流感病毒在體內(nèi)的免疫反應(yīng)過(guò)程[22頁(yè)]

1、流感病毒在體內(nèi)的免疫反應(yīng)過(guò)程,Outline,一、非特異性免疫應(yīng)答 二、特異性免疫應(yīng)答 三、小結(jié) 四、免疫反應(yīng)的驗(yàn)證,流感病毒的結(jié)構(gòu),根據(jù)核蛋白和基質(zhì)蛋白的抗原性,流感病毒可以分成甲(A)、乙(B)、丙(C)三種類型,其中甲型流感病毒根據(jù)其表面血凝素(HA)和神經(jīng)氨酸酶(NA)分成許多亞型。,Outline,Company Logo,一、非特異性免疫應(yīng)答,流感病毒感染的早期，首先引起 防御屏障 吞噬細(xì)胞 干擾素 NK細(xì)胞 等為主的非特異性免疫,Company Logo,一、非特異性免疫應(yīng)答,Company Logo,一、非特異性免疫應(yīng)答,Company Logo,二、特異性免疫應(yīng)答,細(xì)胞免疫應(yīng)

2、答,Company Logo,二、特異性免疫應(yīng)答,細(xì)胞免疫應(yīng)答,Company Logo,二、特異性免疫應(yīng)答,Company Logo,病毒中和抗體: 該抗體能與細(xì)胞外游離的病毒結(jié)合，封閉其細(xì)胞受體結(jié)合的病毒抗原表位或改變病毒表面抗原構(gòu)型，阻止病毒吸附、侵入易感細(xì)胞，但不能直接殺滅病毒。 血凝抑制抗體:表面含有血凝素的流感病毒可刺激機(jī)體產(chǎn)生血凝抑制抗體，該抗體能中和病毒的感染性。 補(bǔ)體結(jié)合抗體: 此類抗體不能中和病毒感染性，但可通過(guò)調(diào)理作用增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬作用。,二、特異性免疫應(yīng)答,體液免疫中的抗體：,Company Logo,總之，機(jī)體抗流感病毒免疫應(yīng)答由非特異性免疫應(yīng)答和特異性免疫應(yīng)答共

3、同來(lái)完成。非特異性免疫先于特異性免疫發(fā)生，主要通過(guò)屏障結(jié)構(gòu)、非特異性免疫細(xì)胞(吞噬細(xì)胞、NK細(xì)胞)和體液免疫分子(補(bǔ)體、干擾素)等發(fā)揮抗病毒作用。特異性免疫是建立在非特異性免疫的基礎(chǔ)上，受流感病毒抗原的誘導(dǎo)而發(fā)生。但特異性免疫的作用更強(qiáng)烈、更有效、更具有針對(duì)性。主要通過(guò)細(xì)胞免疫和體液免疫發(fā)揮特異性抗流感病毒作用。,三、小結(jié),Company Logo,流感病毒多種多樣，但只要感染過(guò)同一種病毒發(fā)生了感冒，之后再感染同一類病毒時(shí)就不會(huì)感冒了。這是因?yàn)槊庖哂洃?。用同一抗原再次免疫時(shí)，可引起比初次更強(qiáng)的抗體產(chǎn)生，稱之為再次免疫應(yīng)答或免疫記憶，無(wú)論在體液免疫或細(xì)胞免疫均可發(fā)生免疫記憶現(xiàn)象。在體液免疫時(shí)，對(duì)

