4. 一血多用，節(jié)省血源。血液來(lái)自健康人的無(wú)私貢獻(xiàn)，是寶貴的資源，將一袋血分成各種成分就可派多種用途，治療多個(gè)患者。如某市每年獻(xiàn)血35萬(wàn)單位，而制成成分血即有70100萬(wàn)單位。 5. 減少輸血傳染病。由于血液中一些致病因子多藏在白細(xì)胞、冷沉淀和凝血因子等制品中，大多數(shù)輸血患者并不需要這些成分。,16,PPT學(xué)習(xí)交流,二、血液成分分離的方法,17,PPT學(xué)習(xí)交流,血液成分分離的方法,全血,全血分層,血漿 紅細(xì)胞

13、血小板 白細(xì)胞,離心機(jī),分漿夾/血液成分分離機(jī),18,PPT學(xué)習(xí)交流,多聯(lián)袋,19,PPT學(xué)習(xí)交流,多聯(lián)袋,20,PPT學(xué)習(xí)交流,血液成分分離機(jī),21,PPT學(xué)習(xí)交流,三聯(lián)袋血分離流程示意圖,X,X,X,X,X,X,X,離心,分血漿,保養(yǎng)液到原袋,X,X,X,22,PPT學(xué)習(xí)交流,四聯(lián)袋血成分分離,X,X,X,X,X,離心,分血漿,清洗白膜,X,X,X,X,X,X,X,X,X,X,X,X,將保養(yǎng)液擠回母袋,X,23,PPT學(xué)習(xí)交流,多聯(lián)袋血-紅細(xì)胞和冰凍血漿的制備,1）第1次重離心后將盡可能多的血漿轉(zhuǎn)移至轉(zhuǎn)移袋； 2）將紅細(xì)胞保存液袋內(nèi)的紅細(xì)胞保存液轉(zhuǎn)移至紅細(xì)胞袋，充分混合即為懸浮紅細(xì)胞； 3

14、）核對(duì)血袋上的獻(xiàn)血條形碼，如一致則熱合斷離，生成1袋懸浮紅細(xì)胞和1袋血漿； 4）血漿紅細(xì)胞混入量少（目視觀察）即可將血漿袋熱合斷離； 5）如血漿紅細(xì)胞混入量較多，應(yīng)當(dāng)經(jīng)過(guò)第2次重離心后，把上清血漿轉(zhuǎn)移至已移空的紅細(xì)胞保存液袋，熱合斷離（如欲制備冷沉淀，則不熱合斷離）； 6）將血漿速凍，低溫保存。,24,PPT學(xué)習(xí)交流,紅細(xì)胞和冰凍血漿的制備,全 血,紅細(xì)胞,懸浮紅細(xì)胞,冰凍血漿,重離心,成分分離機(jī)或分漿夾成分分離,保養(yǎng)液,加保養(yǎng)液,血漿,目視紅細(xì)胞較少，速凍,目視紅細(xì)胞較多，重離心,紅細(xì)胞沉淀,丟棄,(保養(yǎng)液空袋),成分分離,血漿,冰凍血漿,速凍,25,PPT學(xué)習(xí)交流,紅細(xì)胞、濃縮血小板和冰凍

15、血漿的制備富血小板血漿法,1）第1次輕離心(280g)后將富含血小板血漿轉(zhuǎn)移至轉(zhuǎn)移袋； 2）將紅細(xì)胞保存液袋內(nèi)的紅細(xì)胞保存液轉(zhuǎn)移至紅細(xì)胞袋； 3）核對(duì)血袋上的獻(xiàn)血條形碼，如一致則熱合斷離，生成1袋懸浮紅細(xì)胞和1袋富血小板血漿； 4）將富含血小板血漿袋重離心（2100g），上清為血漿，沉淀物為血小板； 5）留取適量血漿，將多余的血漿轉(zhuǎn)移至已經(jīng)移空的紅細(xì)胞保存液袋，熱合斷離，生成1袋濃縮血小板和1袋血漿；6）將血漿袋速凍，低溫保存； 7）將濃縮血小板袋在室溫靜置12小時(shí)，待自然解聚后，輕輕均勻血袋，制成濃縮血小板混懸液，在222的環(huán)境下振蕩保存。,26,PPT學(xué)習(xí)交流,紅細(xì)胞、濃縮血小板和冰凍血漿

