臨床微生物標(biāo)本的正確采集及運(yùn)送參考幻燈片.ppt

1、,臨床微生物標(biāo)本的正確采集及運(yùn)送,1,2,一、臨床微生物標(biāo)本正確采集的重要意義 二、各種類型標(biāo)本的正確采集和送撿,主要內(nèi)容,標(biāo)本質(zhì)量的好壞直接影響診斷結(jié)果的正誤，不當(dāng)標(biāo)本可導(dǎo)致假陰性、假陽(yáng)性結(jié)果的出現(xiàn)。因此正確采集和運(yùn)送微生物標(biāo)本，直接影響到微生物培養(yǎng)鑒定結(jié)果?？煽康臋z驗(yàn)結(jié)果可以指導(dǎo)臨床診斷治療，為臨床科學(xué)用藥和成功的感染控制提供依據(jù)，是正確、合理使用抗菌藥物，延緩細(xì)菌耐藥，減少抗菌藥物濫用和監(jiān)測(cè)醫(yī)院感染的第一步，也是最重要的一步。為此應(yīng)正確采集各種細(xì)菌學(xué)標(biāo)本。,臨床微生物標(biāo)本正確采集和運(yùn)送的重要意義,3,血液標(biāo)本的采集與運(yùn)送,4,1、血液培養(yǎng)的送檢指征 發(fā)熱（38 ）或低溫（36 ） 寒戰(zhàn)白

2、細(xì)胞增多（10 109/L,特別是有“核左移”）粒細(xì)胞減少（1 109/L ）血小板減少 皮膚、黏膜出血 昏迷 多器官衰竭 血壓降低 呼吸加快以及肝脾腫大；關(guān)節(jié)疼痛；C反應(yīng)蛋白和降鈣素原升高等 患者出現(xiàn)以上一種或同時(shí)具備幾種臨床表現(xiàn)時(shí)可作為血培養(yǎng)的重要指征,血液標(biāo)本的采集與運(yùn)送,5,2、血培養(yǎng)標(biāo)本的采集時(shí)間 盡可能在患者寒戰(zhàn)或開(kāi)始發(fā)熱時(shí)采血 在患者接受抗生素治療前采血 如患者已經(jīng)使用抗生素進(jìn)行治療，應(yīng)在下一次用藥前采血,血液標(biāo)本的采集與運(yùn)送,6,3、血培養(yǎng)標(biāo)本的采集 皮膚消毒程序：嚴(yán)格執(zhí)行以下3步法：75%酒精擦拭靜脈穿刺部位待30s以上，再用1%-2%碘酊作用30s或10%碘伏作用90s以上

3、，從穿刺點(diǎn)向外畫(huà)圈消毒，至消毒區(qū)域直徑3cm以上；最后用75%酒精脫碘。如對(duì)碘過(guò)敏的患者，可用75%酒精消毒60s，待酒精揮發(fā)干燥后采血。 注意：不允許在消毒后按壓靜脈，除非戴有無(wú)菌手套,血液標(biāo)本的采集與運(yùn)送,7, 血培養(yǎng)瓶消毒程序：用75%酒精擦拭血培養(yǎng)瓶橡皮塞，作用60s；用無(wú)菌紗布或無(wú)菌棉簽清除橡皮塞子表面殘余酒精，然后注入血液。注入血液后，應(yīng)輕輕顛倒混勻防止血液凝固。,血液標(biāo)本的采集與運(yùn)送,8,4、血培養(yǎng)采血量 由于每毫升血量中含菌量很小，血培養(yǎng)的陽(yáng)性率直接與血樣本容量有關(guān)，據(jù)報(bào)道每增加1ml血樣本可使血培養(yǎng)陽(yáng)性率上升3%，所以采血量要足夠。 通常采血量與培養(yǎng)基之比以1:51:10為宜