4、TD抗原的再次應(yīng)答可表現(xiàn)為抗體滴度明顯上升，免疫球蛋白類別可由IgM轉(zhuǎn)換為IgG，而且抗體親和力增強(qiáng)。提示再次應(yīng)答不僅發(fā)生抗體量的變化，而且也發(fā)生了質(zhì)的變化。實(shí)驗(yàn)證明，免疫記憶的基礎(chǔ)是免疫記憶細(xì)胞的產(chǎn)生。,三、小結(jié),Company Logo,（1）IgA的檢測(cè) 原理：病毒首先侵襲呼吸道黏膜， 而黏膜表面的分泌性 IgA 可以有選擇的轉(zhuǎn)移到黏膜表面， 能夠結(jié)合病毒防止其粘附和進(jìn)入。因此，只需檢測(cè)IgA 的變化即可證實(shí)是否為免疫反應(yīng)。,四、免疫反應(yīng)的驗(yàn)證,Company Logo,方法： 將小鼠隨機(jī)分 2 組，設(shè)病毒組和正常組。 在乙醚輕度麻醉下， 滴鼻感染 15 滴LD 50 流感病毒液，感染后

5、 5 天， 殺剖小鼠， 稱體重和肺重測(cè)定肺指數(shù)。采血分離血清， 收集鼻咽沖洗液、 支氣管肺泡灌洗液、 腸道沖洗液進(jìn)行 ELISA法檢測(cè) IgA 含量。,四、免疫反應(yīng)的驗(yàn)證,四、免疫反應(yīng)的驗(yàn)證,（2）外周血IL-12水平的檢測(cè) 原理：白細(xì)胞介素12又稱NK細(xì)胞刺激因子(NKSF)。IL-12主要由單核巨唾細(xì)胞、NK細(xì)胞和B細(xì)胞分泌,主要生物學(xué)活性有:促進(jìn)激活的T細(xì)胞和NK細(xì)胞的增殖;增強(qiáng)Th細(xì)胞、NK細(xì)胞、LAK細(xì)胞及CTL的生物學(xué)活性。誘導(dǎo)Tn向Th1分化,并促進(jìn)Th1的增殖和發(fā)育,與IL - 4共同調(diào)節(jié)Th1/Th2平衡,調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫應(yīng)答。,Company Logo,實(shí)驗(yàn)對(duì)象： 1、健康對(duì)

6、照組：收集XX醫(yī)院健康體檢者20名 2、流感癥狀組：收集XX醫(yī)院明確診斷的流感癥狀患者26名；經(jīng)rRT-PCR方法確定為非甲型HlNl流感病毒感染 3、輕癥甲流組：收集XX醫(yī)院診斷明確甲型H1N1流感病毒感染住院患者29名;經(jīng)rRT-PCR方法確診為甲型 H1N1病毒感染，癥狀較輕 4、重癥甲流組：收集XX醫(yī)院明確診斷甲型H1N1病毒感染住院患者名13名;經(jīng)rRT-PCR方法確定為甲型H1N1病毒感染,并且癥狀較重,四、免疫反應(yīng)的驗(yàn)證,實(shí)驗(yàn)過(guò)程： 實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:板條包被 ELASA法測(cè)定檢測(cè)物濃度,四、免疫反應(yīng)的驗(yàn)證,結(jié)論：流感病毒感染呼吸道后,通過(guò)呼吸器官上皮細(xì)胞感染其下方樹突狀細(xì)胞和巨唾細(xì)胞并且在這些細(xì)胞中傳播,樹突狀細(xì)胞和巨嗟細(xì)胞可以分秘抗病毒的細(xì)胞因子例如TNF-、IL-12、IL-18等來(lái)協(xié)調(diào)有效的先天免疫反應(yīng)來(lái)對(duì)抗病毒。,四、免疫反應(yīng)的驗(yàn)證,Company Logo,（3）外周血T淋巴細(xì)胞亞群及B、NK細(xì)胞百分率的測(cè)定 步驟：1. 標(biāo)本采集及制備 2. 染色及固定細(xì)胞 3. 流式細(xì)胞儀上T淋巴細(xì)胞亞群及B、NK的檢測(cè)及分析,四、免疫反應(yīng)的驗(yàn)證,結(jié)論：正常情況下CD4+T/CD8+T比值維持動(dòng)態(tài)平衡,保持機(jī)體免疫機(jī)能穩(wěn)定,是細(xì)胞免疫功能