論溶出度試驗對于口服固體制劑的重要意義--謝沐風（2010年10月16日+北京+藥物溶出度技術應用研討會）.ppt

1、謝沐風 上海市食品藥品檢驗所 ,論溶出度試驗,對于口服固體制劑的重要意義,請大家將手機調至“振動”檔！ 謝謝您的配合！,工 作 簡 歷, 1998年至今 在本所化學室工作。經(jīng)歷了 “1998年2002年的強仿期”和“20032006仿制藥瘋狂期” 2003年8月 2004年2月 赴日本國立醫(yī)藥品食品衛(wèi)生研究所藥品部（相當于我國中檢所化藥室）進修。 恰逢日本藥品品質再評價工程如火如荼展開。 師從該項工程技術負責人，全面系統(tǒng)地進行了學習和掌握了溶出度理念與技術。, 回國后發(fā)表了多篇溶出度文章，引起業(yè)內矚目與同仁共鳴。 2008年11月 2009年1月 借調至中檢所起草2010年版藥典溶出度試驗指導

2、原則（新增） 2009年伊始、在國內知名藥學網(wǎng)站 丁香園“藥物分析版”上創(chuàng)立“溶出度研究”子版。,參與了“2009年全國評價性抽驗工作”，指導了各藥檢所“如何采用體外多條溶出曲線評價口服固體制劑內在品質”。學以致用、結果喜人！（舉例） 引起國家新藥審評中心的重視，在現(xiàn)今仿制藥審評中已全面引入體外溶出曲線評價模式，且本人正參與到其中更為詳盡的指導原則制訂中,本 人 體 會, 工作中一定要注重思考，帶著問題去學習、有的放矢地去攻讀，多觀察、多領會，日積月累、潛移默化之中就會水到渠成。 思維要開放、活躍，不要固步自封、按部就班，因循守舊。 一定要不斷思考，注意查詢文獻，收集各方面信息，培養(yǎng)自身的專業(yè)

3、素養(yǎng)與專業(yè)敏感度，不要怕遇到問題，越是遇到問題、將其解決，就越能不斷提高與進步。,很榮幸此次承蒙中國醫(yī)藥教育協(xié)會舉辦 藥物溶出度檢測新技術新方法應用研討會 得以與各位同仁相互交流、切磋！,寄望大家多思考、多提問！,目前國內用藥現(xiàn)狀 某些固體制劑國產(chǎn)藥與進口原研藥相比、臨床療效相距甚遠。 為什么不同廠家生產(chǎn)的同一制劑、甚至同一廠家生產(chǎn)的不同批號，病人服用后也會有不同療效？ 大量低水平的仿制藥存在，惡性、低價競爭！ 國產(chǎn)制劑（包括固體制劑）出路何在？,作為一名藥學工作者 一直在苦苦思索、積極尋求 敢問路在何方？,也正是基于這樣一個歷史背景 國家藥監(jiān)局自2008年起開始進行 “評 價 性 抽 驗”

4、旨在通過探索性研究找到國產(chǎn)仿制藥在檢測指標上與原研藥的差距所在，從而為臨床療效差距提供佐證、 從而完善國家技術審評與指導原則的制訂。,對固體制劑的關注點與著眼點：, 療效才是硬道理 即生物利用度 ！客觀看待安全性 ！,對質量標準中各項指標的深入剖析, 含量（均勻度）沒有任何技術含量。 深入講述制劑生產(chǎn)過程 僅是將一物件使成均勻狀后按照一定規(guī)格制作而已。 闡述含量與生物利用度幾近無關的根據(jù)所在。 一定牢固樹立“吃藥不是吃含量、而是吃生物利用度”的科學理念！,對質量標準中各項指標的深入剖析, 有關物質與毒副作用的關系 能夠建立起準確測定雜質的檢驗方法固然重要，但與主藥在體內吸收的重要性相比就顯得無

5、足輕重了。因為如果主藥尚無有效吸收、主體吸收，即便有12%雜質存在也無關痛癢了！除非一些明確的、毒性較強的雜質。 毒副作用的引起往往由低劣輔料所致！,溶出度技術才是, 隨著人們對溶出度的不斷研究與深入，對其認識與理解亦在不斷發(fā)展與變化著。現(xiàn)今，該試驗不僅具有為建立體內外相關性而設立的理念，且還已成為證明藥物體內釋放特性的一種簡單、廉價而不失嚴謹?shù)膶嶒炇覚z測方法。,“固體制劑內在品質的靈魂與核心所在”！,這里所指的溶出度是廣義的溶出度、包括了釋放度。 這里所指的溶出度測定是指 在多pH值溶出介質中的溶出曲線測定，而非一個介質、一個時間點、一個限度的測定！,“在多種pH值溶出介質中溶出曲線的測定”

6、, 該手段已成為“剖析”和“肢解”原研固體制劑內在品質一種擘肌分理、抽絲剝繭的重要手段；成為固體制劑內在品質呈現(xiàn)于外在的一種“表象”、“映射”與“載體”。 所以，采用該手段用于評價口服固體制劑，就可指示出不同來源的同一制劑內在品質間的差距，從而為彼此間臨床上的差距提供佐證！ 尤其適用于評價性抽驗的探索性研究（日本作法）！, 絕非一個介質、一個時間點、一個限度的測定！,“在多種pH值溶出介質中溶出曲線的測定”, 同時，該手段對于口服固體制劑仿制藥研發(fā)與處方篩選，對于提高生物等效性試驗的成功率，以及有可能影響到藥物生物特性的各類變更評價也發(fā)揮著至關重要的作用。 因此，該項技術愈來愈受到各方面的矚目