4、，成人一次采血1020ml平均注入兩個(gè)血培養(yǎng)（需氧、厭氧瓶）中，嬰幼兒采血量為全血量的1%（12ml），兒童采血量35ml。 當(dāng)發(fā)生菌血癥時(shí)，通常成人血液中含有的菌量小于1CFU/ml,而兒童血液中含有的菌量常超過(guò)100CFU/ml，所以嬰幼兒、兒童采血量少于5ml時(shí)，不會(huì)影響培養(yǎng)的陽(yáng)性率。,血液標(biāo)本的采集與運(yùn)送,9,5、血培養(yǎng)采集的次數(shù) 對(duì)懷疑菌血癥、真菌血癥的成人患者，推薦同時(shí)或短時(shí)間間隔（10分鐘內(nèi)）從不同部位（如雙臂）采集2套血培養(yǎng)標(biāo)本，做到“雙瓶雙側(cè)”。如有必要，可同時(shí)或短時(shí)間間隔內(nèi)從下肢靜脈采血接種第3套培養(yǎng)瓶。在采集血培養(yǎng)后的2-5天內(nèi)，不需要重復(fù)采集血培養(yǎng)。當(dāng)采血量不能滿足推薦

5、的采血量時(shí)，應(yīng)首先接種需氧瓶。 嬰幼兒患者，需要同時(shí)采集2次（不同部位）血培養(yǎng)標(biāo)本。,血液標(biāo)本的采集與運(yùn)送,10,有研究表明，只做1套血培養(yǎng)，病原菌的檢出率僅為65%；2套血培養(yǎng)為80%；3套血培養(yǎng)為96%。對(duì)于成年患者的血培養(yǎng)，只采集單瓶是不允許的，因?yàn)閱纹康呐囵B(yǎng)結(jié)果很難解釋是致病菌還是污染菌。,血液標(biāo)本的采集與運(yùn)送,11,6、血培養(yǎng)標(biāo)本的運(yùn)送 血培養(yǎng)采集后應(yīng)立即送到微生物室（常規(guī)運(yùn)送時(shí)間少于2h） 如果不能立即送到微生物室，需室溫保存或置于35 -37 孵箱中，切勿冷藏（因?yàn)橛行┛琉B(yǎng)菌遇冷很容易死亡）。,血液標(biāo)本的采集與運(yùn)送,12,痰液標(biāo)本的采集與運(yùn)送,13,1、痰標(biāo)本的采集時(shí)間及頻率 在

6、抗生素應(yīng)用前采集；最好在清晨采集；多數(shù)患者在清晨痰較多，且含菌量也多，即使對(duì)痰量少的患者，也以清晨最為容易；對(duì)于細(xì)菌性肺炎，痰標(biāo)本送檢每天1次，連續(xù)2-3天；不建議24h內(nèi)多次采集，除非痰液外觀形狀出現(xiàn)改變；懷疑分枝桿菌感染者，應(yīng)連續(xù)收集3天清晨痰液送檢。采集痰標(biāo)本前應(yīng)先進(jìn)行口腔清潔。因?yàn)楸旧砣梭w口腔內(nèi)含有很多微生物，致使痰液咳出時(shí)易受到污染。,痰標(biāo)本的采集與運(yùn)送,14,2、痰標(biāo)本的采集方法 自然咳痰法：留取前刷牙，用清水漱口3次（或硼酸漱口），以除去口腔內(nèi)大部分雜菌，之后用力咳出呼吸道深部的痰液吐至無(wú)菌的廣口瓶?jī)?nèi)，蓋好蓋子。患者痰液較深不易咳出時(shí)，可在咳痰前捶背、協(xié)助排痰。采集痰量不能少于1

7、ml。,痰標(biāo)本的采集與運(yùn)送,15,下呼吸道肺泡灌洗，支氣管刷洗，氣管抽吸：將抽吸物或灌洗液直接放入痰杯內(nèi)，刷出物放入1ml無(wú)菌生理鹽水的痰杯中。 誘導(dǎo)咳痰：刷完牙齦和舌頭后讓患者用水漱口，借助霧化器使患者吸入約25ml 3-5%的無(wú)菌鹽水誘導(dǎo)咳痰。,痰標(biāo)本的采集與運(yùn)送,16,3、痰標(biāo)本的運(yùn)送 標(biāo)本采集后需盡快（2h）送至微生物室，不及時(shí)運(yùn)送可導(dǎo)致肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌等苛養(yǎng)菌由于不適應(yīng)外界環(huán)境和自溶現(xiàn)象而死亡。 如不能及時(shí)送達(dá)，應(yīng)將標(biāo)本置于4 冰箱保存，以免雜菌生長(zhǎng)，但不超過(guò)24h。,痰標(biāo)本的采集與運(yùn)送,17,鼻咽拭子標(biāo)本采集及運(yùn)送,18,鼻咽拭子標(biāo)本采集 采集標(biāo)本時(shí)患者先用清水漱口，由檢查

