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文檔簡介
1、課題3:制作泡菜并檢測亞硝酸鹽含量,專題1:傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用,1,一、乳酸菌,乳酸菌是發(fā)酵糖類主要產(chǎn)物為乳酸的一類細菌的總稱。,屬于原核生物,乳酸菌種類多,分布廣,常見乳酸菌有乳酸鏈球菌和乳酸桿菌(用于制酸奶)。,乳酸鏈球菌(球狀),乳酸桿菌(桿狀),2,分布:,在自然界分布廣泛,空氣、土壤、植物體表、人或動物腸道內(nèi)部都有,繁殖:,以二分裂方式進行繁殖(無性生殖),代謝類型:,異養(yǎng)厭氧型,乳酸菌耐鹽,最適pH=5,為發(fā)酵中的先鋒隊,3,為什么含有抗生素的牛奶不能發(fā)酵為酸奶?,牛奶發(fā)酵為酸奶主要依靠乳酸菌的發(fā)酵作用,而抗生素能夠殺死或抑制乳酸菌。,4,二、亞硝酸鹽,自然界中,亞硝酸鹽分布廣泛,
2、蔬菜、咸菜、豆粉中均含有。,亞硝酸鹽為白色粉末,外觀與食鹽相似,有咸味,易溶于水,可作食品添加劑。,亞硝酸鹽為強氧化劑,能夠把血液中攜帶氧的低鐵血紅蛋白轉(zhuǎn)變?yōu)楦哞F血紅蛋白,從而導(dǎo)致缺氧性中毒癥狀。,5,膳食中的亞硝酸鹽一般不會危害人體健康,但是,當人體攝入的亞硝酸鹽總量達到0.30.5g時,會引起中毒,當攝入總量達到3g時,會引起死亡。 膳食中的絕大部分亞硝酸鹽隨尿排出,只有在特定的條件下才會轉(zhuǎn)變成致癌物亞硝胺,亞硝胺對動物還具有致畸和致突變作用(亞硝酸鹽本身不是致癌物質(zhì))。,亞硝酸鹽在pH=3,溫度適宜和一定微生物的作用下轉(zhuǎn)變成致癌物質(zhì)亞硝胺,因此,霉變的食品亞硝胺可增至數(shù)十倍至數(shù)百倍。,6
3、,我國衛(wèi)生標準規(guī)定:亞硝酸鹽的殘留量 在肉制品中不得超過30mg/kg, 醬菜中不超過20mg/kg, 而嬰兒奶粉中不得超過2mg/kg。,7,三、泡菜的制作,8,測定亞硝酸鹽含量,9,蔬菜處理,將鮮菜修整、洗滌、陽光下晾曬,到菜表皮萎焉時收下,切分成條狀或片狀。,10,配制鹽水,清水與鹽按4:1的比例配制好后煮沸冷卻。,鹽的作用:調(diào)味,抑制微生物生長,所以鹽含量過低會造成細菌污染。,煮沸的目的:殺菌 冷卻是為了不影響乳酸菌的生命活動。,11,裝壇發(fā)酵,將泡菜壇洗凈,并用熱水洗壇內(nèi)壁兩次。 將經(jīng)過處理的蔬菜混合均勻,裝入泡菜壇內(nèi),裝至半壇時放入蒜瓣、生姜及其他香辛料,繼續(xù)裝至八成滿,再徐徐注入
4、配好的鹽水,使鹽水沒過全部菜料,蓋好壇蓋。向壇蓋邊緣的水槽中注滿水。并注意發(fā)酵過程中補充水。,壇沿注滿水是為了保證壇內(nèi)乳酸菌的發(fā)酵所需的無氧環(huán)境。,12,腌制條件,溫度不能過高 食鹽含量不能過低 腌制時間不能過短 細菌污染大量繁殖后,亞硝酸鹽含量增加,腌制過程中,亞硝酸鹽含量先增多,后減少。,13,泡菜發(fā)酵的階段,泡菜在發(fā)酵期間,由于乳酸菌的發(fā)酵作用,發(fā)酵產(chǎn)物乳酸不斷累積,因此可以根據(jù)微生物的活動情況和乳酸積累量,將泡菜發(fā)酵過程分為三個階段。,14,蔬菜剛?cè)雺瘯r,蔬菜表面帶入的微生物,主要是以不抗酸的大腸桿菌和酵母菌等較為活躍,它們產(chǎn)生較多的乳酸、酒精、醋酸和二氧化碳等,二氧化碳以氣泡從水槽內(nèi)
