病原生物學(xué)第三次課細(xì)菌所致疾病-化膿+呼吸道.ppt

1、病原生物學(xué),黃芬 E-mail:,提問,1、IMViC？ 2、細(xì)菌毒素？ 3、細(xì)菌耐藥性如何產(chǎn)生？ 4、大腸桿菌所致疾病？ 5、志賀毒素 6、沙門菌重要的生化特征？ 7、Vi抗原 8、幽門螺桿菌主要的生物學(xué)特征？ 9、霍亂弧菌培養(yǎng)的特點？ 10、霍亂毒素,案例分析,案例分析 患者，男，16歲。因“發(fā)熱、腹痛。腹瀉、解膿便1天”就診。就診前一天，患者晚餐進(jìn)食鹵肉后，當(dāng)晚即感身體不適、頭痛、發(fā)熱、惡心、四肢無力。半夜有陣痛性腹痛，大便為黃色水樣，量多，其后每0.5-1h排便1次，便前有劇烈腹痛，最近幾次帶有膿血便，便后仍想解大便。 要求：從微生物學(xué)角度，應(yīng)該考慮采集哪些標(biāo)本進(jìn)行檢測？ 如何設(shè)計鑒定

2、試驗？ 試分析引起該患者腹瀉的可能原因。,第二章、細(xì)菌所致疾病,消化道感染細(xì)菌 化膿性細(xì)菌 呼吸道感染細(xì)菌,第二節(jié)、化膿性細(xì)菌,化膿性細(xì)菌：引起化膿性炎癥的細(xì)菌,皮膚 皮下軟組織 深部組織 內(nèi)臟器官膿腫,化膿性細(xì)菌,革蘭氏陽性菌：葡萄球菌屬、鏈球菌屬、腸球菌屬 革蘭氏陰性菌：奈瑟菌屬、莫拉菌屬、假單胞菌屬、埃希菌屬、變形桿菌屬、無芽孢厭氧菌,一、葡萄球菌屬,化膿性細(xì)菌中最常見的G+球菌，呈葡萄串狀 人及動物的皮膚與腔道均存在，多數(shù)不致?。ǔ瘘S色葡萄球菌） 醫(yī)務(wù)人員帶菌率高達(dá)70%，多為耐藥菌，醫(yī)院內(nèi)交叉感染的主要傳染源 組織器官化膿性炎癥，食物中毒，燙傷樣皮膚綜合癥、毒性休克綜合癥,化膿性腹

3、膜炎,燙傷樣皮膚綜合癥,金黃色葡萄球菌,1、生物學(xué)性狀,形態(tài)與染色 0.51.0um，球形或橢圓形的G+細(xì)菌，呈葡萄串狀，無芽孢，無鞭毛； 在膿汁或液體培養(yǎng)基中呈單個、成雙或短鏈狀排列； 在固體培養(yǎng)基上呈典型排列。在青霉素作用下變?yōu)長型細(xì)菌。,電鏡觀察L型葡萄球菌,1、生物學(xué)性狀,培養(yǎng)與生化 需氧或兼性厭氧，營養(yǎng)要求不高，耐鹽（1015% NaCl）。 菌落特征：13mm圓形、凸起、邊緣光滑、不透明的菌落，不同菌株可產(chǎn)生不同的脂溶性色素；血平板上致病菌株能產(chǎn)生-溶血； 多數(shù)菌株能分解葡萄糖、麥芽糖、蔗糖和甘露醇，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣,鑒定,金黃色葡萄球菌,表皮葡萄球菌,腐生葡萄球菌,1、生物學(xué)性狀,抗原

4、結(jié)構(gòu) 葡萄球菌A蛋白（SPA）：90%金黃色葡萄球菌細(xì)胞壁上存在、具有種屬特異性的單鏈多肽，可與人和動物的IgG的Fc段非特異性結(jié)合，從而干擾吞噬細(xì)胞的作用。SPA與IgG復(fù)合物有促進(jìn)細(xì)胞分裂、引起超敏反應(yīng)、損傷血小板等活性。 多糖抗原：細(xì)胞壁上含磷多聚物，具有群特異性。磷壁酸能與細(xì)胞表面的纖連蛋白結(jié)合，介導(dǎo)葡萄糖球菌對粘膜表面的黏附。,1、生物學(xué)性狀,分類,金黃色葡萄球菌 （金黃色） 表皮葡萄球菌 （白色） 腐生葡萄球菌 （檸檬色）,表型,凝固酶陽性菌 凝固酶陰性菌,4群 23型,凝固酶,噬菌體分型,I群：醫(yī)院敗血癥流行株 II群：產(chǎn)生表皮剝脫毒素 III群：產(chǎn)生腸毒素,詳見p59 表8-1

5、 三種葡萄球菌主要性狀鑒別,1、生物學(xué)性狀,為無芽胞細(xì)菌中最強(qiáng)的，可概括為“四耐一敏感”： 耐干燥，在干膿汁、痰液中可存活2-3個月； 耐熱，在60 1h或80 30min以上仍能存活； 耐藥，目前對青霉素耐藥以達(dá)90%以上； 耐鹽，可在10-15%NaCl肉湯中生長； 對堿性染料敏感，1/10萬龍膽紫能抑制其生長。,抵抗力,2、致病性,金黃色葡萄球菌磷壁酸介導(dǎo)黏附、莢膜抗吞噬以及產(chǎn)生多種酶和毒素，故致病力極強(qiáng)，而表皮和腐生葡萄球菌則一般不致病，為條件致病菌 致病物質(zhì),凝固酶 葡萄球菌溶血素 殺白細(xì)胞素 腸毒素 表皮剝脫毒素 毒性休克綜合征毒素,凝固酶：鑒別葡萄球菌有無致病性的重要指標(biāo)。分游離

