婦科感染常見(jiàn)病原菌及檢測(cè)方法ppt課件

1、,婦科感染常見(jiàn)病原菌及檢測(cè)方法,1,婦科感染常見(jiàn)疾病,陰道病/陰道炎 尿道炎 子宮頸炎 盆腔感染 子宮內(nèi)膜炎 輸卵管卵巢膿腫 輸卵管炎癥,2,婦科感染實(shí)驗(yàn)室檢查的意義,很多婦科感染癥狀、體征有很多相似之處。臨床診斷本身既不敏感，也不特異。 實(shí)驗(yàn)室診斷可以： 明確病原微生物，使治療更具針對(duì)性； 提高患者治療依從性； 使患者更有可能遵從性伴侶告知。,3,病例一,患者，女性，24歲，已婚，孕25周。外陰瘙癢一周來(lái)就診。婦檢：宮高與妊娠月份相符,外陰潮紅、充血，見(jiàn)大量黃色膿性分泌物。 考慮什么??？進(jìn)一步做什么檢查？,4,陰道炎,正常情況下陰道內(nèi)寄居有大量需氧菌及厭氧菌，形成正常的陰道菌群。 任何原因?qū)?/p>

2、陰道菌群生態(tài)平衡打破，可形成條件致病菌，引起陰道炎。,陰道粘膜生態(tài)系統(tǒng),5,陰道炎,臨床常見(jiàn)有：細(xì)菌性陰道病、念珠菌性陰道炎、滴蟲(chóng)性陰道炎。,吳文湘, 廖秦平. 陰道炎的診治進(jìn)展J. 中國(guó)實(shí)用婦科與產(chǎn)科雜志, 2009(12):949-952.,6,陰道炎相關(guān)病原實(shí)驗(yàn)室檢查,7,病例1,患者，女性，24歲，已婚，孕25周。外陰瘙癢一周來(lái)就診。婦檢：宮高與妊娠月份相符,外陰潮紅、充血，見(jiàn)大量黃色膿性分泌物。,醫(yī)生： 根據(jù)病史及臨床表現(xiàn)可初步診斷為陰道炎。取陰道分泌物拭子，囑病人立即送檢，以明確病原學(xué)診斷。,8,念珠菌性陰道炎,主要病原菌為： 白色假絲酵母菌 約占80%-90% 光滑假絲酵母菌 熱

3、帶假絲酵母菌 近平滑假絲酵母菌,約占10%-20%,9,念珠菌性陰道炎的實(shí)驗(yàn)室診斷,1. pH 4.5,2. 鹽水濕片+10% KOH,3.培養(yǎng),4. DNA雜交探針,10,鹽水濕片和10KOH,檢出孢子及假菌絲即可確診。,11,培養(yǎng),復(fù)發(fā)病例或有癥狀，但鹽水/KOH 鏡檢陰性時(shí)考慮培養(yǎng)。,12,DNA 雜交探針,不需要活的微生物 需要特殊轉(zhuǎn)運(yùn)管 僅針對(duì)白色假絲酵母菌 FDA 批準(zhǔn)僅用于有癥狀女性陰道分泌物,13,細(xì)菌性陰道病(BV),陰道正常菌群（乳酸桿菌）減少，而其他條件致病菌大量繁殖。 主要致病菌有：陰道加德納菌、動(dòng)彎桿菌、普雷沃菌等厭氧菌和支原體等。,Fredricks D N, Fi

4、edler T L, Marrazzo J M. Molecular identification of bacteria associated with bacterial vaginosis.J. New England Journal of Medicine, 2005, 353(353):1899-911.,14,陰道加德納菌,為革蘭陰性或染色不定的球桿菌，有細(xì)胞壁，無(wú)鞭毛，不形成莢膜和芽孢。 兼性厭氧 最適溫度：時(shí)35-37 最適PH：6.0-6.5,15,陰道加德納菌,革蘭染色： 大?。?.5m 1.5 - 2.5m 形態(tài)：具有多形性，呈小桿狀或球狀 排列：呈單個(gè)或成雙排列,16,

5、動(dòng)彎桿菌,為厭氧菌 革蘭陰性弧菌 形態(tài)：呈弧形，兩端尖細(xì) 排列：呈單個(gè)或呈雙排列,17,細(xì)菌性陰道病的實(shí)驗(yàn)室診斷,1. pH 4.5,2. 鹽水濕片+10% KOH,3.定量革蘭染色Nugent評(píng)分,4. DNA雜交探針,線索細(xì)胞,18,鹽水濕片,線索細(xì)胞是診斷BV的最敏感特異的指標(biāo)。,19,胺試驗(yàn),將一滴陰道分泌物滴于玻片上，再加一滴10KOH，可聞到氨味或魚(yú)腥樣氣味，即胺試驗(yàn)陽(yáng)性。,20,定量革蘭染色 Nugent評(píng)分,定量革蘭染色是BV 診斷最特異的檢查。,21,定量革蘭染色 Nugent評(píng)分,乳酸桿菌革蘭染色,22,定量革蘭染色 Nugent評(píng)分,陰道加德納菌革蘭染色,23,定量革蘭染

