卵泡發(fā)育的調(diào)節(jié)因子

1、卵泡發(fā)育的調(diào)節(jié)因子,生殖微創(chuàng) 馬芳,（一）卵泡刺激素 （二）黃體生成素 （三）甾體激素 1、雌二醇 2、雄激素,（四）多肽類,1、表皮生長(zhǎng)因子 2、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子- 3、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子- 4、胰島素生長(zhǎng)因子 5、纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子,6、血小板和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子 7、卵泡抑制素和激活素 8、卵泡成熟抑制素 9、白細(xì)胞介素 10、腫瘤壞死因子,研究證明，卵泡的生長(zhǎng)主要靠促性腺激素的刺激，即使是發(fā)育后期的卵泡也需要它的作 用。 近年來(lái)，愈來(lái)愈多的證據(jù)表明 ， 除促性腺激素以外，卵巢局部產(chǎn)生的其他諸多因子如甾 體激素和卵 巢多肽等也參與調(diào)節(jié)卵泡的發(fā)育過(guò)程（圖 1-3 。,(一)卵泡刺激素,由于前一周期黃體

2、的萎縮，雌激素對(duì)垂體的負(fù)反饋得以解除，垂體釋放的卵泡刺激素 (FSH )增加是觸發(fā)新的卵泡發(fā)育的主要因素。一個(gè) 5mm大小的卵泡需要FSH的持續(xù)刺激才能發(fā)育成為直徑20mm的排卵前卵泡，此時(shí)顆粒細(xì)胞數(shù)目增加56倍,達(dá)到5000萬(wàn)個(gè)左右。 FSH具有以下生理作用：直接刺激顆粒細(xì)胞增生和分化；誘導(dǎo)顆粒細(xì)胞FSH和受LH受體合成，提高顆粒細(xì)胞對(duì)LH的反應(yīng)性，以保持排卵前卵泡的甾體合成和排卵后黃體的形 成；FSH可與顆粒細(xì)胞表面的受體結(jié)合，激活腺苷酸環(huán)化酶和 cAMP依賴性蛋白激酶（protein kinase) 以誘導(dǎo)基因產(chǎn)物的表達(dá)，如芳香化酶活性增加，使更多的雄激素轉(zhuǎn)化為雌激素；FSH還能刺激抑制

3、素 (inhibin)、激活素(activin)和胰島素樣生長(zhǎng)因子-1(insulin like growth factor-1,IGF-1)等的合成，這些多肽類物質(zhì)在調(diào)節(jié)優(yōu)勢(shì)卵泡的選擇和閉鎖方面起重 要作用。,（二）黃體生成素,黃體生成素(LH) 在排卵前卵泡的甾體激素合成中起關(guān)鍵作用。在卵泡發(fā)育的后半期， 雖然垂體釋放FSH減少，但其釋放的脈沖頻率增加，卵泡顆粒細(xì)胞 LH受體合成也增加，因此卵泡分泌的雌激素增加。卵泡膜細(xì)胞和間質(zhì)細(xì)胞也有LH受體，在整個(gè)月經(jīng)周期中LH直接作用于這些細(xì)胞調(diào)節(jié)其合成甾體激素，排卵期垂體釋放LH，一方面終止顆粒細(xì)胞的增生，使雌激素的分泌暫時(shí)受到抑制;另一方面可通過(guò)

4、一系列的連鎖反應(yīng)，誘發(fā)卵泡破裂和黃體形成。,卵巢多肽類物質(zhì)產(chǎn)生的部位,(三)甾體激素,1 . 雌二醇 雌二醇（estradiol,E2），在卵泡發(fā)育過(guò)程中起重要作用。卵泡期雌二醇緩慢升高，此時(shí)高水平的雌二醇可抑制促性腺激素的釋放，使血漿FSH水平降低，這時(shí)低水平的FSH是選擇優(yōu)勢(shì)卵泡的重要決定因素之一。動(dòng)物試驗(yàn)證明，雌二醇能使顆粒細(xì)胞增生，其上的FSH和雌二醇受體增加，從而增加卵泡對(duì)促性腺激素的反應(yīng)性；此外，雌二醇還可增強(qiáng)芳香化過(guò)程，使雌二醇本身合成增加。,1 、雄激素 在LH的刺激下，卵泡膜細(xì)胞可產(chǎn)生雄激素（androgen，A）,其中以睪酮 （testosterone）最為重要。這種雄激素