6、型和結(jié)合型兩種。使血液或血漿中的纖維蛋白沉積，保護(hù)細(xì)菌抵抗吞噬及其它殺菌物質(zhì)作用，并決定了金黃色葡萄球菌引起化膿性感染時的感染特點：病灶局限、不易擴(kuò)散、而且膿汁粘稠。 葡萄球菌溶血素： 4種溶血素，溶血素為主要致病因子，溶解紅細(xì)胞，破壞白細(xì)胞、血小板及多種其它細(xì)胞 殺白細(xì)胞素：破壞中性粒細(xì)胞和吞噬細(xì)胞、抗吞噬、增強(qiáng)病菌侵襲力,重要的毒素和酶,腸毒素：部分金葡菌產(chǎn)生（1/3），可引起急性胃腸炎。 耐熱，10030min,引起毒素性食物中毒（嘔吐） 抗酸，不受胃腸液中蛋白酶影響. 表皮剝脫毒素 又稱表皮溶解毒素，裂解細(xì)胞間橋小體，破壞細(xì)胞間連接，引起表皮與真皮脫落燙傷樣皮膚綜合征 毒性休克綜合征-

7、1(TSST-1)： 引起發(fā)熱、組織損傷、休克、腎衰、皮疹等多個器官功能紊亂，毒性休克綜合征（TSS） 其它 葡激酶、耐熱核酸酶、透明質(zhì)酸、脂酶，有利于細(xì)菌在機(jī)體內(nèi)擴(kuò)散, 侵襲性疾?。褐饕鸹撔匝装Y。常見的有： 皮膚軟組織的感染：癤、癰、毛囊炎、膿皰瘡、甲溝炎、麥粒腫、傷口化膿； 內(nèi)臟器官的感染：氣管、肺、腦膜、中耳、尿路感染 全身感染：敗血癥 毒素性疾?。?食物中毒、假膜性腸炎、皮膚燙傷綜合征、毒性休克綜合征等。,2.所致疾?。?癰,麥粒腫,甲溝炎,毛囊炎,燙傷樣皮膚綜合征 假膜性腸炎,3、微生物學(xué)檢查,（一）標(biāo)本的采集,膿汁/滲出液,血液,嘔吐物/糞便,（二）檢查方法,直接涂片,分離培

8、養(yǎng)與鑒定,快速診斷試驗 腸毒素檢查,4、防治原則,及時處理傷口,保證飲食衛(wèi)生安全,選擇敏感藥物治療,耐藥性,二、鏈球菌屬,鏈球菌屬種類繁多，致病性強(qiáng)弱不一, 廣泛分布于人糞便、鼻咽部，大多數(shù)不致病，主要引起化膿性炎癥，如扁桃體炎、咽炎、新生兒敗血癥、細(xì)菌性心內(nèi)膜炎，毒素性疾?。ㄐ杉t熱）以及超敏反應(yīng) 對人類致病的主要是A群鏈球菌和肺炎鏈球菌,肺炎鏈球菌,豬鏈球菌,1.形態(tài)染色： G+，呈鏈狀排列，無芽孢、無鞭毛。多數(shù)幼齡期有莢膜，隨培養(yǎng)時間的延長，菌體自身產(chǎn)生的透明質(zhì)酸使莢膜消失。 營養(yǎng)要求高，普通培養(yǎng)基上生長不良，兼性厭氧。在液體培養(yǎng)基中混濁，管低有絮狀沉淀；血平板上形成灰白色光滑型的細(xì)小菌落

9、。分解葡萄糖，只產(chǎn)酸，不分解菊糖，不被膽汁溶解。,肺炎鏈球菌,生物學(xué)性狀,在血平板上可有、三種溶血,1)根據(jù)溶血現(xiàn)象分類： 甲型溶血型鏈球菌（溶血）：菌落周圍有草綠色溶血環(huán)，亦稱為草綠色鏈球菌。溶血環(huán)中的紅細(xì)胞并未完全溶解，可能是細(xì)菌產(chǎn)生的H2O2使血紅蛋白氧化成正鐵血紅蛋白的產(chǎn)物。 此類細(xì)菌多為條件致病菌 (拔牙、扁桃體摘除、齲齒) 乙型溶血型鏈球菌（溶血）：菌落周圍形成完全透明的溶血環(huán)（，也稱為溶血性鏈球菌。其致病性強(qiáng)，常引起人類和動物的多種疾病。 丙型鏈球菌（溶血）：不產(chǎn)生溶血素，菌落周圍無溶血環(huán)，也稱為不溶血/鏈球菌，無致病性，主要分布于乳類或動物的糞便中。,2.分類,2)根據(jù)抗原分類

