動(dòng)物實(shí)驗(yàn)基本操作技術(shù)ppt課件

1、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)基本操作技術(shù),1,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的捉拿和固定方法 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的給藥方法 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的麻醉方法 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的編號(hào)方法 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的去毛方法 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的取血方法 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的處死方法,2,一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的捉拿和固定方法1. 小鼠,捉拿時(shí)先用右手將鼠尾抓住提起，放在較粗糙的臺(tái)面或鼠籠上， 在其向前爬行時(shí)，右手向后拉尾，用左手拇指和食指抓住小鼠的兩耳和頭頸部皮膚，將其固定于左手手心中，拉直四肢并用左手無(wú)名指壓緊尾和后肢，右手即可作注射或其他實(shí)驗(yàn)操作。取尾血及尾靜脈注射時(shí)，可將小鼠固定在金屬或木制的固定器上。,3,4,2. 家兔,一手抓住兔頸部的被毛與皮膚，另一手托其臀部或腹部，使其軀干的重量大部分集中在手上。,

2、5,6,兔手術(shù)固定臺(tái),7,8,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的編號(hào)方法,染色法 耳緣剪孔法 掛牌法 烙印法,9,1、染色法：淺色動(dòng)物 35苦味酸溶液（黃色） 0.5%中性紅或堿性品紅溶液（紅色） 2硝酸銀溶液（咖啡色，涂后光照10分鐘） 煤焦油乙醇溶液（黑色） 甲紫（龍膽紫）溶液（紫色）,10,小鼠的編號(hào)方法,編號(hào)原則：先左后右，從上到下,11,2、耳緣剪孔法（穿耳孔法）：小型動(dòng)物,12,3、掛牌法：耳標(biāo)簽、項(xiàng)圈、腿圈，中、大型動(dòng)物 4、烙印法：中、大型動(dòng)物,13,二、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的給藥方法,1. 注射法給藥：家兔耳緣靜脈注射 大、小鼠尾靜脈注射 2. 攝入法給藥： 家兔、大鼠、小鼠灌胃法 3. 涂布法給藥,14,攝入

3、法給藥,自動(dòng)口服給藥 強(qiáng)制灌胃給藥：大鼠 小鼠 家兔 經(jīng)直腸給藥,15,小鼠、大鼠灌胃法,器械： 灌胃器 由注射器和特殊的灌胃針構(gòu)成。 小鼠灌胃針長(zhǎng)45cm 直徑1 mm 大鼠灌胃針長(zhǎng)68cm 直徑1.2mm,16,小鼠灌胃法,按正確方法用左手抓取和固定動(dòng)物。使腹部朝上，頸部拉直。 固定后，右手持持接灌胃針的注射器吸取藥液（或事先將藥液吸好），將針頭從口角插入口腔內(nèi)，然后用灌胃針頭壓其頭部，使口腔與食管成一直線，再將灌胃針頭沿上腭壁輕輕進(jìn)入，轉(zhuǎn)動(dòng)針頭刺激動(dòng)物吞咽，然后沿咽后壁慢慢插入食道。若動(dòng)物掙扎厲害，應(yīng)退出后灌胃針，待動(dòng)物安靜后重新插入。切不可強(qiáng)行插入，以免損傷食道或誤入氣管導(dǎo)致動(dòng)物死亡。

4、 當(dāng)感覺(jué)有落空感時(shí)表明灌胃針可能進(jìn)入胃內(nèi)，向外抽動(dòng)注射器活塞，感覺(jué)有負(fù)壓說(shuō)明灌胃針未插入氣管，此時(shí)可將藥液灌入。,17,成年小鼠插管深度一般是：3cm 小鼠灌胃量： 0.10.25ml/10g體重,18,大鼠灌胃法,成年大鼠插管深度一般是：5cm 大鼠灌胃量： 12ml/100g體重,19,兔灌胃法,器械： 灌胃管（特制胃管或?qū)蚬埽?開口器（木質(zhì)紡錘狀）,20,兔灌胃法,操作方法： 1.固定：動(dòng)物取直立或平臥體位，固定動(dòng)物頭部。 直立位需2人合作，一人取坐位，將兔的軀體和下肢夾在兩腿之間，左手緊握雙耳固定頭部，右手抓住前肢，將兔固定于豎立體位。另一人將開口器橫放于兔口中，讓動(dòng)物咬住開口器，即