7、與期待！, 絕非一個介質、一個時間點、一個限度的測定！,溶出度核心理念 多條溶出曲線是 口服固體制劑的 “指紋圖譜”！ ,日本進修時的體會 工作的一條主線：日本薬品品質再評価工程 介紹工程實施的歷史背景。日本國家技術部門通過對溶出度（釋放度）的嚴格要求，來提高固體制劑在各種人群體內的生物利用度。 工作理念 通過控制藥品質量的決定性、關鍵性評價指標， “一針見血式地”實現(xiàn)國家管理部門的各種職能！, 目 的： 保證口服固體制劑對于不同患者均能具有較高的生物利用度；使不同企業(yè)生產(chǎn)的同一藥品均能具有相同的生物等效性; 手 段： 對體外溶出度（釋放度）試驗進行全面、細致、深入的研究；更為科學、有效地利用

8、體外溶出度試驗來評價和提高體內生物利用度。 結 果： 通過對溶出度（釋放度）試驗的嚴格要求，大大推動了制藥企業(yè)對制劑工藝的充分、詳盡研究；提升了藥品的內在品質和臨床療效！,我們已經(jīng)走得太遠，以至于忘記了為什么而出發(fā)。 黎巴嫩著名詩人紀伯倫（18831931）,工 作 感 悟,地高辛片、甲苯磺丁脲片 生物利用度差異,A 藥廠 / 原研制劑,療效差,B 藥廠 / 仿制制劑,療效好,藥品行業(yè)作為高科技行業(yè)的體現(xiàn)所在？,為什么兩者會有差異? 為什么兩者的血藥 濃度會不一致?,仿制藥研發(fā)的瓶頸在哪里？,藥品療效的優(yōu)劣主要表現(xiàn)在 一個高品質藥品（如原研制劑），患有該疾病的任何人群服用都會有一定的療效和作用

9、，即有效性廣。 一個低品質藥品（如仿制制劑），可能只會對患有該疾病的某一部分人群有效（如體內環(huán)境正常者），而對另一部分病人療效甚微（如胃酸缺乏者、年老體弱者），即有效性低。,體外溶出度試驗,體內消化道,生物利用度與體外溶出度試驗的相關性，這一點已被人們所知！,療 效 的 優(yōu) 劣,體內生物利用度的差異,體外溶出曲線的不同,制劑的優(yōu)劣,關鍵、核心,如何將原料制成（固體）制劑,即如何科學、有效地進行 制劑工藝/處方/輔料的篩選,主要評價：溶出度試驗,溶出度試驗的重要意義,消化道,Tablet,到達作用部位,崩解,溶 液,溶出,環(huán)境（用pH 值表達） 蠕動強度（雖年齡增長、減弱）,人體消化道中最為關鍵

10、的兩個參數(shù),人體內消化道各器官的變化范圍,消化道各器官,變化范圍,胃,pH,1.2 - 7.6,表面張力 (dyne/cm2),35 - 50,胃液體積 (ml),5 - 200,十二指腸,pH,3.1 - 6.7,收縮壓 (mmHg),3 - 30,小腸,pH,5.2 - 6.0,膽汁酸(mM),0 - 17,液體流速 (ml/min),0 - 2,胃酸隨年齡變化統(tǒng)計表 （日本學者2001年發(fā)表的統(tǒng)計數(shù)據(jù)）,0,20,40,60,80,10,20,30,40,50,60,70,年 齡,胃酸缺乏者的比例 (%),1984,1989-1994,1995-1999,從專業(yè)角度看：療效的優(yōu)劣，即藥物

11、在體內吸收的多寡，是與生物利用度緊密相關的。 優(yōu)質藥品，可在任何體內環(huán)境下（即pH值的寬范圍內）都有一定的崩解、溶出，即對任何人群均有較高的生物利用度。 劣質藥品，可能只在一種體內環(huán)境下（如胃酸正常者）才有一定的溶出和吸收，而在其他體內環(huán)境下可能崩解、溶出就會很差，生物利用度也就很低。,如果某制劑，僅在pH 1.2條件下體外溶出較好，在pH 6.8條件下體外溶出較差，結果也許只能保證對于胃酸正常的患者吸收良好，而對胃酸缺乏的患者可能就會很差了。,溶出度試驗裝置/轉速與消化道蠕動的關系 一個優(yōu)質藥品，在采用一定的裝置與轉速條件下（通常認為槳板法/50轉最接近中老人人群），應在pH值的寬范圍內（即

12、多種溶出介質中）盡可能均有一定溶出與釋放，這樣就可保證該藥品用于人體時，可在各種體內環(huán)境下，對任何體質患者均有一定療效！,溶出度試驗中的“轉速”與生物利用度的相關性,槳板法 100轉,槳板法 50轉,0,500,1000,1500,0,2,4,6,8,10,Time (h),Conc (ng/ml),A藥廠產(chǎn)品,B藥廠產(chǎn)品,0,20,40,60,80,100,0,2,4,6,8,10,12,Time (h),% dissolved,身體機能良好者體內,0,200,400,600,800,0,2,4,6,8,10,Time (h),Conc. (ng/ml),身體機能虛弱者體內,不相關,100

13、轉,0,20,40,60,80,100,0,10,20,30,Time (min),% dissolved,A,B,50 轉,0,20,40,60,80,100,0,10,20,30,Time (min),% dissolved,A,B,0.0,0.5,1.0,1.5,2.0,2.5,0,2,4,6,8,Time (h),Concentration (ug/ml),Capsule A,Capsule B,具體實例： 兩吲哚美辛膠囊溶出度 與生物利用度的相關性,不相關,相 關,在身體機能虛弱者體內,100,中年婦女,0.6,A藥廠產(chǎn)品,B藥廠產(chǎn)品,0,50,0.2,0.4,老年患者,年輕小伙,不