10、： 根據(jù)細(xì)胞壁中的多糖抗原不同分類，現(xiàn)已有20個血清群。對人類致病的主要為A群（90%以上，多數(shù)呈溶血），其它如B、C、D、G群偶爾可感染人。同一群的鏈球菌因其表面抗原不同又可分為若干血清型，例如A群根據(jù)M抗原的不同分為100個型。 3.抵抗力： 對理化因素抵抗力弱，不耐熱（60 30min），對常用消毒劑敏感。 青霉素是首選，極少產(chǎn)生耐藥性。,鏈球菌引起的感染在臨床上極為常見。 （一）致病物質(zhì)： 溶血素：能溶解紅細(xì)胞，據(jù)其對氧的敏感性分為溶血素O（SLO）和溶血素S（SLS），前者對氧敏感，對熱較穩(wěn)定，抗原性強(qiáng)，感染后23周可產(chǎn)生抗體（ASO）；后者對氧穩(wěn)定，對熱敏感，抗原性弱。 致熱外毒素

11、（SPE） ：也稱紅疹毒素或猩紅熱毒素，具有致熱作用和細(xì)胞毒作用，抗原性強(qiáng)，是人類猩紅熱主要致病物質(zhì)。 侵襲性酶：鏈激酶（溶解血塊或阻止血漿凝固）、鏈道酶（降解膿汁中具有高度黏稠性的DNA）、透明質(zhì)酸酶（利于細(xì)菌擴(kuò)散）、膠原酶。感染特點：感染病灶與周圍界限不清，易于擴(kuò)散，膿汁稀薄 菌體表面結(jié)構(gòu)：脂磷壁酸（黏附）、M蛋白（抗吞噬）、F蛋白（結(jié)合纖連蛋白）,4、致病性：,（一）致病因子,脂磷壁酸(LTA) 黏附于細(xì)胞表面 F蛋白:與上皮細(xì)胞粘連蛋白結(jié)合，利于定植和增殖，抗吞噬能力 M蛋白:抗吞噬和抗殺菌作用，介導(dǎo)細(xì)菌的黏附，參與超敏反應(yīng),定植因子,溶血素,能溶解紅細(xì)胞、破壞白細(xì)胞和血小板,又稱紅疹

12、毒素或猩紅熱毒素，引起發(fā)燒，是人類猩紅熱的主要毒性物質(zhì)，也可導(dǎo)致毒性休克綜合征,致熱外毒素,2、致病性,侵襲性酶,透明質(zhì)酸酶：分解細(xì)胞間質(zhì)的透明質(zhì)酸 鏈激酶：溶解血塊或組織血漿凝固，利于擴(kuò)散。急性心肌梗塞 鏈道酶：膿液變稀薄 膠原酶：溶解膠原纖維,A群鏈球菌：主要導(dǎo)致化膿性感染，約占人類鏈球菌感染的90%， 1.急性化膿性炎癥：丹毒、蜂窩組織炎、淋巴（節(jié)）炎、膿皮病等 2.猩紅熱：鏈球菌經(jīng)咽喉黏膜侵入機(jī)體，增殖并產(chǎn)生致熱外毒素 3.感染后超敏反應(yīng)性疾病： 急性腎小球腎炎：上呼吸道及皮膚感染均可繼發(fā)急性腎小球腎炎 風(fēng)濕熱：常繼發(fā)于A族鏈球菌感染的咽炎,（二）所致疾?。?丹毒,蜂窩組織炎,膿皮病,

13、猩紅熱,其他鏈球菌感染 1.B群鏈球菌：為陰道、鼻咽部的正常菌群，分娩時感染胎兒，導(dǎo)致新生兒腦膜炎、肺炎、敗血癥（死亡率5070%）。 2.D群腸球菌：屬于皮膚、上呼吸道、消化道、泌尿生殖道的正常菌群，可導(dǎo)致老年及中青年女性的泌尿生殖道感染、化膿性盆腔感染、敗血癥等。 3.甲型溶血性鏈球菌：為人鼻咽、口腔、女性生殖道的正常菌群，拔牙時，入血可導(dǎo)致亞急性心內(nèi)膜炎、敗血癥等，變異鏈球菌與齲齒有關(guān)。,齲齒,三、肺炎鏈球菌,寄生于正常人的鼻咽腔中， 4070%的正常人鼻咽部攜帶有此菌，一般不致病，當(dāng)機(jī)體免疫力下降時才致病，是細(xì)菌性肺炎的主要病原體，主要引起大葉性肺炎。,1.形態(tài)染色： G+球菌，呈矛頭

14、狀，排列時鈍端相對，尖端相背，故又稱肺炎雙球菌；在膿汁、痰液標(biāo)本中有時呈單個或短鏈排列，液體培養(yǎng)基中呈鏈狀。在人體內(nèi)可形成莢膜，人工傳代后消失。,2、培養(yǎng)與生化 血平板上形成灰白色細(xì)小、半透明的菌落， 呈溶血，與甲型溶血性鏈球菌相似。若孵育時間48h，產(chǎn)生自溶酶，菌體溶解，菌落中央下陷呈臍狀，在血清肉湯中培養(yǎng)早期呈混濁生長，稍久因自溶而逐漸澄清。 分解菊糖，膽汁溶菌試驗陽性,1、生物學(xué)性狀,接種小白鼠 （腹腔）,肺炎鏈球菌：24h內(nèi)死亡 甲型溶血性鏈球菌：不死亡,3.抗原結(jié)構(gòu)： 莢膜多糖抗原具有型特異性，分為90多個血清型，其中20多個可引起疾病。 M蛋白：型特異性抗原，但各型免疫原性不同，與