5、可開始插入灌胃管。,21,22,兔灌胃法,操作方法： 2.插管：將灌胃管由開口器的中央孔插入，沿上顎壁推進(jìn)約15cm。 插管過(guò)程中可將灌胃管的另一端放于一杯清水中，若連續(xù)有氣泡，說(shuō)明插入呼吸道，應(yīng)立即拔出灌胃管，重新操作；若無(wú)氣泡，說(shuō)明沒(méi)有插入氣管，即可開始注藥。,23,沿上顎壁推進(jìn)約15cm 檢查插入部位,24,兔灌胃法,操作方法： 3.給藥：灌注藥后可用少量清水將灌胃管里的藥全部沖入胃內(nèi)，以保證灌入藥的劑量準(zhǔn)確。灌胃完畢后，先退出胃管，后退出開口器。,25,兔灌胃法,關(guān)鍵詞：固定，插入（沿上顎壁），檢查,26,家兔耳緣靜脈注射,將動(dòng)物固定于實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，剪去耳緣部位的被毛，用乙醇輕輕擦拭，耳緣

6、靜脈即清晰可見。用左手食指和中指夾住靜脈近心端，拇指和小指夾住耳緣部分，以左手無(wú)名指和小指放在耳下作墊，待靜脈充盈后，右手持注射器使針頭盡量由靜脈遠(yuǎn)心端刺入，順血管方向平行、向心端刺入約1cm。 注射完畢抽出針頭，用棉球壓迫注射部位數(shù)分鐘，以免出血。,27,三、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的麻醉方法,全身麻醉法：吸入法，注射法 局部麻醉法：浸潤(rùn)麻醉，表面麻醉,28,（一）全身麻醉法,1、吸入法,麻醉藥： 乙醚 氯仿 三氟乙烷,29,2、注射法 麻醉藥： 巴比妥類藥物 氯胺酮 烏拉坦 水合氯醛,（一）全身麻醉法,30,（二） 局部麻醉法,1% 鹽酸普魯卡因 局部浸潤(rùn)麻醉 0.022鹽酸可卡因 表面麻醉,31,麻醉藥

7、物應(yīng)用原則： 依據(jù)動(dòng)物體重計(jì)算麻醉藥物的劑量； 依據(jù)動(dòng)物生命體征變化控制給藥速度； 掌握寧少勿多、分階段給藥的方式。,針對(duì)不同的動(dòng)物，選擇不同的麻醉藥物、實(shí)施不同的麻醉方法。,32,麻醉具體操作：,家兔全身麻醉,麻醉劑：1.5%戊巴比妥鈉，2ml/kg,前1/2快速推入，使動(dòng)物能順利、快速地渡過(guò)興奮期；后1/2速度宜慢，且邊注射邊注意觀察動(dòng)物的生命體征變化，當(dāng)確定已達(dá)到麻醉效果時(shí)，即停止給藥，不必急于將剩余的麻醉藥物全部推入。,給藥方法：耳緣靜脈注射,33,麻醉成功標(biāo)志,角膜反射遲鈍 或消失,肢體肌肉松弛,疼痛反射消失,呼吸變深變慢,34,機(jī)能實(shí)驗(yàn)學(xué)常用手術(shù)方法,一、常用手術(shù)器械 二、常用手術(shù)