8、者將舌向外拉，使腭垂盡可能向外牽引，用無(wú)菌鼻咽拭子由口腔進(jìn)入，越過(guò)舌根到咽后壁或腭垂的后側(cè)采集鼻咽紅腫處，取材后小心退出，立即放入無(wú)菌試管內(nèi)，避免觸及舌、口腔黏膜和唾液，以防污染。,鼻咽拭子標(biāo)本采集,19,化膿和創(chuàng)傷標(biāo)本的采集與運(yùn)送,20,采集方法 未破裂膿腫：在采集標(biāo)本前，對(duì)患者病灶局部的皮膚或黏膜表面，用2.5%3%碘酊消毒、75%酒精脫碘，用無(wú)菌注射器將膿腫內(nèi)容物吸出,然后切開(kāi)膿腫、引流，采集的膿液（1ml）,并取部分膿腫壁置于厭氧運(yùn)送裝置或接種于厭氧培養(yǎng)基中立刻送檢。注意不主張用拭子采集標(biāo)本。,化膿和創(chuàng)傷標(biāo)本的采集與運(yùn)送,21,開(kāi)放性病灶和膿腫：首先用無(wú)菌生理鹽水清洗病灶表面的污染雜菌

9、，用無(wú)菌棉拭子先蘸少許生理鹽水，以保持標(biāo)本的濕度，然后采取膿液及病灶深部的分泌物（最好從膿腫底部或膿腫壁取樣）后置于無(wú)菌的容器中送檢。最好采集2個(gè)拭子，其中一個(gè)用于細(xì)菌培養(yǎng)，另一個(gè)用于涂片革蘭染色。,化膿和創(chuàng)傷標(biāo)本的采集與運(yùn)送,22,膿皰或水皰：用酒精消毒使之干燥，對(duì)于患兒用23號(hào)針頭挑破膿皰，拭子采集膿皰液和基底部標(biāo)本。,化膿和創(chuàng)傷標(biāo)本的采集與運(yùn)送,23,膿腫標(biāo)本采集及運(yùn)送過(guò)程中的注意事項(xiàng) 應(yīng)盡可能在使用抗生素前采集標(biāo)本，若患者在采集標(biāo)本前已用抗生素，應(yīng)在檢驗(yàn)申請(qǐng)單上注明應(yīng)用的抗生素，并在下次用抗生素前采集；在采集標(biāo)本時(shí)，應(yīng)注意無(wú)菌操作，以防帶入與感染無(wú)關(guān)的皮膚定植菌；采集標(biāo)本時(shí)應(yīng)注意標(biāo)本的

10、性狀、色澤及氣味，為分離鑒定致病菌提供依據(jù)；標(biāo)本采集后應(yīng)在室溫2h內(nèi)送檢，若不能及時(shí)送檢，可保存在4 冰箱中，但不應(yīng)超過(guò)24h。,化膿和創(chuàng)傷標(biāo)本的采集與運(yùn)送,24,尿液標(biāo)本的采集與運(yùn)送,25,1、尿液培養(yǎng)的送檢指征 有典型的尿路感染癥狀：如尿急、尿頻、尿痛 肉眼膿尿或血尿 尿常規(guī)檢查表現(xiàn)為白細(xì)胞或亞硝酸鹽陽(yáng)性 不明原因的發(fā)熱，無(wú)其它局部癥狀 留置導(dǎo)尿管的患者出現(xiàn)發(fā)熱 膀胱排空功能受損 尿道口有膿性分泌物 泌尿系統(tǒng)疾病手術(shù)前,尿液標(biāo)本的采集與運(yùn)送,26,2、尿標(biāo)本采集方法：盡量取早晨第一次尿液 清潔中段尿采集法 女性：采集前先用肥皂水或0.1%高錳酸鉀溶液沖洗外陰部及尿道口，用滅菌紗布擦拭，用手