16、的制備富血小板血漿法,全 血,紅細(xì)胞,懸浮紅細(xì)胞,輕離心,成分分離機(jī)或分漿夾成分分離,保養(yǎng)液,加保養(yǎng)液,重離心,富血小板血漿,上層血漿，下層血小板沉淀,血漿,(保養(yǎng)液空袋),冰凍血漿,低溫保存,速凍,濃縮血小板,大部分血漿,少量血漿+血小板,成分分離,濃縮血小板懸浮液,室溫靜置12小時(shí)，自然解聚,222的環(huán)境下振蕩保存,27,PPT學(xué)習(xí)交流,紅細(xì)胞、濃縮血小板和冰凍血漿的制備白膜法,1）第1次重離心后，將血漿轉(zhuǎn)移至第1個(gè)轉(zhuǎn)移袋，將適量血漿及白膜層轉(zhuǎn)移至第2個(gè)轉(zhuǎn)移袋； 2）將紅細(xì)胞保存液袋內(nèi)的紅細(xì)胞保存液轉(zhuǎn)移至紅細(xì)胞袋，充分混合即為懸浮紅細(xì)胞； 3）核對(duì)血袋上的獻(xiàn)血條形碼，如一致則熱合斷離懸浮紅

17、細(xì)胞袋和血漿袋； 4）將白膜成分袋和1個(gè)空袋一起進(jìn)行輕離心，將富含血小板血漿（上層）轉(zhuǎn)移至空袋，制成濃縮血小板，熱合斷離，棄去白細(xì)胞袋。,28,PPT學(xué)習(xí)交流,紅細(xì)胞、濃縮血小板和冰凍血漿的制備白膜法,全 血,紅細(xì)胞,懸浮紅細(xì)胞,重離心,成分分離機(jī)或分漿夾成分分離,富血小板血漿,上層血漿，下層血小板沉淀,白膜,保養(yǎng)液,加保養(yǎng)液,輕離心,富血小板血漿,血漿,(保養(yǎng)液空袋),冰凍血漿,低溫保存,速凍,濃縮血小板,大部分血漿,少量血漿+血小板,成分分離,濃縮血小板懸浮液,室溫靜置12小時(shí)，自然解聚,222的環(huán)境下振蕩保存,丟棄,29,PPT學(xué)習(xí)交流,三、相關(guān)技術(shù)簡(jiǎn)介,30,PPT學(xué)習(xí)交流,冷沉淀凝血

18、因子制備 離心法,取出待制備冷沉淀的新鮮冰凍血漿，置42冰箱中過(guò)夜融化或在42水浴裝置中融化。 當(dāng)血漿基本融化時(shí)，取出血漿，在42的環(huán)境下重離心。 將大部分上層血漿移至空袋，制成冰凍血漿。將留下的2030ml血漿與沉淀物混合，制成冷沉淀凝血因子。,31,PPT學(xué)習(xí)交流,冷沉淀凝血因子制備 虹吸法,將新鮮冰凍血漿袋置于42水浴裝置中，另一空袋懸于水浴箱外，位置低于血漿袋，兩袋之間形成一定的高度落差。 血漿融化后，隨時(shí)被虹吸至空袋中，當(dāng)融化至剩下4050 ml血漿與沉淀物時(shí)，閉合導(dǎo)管，阻斷虹吸。將血漿與沉淀物混合，制成冷沉淀凝血因子。將冰凍血漿袋和冷沉淀凝血因子袋熱合斷離。,32,PPT學(xué)習(xí)交流,