5、前體可以穿過(guò)卵泡膜細(xì)胞的細(xì)胞膜到達(dá)顆粒細(xì)胞，并在FSH的作用下轉(zhuǎn)化為雌二醇。在FSH供給不足的情況下，睪酮不能全部轉(zhuǎn)化為雌激素,剩余的睪酮就被轉(zhuǎn)化為高活性的雙氫睪酮，可抑制雌激素對(duì)顆粒細(xì)胞的促增生作用，導(dǎo)致卵泡發(fā)生閉鎖。,(四)多肽類,1. 表皮生長(zhǎng)因子 表皮生長(zhǎng)因子（epidermal growth factor,EGF） 是一種含 53 個(gè)氨基酸的多肽（polypeptide），分子量為6000，存在于機(jī)體許多器官和組織包括生殖道中，體內(nèi)外試驗(yàn)均證明，EGF是雌激素作用的中介體（mediator），具有很強(qiáng)的促細(xì)胞分裂作用，可刺激多種細(xì)胞增生。,2 、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子- 轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-（tra

6、nsforming growth factor-，TGF-） 在結(jié)構(gòu)和功能上與以EGF相似，并作用于同一受體。體內(nèi)合成的往往是TGF-的前體，在細(xì)胞表面的蛋白酶的作用下被激活為T(mén)GF-。免疫細(xì)胞化學(xué)證明，卵泡膜內(nèi)層細(xì)胞可產(chǎn)生 TGF-，并作用于顆粒細(xì)胞上的EGF/TGF-受體，促進(jìn)顆粒細(xì)胞增生，干擾FSH誘導(dǎo)的細(xì)胞分化?，F(xiàn)已證實(shí)TGF-/EGF參與了卵巢的旁分泌調(diào)節(jié)，起到調(diào)節(jié)顆粒細(xì)胞對(duì)FSH的反應(yīng)性，增強(qiáng)細(xì)胞增生和抑制其留體激素合成的作用。,3、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子- 轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子 （transforming growth factor-）由兩個(gè)相同的，分子量12500 的多肽組成。目前至少已發(fā)現(xiàn)三種

7、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子，即TGF-1、TGF-2和TGF-3及其三個(gè)不同的受體，即I型II型和III型。 I 型和III 型受體對(duì)TGF-1的親和力較TGF-2強(qiáng)。 II型受體對(duì)TGF-1 和TGF-2 的親和力相同。免疫細(xì)胞化學(xué)證明，小鼠著 床前的胚胎就開(kāi)始合成TGF-1 、TGF-2 和TGF-3，主要位于上皮間質(zhì)交界處，提示TGF-與組織分化有關(guān)。卵泡膜細(xì)胞和顆粒細(xì)胞均可合成TGF-，卵泡膜細(xì)胞是其主要來(lái)源。TGF-1 是一種具有多功能的調(diào)節(jié)因子，根據(jù)其產(chǎn)生部位和作用對(duì)象不同，可刺激或抑制細(xì)胞的生長(zhǎng)和分化。,TGF-對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)和分化作用可能是通過(guò)影響細(xì)胞外基質(zhì)的結(jié)構(gòu)，增加細(xì)胞黏蛋 白如纖維結(jié)合素（

8、fibronectin）和細(xì)胞對(duì)它的反應(yīng)性而達(dá)到的。 TGF-還可刺激顆粒細(xì)胞其他功能如FSH誘導(dǎo)的LH受體的產(chǎn)生，F(xiàn)SH誘導(dǎo)的芳香化酶活性。此外，體外試驗(yàn)證明，TGF-還可影響卵泡膜細(xì)胞的功能、甾體激素合成和卵子的成熟。,4、胰島素樣生長(zhǎng)因子 胰島素樣生長(zhǎng)因子（insulin like growth factors，IGFs）是小分子單鏈多肽，分子量為7000 ，與胰島素前體（proinsulin）的結(jié)構(gòu)很相似。人類卵泡膜細(xì)胞和顆粒細(xì)胞均可合成兩種IGFs，即IGF-1和IGF-2。卵泡膜細(xì)胞合成IGF-1，而顆粒細(xì)胞合成IGF-2 ，并可釋放人卵泡液中。體外試驗(yàn)證明，一些可刺激顆粒細(xì)胞增生