15、細(xì)菌毒力無關(guān) C多糖：CRP與肺炎鏈球菌多糖抗原結(jié)合能激活補(bǔ)體，并增強(qiáng)吞噬細(xì)胞的吞噬功能。,2、致病性,一般不致病，多形成帶菌狀態(tài)；感染后獲得牢固的免疫。 致病物質(zhì)： 莢膜：主要致病物質(zhì)，有莢膜才能致病 溶血素O：溶解紅細(xì)胞、抑制吞噬 脂磷壁酸、神經(jīng)氨酸酶、SIgA蛋白酶 所致疾?。捍笕~性肺炎和支氣管炎，也可引起肺膿腫、敗血癥及腦膜炎、中耳炎等。 多重耐藥株增多，死亡率高,3、微生物學(xué)檢查,（一）標(biāo)本的采集,膿汁/滲出液/腦脊液,血液/腦脊液,（二）檢查方法,直接涂片,分離培養(yǎng)與鑒定,動物試驗 小鼠對肺炎鏈球菌高度易感,提問,1、巧克力培養(yǎng)基？ 2、細(xì)菌毒素？ 3、溶血？ 4、如何區(qū)分甲型鏈球

16、菌和肺炎鏈球菌？ 5、猩紅熱由哪個病原體造成？ 6、肺炎鏈球菌的生化培養(yǎng)特征 7、表皮剝脫毒素,案例分析,案例分析 患者，男，16歲。因“發(fā)熱、腹痛。腹瀉、解膿便1天”就診。就診前一天，患者晚餐進(jìn)食鹵肉后，當(dāng)晚即感身體不適、頭痛、發(fā)熱、惡心、四肢無力。半夜有陣痛性腹痛，大便為黃色水樣，量多，其后每0.5-1h排便1次，便前有劇烈腹痛，最近幾次帶有膿血便，便后仍想解大便。 要求：從微生物學(xué)角度，應(yīng)該考慮采集哪些標(biāo)本進(jìn)行檢測？ 如何設(shè)計鑒定試驗？ 試分析引起該患者腹瀉的可能原因。,三糖鐵瓊脂試驗,志賀菌都能分解葡萄糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，大多不發(fā)酵乳糖，不產(chǎn)生H2S。 沙門氏菌能分解葡萄糖，不發(fā)酵乳糖，大

17、多數(shù)產(chǎn)生H2S，多數(shù)產(chǎn)氣。 大腸埃希菌能分解葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣，大多數(shù)能分解乳糖，不產(chǎn)生H2S。,對照,志賀菌,沙門氏菌,大腸埃希菌,乳糖：蔗糖：葡萄糖=10:10:1, H2S,酚紅指示劑： 酸性黃色 pH6.6至8.0橙色 堿性紅色,重要的致病菌包括腦膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌。 一、腦膜炎奈瑟菌，簡稱腦膜炎雙球菌，是流行性腦脊髓膜炎（流腦）的病原菌。人是本菌的唯一宿主，主要通過咳嗽、噴嚏等飛沫傳播，流腦患者和帶菌者是本病的主要傳染源。 （一）生物學(xué)性狀： 1.形態(tài)染色： G-球菌，菌體呈腎形或豆形，多成雙排列，凹面相對；無鞭毛，無芽孢。 新分離株大多有莢膜和菌毛。,奈瑟菌屬,3、抗原結(jié)構(gòu) 莢膜多

18、糖抗原 有群特異性，分為A-D、X、Y、Z、29E、W135等13個血清群。對人致病的多屬于A、B、C群；C群致病力最強(qiáng)而病例極少，B群散發(fā)，我國95%屬于A群。 外膜蛋白抗原 分為1-5類，刺激機(jī)體產(chǎn)生抗體，有免疫保護(hù)作用 脂寡糖抗原（LOS） 型特異性抗原，L1-L12血清型。A群L10型為優(yōu)勢株 4.抵抗力弱，對熱、冷、干燥等敏感， 對常用消毒劑敏感。對青霉素敏感，對磺胺普遍耐藥。,腦膜炎奈瑟菌 （油鏡）,G-，雙球菌,（二）致病性 1.致病物質(zhì)：菌毛、莢膜和內(nèi)毒素。 2.所致疾?。毫餍行阅X脊髓膜炎（流腦） 致病過程： 通過菌毛黏附于鼻咽部上皮細(xì)胞表面引起局部感染，出現(xiàn)上呼吸道癥狀; 細(xì)

19、菌進(jìn)入血液，引起菌血癥或敗血癥（2-3%，惡寒、發(fā)熱、惡心、皮膚出血性皮疹）； 細(xì)菌進(jìn)入腦脊髓膜，引起化膿性腦脊髓膜炎（ 2-3%，頭痛、噴射狀嘔吐、頸項強(qiáng)直等）；嚴(yán)重者導(dǎo)致爆發(fā)性腦膜炎（10-20%，爆發(fā)性紫癜、衰竭、內(nèi)毒素休克、DIC及嚴(yán)重的中樞神經(jīng)系統(tǒng)癥狀）。,3、微生物學(xué)檢查,（一）標(biāo)本的采集,膿汁/滲出液,血液/腦脊液,（二）檢查方法,直接涂片,離心后涂片鏡檢,（三）免疫性 特異性抗莢膜多糖抗體及抗外膜蛋白抗體是主要的保護(hù)性抗體，SIgA可阻止該菌對呼吸道的侵襲。 疫苗 莢膜多糖，A、C二價或A、C、Y和W135四價混合多糖疫苗。 治療：青霉素、磺胺類等能通過血腦屏障的抗生素,（一）