5、放出,逐漸使壇內(nèi)形成嫌氣狀態(tài)。,發(fā)酵產(chǎn)物中除乳酸外,還有其他,如乙醇、CO2等稱異型乳酸發(fā)酵,發(fā)酵前期:,特點:還有一點點氧氣,微生物(大腸桿菌,酵母菌)發(fā)酵,產(chǎn)生代謝產(chǎn)物,二氧化碳排出,形成無氧環(huán)境,為后面乳酸菌發(fā)酵提供條件,乳酸含量逐漸增加,抑制微生物生長繁殖。,15,由于前期乳酸的積累,pH下降,嫌氣狀態(tài)的形成,乳酸桿菌進行活躍的同型乳酸發(fā)酵,乳酸的積累量可達到0.6%0.8%;乳酸積累pH達3.53.8.大腸桿菌、酵母菌、霉菌等的活動受到抑制。這一期為完全成熟階段,泡菜有酸味且清香品質(zhì)最好。,發(fā)酵產(chǎn)物中只有乳酸,稱為同型乳酸發(fā)酵,發(fā)酵中期:,特點:乳酸菌逐漸占據(jù)優(yōu)勢,其他發(fā)酵微生物受到
6、抑制,乳酸積累增多,16,在此期間繼續(xù)進行的是同型乳酸發(fā)酵,乳酸含量繼續(xù)增加,可達1.0%以上。當乳酸積累達1.2以上時,乳酸桿菌的活性受到抑制,發(fā)酵速度逐漸變緩甚至停止。,發(fā)酵后期:,此階段泡菜酸度過高、風(fēng)味不協(xié)調(diào)。,特點:乳酸含量過高,抑制乳酸菌活動,乳酸菌減少。,17,1、為什么泡菜壇內(nèi)有時會長一層白膜,這層白膜是怎么形成的?,形成白膜是由于產(chǎn)膜酵母的繁殖。酵母菌是兼性厭氧微生物,泡菜發(fā)酵液營養(yǎng)豐富,其表面氧氣含量也很豐富,適合酵母菌的繁殖。,18,2、為什么日常生活中要多吃新鮮蔬菜,不吃存放時間過長、變質(zhì)的蔬菜?,有些蔬菜,如小白菜和蘿卜等含有豐富的硝酸鹽。當這些蔬菜放置過久時發(fā)生變質(zhì)
7、(發(fā)黃、腐爛)或者煮熟后存放太久時,蔬菜中的硝酸鹽會被微生物還原成亞硝酸鹽,危害人體健康。,19,四、亞硝酸鹽含量的測定,20,1、測定亞硝酸鹽含量的原理 比色法,在鹽酸酸化條件下,亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)后,再與N-1萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合生成玫瑰紅溶液。 將經(jīng)過反應(yīng)顯色后的泡菜待測樣品與標準液比色,即可估算出樣品中的亞硝酸鹽含量。,21,3、步驟,(1)配置溶液,(2) 配制標準液,(3) 制備泡菜樣品處理液,(4)比色,22,2、材料與器具,泡菜、 對氨基苯磺酸、N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽、鹽酸 亞硝酸鈉、 氯化鎘、氯化鋇、 氫氧化鈉、氫氧化鋁、 蒸餾水、 榨汁機、移液管、容量瓶
8、、比色管等,23,(1)配置溶液,對氨基苯磺酸溶液(4mg/mL)溶于鹽酸,避光保存,N-1萘基乙二胺鹽酸鹽溶液(2mg/mL) 避光保存,亞硝酸鈉溶液(5ug/mL),提取劑:氯化鎘、氯化鋇,氫氧化鋁乳液,氫氧化鈉溶液,24,(2) 配制標準顯色液 用移液管吸取0.20mL、0.40mL、0.60mL、0.80mL、1.00mL、1.50mL亞硝酸鈉溶液(相當于1ug,2ug,3ug,4ug,5ug和7.5ug亞硝酸鈉),分別置于50mL比色管中,再取1支比色管作為空白對照。 并分別加入2.0mL對氨基苯磺酸溶液,混勻,靜置35分鐘后; 再分別加入1.0mL N-1萘基乙二胺鹽酸鹽溶液,加蒸餾水至50mL,混勻; 觀察亞硝酸鈉溶液顏色的梯度變化(玫瑰紅色逐漸加深)。,25,制備樣品,樣品處理液的制備,26,比色,樣品即濾液加入比色管,顯色反應(yīng):先加對氨基苯磺酸 ,后加 N-1萘基乙二胺鹽酸鹽,比色:顯色后與標準顯色液對比,找出顏色最相近的記錄對應(yīng)亞硝酸鹽含量,27,測定反應(yīng)原理總結(jié),酸化:對氨基苯磺酸溶于鹽酸中,顯色:重氮鹽+ N-1萘基乙二胺鹽酸鹽,比色:樣品和標準比色液對比,估算亞硝酸鹽含量,
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