基因工程的工具——酶與載體.ppt

1、基因工程的工具,學(xué)習(xí)目標(biāo)： 1.能說出基因工程的概念 2、舉例說出基因工程的工具,基因工程的概念：,DNA重組技術(shù),生物體外,基因,DNA分子水平,剪切, 拼接, 導(dǎo)入, 表達(dá),基因工程培育抗蟲棉的簡要過程：,普通棉花(無抗蟲特性),蘇云金芽孢桿菌,提取,抗蟲基因,加以修飾改造,棉花細(xì)胞(含抗蟲基因),棉花植株(有抗蟲特性),提取,導(dǎo)入,加以修飾改造,導(dǎo)入,培育抗蟲棉的過程中需要哪些工具呢？,T,T,G,G,T,C,1.,2.,T,磷酸二酯鍵,A,一、限制性核酸內(nèi)切酶,1.來源： 2.特點(diǎn)： 3.結(jié)果：,微生物(例：大腸桿菌）,（1）識(shí)別特定的脫氧核苷酸序列 （2）在特定的位點(diǎn)切割磷酸二酯鍵。

2、,能被限制性內(nèi)切酶特異性識(shí)別的切割部位一般具有回文序列： 在切割部位，一條鏈正向讀的堿基順序與另一條鏈反向讀的順序完全一致,2. 作用特點(diǎn)斷開特定部位的磷酸二酯鍵,限制酶的識(shí)別序列,回文序列,限制性核酸內(nèi)切酶作用過程,二.DNA連接酶,1.連接酶的作用：,2.連接的部位：,將互補(bǔ)配對的兩個(gè)黏性末端連接起來，使之成為一個(gè)完整的DNA分子。,磷酸二酯鍵，不是氫鍵。,DNA連接酶的作用過程,【學(xué)以致用】 1、下列黏性末端屬于同一種限制性核酸內(nèi)切酶切割 而成的是 ( ) A. B. C. D.,B,三.基因工程的載體質(zhì)粒 具備的條件,復(fù)制區(qū),即含復(fù)制原點(diǎn)。 含標(biāo)記基因,主要是抗性基因. 目的基因插入位

3、點(diǎn),即限制性核酸內(nèi)切酶切割 位點(diǎn).,常用的載體：質(zhì)粒,能復(fù)制并帶著插入的目的基因一起復(fù)制,有切割位點(diǎn),有標(biāo)記基因的存在，可用含氨芐青霉素的培養(yǎng)基鑒別,課堂練習(xí) 1.質(zhì)粒是基因工程最常用的載體,有關(guān)質(zhì)粒的 說法正確的是 ( ) A.質(zhì)粒不僅存在于細(xì)菌中,某些病毒也具有 B.細(xì)菌的基因只存在于質(zhì)粒上 C.質(zhì)粒為小型環(huán)狀DNA分子,存在于擬核外的細(xì)胞溶膠中 D.質(zhì)粒是基因工程中的重要工具酶之一,C,C,3、思考題 基因工程中,需使用特定的限制性核酸內(nèi)切酶切割目的基因 和質(zhì)粒,便于重組和篩選。已知限制性核酸內(nèi)切酶的識(shí)別 序列和切點(diǎn)是GGATCC，限制性核酸內(nèi)切酶性內(nèi)切酶 的識(shí)別序列和切點(diǎn)是GATC。根據(jù)圖示判斷下列操作正 確的是 ( ) A.目的基因和質(zhì)粒均用限制性核酸內(nèi)切酶切割 B.目的基因和質(zhì)粒均用限制性核酸內(nèi)切酶切割 C.質(zhì)粒用限制性核酸內(nèi)切酶切割,目的