20、生物學(xué)性狀 1.形態(tài)染色： G-雙球菌，菌體呈腎形或蠶豆?fàn)?，凹面相對?急性患者中多數(shù)細(xì)菌位于膿汁標(biāo)本的中性粒細(xì)胞內(nèi)，而在慢性患者則菌量較少，且多位于細(xì)胞外； 有菌毛，有莢膜。,二、淋病奈瑟菌,2.培養(yǎng)特征： 專性需氧菌，初次分離需要510%的CO2；營養(yǎng)要求高，在巧克力培養(yǎng)基上生長緩慢，48小時形成圓形、光滑、無色或灰白色小菌落，血平板上不溶血。只分解葡萄糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。,3.生化反應(yīng)： 不活潑，只分解葡萄糖，不分解麥芽糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣 4.抵抗力： 弱，對冷、熱、干燥、消毒劑極度敏感，1/4000硝酸銀7min死亡，1%硝酸銀1min死亡。,（一）致病因子,依靠菌毛黏附到柱狀上皮細(xì)胞表面，能

21、在吞噬細(xì)胞內(nèi)寄生（抗吞噬）,黏附,外膜蛋白,PI: 破壞膜結(jié)構(gòu)的完整性導(dǎo)致中性粒細(xì)胞損傷，介導(dǎo)細(xì)菌與靶細(xì) 胞的黏附，組織吞噬溶酶體的形成，利于定植 PII: 參與黏附 PIII：阻抑抗體活性,局部形成炎癥反應(yīng),內(nèi)毒素,2、致病性,人是淋球菌的唯一天然宿主。幾乎全是通過性傳播感染，偶爾污染的內(nèi)衣、被褥、毛巾等也可間接傳播，也可垂直傳播。 感染淋球菌后，細(xì)菌借助菌毛吸附于泌尿生殖道上皮細(xì)胞上，局部大量繁殖，導(dǎo)致上皮細(xì)胞的溶解、破壞，引起急性化膿性炎癥，男性為尿道炎，女性為急性陰道炎和尿道炎。如果治療不及時，該菌可沿泌尿系統(tǒng)擴(kuò)散，造成各種合并癥，如男性前列腺炎、附睪炎，女性盆腔炎、輸卵管炎等，嚴(yán)重者

22、可導(dǎo)致不孕、不育。 如孕婦感染淋球菌，分娩時胎兒可經(jīng)產(chǎn)道感染，患淋菌性結(jié)膜炎。,（二）所致病疾病,膿漏眼,（三）免疫性 人無免疫力，多數(shù)可自愈，并出現(xiàn)特異性抗體，但再感染和慢性患者普遍存在。 耐藥株較多，頭孢菌素類治療 1%硝酸銀或其他銀鹽溶液處理新生嬰兒,超級淋菌,超級淋菌，2013年5月，對頭孢類藥物有較好的抵抗性，如不及時阻住，10年內(nèi)將全球泛濫,3、微生物學(xué)檢查,（一）標(biāo)本的采集,生殖道內(nèi)膿性分泌物,子宮頸口表面分泌物,（二）檢查方法,直接涂片鏡檢,分離培養(yǎng)與鑒定,其他化膿性細(xì)菌,1、銅綠假單胞菌 俗稱綠膿桿菌，廣泛存在于自然界，是人體的正常菌群。 G-桿菌，無芽孢，有莢膜，有鞭毛、菌

23、毛； 專性需氧，35 ，在4不生在而42可生長。普通培養(yǎng)基上形成大小不一，扁平濕潤，邊緣不齊，帶亮綠色的水溶性色素菌落。血瓊脂上產(chǎn)生透明溶血環(huán)。分解葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，不液化明膠 抗原結(jié)構(gòu) O和H抗原，O抗原含有內(nèi)毒素脂多糖、原內(nèi)毒素蛋白（OEP） 抵抗力 較強(qiáng)，耐多種化學(xué)消毒劑與抗生素，56需1h殺死,致病性與免疫力,致病物質(zhì)：主要為內(nèi)毒素 所致疾病：條件致病菌，多見于皮膚黏膜受損部位，長期化療或免疫抑制缺陷患者。局部化膿性炎癥，中耳炎、角膜炎、胃腸炎等；嬰兒嚴(yán)重的流行性腹瀉。 防治 OEP疫苗 氨基糖苷類和酰胺類抗生素聯(lián)合治療,其他化膿性細(xì)菌,2、腸球菌屬 是G+中僅次于葡萄球菌的主要醫(yī)院感