14、同制劑的溶出度試驗曲線與 不同患者體內生物利用度的關系,溶出度 試 驗,不同患者體內生物利用度,槳板法、50轉,槳板法、75轉,槳板法、100轉,彼此間就不相關了！,由此可見，溶出度（釋放度）研究一定要全面、即多pH值溶出曲線的測定。 機械參數(shù)的選擇一定要具有區(qū)分力。如設定得寬松（如槳板法/100轉、加高濃度表面活性劑、甚至有機溶劑），則于體內的評價可能就會失去意義，建立不起體內外相關性，也無法評價生物等效性了！,對于仿制藥、為提高生物等效性試驗成功率、如何確定體外溶出度試驗條件與參數(shù)？,至關重要,溶出度技術應用（一） 對于仿制藥的研發(fā),闡述為何要做生物等效性(BE)試驗？如何做？ 如何提高B

15、E試驗成功率？ 不可能試驗一個處方、進行一次生物等效性試驗！ 這也正是溶出度試驗作為體內外相關性的一個重要體現(xiàn)！作為剖析固體制劑內在品質的一種手段！,體外一致 體內多數(shù)一致、BE試驗成功率高！,體內外相關性的最新理解(),均能夠具有相似 的溶出曲線,生物等效,大多數(shù)藥物,極少數(shù)藥物,生物不等效,體外溶出度試驗，在各種溶出介質中，在嚴格的溶出度條件下（低轉速）,生物等效性試驗,這樣就大大提高了生物等效性(BE)試驗的成功率！但并不能替代BE試驗！,仿制藥研發(fā)思路 “殊途同歸”,pH = 1.0,pH = 4.0,pH = 7.0,0,20,40,60,80,100,0,20,40,60,80,1

16、00,0,20,40,60,80,100,0,20,40,60,Time (min),0.0,0.2,0.4,0.6,0.8,0.0,0.2,0.4,0.6,0.8,0.0,0.2,0.4,0.6,0.8,0,2,4,6,Time (h),A,B,溶出曲線,體內血藥濃度,A,B,A,B,日本仿制藥申報要求，體外至少四條溶出曲線與原研制劑一致，方可申報。并根據(jù)藥物特性，如BE試驗需分別進行“進食”和“禁食”兩種狀態(tài)，則體外溶出研究還需針對性進行加消化酶溶出介質中的比對試驗。 世界衛(wèi)生組織、美國與歐盟要求皆雷同日本。 我國新藥審評中心2010年3月11日發(fā)布了“關于仿制藥通用技術文件（簡稱:CTD

17、）申報資料提交要求征求意見的通知”，其中明確規(guī)定“需進行多溶出介質中的比對研究”！,各國對仿制藥申報要求,體外不一致 體內多數(shù)不一致、 BE試驗成功率低！ 日本藥品品質再評價工程就是充分利用了該點。 再評價時，由于無法再進行大量“BE試驗”，故只好采用體外溶出曲線比對方法。給予仿制藥廠一定時間、更改處方與工藝，使多條溶出曲線與原研品一致！ “評價性抽驗工作”便可借鑒該理論。 （列舉去年實例）,體內外相關性的最新理解(),pH 7,溶出度,pH 1,.,.,0,20,40,60,80,100,0,20,40,60,Time (min),0,2,4,6,0,5,10,15,20,25,Time (

18、h),0,2,4,6,0,5,10,15,20,25,胃酸正?；颊?預測體內血藥濃度,實測體內血藥濃度,胃酸缺乏患者,不同廠家生產(chǎn)的甲硝唑片體外溶出度與體內學藥濃度的相關性,A藥廠產(chǎn)品,B藥廠產(chǎn)品,0,1,2,3,4,5,6,7,0,10,20,30,40,Time (h),0,1,2,3,4,5,6,7,0,10,20,30,40,Time (h),年 輕 人,老 年 人,pH 1.2,兩不同藥廠生產(chǎn)的地西泮片 體外溶出度試驗與體內血藥濃度的相關性,0,20,40,60,80,0,10,% dissolved,pH 4.6,0,20,40,60,Time (min),A,B,胃酸缺乏者,胃酸

19、正常者,0,50,100,150,200,250,300,350,0,2,4,6,Time (min),Concentration (ng/ml),0,2,4,6,Time (min),Time (min),A,B,日本規(guī)定：如不一致、BE試驗受試者必須酌情進行針對性選取！ 故日本橙皮書中，在已結束的586個品種中、約有10個品種為兩套溶出曲線。,體外溶出曲線比對研究的人性化規(guī)定,使用該藥品的患 者是特定人群嗎?,溶 出 度 試 驗,是,是,在低轉度和所有介質中，溶出曲線均一致嗎?,否,在中性介質條件下 溶出曲線一致嗎？,體內一致、即BE試驗成功 并不意味著仿制制劑臨床療效就一定與原研制劑相當

20、。 因BE試驗是采用年輕男性、是人體的最佳狀態(tài)、這也是BE試驗的局限性所在！ 而原研制劑在臨床階段經(jīng)過大量病例驗證。,體內外相關性的最新理解(),只有通過對體外溶出度（釋放度）的嚴格要求，才能盡可能地增加在年老患者、在體質虛弱患者體內生物利用度高的概率！ 以上這一觀點彌補了“生物等效性試驗的局限與不足”！,對溶出度試驗嚴格要求的意義,體內不一致、即BE試驗失敗 則肯定會在體外某個溶出度條件下呈現(xiàn)顯著性差異，關鍵就看體外溶出度研究的深度了。 已幫助眾多企業(yè)尋找到這種差異； 越來越多的企業(yè)開始進行二次開發(fā)； 目前國內仿制藥質量便如此！ USP七種溶出度試驗法的由來。,體內外相關性的最新理解(),兩

