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1、,1、什么是克隆? 2、為什么克隆羊“多莉”如此轟動(dòng)?,瑞安十中 陳承君,生殖,有性生殖:經(jīng)過(guò)兩性生殖細(xì)胞的結(jié)合,由合 子發(fā)育成新個(gè)體。 如卵式生殖等 意義,無(wú)性生殖:不經(jīng)過(guò)兩性生殖細(xì)胞的結(jié)合,由母體 直接發(fā)育成新個(gè)體。如分裂生殖等 意義,第二章 克隆技術(shù),2.1 什么是克隆,一、克隆 1、克?。簜€(gè)體通過(guò)無(wú)性繁殖可連續(xù)傳代并形成群體,這樣的群體稱為無(wú)性繁殖系。克?。╟lone)就指無(wú)性繁殖系??寺”举|(zhì)即無(wú)性繁殖。 2、克隆概念的發(fā)展(三個(gè)水平) 基因克隆(分子水平) 細(xì)胞克?。?xì)胞水平) 個(gè)體克隆(植物克隆和動(dòng)物克?。?克隆概念在生命科學(xué)之外領(lǐng)域運(yùn)用,關(guān)鍵技術(shù),單克隆抗體制備過(guò)程,細(xì)胞融合、篩

2、選,足夠數(shù)量的、能產(chǎn)生特定抗體的細(xì)胞群,單克隆抗體,無(wú)性生殖,植物克隆,中國(guó)首例異體克隆動(dòng)物克隆北山羊,綿羊“多利”問(wèn)世(圖1),世界首例胚胎克隆波爾山羊津生,從理論上說(shuō),細(xì)胞核具有基因組全套遺傳信息,生物的體細(xì)胞有潛力發(fā)育成胚胎和形成與核供體完全相同的克隆個(gè)體。,小結(jié):克隆的定義,二、克隆技術(shù)的發(fā)展,1、微生物克隆(細(xì)胞克?。?2、遺傳工程克隆 DNA克隆 3、個(gè)體水平克隆,早在本世紀(jì)50年代,美國(guó)的科學(xué)家以兩棲動(dòng)物和魚(yú)類作研究對(duì)象,首創(chuàng)了細(xì)胞核移植技術(shù),他們研究細(xì)胞發(fā)育分化的潛能問(wèn)題,細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核的相互作用問(wèn)題。英國(guó)牛津大學(xué)的科學(xué)家在1960年和1962年,先后用非洲一種有爪的蟾蜍(非洲

3、爪蟾)進(jìn)行過(guò)克隆試驗(yàn)。試驗(yàn)方式是光用紫外線照射爪蟾卵細(xì)胞,破壞其中的核,然后依靠高超的外科手術(shù)從爪蟾蝌蚪的腸上皮細(xì)胞、肝細(xì)胞、腎細(xì)胞中取出核,并把這些細(xì)胞的核精確地放進(jìn)已被紫外線破壞了細(xì)胞核的卵細(xì)胞內(nèi),經(jīng)過(guò)精心照料,這些換核卵中終于有一部分長(zhǎng)出了活蹦亂跳的爪蟾,這種爪蟾不是經(jīng)過(guò)精細(xì)胞和卵細(xì)胞州結(jié)合產(chǎn)生的,所以是克隆爪蟾。,1986年英國(guó)科學(xué)家魏拉德森首次把胚胎細(xì)胞利用細(xì)胞核移植法克隆出一只羊,以后又有人相繼克隆出牛、羊、鼠、兔、猴等動(dòng)物。而美國(guó)最近克隆猴取得成功,日本科學(xué)家也聲稱他們繁殖出200多頭克隆牛。以上所述的克隆動(dòng)物,都是用胚胎細(xì)胞作為供體細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞核移植而獲得成功的。目前,克隆技術(shù)

4、在英國(guó)又有了新的進(jìn)展,他們把這一技術(shù)應(yīng)用于人類造血事業(yè)。英國(guó)的PPL公司是克隆技術(shù)的經(jīng)濟(jì)后臺(tái),它的主管羅思詹姆斯博士說(shuō):從研究多利中我們知道,我們可以用一個(gè)細(xì)胞制要的組成部分,也就是血漿。他們與羅斯林研究所合作研究一種帶有人類基因的牛和羊。他們先把動(dòng)物體內(nèi)的血漿取出,再取代人類的血漿,這種改變了基因的牛和羊體內(nèi)就含有人類血漿的重要成分,通過(guò)對(duì)這些動(dòng)物的飼養(yǎng)、再克隆或繁殖,就可以得到穩(wěn)定可靠而且相對(duì)便宜的血資源,據(jù)統(tǒng)計(jì)在英國(guó)每年價(jià)值可達(dá)150萬(wàn)英鎊??芍^效益匪淺。,我國(guó)的克隆技術(shù)也毫不遜色。60年代,生物學(xué)家童第周對(duì)金魚(yú)、鯽魚(yú)進(jìn)行細(xì)胞核移植,1978年又成功地進(jìn)行了黑斑蛙的克隆試驗(yàn),他將黑斑蛙的