24、染病原菌，常見為尿路感染，創(chuàng)傷或術(shù)后感染。 常用青霉素和氨基糖苷類抗生素治療。近年出現(xiàn)耐藥株 3、卡他布蘭漢菌 又稱黏膜炎布蘭漢菌，G-球菌。在痰液中呈腎形雙球菌狀，存在于吞噬細(xì)胞內(nèi)或外。抵抗力較強(qiáng)。導(dǎo)致急性咽喉炎、支氣管炎、肺炎、腦膜炎等。,第三節(jié)、呼吸道感染細(xì)菌,能侵犯呼吸道，引起呼吸道局部病變或以其為侵入門戶，引起呼吸道及其他組織器官病變的病原菌。 經(jīng)呼吸道途徑感染，口-口途徑,結(jié)核分枝桿菌 棒狀桿菌白喉棒狀桿菌 嗜肺軍團(tuán)菌 百日咳鮑特菌 流感嗜血桿菌 肺炎克雷伯菌,細(xì)長而略帶彎曲的桿菌，生長繁殖過程中常呈分枝狀。無特殊結(jié)構(gòu)；不易著色，經(jīng)加熱、延長加熱時間、提高染料濃度等措施后，一旦染色

25、又能抵抗酸酒精脫色，故又稱抗酸桿菌（acid fast bacillus）。,對人致病的主要有： 結(jié)核分枝桿菌 非結(jié)核分枝桿菌 麻風(fēng)分枝桿菌,一、分枝桿菌屬,結(jié)核分枝桿菌簡稱結(jié)核桿菌（TB），是引起人類結(jié)核病的病原菌，通常是指人型和牛型。 一、生物學(xué)性狀： 形態(tài)染色： 1.組織中典型的結(jié)核桿菌為細(xì)長、 直或微彎曲，在痰液中多單個存在， 有時呈分枝狀；菌量多時可聚集成團(tuán) 或束（簇）；人工培養(yǎng)后可呈絲狀、棒狀。一般牛型較人型粗短。 2.G+桿菌,無鞭毛、無芽孢，有莢膜?？顾崛旧杉t色，金胺O染色呈金黃色熒光。,結(jié)核分枝桿菌,培養(yǎng)特征： 1.專性需氧，初次分離需要510% CO2刺激。 2.溫度范圍

26、廣，37最適；最適pH值6.56.8；生長需要一定的濕度。 3.營養(yǎng)要求高，需要加入卵黃、血液、馬鈴薯粉、氨基酸，無機(jī)鹽等(羅氏培養(yǎng)基)。 4.生長緩慢，1824小時分裂一代，34周形成菌落。,5.在羅氏培養(yǎng)基中人型結(jié)核分枝桿菌的菌落為粗糙型表面干燥、顆粒狀、不透明，乳白色或淡黃色，菜花狀；牛型結(jié)核分枝桿菌菌落為S型。 6. 在液體培養(yǎng)基中結(jié)核桿菌生長迅速，形成菌膜，有毒株可呈索狀生長。,（三）抵抗力： 結(jié)核桿菌細(xì)胞壁含有大量脂類，對理化因素的抵抗力強(qiáng)。 耐干燥：細(xì)菌細(xì)胞壁中含有大量的脂質(zhì)，可防止水分的丟失；在干燥的痰液中可存活68個月，粘附于塵埃中傳染性能保持810天； 耐酸堿：4% NaO

27、H、3% HCl、6% H2SO4中半小時仍能存活，故可用酸或堿處理標(biāo)本去除雜菌； 耐青霉素及低濃度的染料（龍膽紫、孔雀綠等）； 對酒精、過氧乙酸、濕熱、紫外線敏感，60煮1小時、日光照射2小時即可被殺滅。,二、致病性,結(jié)核桿菌不產(chǎn)生內(nèi)、外毒素，也無莢膜和侵襲性的酶，其致病主要是依靠細(xì)菌在機(jī)體細(xì)胞內(nèi)外的強(qiáng)大的繁殖能力，以及菌體成分（如索狀因子、蠟脂D、結(jié)核菌酸等）、代謝產(chǎn)物引起的免疫活性損傷、變態(tài)反應(yīng)等有關(guān)。（一）致病物質(zhì) 1.脂質(zhì)：約占細(xì)胞干重的60%。脂質(zhì)的含量與毒力密切相關(guān)。 2.蛋白質(zhì):蛋白抗原成分極為復(fù)雜，引起自身免疫，參與黏附和侵入，對巨噬細(xì)胞內(nèi)的菌體起保護(hù)作用。 3.多糖：吸引中

28、性粒細(xì)胞，誘發(fā)遲發(fā)型超敏反應(yīng)。,（二）致病性與免疫性,結(jié)核桿菌主要通過呼吸道、消化道和受損的皮膚侵入機(jī)體，引起各組織、臟器的結(jié)核，其中以肺結(jié)核最多見，腹膜、淋巴結(jié)、皮膚、腎臟、腸、骨、關(guān)節(jié)等亦可發(fā)生。如果機(jī)體抵抗力較弱，則結(jié)核桿菌可血液、淋巴液擴(kuò)散，引起全身粟粒性結(jié)核。 人對結(jié)核桿菌的感染率很高，但發(fā)病率低，表明機(jī)體對其有較強(qiáng)的免疫力，該免疫以細(xì)胞免疫為主。初次感染時機(jī)體釋放出蛋白-類脂復(fù)合物激活T細(xì)胞，形成致敏的T細(xì)胞群，當(dāng)再次感染時致敏T細(xì)胞被激活，釋放一系列淋巴因子，使巨噬細(xì)胞聚集于病灶周圍，分泌水解酶，殺傷、消除病原菌。而機(jī)體是否已建立抗感染免疫可用結(jié)核菌素（OT）試驗。,1.方法：