21、個不同藥廠生產(chǎn)的吲哚美辛膠囊,pH 6.8 介質中，槳板法、 100轉,血 藥 濃 度,0,20,40,60,80,100,0,30,60,Time (min),% dissolved,A,B,0.0,0.5,1.0,1.5,2.0,2.5,0,2,4,6,8,Time (h),Concentration (ug/ml),Capsule A,Capsule B,不相關,造成以上不相關的原因 也許是溶出度試驗條件選擇不當所致。 也許在低轉速、或是在其他介質中，差異就會顯示出來了！,兩個不同藥廠生產(chǎn)的氟芬那酸膠囊,pH 6.8 介質中，槳板法、 100轉,血 藥 濃 度,不相關,造成以上不相關的原

22、因： 也許是生物等效性試驗的受試者體內環(huán)境正常；對于體內環(huán)境非正常者，尤其是胃酸缺乏者，差異就會顯示出來了！,0,20,40,60,80,100,0,60,120,180,Time (h),% dissolved,C,D,0,2,4,6,8,10,0,2,4,6,8,Time (h),Concentration (ug/ml),Capsule C,Capsule D, 原則上從市場上購買來不同時間點的不同批號，分別測定，觀測溶出曲線波動情況。酌情審定（著重講述）。 生產(chǎn)規(guī)模10萬單位或今后最大生產(chǎn)規(guī)模的1/10。 含量與參比制劑的差值應在5%以內。 選用的樣品應在重量/裝量差異所規(guī)定范圍的1/

23、2內。 理論上個測定12個單位，現(xiàn)實情況測定6個單位即可，甚至可以更少（可靈活變通為預試驗時3個、隨后再補充）！,體外溶出曲線比較的具體操作,至少四種溶出介質： 【普通制劑】 (1)酸性藥物 pH值分別為1.2、5.56.5、6.87.5和水； (2)中/堿性藥物和包衣制劑 pH值分別為1.2、3.05.0、6.8和水； (3)難溶性藥物制劑 pH值分別為1.2、4.04.5、6.8和水； (4)腸溶制劑 pH值分別為1.2、6.0、6.8和水； 【緩/控釋制劑】 pH值分別為1.2、3.05.0、6.87.5和水。 與美國作法有所不同：美國統(tǒng)一采用1.0、4.5、6.8和水。,體外溶出曲線比

24、較的具體操作,以上pH值的選擇依據(jù)： (1) 以pKa值3.0為界判斷酸堿性 。 (2) 如該藥物pKa1.0值未能涵蓋于以上各pH值中，建議增加pKa1.0值溶出曲線的測定，以更好地把握該制劑的溶出特性。日本橙皮書中的一些特例。 (3) 無論何種制劑都不建議采用pH8.0以上的介質進行表達；如確有必要，應提供充足理由。FDA公布的溶出度數(shù)據(jù)庫中，“阿維A膠囊”采用pH9.6溶出介質特例。,體外溶出曲線比較的具體操作,溶出介質配制方法： (1) 各國不盡相同、建議根據(jù)原研制劑生產(chǎn)廠商的國別而定。詳細配制方法請參閱本人撰寫的文章。 (2) 表面活性劑加入時，一定采用煮沸法配制，絕對不要采用超聲法

25、（鹽的溶解方式亦如此）。 (3) 離子濃度越低、樣品越不易溶出，則要求越高！ (4) 試驗前應首先進行原料藥在各pH值溶出介質中的穩(wěn)定性考察，以確保試驗數(shù)據(jù)的準確測定。在日本橙皮書中，就羅列了該藥物在各種溶出介質中的穩(wěn)定性數(shù)據(jù)。,體外溶出曲線比較的具體操作,對原研制劑的剖析： 普通制劑與腸溶制劑可為5、10、15、20、30、45、60、90、120分鐘，此后每隔1小時直至6小時止；緩控釋制劑可為15、30、45、60、90、120分鐘，3、4、5、6、8、10、12、24小時。當連續(xù)兩點溶出率均達90%（緩控釋制劑為85%）以上、且差值在5%以內時，試驗則可提前結束。 在酸性介質中最長測定時

26、間為2小時，在其他各pH值介質中普通制劑為6小時，緩控釋制劑為24小時。,體外溶出曲線比較的具體操作,對原研制劑的剖析： 片劑：槳板法/50轉起始。 膠囊劑：轉籃法/50轉或槳板法/50轉（加沉降藍）起始。 不建議采用小杯法，一律采用900ml或1000ml。 如樣品濃度過低，可采用加大進樣量至50l、100l，甚至200l。,體外溶出曲線比較的具體操作,漏漕條件的定義：溶出介質體積要大于溶解藥物主成分（該量為制劑最大規(guī)格量）所需體積的至少3倍量，以保證藥物溶出不受其溶解性的顯著影響。 該理念的推出，是美國學者在最初建立溶出度試驗方法時，斟酌確定溶出杯體積時所推出的一個概念，從當時所研究的藥物

27、出發(fā)，針對該理念，1000ml的溶出杯可基本滿足大部分藥物。,漏槽條件對溶出度試驗的意義,現(xiàn)今，溶出介質體積已固定、通常選用9001000ml。以此為出發(fā)點，如根據(jù)某藥物在某溶出介質中的溶解度值來推算采用“何種溶出介質”或“添加多少濃度的表面活性劑”，將完全無視“藥物制劑”的作用！ 將“藥劑可以改善藥物的水難溶性”這一至關重要的理念完全擯棄了！所以，該理念在現(xiàn)今溶出度試驗應用中已基本無用武之地。,漏槽條件對溶出度試驗的意義,講述如何測定溶解度（日本橙皮書中收載）。 由測定數(shù)據(jù)推算出該制劑是否為“pH值依賴型制劑”，從而來指導自己的制劑研發(fā)與溶出度質量標準的擬定。 絕非用該數(shù)據(jù)來推導溶出度試驗用