6、色 Nugent評(píng)分,動(dòng)彎桿菌革蘭染色,24,定量革蘭染色 Nugent評(píng)分,線索細(xì)胞革蘭染色,25,定量革蘭染色 Nugent評(píng)分,分?jǐn)?shù)解釋標(biāo)準(zhǔn)： 0-3 分 正常 4-7 分 中介 7-10 分 細(xì)菌性陰道炎,26,定量革蘭染色 Nugent評(píng)分,乳酸桿菌0分，上皮細(xì)胞周?chē)浅Ｇ宄?評(píng)分：0分,27,定量革蘭染色 Nugent評(píng)分,乳酸桿菌0分，少量雜菌，見(jiàn)白細(xì)胞和菌絲。 評(píng)分：1分 診斷：BV陰性，但診斷為VVC,28,定量革蘭染色 Nugent評(píng)分,乳酸桿菌2分，加德納菌/普雷沃菌等 3分，動(dòng)彎桿菌 1分。 評(píng)分：6分 診斷：BV中間型,29,定量革蘭染色 Nugent評(píng)分,乳酸桿菌

7、3分，加德納菌/普雷沃菌等 3分，動(dòng)彎桿菌 4分。 評(píng)分：10分 診斷：BV,30,陰道毛滴蟲(chóng),陰道的致病性厭氧寄生原蟲(chóng)，蟲(chóng)體為 8-45m，呈梨形或橢圓形，無(wú)色透明，大小為白細(xì)胞的2-3倍。,31,毛滴蟲(chóng)性陰道炎的實(shí)驗(yàn)室診斷,1. pH 4.5,2. 鹽水濕片,3.快速抗原檢查,4. DNA雜交探針,5. 培養(yǎng),6. 核酸擴(kuò)增實(shí)驗(yàn),32,鹽水濕片,33,革蘭染色,34,快速抗原檢查,檢測(cè)陰道毛滴蟲(chóng)特定的抗原 已有商品化試劑 最優(yōu)試驗(yàn)條件并不需要活的微生物,35,培養(yǎng),36,核酸擴(kuò)增試驗(yàn),APTIMA Trichomonas vaginalis (ATV) test（Gen-Probe, In

8、c. San Diego, CA）是近期FDA 批準(zhǔn)的檢查，既可用于女性TV 的篩檢，也可用于診斷。 可以使用多種標(biāo)本類型。 一些實(shí)驗(yàn)室也可通過(guò)比對(duì)，驗(yàn)證自己的PCR方法。,37,病例二,患者，女性，40歲，已婚，陰道分泌物增多，伴腰酸，偶有性生活后出血2年。檢查外陰正常，宮頸肥大，度糜爛，接觸性出血。 考慮什么病？進(jìn)一步做什么檢查？,38,子宮頸炎,子宮頸可因各種致病因素的侵襲而發(fā)生炎癥，有急性和慢性兩種。,39,尿道炎,是指尿道黏膜的炎癥 。多為致病菌逆行侵入尿道引起。,40,尿道炎/宮頸炎相關(guān)病原實(shí)驗(yàn)室檢查,41,尿道炎/宮頸炎相關(guān)病原實(shí)驗(yàn)室檢查,42,病例二,患者，女性，40歲，已婚，

9、陰道分泌物增多，伴腰酸，偶有性生活后出血2年。檢查外陰正常，宮頸肥大，度糜爛，接觸性出血。,醫(yī)生：根據(jù)臨床表現(xiàn)初步診斷為宮頸炎。取宮頸內(nèi)拭子，囑病人立即送檢（注意保溫），以明確感染病原體。,43,淋病奈瑟菌,革蘭染色 為革蘭陰性雙球菌，似腎形或咖啡豆?fàn)睿３呻p排列，凹面相對(duì)。 急性淋病患者的淋球菌常被吞噬于中性粒細(xì)胞內(nèi)；慢性淋病患者的淋球菌多分布在細(xì)胞外。 簡(jiǎn)便、快速，可做出初步診斷。僅對(duì)男性患者進(jìn)行涂片革蘭染色。,44,淋病奈瑟菌,細(xì)胞內(nèi)革蘭陰性雙球菌 對(duì)GC 特異性達(dá)95,細(xì)胞外革蘭陰性雙球菌 對(duì)GC 特異性達(dá)10-29,45,培養(yǎng),診斷淋病的重要手段 接種到選擇培養(yǎng)基，置于36、含5-1