29、取5U注射入前臂皮內(nèi)，2-3天后觀察結(jié)果。若注射局部紅腫硬結(jié)直徑大于0.5cm陽性，大于1.5cm為強(qiáng)陽性，小于0.5cm為陰性。 2.結(jié)果判斷： 陽性結(jié)果：表明機(jī)體已感染過結(jié)核桿菌或接種卡介苗（BCG）成功，對結(jié)核桿菌有免疫力。 強(qiáng)陽性結(jié)果：機(jī)體可能有活動性結(jié)核。 陰性結(jié)果：機(jī)體未感染過結(jié)核桿菌，無免疫力。 3.實際應(yīng)用：1）選擇卡介苗接種對象及接種后效果觀察； 2）在未接種卡介苗人群中作結(jié)核桿菌感染流行病學(xué)研究； 3）嬰幼兒結(jié)核病的輔助診斷。,結(jié)核菌素試驗,作業(yè),1、如何區(qū)分肺炎鏈球菌和甲型溶血性鏈球菌？ 2、患兒，女，6歲。因“畏寒發(fā)熱6天，全身出現(xiàn)多處膿腫3天”就診。該患兒從小體弱多病

30、，入院前10天左右，臉上張一小疹子，曾用手?jǐn)D壓。6天前，患兒出現(xiàn)畏寒、發(fā)熱，曾服用磺胺、氨芐西林等未見好轉(zhuǎn)。入院前3天，患兒頭、手臂、小腿不斷有膿腫出現(xiàn)。 體格檢查：急性病容，意識不清。頭皮、頸部、左上臂外側(cè)、右背下部、左小腿均可見直徑為3-4cm的包塊，有的已破潰，有的有波動感。 要求：設(shè)計實驗方案，得出明確診斷結(jié)果，并指導(dǎo)臨床用藥。,細(xì)菌感染所致疾病總結(jié),消化道感染細(xì)菌 化膿性細(xì)菌 呼吸道感染細(xì)菌,消化道感染細(xì)菌,腸桿菌科細(xì)菌 幽門螺桿菌 霍亂弧菌 副溶血性弧菌 彎曲菌屬,埃希菌屬 志賀菌屬 沙門菌屬 克雷伯菌屬 變形桿菌 摩根菌屬 枸櫞酸菌屬 腸桿菌屬 沙雷菌屬,在胃腸道中增殖引起以胃腸

31、道癥狀為主的疾病，食物中毒，以及腸道外感染。 傳播途徑： 糞口傳播,消化道感染細(xì)菌,1.形態(tài)與培養(yǎng),G-，無芽孢，大多有菌毛，需氧或兼性厭氧。,2.生化反應(yīng),活潑，分解多種糖類和蛋白質(zhì) 非致病菌能分解乳糖，而致病菌多不能分解 IMViC（吲哚、甲基紅、VP、枸櫞酸鹽）“+-”大腸桿菌,3.致病性,侵襲力菌毛、鞭毛、黏附素、脂多糖,內(nèi)毒素志賀菌、沙門氏菌、 外毒素腸毒素（大腸桿菌）霍亂毒素 志賀毒素（志賀菌）,毒素,4. 所致疾病,消化道感染細(xì)菌,腹瀉 腸外感染 胃腸炎（食物中毒） 沙門氏菌、幽門螺桿菌 敗血癥 胃癌 幽門螺桿菌,5. 微生物學(xué)檢查,收集標(biāo)本，直接鏡檢 分離培養(yǎng) 血清學(xué)診斷,案例

32、分析,案例分析 患者，男，16歲。因“發(fā)熱、腹痛。腹瀉、解膿便1天”就診。就診前一天，患者晚餐進(jìn)食鹵肉后，當(dāng)晚即感身體不適、頭痛、發(fā)熱、惡心、四肢無力。半夜有陣痛性腹痛，大便為黃色水樣，量多，其后每0.5-1h排便1次，便前有劇烈腹痛，最近幾次帶有膿血便，便后仍想解大便。 要求：從微生物學(xué)角度，應(yīng)該考慮采集哪些標(biāo)本進(jìn)行檢測？ 如何設(shè)計鑒定試驗？ 試分析引起該患者腹瀉的可能原因。,化膿性細(xì)菌,革蘭氏陽性菌：葡萄球菌屬、鏈球菌屬、腸球菌屬 革蘭氏陰性菌：奈瑟菌屬、莫拉菌屬、假單胞菌屬、埃希菌屬、變形桿菌屬、無芽孢厭氧菌,化膿性細(xì)菌葡萄球菌,1.生物學(xué)性狀,脂溶性色素：金黃色、白色、檸檬色,2.抵抗

33、力,四耐一敏感：耐干燥、耐熱、耐藥、耐鹽、對堿敏感,3.致病性,磷壁酸：黏附 莢膜：抗吞噬、產(chǎn)生毒素和酶類 凝固酶：有無致病性的重要標(biāo)志病灶局限性 葡萄球菌溶血素溶血 腸毒素嘔吐 表皮剝脫毒素燙傷樣皮膚綜合征 毒性休克綜合征毒素休克,4.所致疾病,化膿性細(xì)菌葡萄球菌,侵襲性疾病,皮膚發(fā)炎、化膿 內(nèi)臟肺炎 全身感染敗血癥,癰,麥粒腫,甲溝炎,毛囊炎,化膿性細(xì)菌葡萄球菌,4.所致疾病 毒素性疾病,食物中毒 假膜性腸炎 燙傷樣皮膚綜合征 毒性休克綜合征,假膜性腸炎,燙傷樣皮膚綜合征,化膿性細(xì)菌鏈球菌,1.生物學(xué)性狀,產(chǎn)生透明質(zhì)酸酶，血清肉湯培養(yǎng)易形成長鏈絮狀沉淀，不分解菊糖，不被膽汁溶解,甲型溶血性