28、體積和溶出介質中添加的表面活性劑濃度！,溶 解 度 的 測 定 意 義,對原研制劑的剖析： 在某溶出介質中最終溶出量未達要求、無法進行比較時 精密度差、必須提高精密度以使數(shù)據(jù)更具代表性時 轉速：增加至75100轉。 加入表面活性劑：濃度以0.01(w/v)為起點、按照1、2、5級別逐步增加，不建議采用3.0%以上濃度。 有機溶劑：對比剖析時可加入，但最終擬定質量標準時決不允許添加。 闡述最常用的十二烷基硫酸鈉和吐溫-80的優(yōu)缺點,體外溶出曲線比較的具體操作,裝置：槳板法 轉速：100轉 加入表面活性劑：3.0%濃度 結果：仍難以達到一定時間點85%以上溶出量。 論斷：對于創(chuàng)新藥、謹慎考慮，酌情

29、申報！,體外溶出試驗參數(shù)的“極端條件”,原研制劑曲線類型 無需采用f1和f2因子比較。仿制制劑在15分鐘內平均溶出率也達85%以上；或是15分鐘時，試驗制劑與參比制劑平均溶出率的差在15%范圍內。,體外溶出曲線比較的具體操作,原研制劑曲線類型 采用f2因子比較時，比較15、30和45分鐘三個時間點。 對應于參比制劑平均溶出率分別為60和85兩個時間點，兩者平均溶出量差均在15%范圍內； 采用f1和f2因子比較法。,體外溶出曲線比較的具體操作,F1 因 子 計 算 公 式,Rt和Tt分別表示兩制劑在第n個取樣點的平均累積溶出率。,F2 因 子 計 算 公 式,Rt和Tt分別表示兩制劑在第n個取樣

30、點的平均累積溶出率。 n對于計算結果的貢獻尤甚！,F2 因 子比較時間點的確定 溶出量在85%（緩控釋制劑80%）以上的時間點僅能選取一個。 普通速釋制劑選取45個、緩控釋制劑選取46個時間點。因 f2因子計算結果有依賴于比較時間點個數(shù)的特性。 以上各時間點溶出量間隔盡可能相近，這也是之前取樣時間點較為密集的原因所在。,體外溶出曲線比較的具體操作,對于所選時間點溶出結果變異系數(shù)的規(guī)定（精密度的代表性）： 以上所選用的第一時間點溶出結果變異系數(shù)應不得過20%，自第二時間點至最后時間點溶出結果變異系數(shù)均應不得過10%。 若不符合，應從儀器適用性予以考慮解決，如增加轉速或增加表面活性劑濃度，直至滿足

31、精密度要求。 對于本身變異性較大的品種，n可增至1218。 如各時間點變異系數(shù)超出規(guī)定，說明制劑工藝/處方篩選尚待優(yōu)化、工藝尚未穩(wěn)定。,體外溶出曲線比較的具體操作, f1因子應介于015；f2因子應至少大于50（65）。 ,體外溶出曲線比較的具體操作,若直觀估計，各時間點差異在10%或5%以內，則可基本斷定2因子大于50或大于65。,體外溶出曲線比對的附加要求, 還要有添加酶液溶出介質的研究。 尤其要注意原研制劑的延遲釋放現(xiàn)象、會導致BE試驗中 的tmax不一致。 日本 在最具區(qū)分力的溶出介質中，還要增加100或200轉比較研究；腸溶制劑還要增加pH6.0溶出介質稀釋5倍后的比對研究。 美國

32、在最具區(qū)分力的溶出介質中，別增加5%、20%和40%有機溶劑溶出介質的測定。 皆是為防止劑量傾斜（dose-dumping）！,某一原研制劑添加不同有機溶劑時的溶出曲線,某一仿制制劑添加不同有機溶劑時的溶出曲線,紅色為原研制劑；藍色為仿制制劑,(1-1) 投樣方式（槳板法） 采用每間隔固定時間（如30秒）投樣。 (1-2) 濾頭/針筒的取用 建議采用“1個濾頭/1個取樣針筒方式”進行多樣品抽取。第1份樣品抽取1020ml后，過濾使濾膜吸附飽和，并將濾液沿溶出杯壁緩慢注回，再抽取所需體積（如HPLC法、12ml即可）即可，其后所有樣品無需再棄去初濾液，直接收集。,如何準確、快捷、高效地測定大批量

33、溶出度樣品,(2) 盡可能采用HPLC法。一者可排除輔料/薄膜衣/腸溶衣/膠囊殼等易對紫外測定產(chǎn)生干擾的情況；二者，由于線性范圍寬，樣品均可直接進樣測定，省略了紫外測定要求吸收度值在0.200.80間、樣品需稀釋的繁瑣步驟，大大提高了工作效率。,如何準確、快捷、高效地測定大批量溶出度樣品,(3-1) 采用短色譜柱 市售有25cm長、粒徑510m的短分析柱、 (3-2) 提高流動相中有機相比例。如此，雖然有雜質與主成分未能分離的擔憂，但考慮到樣品已被稀釋1000倍（溶出介質體積通常為9001000ml），在此條件下，存在的微量雜質響應值已微乎其微，即便有所表現(xiàn)，其影響對于結果而言亦是完全在誤差范

34、圍之內，可忽略不計。,如何準確、快捷、高效地測定大批量溶出度樣品,(4) 柱溫升高至4050。色譜柱最高承受溫度為80，在60以下操作沒有問題。 (5) 流速亦可根據(jù)柱壓提高至1.52.0ml/min。 (6) 進樣量可依據(jù)對照品溶液的精密度予以靈活調節(jié)。100l500l皆可。且對于小規(guī)格制劑，為提高精密度，縮短保留時間，使色譜峰“變細變尖（銳）”更為重要。采用10%溶出量驗證精密度。,如何準確、快捷、高效地測定大批量溶出度樣品,(7) HPLC法測定時取樣量12ml即可。對于小規(guī)格難溶性藥物，可考慮取出后無需過濾，直接置于液相小瓶、放置0.5小時后進樣即可。 因為在取樣點位置處，吸取這么小體