10、0% CO2 ，濕潤(rùn)環(huán)境中培養(yǎng)。 如果床邊直接接種標(biāo)本到選擇培養(yǎng)基，加CO2 藥片形成氣體環(huán)境，培養(yǎng)敏感性會(huì)更好。,46,培養(yǎng),初代培養(yǎng)生長(zhǎng)緩慢，24小時(shí)后可形成灰色/濕潤(rùn)、半透明的小菌落（直徑0.5-1mm）。 氧化酶陽(yáng)性、觸酶陽(yáng)性、葡萄糖產(chǎn)酸試驗(yàn)陽(yáng)性且僅分解利用葡萄糖。,圖片by陳東科,47,核酸擴(kuò)增試驗(yàn),已有商品化試劑盒。 優(yōu)點(diǎn)是快速、準(zhǔn)確，缺點(diǎn)是試驗(yàn)設(shè)備要求高。 淋病奈瑟菌DNA 在感染成功治療后，在標(biāo)本中仍可保留3周之久，所以不能作為治療評(píng)估指標(biāo)。,48,雜交探針,目前FDA 已有批準(zhǔn)的GC的雜交試驗(yàn)試劑盒。 不可針對(duì)尿標(biāo)本。,49,病例三,病人，女，24歲，主訴為持續(xù)3天的輕度排尿

11、困難，化膿性陰道分泌物，發(fā)熱，并伴有中度的雙側(cè)下腹痛。查體：子宮和附件壓痛，化膿性宮頸分泌物。 考慮什么病？進(jìn)一步做什么檢查？,50,盆腔炎,盆腔炎癥性疾病是女性上生殖道一系列疾病的總稱。 包括： 子宮內(nèi)膜炎 輸卵管卵巢膿腫 輸卵管炎癥 盆腔腹膜炎,51,盆腔炎致病菌,盆腔炎,外源性病原體,內(nèi)源性病原體,主要為性傳播疾病病原體：淋病奈瑟菌、沙眼衣原體、支原體等,來(lái)自于原寄生于陰道的正常菌群，包括：需氧菌和厭氧菌,52,內(nèi)源性病原體,需氧菌及兼性厭氧菌： 金黃色葡萄球菌、鏈球菌、大腸埃希菌、 陰道加德納菌等 厭氧菌： 脆弱擬桿菌、消化鏈球菌、普雷沃菌、真桿菌等 感染特點(diǎn)：容易形成盆腔膿腫、感染性

12、血栓靜脈炎，膿液有糞臭并有氣泡,53,盆腔炎相關(guān)病原實(shí)驗(yàn)室檢查,54,病例三,病人，女，24歲，主訴為持續(xù)3天的輕度排尿困難，化膿性陰道分泌物，發(fā)熱，并伴有中度的雙側(cè)下腹痛。查體：子宮和附件壓痛，化膿性宮頸分泌物。,醫(yī)生：根據(jù)臨床表現(xiàn)初步診斷為急性盆腔炎。進(jìn)一步送檢至少一套血培養(yǎng)，抽取膿腫置于厭氧容器盡快送檢，并取宮頸內(nèi)拭子送檢，必要時(shí)取子宮內(nèi)膜活檢，以明確感染病原體。,55,盆腔炎相關(guān)厭氧菌培養(yǎng)流程,分離培養(yǎng),挑取菌落,需氧培養(yǎng),厭氧培養(yǎng),厭氧培養(yǎng),生長(zhǎng),不生長(zhǎng),生長(zhǎng),專性厭氧菌：做第二次耐氧試驗(yàn),形態(tài)染色 菌落特征 生化反應(yīng) 藥敏鑒定 氣相色譜,厭氧（+）,需氧（-）,兼性厭氧菌,標(biāo)本,肉

13、眼觀察 染色鏡檢,56,直接涂片染色鏡檢,在接種時(shí)做涂片，革蘭染色并鏡檢： 觀察膿細(xì)胞的有無(wú)及特殊情況，細(xì)菌與細(xì)胞之間的相關(guān)性。 觀察有無(wú)細(xì)菌，微生物的類型和大概的數(shù)量以及有無(wú)芽孢、形狀和位置、著色及菌體特征。 大致推斷微生物的種類，如梭菌、放線菌、擬桿菌、消化球菌和消化鏈球菌等。,57,常見(jiàn)盆腔炎相關(guān)厭氧菌形態(tài)特征,擬桿菌、普雷沃菌屬,產(chǎn)氣莢膜梭菌，破傷風(fēng)梭菌,雙歧桿菌屬，真桿菌屬 乳酸桿菌屬，放線菌屬,消化鏈球菌屬，消化球菌屬,58,常見(jiàn)盆腔炎相關(guān)厭氧菌形態(tài)特征,革蘭陰性桿菌，兩端鈍圓著色深，中間著色淺不均勻，且有空泡，長(zhǎng)短不一擬桿菌,59,常見(jiàn)盆腔炎相關(guān)厭氧菌形態(tài)特征,革蘭陽(yáng)性粗短兩端鈍圓桿菌，無(wú)芽孢，中性粒細(xì)胞也很少且變形破碎，標(biāo)本來(lái)自戰(zhàn)傷或肢體嚴(yán)重腫脹者產(chǎn)氣莢膜梭菌,60,常見(jiàn)盆腔炎相關(guān)厭氧菌形態(tài)特征,革蘭陽(yáng)性桿菌，菌體有分枝，呈棒狀或柵狀排列放線菌,61,革蘭陰性厭氧菌鑒定（CLSI M35-A2）,62,