19、虹吸,33,PPT學(xué)習(xí)交流,洗滌紅細(xì)胞制備, 待用洗滌溶液聯(lián)袋提前放置冷藏保存，無(wú)破損滲漏，溶液外觀正常，在有效期內(nèi)。 將合格的紅細(xì)胞懸液用作制備洗滌紅細(xì)胞懸液的起始血液，無(wú)破損滲漏，血液外觀正常，在有效期內(nèi)。 使用無(wú)菌接合機(jī)將待洗滌的紅細(xì)胞懸液袋導(dǎo)管和洗滌溶液聯(lián)袋進(jìn)行無(wú)菌接合連通。 將洗滌溶液移至紅細(xì)胞袋內(nèi)，液體量約為100ml/單位，夾緊導(dǎo)管，混勻。 按照制備紅細(xì)胞的離心程序進(jìn)行離心操作。 離心后將血袋取出，避免震蕩，垂直放入分漿夾中，把上清液轉(zhuǎn)移至空袋內(nèi)，夾緊導(dǎo)管。 重復(fù) 步驟，洗滌3次。 將適量（50 ml/單位）保存液（生理鹽水或紅細(xì)胞保存液）移入已完成洗滌的紅細(xì)胞，混勻。 熱合，貼

20、簽，入庫(kù)。 如果是在開放環(huán)境制備，應(yīng)嚴(yán)格遵從無(wú)菌操作。 如果在開放環(huán)境制備或最后以生理鹽水混懸，洗滌紅細(xì)胞保存期為24小時(shí)。如果是在閉合無(wú)菌環(huán)境中制備且最后以紅細(xì)胞保存液混懸，洗滌紅細(xì)胞保存期與洗滌前的紅細(xì)胞懸液相同。,34,PPT學(xué)習(xí)交流,去除白細(xì)胞, 使用白細(xì)胞過(guò)濾技術(shù)去除全血或紅細(xì)胞懸液中的白細(xì)胞。 根據(jù)白細(xì)胞過(guò)濾器生產(chǎn)方說(shuō)明書的要求進(jìn)行過(guò)濾操作。 應(yīng)當(dāng)在密閉環(huán)境（使用白細(xì)胞過(guò)濾多聯(lián)血袋或無(wú)菌接合技術(shù)）制備。 應(yīng)當(dāng)在采血后2天內(nèi)（采血次日為第1天）完成白細(xì)胞過(guò)濾。 檢查待濾過(guò)血液的外觀，并充分混勻后進(jìn)行過(guò)濾。 如果在進(jìn)行白細(xì)胞過(guò)濾操作前，血液已經(jīng)處于保存溫度（4 2），需要在室溫進(jìn)行過(guò)濾時(shí)，室溫應(yīng)26，而且應(yīng)當(dāng)盡快放回至既定保存溫度的環(huán)境中，從取出到放回的時(shí)間應(yīng)3小時(shí)。 如果在白細(xì)胞過(guò)濾后，將血液轉(zhuǎn)移至不屬于原聯(lián)體血袋的其他血袋，應(yīng)當(dāng)建立與實(shí)施標(biāo)識(shí)控制機(jī)制，保證過(guò)濾后血液的正確標(biāo)識(shí)。,35,PPT學(xué)習(xí)交流,去除白細(xì)胞,36,PPT學(xué)習(xí)交流,冰凍紅細(xì)胞,紅細(xì)胞甘油化 取擬冰凍保存的全血或懸浮紅細(xì)胞，離心去除上清液，用無(wú)菌接合技術(shù)將紅細(xì)胞轉(zhuǎn)移至容量適當(dāng)?shù)摹⑦m宜于冰凍保存的轉(zhuǎn)移袋內(nèi)。 在無(wú)菌條件下，緩慢滴加復(fù)方甘油溶液至紅細(xì)胞袋內(nèi)，邊加邊振