35、積攜帶出輔料的可能性極小，即便有少量存在，靜置后使其沉淀，就不會影響到測定，更不會堵塞色譜柱。 這樣，還可省略去溶出量累積計算的繁瑣以及過濾時濾膜吸附的擔憂，起到“一舉多得、事半功倍”的效果！,如何準確、快捷、高效地測定大批量溶出度樣品,(8) 波長可根據(jù)峰面積，酌情選取末端吸收或非最大吸收波長（詳細講述）。 (9) 如采用超高速液相測定，效果自然更好！但由于色譜柱粒徑較小，樣品液若不過濾，恐堵塞色譜柱，建議試驗時驗證后予以酌情考慮。,如何準確、快捷、高效地測定大批量溶出度樣品,(10)現(xiàn)今市場上主流品牌色譜儀皆已具有數(shù)據(jù)批量處理功能和打印功能（多張圖譜結果打印在一張紙上），將這些功能掌握后一

36、次性編輯好模板，便可大大提高工作效率。 本人曾在20分鐘內完成200個樣品的數(shù)據(jù)處理（得到溶出量），每一溶出量數(shù)據(jù)直接從軟件中拷貝出、粘貼至Excel軟件中、畫出溶出曲線圖的全部過程。 (11) 如何進行累積計算，演示Excel軟件具體實例。,如何準確、快捷、高效地測定大批量溶出度樣品,“日本薬品品質再評価工程” 針對的藥物類型 主要應用于生物藥劑學分類系統(tǒng)里的 和 類藥物。這些類型的藥物目前又多是較為熱門的藥物：如心血管類、抗高血壓、高血脂類。截止2010年2月底、完成了586個品種的溶出度校準曲線繪制工作。 本人已將這些品種編譯完成，交給了國家藥品審評中心，現(xiàn)已作為內部評審資料參照用。本年

37、度藥品審評論壇第二期首次登載了4個品種。,“日本薬品品質再評価工程”的流程 一年34次，一次2030個品種，每次結束后有專門的書籍出版。 原創(chuàng)廠先行測定本廠產(chǎn)品多條溶出曲線，報送給國家；經(jīng)專家與該企業(yè)協(xié)商溝通后確定并予以公布“標準四條溶出曲線” 。 仿制廠家根據(jù)該“曲線”，測定本廠品種，并將資料報送，一致則通過；如不一致將給一定的時間進行制劑工藝的改進。 仍未果、文號撤銷！,伴隨“日本薬品品質再評価工程”應運而生的 日本橙皮書 列舉實例看差距！,卡馬西平片的四條溶出曲線,槳板法、75轉、在四種介質中，5分鐘和30分鐘時分別取樣測定，限度分別為不得過60%和不得少于70%。,2005和2010年

38、版藥典：槳板法、150轉、0.1mol/L鹽酸1000ml、60min、65,公布標準批號的意義,尼群地平片的四條溶出曲線,槳板法、100轉、在四種介質中（其中均含0.15的吐溫-80），45分鐘，限度均為70%,2005和2010年版藥典：槳板法、100轉、0.1mol/L 鹽酸溶液-乙醇(70:30) 900ml，60分鐘，75%,法莫替丁片的四條溶出曲線,“錯落有致”與“溶解度”相一致,闡述仿制藥意義！,奧美拉唑腸溶片四條溶出曲線,pH4.06.0間的研究國內幾乎無人去做！國產(chǎn)腸溶衣缺陷所在。 延遲釋放請注意！,茶 堿 緩 釋 片,槳板法、50轉、在四種介質中,硝 苯 地 平 緩 釋 片

39、,日本藥品品質再評價工程所帶來的意義與影響 極大地促進了日本制藥行業(yè)對制劑工藝的全面深入研究 許多企業(yè)均以有多少個品種被列入?yún)⒈戎苿?、收載于橙皮書而引以為豪， 該項工程的實施對中小企業(yè)帶來了很大的沖擊和觸動。 消除日本藥學人士對仿制藥品質的偏見。,定價原則 參比制劑廠家定價可略高。 溶出儀的市場需求非常旺盛。 企業(yè)內控標準嚴格按照四條溶出曲線要求 制劑專業(yè)人才供不應求，是企業(yè)的“頂梁柱”；也拉動了藥用輔料、制藥機械設備等行業(yè)的發(fā)展。,從國家的角度，大力提倡市場應以技術取勝，一方面在鼓勵仿制、降低藥價、降低國民醫(yī)療費用的的同時，又不降低藥品品質，從而使廣大民眾得以受益，獲得了高品質的藥品，這也自

40、然而然地形成了一個長期的良性循環(huán)！另外，隨著步入老年化社會，更具有應用價值！,日本的仿制藥申報規(guī)定與其后的質量控制 第一步：生產(chǎn)規(guī)模不小于10萬單位或今后最大生產(chǎn)規(guī)模的1/10（評價性抽驗樣品符合這一點）。 第二步：四條溶出曲線與原研制劑（或公布出來）一致。如不一致，根據(jù)不一致的pH值，有針對性地選取BE試驗受試者。（故日本橙皮書中極個別品種有兩套“標準四條溶出曲線”） 第三步：上市后的產(chǎn)品抽查采用多條溶出曲線評價。 【這樣就起到了事半功倍、一針見血的監(jiān)管效果】,“第三條規(guī)定”所帶來的震撼力！ 嚴格控制生產(chǎn)工藝，每批樣品均要保持均一與穩(wěn)定。 批間差異評價：規(guī)定2因子至少大于65。 最終導致“質

