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文檔簡介
1、/淋巴瘤免疫分型,1,學(xué)習(xí)交流PPT,應(yīng)用目的: 確定淋巴系病變的起源和分化程度; 鑒別反應(yīng)性與克隆性淋巴細(xì)胞增生性疾??; 確定髓系白血病各亞型; 對形態(tài)學(xué)分類不明細(xì)胞進(jìn)行定性; 診斷急性未分化型白血?。?診斷急性混合細(xì)胞白血??; 診斷微小殘留白血病或白血病浸潤; 判斷白血病/淋巴瘤預(yù)后。,2,學(xué)習(xí)交流PPT,流式細(xì)胞術(shù)(Flow Cytometry): 對高速流過檢測區(qū)的單個(gè)細(xì)胞或生物顆粒進(jìn)行多參數(shù)、快速分析(或分選)的一種技術(shù)。,3,學(xué)習(xí)交流PPT,4,學(xué)習(xí)交流PPT,數(shù)據(jù)顯示方式: 單參數(shù)直方圖 雙參數(shù)二維點(diǎn)圖 等高圖 二維密度圖 三維圖,5,學(xué)習(xí)交流PPT,單參數(shù)直方圖,雙參數(shù)點(diǎn)圖,6
2、,學(xué)習(xí)交流PPT,熒光素,FITC(異硫氰酸熒光素):530nm(綠) PE(藻紅蛋白):575nm(橙黃) PI(碘化丙啶): 620nm(橙紅) PerCP(多甲藻黃素葉綠素蛋白):675nm(深紅) APC(別藻蘭蛋白): 660nm(紅),7,學(xué)習(xí)交流PPT,檢測物: 細(xì)胞表面、胞漿或胞核抗原性物質(zhì),8,學(xué)習(xí)交流PPT,CD(cluster of differentiation):1982年起將識別同一分化抗原的來自不同實(shí)驗(yàn)室的單克隆抗體歸為一個(gè)分化群,并進(jìn)行流水編號。一個(gè)CD相關(guān)抗體可包含多個(gè)克隆號。 其他非CD系列抗原:如TCR、HLA等,9,學(xué)習(xí)交流PPT,正常血細(xì)胞中的抗原表達(dá)
3、特點(diǎn),1. 系列保守性 2. 時(shí)序性 3. 抗原表達(dá)量的模式化,10,學(xué)習(xí)交流PPT,干細(xì)胞,嗜堿性細(xì)胞,嗜酸性細(xì)胞,定向髓系干細(xì)胞,紅系,巨核系,粒單核系,粒系,單核系,CD36 CD71 CD235a,CD41 CD42a/b CD61,CD4 CD11b CD14 CD64 HLA-DR CD36,CD15 CD71 CD16,(TDT CD7) CD34 CD117 CD13 CD33 CD38 MPO,CD34 CD13 CD33 CD117 MPO,11,學(xué)習(xí)交流PPT,抗原刺激,干細(xì)胞,早前B,前B,靜止期B,Pro-B ALL,Pre-B ALL,Common-B ALL,CL
4、L/SLL,免疫母細(xì)胞,漿細(xì)胞樣淋巴細(xì)胞,大B細(xì)胞淋巴瘤,淋巴漿細(xì)胞淋巴瘤,外套細(xì)胞,濾泡區(qū)母細(xì)胞,中心母細(xì)胞,中心細(xì)胞,邊緣帶細(xì)胞,漿細(xì)胞,套細(xì)胞淋巴瘤,伯基特淋巴瘤,大B細(xì)胞淋巴瘤,濾泡淋巴瘤,邊緣帶淋巴瘤,骨髓瘤,TDT+ CD34+ cCD79a+CD19+ CD10 c-,TDT+ CD34+ cCD79a+ CD19+ CD20 CD10+ c-,TDT+ CD34 cCD79a+CD19+ CD20+ CD10 c+,CD5+ CD19+ CD20 CD22+ CD23 + sIg+ FMC7-,CD38 CD138 CD56 cIg CD19- CD45-,CD22+ CD5-
5、CD10- CD23-,CD22+ CD10+ FMC7+ CD23 bcl-2+ CD5-,CD19+ CD20+ CD22+ CD38+ IgM+ sIg+,CD22+ CD10+ sIg+ CD34-TDT-,CD5+ CD22+ sIg+ FMC7+ Cyclin D1+ CD23-,CD22+ bcl-6+ CD10 CD5 CD30 ,12,學(xué)習(xí)交流PPT,干細(xì)胞,胸腺期,胸腺期,TDT+ CD34+ CD2 cCD3 CD7 CD71,TDT+ CD34 CD1a CD2 cCD3 CD7 CD4 CD8,胸腺期,TDT+ CD2 CD3 CD5 CD7 CD4/CD8 TCR,