8、插管技術(shù) 氣管插管術(shù) 頸動(dòng)脈插管術(shù) 頸靜脈插管術(shù),35,動(dòng)物實(shí)驗(yàn)常用手術(shù)器械,36,粗剪 用于蛙類實(shí)驗(yàn)中的剪骨、肌肉和皮膚等粗硬組織以及家兔等實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的剪毛。 剪毛時(shí)，剪毛剪自然落下逆毛方向一次次將毛剪下即可，加力下壓或一手提起被毛，均易剪破皮膚。剪下的毛應(yīng)集中放入加有清水的污物盒內(nèi)，避免到處飛揚(yáng)。,37,手術(shù)剪,用于剪線和剪開、分離組織。有直、彎、尖頭、圓頭、大、小之分，根據(jù)不同用途選用。手術(shù)操作中用于沿組織間隙進(jìn)行分離和剪斷組織者稱組織剪，一般為彎形，尖端較鈍圓；用于剪斷縫扎線、引流物或敷料等用品者稱剪線剪，為直形。,38,眼科剪 主要用于剪血管或神經(jīng)等柔軟組織，眼科剪也有直頭與彎頭之分，

9、正確的執(zhí)剪姿勢(shì)與手術(shù)剪相同，即用拇指與無(wú)名指持剪，食指置于手術(shù)剪上方。,39,手術(shù)刀,由刀片和刀柄組成，可分為大、中、小號(hào)不同類型。 大號(hào)切開皮膚； 中號(hào)切割臟器組織； 小號(hào)切割特殊部位。 安裝：先用持針器（或直型止血鉗）夾住刀片，左手握住刀柄，按刀片上的空隙對(duì)準(zhǔn)刀柄上的槽隙，順勢(shì)推入即可。,40,手術(shù)刀握持方法,41,執(zhí)筆式：即以持筆的手法握住刀柄，適用于小范圍內(nèi)的組織切開，隨意性強(qiáng)，可作垂直或水平切割。,持弓式：右手中指、無(wú)名指按壓在手術(shù)刀柄的外側(cè)緣，拇指放在刀柄內(nèi)側(cè)緣，食指按壓在刀片后13處。適用于切開皮膚。,42,組織鑷,組織鑷和眼科鑷。 組織鑷鉗夾組織，分離組織和筋膜。 眼科鑷分離血

10、管。 使用手法：以食指、中指放于器械的外側(cè)緣，拇指放于內(nèi)側(cè)緣，集3指的力量實(shí)施操作動(dòng)作，而且適用于左右手的同時(shí)操作。,43,止血鉗,止血和分離組織。 使用方法：以拇指、中指（或無(wú)名指）分別套人止血鉗的套扣內(nèi)，控制止血鉗展開的力度，以食指放在止血鉗的關(guān)節(jié)部位，控制止血鉗的方向和鉗夾組織部位的準(zhǔn)確性。 切忌左右手分別抓住止血鉗的套扣部位，用兩手的合力進(jìn)行止血或分離組織。,44,縫合針,有圓針和角針兩種，圓針用于縫合組織結(jié)構(gòu)； 角針邊緣鋒利，除具有穿刺功能外，還具有 切割的作用；縫合針需配合持針器同時(shí)使用。,45,探針,包括金屬探針和玻璃分針；用于對(duì)精細(xì)部位的分離和游離等操作。有時(shí)，在實(shí)施血管插管技

11、術(shù)時(shí)，切開血管壁后往往借助于探針先將切口挑起，然后插入導(dǎo)管。,46,支架 用于蛙類及哺乳類手術(shù)中換能器及刺激電極等的固定與位置調(diào)節(jié)。由底座及支架桿構(gòu)成，支架上附有萬(wàn)向節(jié)，可在各個(gè)方向上調(diào)節(jié)。,47,哺乳類手術(shù)器械,氣管插管 急性動(dòng)物實(shí)驗(yàn)時(shí)插入氣管，以保證呼吸道暢通，一端接氣鼓或呼吸換能器可記錄呼吸運(yùn)動(dòng)。分為金屬插管和玻璃插管。,48,哺乳類手術(shù)器械,動(dòng)脈夾 動(dòng)脈夾分大、中、小三種型號(hào)及直、彎兩種，用于夾持動(dòng)脈，暫時(shí)阻斷動(dòng)脈血流。使用時(shí)動(dòng)脈夾的尖端套有塑料管，以防止夾持動(dòng)脈時(shí)對(duì)血管造成損傷。,49,哺乳類手術(shù)器械,動(dòng)脈插管 用于在急性動(dòng)物實(shí)驗(yàn)時(shí)插入動(dòng)脈?？捎媒饘?、玻璃以及塑料等不同材料制成，常用