9、的藥物如FSH、人絨毛膜促性腺激素（human chorionic gonado-tropin，HCG）或雙丁醜環(huán)憐腺苷，均可誘導(dǎo)IGF-2 mRNA的表達(dá)，提示 IGF-2可能起自分泌調(diào)節(jié)作用，刺激顆粒細(xì)胞的增生。顆粒細(xì)胞合成的IGF-結(jié)合蛋白 (IGF-binding proteins，IGFBPs ) 可調(diào)節(jié)該細(xì)胞對(duì)IGF的局部反應(yīng)性。卵泡膜細(xì)胞不僅合成IGF-1，還合成IGF-1受體。胰島素或IGF-1可刺激體外培養(yǎng)的卵泡膜細(xì)胞或間質(zhì)細(xì)胞合成雄激素。,5、纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子 纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子（fibroblast growth factor，F(xiàn)GF）是一種肝素結(jié)合性蛋白（hepari

10、n-binding protein） ，在胚胎的性腺和成人的卵巢均可合成。FGF已被認(rèn)為是卵巢發(fā)育和黃體生成的血管生長(zhǎng)因子。同時(shí)，它還能作用于顆粒細(xì)胞，以改變其甾體激素合成能力，刺激促性腺激素受體和纖溶酶原激活物的合成。,6 、血小板和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子 血小板生長(zhǎng)因子（platelet derived growth factor，PDGF）是由兩條多肽鏈，即A鏈（17000 ）和B鏈（16000）通過(guò)二硫鍵形成的聚合物，具有促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)的作用。能增強(qiáng)顆粒細(xì)胞對(duì)FSH誘導(dǎo)的反應(yīng)性,使孕酮分泌，腺苷酸環(huán)化酶、纖溶酶原激活物和LH受體合成增加。通過(guò)免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)發(fā)現(xiàn)，卵巢間質(zhì)細(xì)胞、顆粒細(xì)胞和著床前

11、后的胚胎都可合成PDGF和受體 ， 提示它可能與卵泡和胚胎發(fā)育有關(guān)。在卵巢組織中可檢出一種與結(jié)構(gòu)上相似的多肽類物質(zhì)稱血管內(nèi)皮 生長(zhǎng)因子（vascular endothelial growth factor，VEGF），VEGF在 黃體組織中的含量尤高，具有促進(jìn)卵泡血管生長(zhǎng)的作用。,7、卵泡抑制素和激活素 80年代中期，Ling等從豬卵泡液中分離出一種分子量為 32000的蛋白質(zhì)，根據(jù)其在體外對(duì)垂體細(xì)胞釋放FSH起抑制或刺激作用而分別被稱為抑制素或激活素。抑制素由和兩個(gè)亞單位組成，而激活素則由抑制素中的兩個(gè)亞單位組成。給體外培養(yǎng)的卵泡膜細(xì)胞以基因重組激活素，可顯著地抑制其LH和IGF-1誘導(dǎo)的雄

12、激素合成。相反，微量的抑制素則可顯著地增強(qiáng)LH/IGF-1誘導(dǎo)的雄激素合成，提示抑制素和激活素可能參與調(diào)節(jié)卵泡膜細(xì)胞的甾體合成過(guò)程。同時(shí)，激活素可增強(qiáng)對(duì)未成熟顆粒細(xì)胞孕酮合成的誘導(dǎo)作用，而削弱FSH對(duì)成熟顆粒細(xì)胞孕酮合成的誘導(dǎo)作用，提示它們可能又是有效的雄激素芳香化自分泌調(diào)節(jié)物。最近通過(guò)基因剔除技術(shù)，發(fā)現(xiàn)體內(nèi)缺失抑制素基因的小鼠會(huì)發(fā)生卵巢間質(zhì)腫瘤，提示抑制素可能也是卵巣腫瘤抑制基因（tumor suppressor gene）之一。,8 、卵泡成熟抑制素 卵泡成熟抑制素（follistatin）是一種糖蛋白。已發(fā)現(xiàn)至少有三種分子量不同（32000、35000和39000）的形式存在。卵泡成熟抑制素由顆粒細(xì)胞合成，其釋放受FSH的調(diào)節(jié)。在體外，卵泡成熟抑制素有抑制垂體細(xì)胞釋放FSH的能力，但其效力僅為抑制素的10%30%。最近的研究表明，卵泡成熟抑制素也是一種激活素結(jié)合蛋白（activin-binding protein），在體外可阻止激活素的作用。,9 、白細(xì)胞介素 在卵巢中可觀察到許多非性腺成分如單核巨噬細(xì)胞和多核粒細(xì)胞存在白細(xì)胞介素 -1 （interleukin-1），常位于卵泡毛細(xì)血管周圍。這些巨噬細(xì)胞被激活后可產(chǎn)生一 些這樣的細(xì)胞因子，在體外有對(duì)抗促性腺激素的作