41、量源于設計（簡稱QbD ）” 理念形成！ 該規(guī)定如同“緊箍咒”，對企業(yè)生產(chǎn)提出了更高、更嚴謹?shù)囊?！因溶出曲線自該樣品合法誕生之日起，便開始伴隨，其必須保持恒定性與穩(wěn)定性！（講述案例）,“撬動”了整個日本制藥行業(yè)和相關產(chǎn)業(yè)的全面發(fā)展!,對固體制劑溶出度的深入研究和嚴格要求,猶如“四兩撥千斤”,美國FDA/CDER屬下的仿制藥辦公室里的生物等效部，為提高仿制藥的內在品質、強化檢測的各項規(guī)范，也采取額同樣的做法，規(guī)定了一個最能反映內在品質的溶出介質。其出發(fā)點與日本是完全一致的！該工作從2004年初開始，每季度更新一次。（by the Division of Bioequivalence, Offi

42、ce of Generic Drugs. ） 網(wǎng)址：/scripts/cder/dissolution/index.cfm,溶出度技術應用（二）,通過對產(chǎn)品溶出曲線的測定，可以評價出生產(chǎn)工藝過程是否予以了嚴格控制；還可通過批間/批內樣品溶出曲線的比較，考察和辨明這些樣品內在質量是否有所改變。,對于生產(chǎn)工藝穩(wěn)定性、批間/批內樣品內在質量均一性的評價,溶出度技術應用（三）,目前、仿制藥市場蓬勃發(fā)展、方興未艾，同一產(chǎn)品皆有眾多廠家生產(chǎn)。針對這些產(chǎn)品內在品質的差異，亦可通過相互間溶出曲線的測定和比較予以揭示和判斷，因為每一產(chǎn)品皆采用BE/BA試驗

43、來予以評價是不現(xiàn)實的！,對于不同來源同一制劑產(chǎn)品內在品質的評價,溶出度技術應用（四）,在以上各方面、亦可通過測定和比較溶出曲線來判斷流通環(huán)節(jié)樣品、有效期內樣品、市場監(jiān)督樣品內在品質是否發(fā)生變化。 簡述日本國家藥監(jiān)部門的市場監(jiān)督作法。,用于流通環(huán)節(jié)樣品、有效期內樣品、市場監(jiān)督樣品內在品質的評價,溶出度技術應用（五）,體外溶出度試驗還有助于對潛在風險的評價和預測，特別是對治療窗（亦稱“治療指數(shù)”）狹窄藥物的突釋等方面的一些指示作用。 例如：具體講述今年評價性抽驗海南省所負責品種 氨茶堿片情況。,對于“治療窗狹窄”藥物的評價,“治療窗窄”的藥物清單 鹽酸阿普林定、鹽酸異丙腎上腺素、炔雌醇、乙琥胺、卡

44、馬西平、硫酸奎尼丁、硫酸胍乙啶、鹽酸克林霉素、氯硝西泮、鹽酸可樂定、洋地黃毒苷、環(huán)孢素、地高辛、磷酸丙吡胺、唑尼沙胺、他克莫司、西羅莫司、嗎替麥考酚酯、丙戊酸（鈉）、苯妥英、苯巴比妥、鹽酸哌唑嗪、撲米酮、鹽酸普魯卡因胺、甲氨蝶呤、碳酸鋰、華法林（鈉）、格列本脲、甲苯磺丁脲、格列吡脲、醋酸己脲、妥拉磺脲、格列齊特、茶堿、二羥丙茶堿、氨茶堿、膽茶堿、硫酸奧西那林、米諾地爾、雙丙戊酸鈉。,溶出度技術應用（六）,溶出曲線與原研制劑相差甚遠，從而證明其為假藥。 處方工藝中加入表面活性劑，使其迅速溶出，為使“按質量標準檢驗時”溶出度合格。,對于“專業(yè)造假”的甄別,不同“弧度”的多條特定溶出曲線現(xiàn)已成為“剖

45、析”和“肢解”固體制劑內在品質的一種手段、一種外在的表象與投影！,溶出度技術應用（七）,(1) 對于速釋制劑仿制藥的研發(fā)： 當原料藥屬于BCS分類系統(tǒng)第一類藥物時，原研制劑與仿制制劑皆能在多種溶出介質中15分鐘溶出量達85%以上。(2) 在既有大規(guī)格基礎上、增加小規(guī)格制劑： 處方/制劑工藝基本不變，體外溶出曲線一致時，則可減免BE試驗。反之不可、還應進行BE試驗。,對于申請豁免生物等效性 (BE) 試驗的作用,“生物藥劑學（簡稱BCS）分類系統(tǒng)” 第一類藥物：高溶解性 高滲透性 第二類藥物：低溶解性 高滲透性 第三類藥物：高溶解性 低滲透性 第四類藥物：低溶解性 低滲透性 高溶解性藥物：最高劑

46、量規(guī)格的制劑能在pH值1.08.0的250ml或更少體積的水溶液中溶解的藥物。 高滲透性藥物：是指絕對生物利用度超過90%的藥物。 （闡述溶出度試驗與四種藥物的關系、研發(fā)的重點）,申請豁免生物等效性試驗的其他條件 除滿足以上條件外，還應滿足： (1) 該制劑中的輔料量與主藥量相比，不能過大； (2) 且輔料中不能加入表面活性劑； (3) 活性成分應為寬治療指數(shù)藥物； (4) 同一制劑不同規(guī)格的速釋制劑。 洛索洛芬鈉片就是一個很好的例證！,延伸至 質量標準中如何擬定溶出度試驗條件 采用何裝置與溶出介質體積 ？ 片劑 首選 槳板法/50轉 膠囊劑 首選 轉藍法/50轉，如體積過大或粉末過多堵塞網(wǎng)孔

