湖南地標(biāo) 漁業(yè)水體五氯苯酚的測(cè)定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（征求意見(jiàn)稿）

1、SN/T 湖南省市場(chǎng)監(jiān)督管理局 發(fā)布2020-實(shí)施2020-發(fā)布漁業(yè)水體中五氯苯酚的測(cè)定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法 Determination of pentachlorophenol infishery watersLiquid chromatography-tandem mass spectrometric method（征求意見(jiàn)稿）DB 43/T XXXXX2020DB43湖南省地方標(biāo)準(zhǔn)ICS 03.120.20 A00 IDB43/T XXX-2020目 次前言1 范圍12 規(guī)范性引用文件13 方法原理14 試劑與材料15 儀器與設(shè)備16采樣17 測(cè)定步驟28 結(jié)果計(jì)算39方法的靈敏度、準(zhǔn)確

2、度、精密度3附錄A （資料性附錄）五氯苯酚選擇反應(yīng)監(jiān)測(cè)（SRM）色譜圖4-5前 言本標(biāo)準(zhǔn)按GB/T 1.1-2009給出的規(guī)則起草。請(qǐng)注意本標(biāo)準(zhǔn)某些內(nèi)容可能涉及專利，本標(biāo)準(zhǔn)發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別這些專利的責(zé)任。本標(biāo)準(zhǔn)由湖南省畜牧水產(chǎn)事務(wù)中心提出。本標(biāo)準(zhǔn)由湖南省農(nóng)業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：湖南省水產(chǎn)科學(xué)研究所、農(nóng)業(yè)部漁業(yè)產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)試中心（長(zhǎng)沙）。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：萬(wàn)譯文，楊霄，李小玲，索紋紋，洪波，劉伶俐，肖維，陳湘藝，曾春芳，何詠，黃向榮，黃華偉，尹升福，謝玉昆，雷琴5漁業(yè)水體中五氯苯酚的測(cè)定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法1 范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了漁業(yè)水體中五氯苯酚的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)定方

3、法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于我省漁業(yè)水體中五氯苯酚的測(cè)定。2規(guī)范性引用文件下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T 6682 分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法SL 187水質(zhì)采樣技術(shù)規(guī)程3 方法原理水樣中的目標(biāo)物經(jīng)HLB固相萃取柱富集和凈化后，用帶有電噴霧離子源的液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀負(fù)離子模式測(cè)定，外標(biāo)法定量。4 試劑與材料本方法所用試劑除另有說(shuō)明外，均為分析純；實(shí)驗(yàn)用水應(yīng)符合GB/T 6682一級(jí)水的規(guī)定。4.1 甲醇：色譜純。4.2 甲酸：色譜純。4.3 乙酸銨：色譜純。4.4 2 m

4、mol/L乙酸銨溶液（含體積分?jǐn)?shù)為0.1%甲酸）：稱取0.075 g乙酸銨，置于500 mL容量瓶中，加入0.5 mL甲酸，用水溶解定容至刻度。4.5五氯苯酚標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液（100 mg/L）：4避光保存，可以使用市售有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。4.6五氯苯酚標(biāo)準(zhǔn)中間溶液（50g/L）：準(zhǔn)確移取適量五氯苯酚標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液（4.5），用甲醇配制成50g/L標(biāo)準(zhǔn)中間溶液，4避光保存。4.7五氯苯酚標(biāo)準(zhǔn)工作溶液：根據(jù)需要，臨用時(shí)準(zhǔn)確吸取一定量的五氯苯酚標(biāo)準(zhǔn)中間溶液（4.6），用甲醇稀釋配制成濃度為1.0 g/L、2.5 g/L、5.0 g/L、10.0g/L、25.0 g/L、50.0 g/L的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。4.8微

5、孔有機(jī)過(guò)濾膜：0.22 m。4.9HLB固相萃取柱：200mg/6 mL，使用前用5 mL甲醇、5 mL水活化。5 儀器與設(shè)備5.1 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用儀，配有電噴霧（ESI）離子源。5.2 渦旋混勻器。5.3 固相萃取裝置。 5.4 氮吹儀。6 采樣采樣按SL 187的規(guī)定執(zhí)行。7測(cè)定步驟7.1 樣品前處理量取50 mL水樣，置于100 mL離心管中，用甲酸調(diào)節(jié)pH至3.0左右。將預(yù)處理的水樣轉(zhuǎn)移至已活化的HLB固相萃取柱中，在抽真空的情況下過(guò)柱（保持流速3 mL/min）。待水樣全部過(guò)完后，加入5 mL水進(jìn)行淋洗并抽干，再加入5 mL甲醇進(jìn)行洗脫，收集全部洗脫液，于45下氮?dú)獯蹈?。加?/p>