5、紅細(xì)胞的核移入事先除去了核的黑斑蛙卵中,這種換核卵最后長(zhǎng)成能在水中自由游泳的蝌蚪。1979年春,中國(guó)科學(xué)院武漢水生生物研究所的科學(xué)家用鯽魚(yú)囊胚期的細(xì)胞進(jìn)行人工培養(yǎng),經(jīng)過(guò)385天59代連續(xù)傳代培養(yǎng)后,用直徑10微米左右的玻璃管在顯微鏡下從培養(yǎng)細(xì)胞中吸出細(xì)胞核,在此同時(shí),除去鯽魚(yú)卵細(xì)胞的核,讓卵細(xì)胞留出空間作好接納囊胚細(xì)胞核的準(zhǔn)備,一切準(zhǔn)備就緒后,把玻璃管吸出的核移放到空出位置的鯽魚(yú)卵細(xì)胞內(nèi),得到了囊胚細(xì)胞核的卵細(xì)胞在人工培養(yǎng)下大部分夭亡了,在189個(gè)這種換核卵細(xì)胞中,只有兩個(gè)孵化出了魚(yú)苗,而最終只有一條幼魚(yú)度過(guò)難關(guān),經(jīng)過(guò)80多天培養(yǎng)后長(zhǎng)成8厘米長(zhǎng)的鯽魚(yú)。這種鯽魚(yú)并沒(méi)有經(jīng)過(guò)雌、雄細(xì)胞的結(jié)合,僅僅是

6、給卵細(xì)胞換了個(gè)囊胚細(xì)胞的核,實(shí)際上是由換核卵產(chǎn)生的,因此也是克隆魚(yú)。,魚(yú)類換核技術(shù)的成熟和兩棲類換核的成功,使一批從事良種培育工作的科學(xué)家激動(dòng)不己,既然鯽色的囊胚細(xì)胞核取代鯽魚(yú)卵細(xì)胞核后能得到克隆魚(yú),那么異種魚(yú)換核能否得到新的雜種魚(yú)呢?我國(guó)科學(xué)家首先提出了這個(gè)問(wèn)題,也首先解決了這個(gè)問(wèn)題,他們?cè)O(shè)法把鯉魚(yú)胚胎細(xì)胞的核取代了鯽魚(yú)卵細(xì)胞的核。鯉魚(yú)細(xì)胞核和鯽魚(yú)卵細(xì)胞質(zhì)居然能相安無(wú)事,并開(kāi)始了類似受精卵分裂發(fā)育的過(guò)程,最后長(zhǎng)出有胡須的鯉鯽魚(yú),這種魚(yú)有胡須,生長(zhǎng)快,完全像鯉魚(yú),但它的側(cè)線鱗片數(shù)和脊椎骨的數(shù)目與鯽魚(yú)相同,而且魚(yú)味鮮美不亞于鯽魚(yú)。這種人工克隆新魚(yú)種的出現(xiàn)為魚(yú)類育種開(kāi)辟了新途徑。1990年5月,西北農(nóng)業(yè)大學(xué)畜牧所克隆一只山羊。1992年,江蘇農(nóng)科院克隆一只兔子。1993年,中科院發(fā)育生物學(xué)研究所與揚(yáng)州大學(xué)農(nóng)學(xué)院合作,克隆一只山羊。1995年7月,華南師大與廣西農(nóng)大合作,克隆一頭奶牛、黃牛雜種牛。1995年10月,西北農(nóng)大克隆6頭豬。1996年12月,湖南醫(yī)大克隆6只老鼠。同年中國(guó)農(nóng)科院畜牧所克隆一頭公牛犢。1997年3月,中國(guó)科學(xué)院動(dòng)物研究所研究員陳大元率先提出了克隆大熊貓的設(shè)想。1999年,陳大元領(lǐng)導(dǎo)的小組

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