12、細(xì)塑料管自行拉制而成。 在哺乳類動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，插管一端插入動(dòng)脈，另一端接壓力換能器以記錄血壓，插管內(nèi)充滿肝素以防止插管內(nèi)血液凝固，插管腔內(nèi)不可有氣泡，以免影響結(jié)果。,50,哺乳類手術(shù)器械,三通管 用于改變實(shí)驗(yàn)中液體流動(dòng)方向，以便輸液、給藥或描記血壓?？呻S意將三個(gè)通道中的任何兩個(gè)通道口相通，另一個(gè)不通；也可使三個(gè)通道同時(shí)都通或都不通。,51,哺乳動(dòng)物手術(shù)器材清單,52,動(dòng)物實(shí)驗(yàn)常用插管技術(shù),氣管插管術(shù) 頸動(dòng)脈插管術(shù) 頸靜脈插管術(shù) 導(dǎo)尿管插管術(shù),53,插管技術(shù)的基本步驟,1. 動(dòng)物稱重、麻醉、固定。 2. 插管部位皮膚去毛、備皮。 3. 皮膚切開。 4. 皮下組織結(jié)構(gòu)的分離。 5. 目標(biāo)器官或組織結(jié)

13、構(gòu)的游離。 6. 導(dǎo)管的插入或固定。,54,家兔頸部神經(jīng)和血管的解剖位置,55,56,迷走神經(jīng) 交感神經(jīng),57,減壓神經(jīng),58,氣管插管術(shù),59,1、麻醉固定、頸部皮膚去毛、備皮,2、在頸前區(qū)正中作一約5-7cm的切口,60,3、鈍性分離皮下組織、肌肉，游離出氣管，穿線備用。,61,4、在甲狀軟骨下方第3-4個(gè)環(huán)狀軟骨上作一倒“T”形切口，插入“Y”形氣管插管，并用線固定好。,62,頸動(dòng)脈插管技術(shù),1、頸正中作一約5-7cm的切口 2、鈍性分離皮下筋膜,63,3、分離一側(cè)頸總動(dòng)脈，穿雙線備用。,64,4、結(jié)扎遠(yuǎn)心端，在距結(jié)扎線約2-3cm處用動(dòng)脈夾夾閉頸總動(dòng)脈近心端。,65,5、在靠近結(jié)扎線處

14、用眼科剪剪一“v”形切口，切口大小約為動(dòng)脈口徑的1/31/2。,66,6、將壓力換能器與動(dòng)脈插管連接好并充滿肝素，向近心端插入動(dòng)脈插管，用線結(jié)扎牢固。,67,三通的使用：,68,進(jìn)入BL410/420系統(tǒng)。,選擇“實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目” 選擇“循環(huán)實(shí)驗(yàn)” “兔動(dòng)脈血壓調(diào)節(jié)”實(shí)驗(yàn)?zāi)K；,7、打開換能器開關(guān)，觀察并記錄動(dòng)脈血壓。,或選擇“輸入信號(hào)”選擇“通道”“壓力”點(diǎn)擊“開始”實(shí)驗(yàn)按鈕，即可在屏幕上觀察到正常的血壓曲線。,69,動(dòng)脈插管注意事項(xiàng),動(dòng)脈插管和血壓換能器內(nèi)注滿肝素生理鹽水以排氣抗凝。 壓力換能器與動(dòng)物心臟等高。 動(dòng)脈插管與頸總動(dòng)脈呈一條直線，方向一致 。 掌握好三通管的方向。 結(jié)扎固定牢固。,70,頸靜脈插管技術(shù),、由頸正中剪開一約cm的口。 2、鈍性分離皮下筋膜。 3、辨認(rèn)、分離一側(cè)頸外靜脈。 4、穿雙