6、Precursor-T ALL,成熟T細(xì)胞各分化群,13,學(xué)習(xí)交流PPT,造血細(xì)胞在其分化、發(fā)育過程中,細(xì)胞膜、細(xì)胞漿或胞核抗原的有無、表達(dá)強(qiáng)弱與血細(xì)胞的分化發(fā)育階段密切相關(guān),表現(xiàn)出與細(xì)胞系列及其分化程度相關(guān)的特性。,14,學(xué)習(xí)交流PPT,白血病細(xì)胞中的抗原表達(dá)特點(diǎn),表達(dá)模式基本與相應(yīng)階段正常細(xì)胞相似,還具有以下特點(diǎn): 1. 跨系表達(dá) 2. 時(shí)相混亂 3. 抗原表達(dá)量的改變,15,學(xué)習(xí)交流PPT,免疫分型四種急性白血病,單表型急性白血病 表達(dá)某一個(gè)系列抗原為主的急性白血病 雙表型/雙克隆急性白血病 未分化型急性白血病,16,學(xué)習(xí)交流PPT,各系急性白血病重要抗原指標(biāo),1. 急性淋巴細(xì)胞白血病
7、(AL) 敏感性 特異性 B-ALL: CD19 100% 非特異 cCD79a 99% 特異 T-ALL: CD7 100% 非特異 cCD3 100% 特異,17,學(xué)習(xí)交流PPT,2. 急性髓細(xì)胞白血病 (AML) 表達(dá)率 特異性 CD13 70% 非特異 CD33 70% 非特異 CD117 70% 特異 cMPO 70% 特異,18,學(xué)習(xí)交流PPT,錯(cuò)譯表達(dá)(Ly+AML ,My+ALL ): 白血病細(xì)胞表達(dá)非本系細(xì)胞抗原標(biāo)志物,具有預(yù)后意義。,19,學(xué)習(xí)交流PPT,ALL CD13, CD33t(9;22) AML CD2+, DR-M3 t(15;17),或RAR+,t(11;17
8、) CD2+, DR+M4Eo inv(16)或 t(16;16) CD19+M0t(9:22)多見 M2t(8;21) TdT+, CD7+見于M0 CD56+ M5/M4,20,學(xué)習(xí)交流PPT,雙表型急性白血病記分系統(tǒng),分值 B系 T系 髓系 2 cCD79a cCD3 cMPO CD22 TCR cIgM TCR 1 CD19 CD2 CD117 CD10 CD5 CD13 CD20 CD8 CD33 0.5 TdT TdT CD14 CD24 CD7 CD15 CD64,21,學(xué)習(xí)交流PPT,部分慢性B淋巴細(xì)胞增殖性疾病的免疫表型,注:HCL CD103+ CD25+,22,學(xué)習(xí)交流P
9、PT,部分慢性T淋巴細(xì)胞增殖性疾病的免疫表型,肝脾T細(xì)胞淋巴瘤:CD2+ CD3+ CD7+ TCR+ CD16+/- CD56+/- CD8-/+ CD4- TCR-,23,學(xué)習(xí)交流PPT,標(biāo)本種類:懷疑含有病變細(xì)胞的組織或體液,如外周血、骨髓、胸腹水、腦脊液、淋巴結(jié)等。 標(biāo)本要求:細(xì)胞有活性,最好不要超過48h。,24,學(xué)習(xí)交流PPT,光散射特征與細(xì)胞形態(tài)的關(guān)系,25,學(xué)習(xí)交流PPT,淋巴,單核,粒細(xì)胞,CD45,CD45,M4/M5,M 3,正常,白血病,L13, M02 M6, M7,T,SSC,SSC,MM 非造血 來源細(xì)胞,CD45在免疫分型中的應(yīng)用意義,原始,嗜堿,嗜酸,26,學(xué)習(xí)交流PPT,正常骨髓,27,學(xué)習(xí)交流PPT,AML-M1,AML-M2,AML-M3,AML-M4/M5,28,學(xué)習(xí)交流PPT
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