34、鏈球菌（溶血）：不完全溶血（草綠色）條件致病菌 乙型溶血性鏈球菌（溶血）：完全溶血（透明）致病性較強(qiáng) 丙型鏈球菌（溶血）：不溶血（無色）不致病,3.致病性,菌體胞壁：黏附、定植、抗吞噬 鏈球菌溶血素：溶解紅細(xì)胞、破壞白細(xì)胞和血小板 致熱外毒素猩紅熱、毒性休克 侵襲性酶,化膿性細(xì)菌鏈球菌,透明質(zhì)酸酶易于擴(kuò)散 鏈激酶溶解血塊、阻止血漿凝固 鏈道酶使膿液變稀薄 膠原酶易于菌體擴(kuò)散,化膿性細(xì)菌鏈球菌,4.所致疾病,化膿性感染 猩紅熱 超敏反應(yīng)風(fēng)濕熱、急性腎小球腎炎 其他疾病菌血癥、齲齒、腦膜炎和肺炎（新生兒）,丹毒,猩紅熱,齲齒,1.生物學(xué)性狀 溶血 若孵育時間48h，產(chǎn)生自溶酶，菌體溶解 分解菊糖，

35、膽汁溶菌試驗陽性,化膿性細(xì)菌肺炎鏈球菌,接種小白鼠 （腹腔）,肺炎鏈球菌：24h內(nèi)死亡 甲型溶血性鏈球菌：不死亡,常用的細(xì)菌分離技術(shù),常見腸道感染細(xì)菌的分離與鑒定,糞便或肛門拭子,直接檢查,分離培養(yǎng),涂片 革蘭氏染色 油鏡觀察,懸滴 高倍鏡觀察,形態(tài)、染色性,動力,腸桿菌科,特殊細(xì)菌,選擇鑒別瓊脂平板,適當(dāng)培養(yǎng)基,生化反應(yīng),分離鑒定,實驗一、食品的細(xì)菌學(xué)檢測,一、目的和要求： 1、掌握食品微生物檢驗中細(xì)菌總數(shù)檢測的基本操作技術(shù)； 2、熟悉不同食品中細(xì)菌的分離和鑒定方法； 3、了解菌落總數(shù)測定的意義。 二、實驗材料： 飲料：乳飲料、可樂 、牛奶、酸奶 食物：涼菜類、鹵菜、冰激凌、罐頭 水源：自來

36、水、生活用水、河道水,待檢食品,直接鏡檢,分離培養(yǎng),樣品預(yù)處理,涂布瓊脂平板,37 培養(yǎng),菌落計數(shù),樣品預(yù)處理,低速離心去除殘渣,離心富集菌落,直接涂布平板,選擇鑒別瓊脂平板,EMB平板,中國藍(lán)瓊脂平板,SS瓊脂平板,選擇鑒別瓊脂平板,膿汁、痰液、肚灶分泌物,直接涂片鏡檢：革蘭氏染色，鏡檢（形態(tài)、排列、染色性）,血瓊脂平板 （37 18-24h）,觀察生長情況（菌落特征、溶血性、色素等）,挑選可疑菌落,涂片染色鏡檢,生化反應(yīng),致病性測定,血清學(xué)鑒定,藥物敏感試驗,血液 腦脊液 穿刺液,肉湯增菌培養(yǎng),培養(yǎng)生長后直接涂片、染色、鏡檢,常見化膿性球菌的分離鑒定程序,常用尿液標(biāo)本細(xì)菌計數(shù)法,1、直接計

37、數(shù)法：取中段尿液一滴于載玻片上，蓋上蓋玻片，相差顯微鏡觀察。 G- 菌數(shù)/視野100個，尿液中細(xì)菌數(shù)為1010 感染菌 菌數(shù)/視野10個，尿液中細(xì)菌數(shù)為108 感染菌 菌數(shù)/視野1個，尿液中細(xì)菌數(shù)為107 污染菌 2、定量計數(shù)法：定量接種環(huán)或1:100稀釋的尿液0.1ml，在血瓊脂平板上連續(xù)劃線接種，置37培養(yǎng)18-24h，計數(shù)平板上的菌落 3、傾注培養(yǎng)法 ：1:100稀釋尿液1ml加入無菌平皿內(nèi)，倒入50 的普通瓊脂培養(yǎng)基，立即混勻，凝固后置37培養(yǎng)18-24h，計數(shù)平板上的菌落，乘以100，即得每毫升尿液的細(xì)菌數(shù)。,生物安全等級,生物安全等級,BSL1, P1, 安全一級（輕度傳染?。?肺炎球菌，沙門氏菌屬 進(jìn)行試驗研究用的物質(zhì)都是已知的，所有特性都已清楚并且已證明不會導(dǎo)致疾病的多種微生物物質(zhì)。