6、1.00 mL 甲醇渦旋振蕩溶解殘留物，過(guò)0.22 m 微孔濾膜后，供液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)定。7.2 空白試驗(yàn)量取不含五氯苯酚的的水樣，按照樣品前處理（7.1）步驟進(jìn)行空白試驗(yàn)和空白添加試驗(yàn)。7.3 測(cè)定7.3.1液相色譜參考條件色譜柱：C18 (1002.1 mm,粒徑3 m)，或相當(dāng)者。流動(dòng)相：A相：甲醇；B相：2 mmol/L乙酸銨溶液（含體積分?jǐn)?shù)為0.1%甲酸）。流動(dòng)相梯度洗脫條件參見(jiàn)表1。進(jìn)樣量：20 L。流速：0.30 mL/min。柱溫：35 。表1 流動(dòng)相梯度洗脫條件時(shí)間（min）A (%)B (%)040601.040602.010006.010008.0406010.040

7、607.3.2 質(zhì)譜參考條件離子源：電噴霧離子源。掃描方式：負(fù)離子掃描。檢測(cè)方式：選擇反應(yīng)監(jiān)測(cè)（SRM）。噴霧電壓：-3.0 kV。離子傳輸毛細(xì)管溫度：300 。選擇反應(yīng)監(jiān)測(cè)定性、定量離子對(duì)和碰撞能量見(jiàn)表2。表 2 選擇反應(yīng)監(jiān)測(cè)定性、定量離子對(duì)和碰撞能量目標(biāo)化合物定性離子對(duì) m/z定量離子對(duì) m/z碰撞能量 / eV五氯苯酚262.7262.7264.7264.7-5 266.7266.7268.7268.77.3.3定性樣品中待測(cè)化合物色譜峰的保留時(shí)間與相應(yīng)濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液的色譜峰的保留時(shí)間應(yīng)一致，偏差在5%之內(nèi)。在相同實(shí)驗(yàn)條件下，樣品中待測(cè)化合物定性離子的相對(duì)豐度與濃度接近的標(biāo)準(zhǔn)物對(duì)應(yīng)的定性離

8、子的相對(duì)豐度比較，相對(duì)離子豐度的最大允許偏差參見(jiàn)表3。表3 相對(duì)離子豐度的最大允許偏差相對(duì)離子豐度KK50%20%K50%10%K20%K10%允許的相對(duì)偏差20%25%30%50%7.3.4定量按7.3.1和7.3.2設(shè)置儀器條件，將標(biāo)準(zhǔn)工作溶液、樣品溶液、空白溶液、空白添加試樣等體積進(jìn)樣測(cè)定，外標(biāo)法定量，五氯苯酚的選擇反應(yīng)監(jiān)測(cè)（SRM）色譜圖參見(jiàn)附錄A，五氯苯酚標(biāo)準(zhǔn)溶液的選擇反應(yīng)監(jiān)測(cè)（SRM）色譜圖參見(jiàn)附錄A中圖A.1，空白水樣的選擇反應(yīng)監(jiān)測(cè)（SRM）色譜圖參見(jiàn)附錄A中圖A.2，空白水樣中添加五氯苯酚標(biāo)準(zhǔn)溶液的選擇反應(yīng)監(jiān)測(cè)（SRM）色譜圖參見(jiàn)附錄A中圖A.3。8結(jié)果計(jì)算樣品中待測(cè)物含量按（1）計(jì)算。 (1)式中：Xi樣品中待測(cè)物的含量，單位為微克每升（g/L）；Ci樣品溶液中待測(cè)物的濃度，單位為微克每升（g/L）；V1最終定容體積，單位為（mL）；V2試樣體積，單位為（mL）。注：計(jì)算結(jié)果須扣除空白值。當(dāng)結(jié)果小于1 g/L時(shí)，保留到小數(shù)點(diǎn)后兩位，當(dāng)結(jié)果大于等于1 g/L時(shí)，保留三位有效數(shù)字。9方法的靈敏度、準(zhǔn)確度、精密度9.1靈敏度本方法五氯苯酚的定量限為0.04g/L。9.2準(zhǔn)確度本方法添加濃度為0.0410.0g/L時(shí)回收率為（70120）%。9.3精密度本方法的批內(nèi)變異系數(shù)1