11、指將陰唇分開(kāi)排尿，留取中段尿送檢 男性：用肥皂水翻轉(zhuǎn)包皮沖洗，用0.1%新潔爾滅消毒尿道口，用滅菌紗布擦拭，取中段尿送檢,尿液標(biāo)本的采集與運(yùn)送,27,導(dǎo)尿法 直接導(dǎo)尿：將會(huì)陰局部清洗后，用導(dǎo)尿管直接經(jīng)尿道插入膀胱，獲取膀胱尿液。但有可能將下尿道細(xì)菌引入膀胱，導(dǎo)致繼發(fā)感染，一般不提倡用。 留置導(dǎo)尿：通過(guò)專門的采樣端口采集，不能把導(dǎo)尿管與尿袋拔開(kāi)后收集尿液。采樣端口用酒精消毒；必要時(shí)可先夾住導(dǎo)尿管但不能超過(guò)30分鐘；將注射器針頭插入采樣端口，抽吸出尿液。 注意：不能從集尿袋的下端管口留取標(biāo)本，集尿袋內(nèi)的尿液也不能用于培養(yǎng)。,尿液標(biāo)本的采集與運(yùn)送,28,膀胱穿刺采集法 采用恥骨上膀胱穿刺取尿。這種方

12、法是評(píng)估膀胱內(nèi)細(xì)菌感染的“金標(biāo)準(zhǔn)”方法。因有一定的痛苦，患者難以接受。,尿液標(biāo)本的采集與運(yùn)送,29,3、尿液標(biāo)本運(yùn)送 收集中段尿510ml，及時(shí)送檢 室溫保存下不得超過(guò)2h，否則應(yīng)置于4 冷藏保存時(shí)間不得超過(guò)8h。,尿液標(biāo)本的采集與運(yùn)送,30,女性生殖道標(biāo)本采集,31,陰道及宮頸分泌物采集 宮腔內(nèi)標(biāo)本采集 羊膜腔感染時(shí)可經(jīng)腹壁羊膜穿刺抽取羊水或經(jīng)子宮頸插管抽取羊水進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)。但經(jīng)子宮頸插管抽取羊水進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)易受陰道或子宮頸部位細(xì)菌污染，臨床應(yīng)用價(jià)值有限。 懷疑有急性宮腔內(nèi)感染時(shí)，原則上不采取宮腔分泌物，以免引起感染播散；必要時(shí)用滅菌導(dǎo)管抽取，導(dǎo)管外套一層保護(hù)膜，經(jīng)子宮頸插入宮腔后再刺穿保護(hù)

13、膜抽取分泌物。,女性生殖道標(biāo)本采集,32,穿刺液標(biāo)本的采集及運(yùn)送,33,1、標(biāo)本采集 由臨床醫(yī)生采集（無(wú)菌操作穿刺抽取標(biāo)本或外科手術(shù)采集標(biāo)本） 膽汁采集分三種方法：十二指腸引流法（以B膽汁來(lái)自膽囊，做細(xì)菌培養(yǎng)意義較大）。膽囊穿刺法 手術(shù)采取法。取標(biāo)本約2ml裝入無(wú)菌密封容器送檢。 其它穿刺液的采集：由臨床醫(yī)生采集標(biāo)本510ml注入無(wú)菌密封容器內(nèi)送檢（為防止凝固，可先加入滅菌肝素），也可將標(biāo)本直接加入血培養(yǎng)瓶中送檢。心包液、關(guān)節(jié)液、鞘膜積液采樣量為15ml。,穿刺液標(biāo)本的采集及運(yùn)送,34,2、標(biāo)本運(yùn)送 采集后應(yīng)正確蓋好，防止泄露或容器外部留有殘留物。 標(biāo)本應(yīng)在15min內(nèi)送檢。若不能及時(shí)送檢室溫保存不超過(guò)24h。,穿刺液標(biāo)本的采集及運(yùn)送,35,糞便標(biāo)本的采集與運(yùn)送,36,1、采集指征： 當(dāng)腹瀉患者出現(xiàn)以下任何一種情況時(shí)建議采集糞便標(biāo)本，進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)： 糞便涂片鏡檢白細(xì)胞 5 /HP 體溫38.5 重癥腹瀉 血便或便中有膿液 未經(jīng)抗菌藥物治療的持續(xù)性腹瀉病人 來(lái)自腸道傳染疫區(qū)的患者,糞便標(biāo)本的采集與運(yùn)送,37,2、糞便標(biāo)本的采集方法 自然排便采集標(biāo)本時(shí)，取有膿液、粘液、組織碎片部分的糞便 1-3克（花生米大?。?液體糞便取絮狀物，一般取