47、，可改為槳板法/50轉、加沉降藍。 溶出介質體積統(tǒng)一采用900ml1000ml。 強烈不建議采用小杯法。,延伸至 質量標準中應采用何介質？ (1) 在該介質中最終溶出量應達85%以上。 (2) 在體內吸收部位的生理pH值。 (3) 建立起體內外相關性的那個介質。 (4) 最有區(qū)分力的介質（對于來源不同的同一制劑）。 (5) 最能反映工藝變化、偏差的那個介質（用于處方變更、生產(chǎn)場地的變更、工藝中關鍵參數(shù)的控制，即現(xiàn)在最耳熟能詳?shù)腝bD理念） (6) 最難溶的、即四條曲線中最低的介質 （用于內控）。,延伸至 質量標準中應采用何介質？ 美國 傾向于不用水，因受pH值影響！ 日本 傾向于用水。 為環(huán)保

48、、節(jié)能、清潔，便于清洗！,延伸至 質量標準中取樣時間點與限度如何擬定？ 對于速釋制劑 以第一次出現(xiàn)溶出量均在85%以上的兩個時間點，且該兩點溶出量差值在5%以內時，取前一個時間點作為質量標準中的取樣時間點，并將該點的溶出量減去15%作為溶出限度，即得！ 國外已開始有兩點法控制。對于治療窗狹窄藥物 / 難溶性藥物 / 需要緩慢釋放等的藥物。增加前一時間點溶出度范圍的要求！,延伸至 質量標準中取樣時間點與限度如何擬定？ 對于緩控釋制劑 溶出度應至少設定三個取樣時間點。第一點是為避免“突釋”，故應設定為試驗12小時后或溶出量相當于標示量2030%時間點； 第二點是為考察藥品溶出特性，該限度應設定在溶

49、出量約50%時間點； 最后一點是為確保藥物（幾乎）定量釋放，通常為藥物溶出量超過80%時間點。 任何一點的擬定范圍建議勿超過標示含量的20%，且各點溶出限度交叉范圍建議勿超過10%，除非體內特征能夠顯示出相應的重現(xiàn)性和可接受性。,質量標準中何時可不擬定溶出度、 而僅采用崩解時限來控制？ 對于可豁免生物等效性試驗的制劑，則可僅制訂崩解時限。,國內前些年現(xiàn)狀,第一個問題：無參比制劑目錄 由于參比制劑目錄尚未擬定，參比制劑選取的混亂性。 體外溶出度比較，通常也只比較一種溶出介質，比較四種介質的研發(fā)企業(yè)幾乎沒有！ 技術門檻的低下、導致仿制藥極易通過藥檢所檢驗與技術審評，最終走向泛濫！,片面地理解溶出度

50、試驗，進入誤區(qū)！ 單純考慮溶出度試驗，認為是孤立存在的！ 試驗條件的確定原則是“溶出度跟著制劑走” 即“片子壓好了，一定能找到一個溶出條件把主成分溶出來”。 而非是“制劑跟著溶出度走”，即“為能符合一個嚴格的溶出度試驗條件，深入地研究制劑工藝”。,緩、控釋制劑的出發(fā)點 要讓它“緩”不難，關鍵是怎樣“緩”！ 選擇什么樣的溶出度試驗參數(shù)最能與體內相關？ 目前一個緩控釋產(chǎn)品，有時就會有多個質量標準，即多個釋放度試驗條件。,目前，國內對釋放度的要求 在前面所述的前提下，還在限度上放寬要求 兩點間交叉過大，導致一些根本不是什么緩控釋的產(chǎn)品，想判定其不合格都“難以下手”?。ㄅc國外質量要求的對比?。?列舉實

51、例。（為降低成本、采用質量差、價格廉的輔料導致釋放度不合格?。?形成了“什么人都能壓片子、什么人都可灌膠囊”的一種現(xiàn)象！ 導致了目前我國制劑工藝的粗制濫造和低水平重復！ 造成了“國內制劑專業(yè)人才無用武之地的尷尬局面”！（相關專業(yè)畢業(yè)生的調查） 打擊了深入研發(fā)企業(yè)的積極性！,GMP已經(jīng)結束?。信e廚房、碗筷和饅頭的例子東瀛期間與在日留學生研討時） “GMP”很大程度上講，是對硬件的要求，與“溶出度試驗，槳板法是50轉能溶出，還是100轉能溶出；是在一種介質能溶出？還是在多種介質中均能溶出”，完全是兩個概念！ “溶出”是專業(yè)知識、專業(yè)技術的比拼，是屬于純“軟件”范疇的。“GMP”是屬于純“硬件”范

52、疇的！ “后GMP時代”我們做些什么？ “含量”沒有任何技術含量！,第二階段 生物等效性試驗 由于沒有強制性要求，參比制劑一般均選用國內某一廠家生產(chǎn)的已上市產(chǎn)品，易于“生物等效”！ 受試者均選用健康、體質非常良好的年輕男性，更易于與參比制劑“一致”，沒有針對性選??！ 所使用的試驗品生產(chǎn)規(guī)模？是大批量生產(chǎn)的？還是實驗室“手工制作”的？甚至是 評價標準要求低、范圍寬，指標少！ 現(xiàn)實情況不允許失?。。I(yè)內“潛規(guī)則”）,上 市 了！ 銷 售 了！ 幾十個廠家生產(chǎn)！低水平惡性競爭，沒有出路！ 無法客觀比較相互品質，只好降價！一降再降！ 片面壓縮生產(chǎn)和人力成本（大批量生產(chǎn)），為流通環(huán)節(jié)騰出“空間”！ 藥品招標官員也無從下手，不知“孰優(yōu)孰劣”！ 不要說不同批號、就是“一板”的6片溶出曲線有時都會差異懸殊。（進口藥品測定數(shù)據(jù)猶如“造假”般良好?。?反正固體制劑“