《紅托竹蓀固體菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程》編制說(shuō)明（征求意見稿）

1、紅托竹蓀固體菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程 編制說(shuō)明一、制定本標(biāo)準(zhǔn)的必要性及意義1、建立紅托竹蓀固體菌種標(biāo)準(zhǔn)化示范點(diǎn)通過(guò)建立紅托竹蓀固體菌種生產(chǎn)技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)，為貴州省紅托竹蓀生產(chǎn)提供技術(shù)支撐。2、規(guī)范紅托竹蓀固體菌種生產(chǎn)技術(shù)3、提高紅托竹蓀固體菌種質(zhì)量二、任務(wù)來(lái)源及起草單位1、任務(wù)來(lái)源2019年貴州省農(nóng)業(yè)地方標(biāo)準(zhǔn)制定和修訂項(xiàng)目。2、主要起草單位及起草小組成員主要起草單位：貴州大學(xué)、貴州織金毫米農(nóng)業(yè)科技發(fā)展有限公司、貴州省食用菌工程中心、貴州省果蔬工作站、畢節(jié)市場(chǎng)監(jiān)管局、織金縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局。三、起草本標(biāo)準(zhǔn)的主要原則與依據(jù)1. 主要原則本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T 1.1-2009標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則 第1部分：標(biāo)準(zhǔn)的結(jié)構(gòu)和編寫起草

2、。 2. 起草本標(biāo)準(zhǔn)的依據(jù)目前，國(guó)內(nèi)有“NY/T 836-2004 竹蓀”、并且浙江、福建、廣西、海南已經(jīng)制定并頒布實(shí)施了浙江省地方標(biāo)準(zhǔn)“DB33/T20732017竹蓀生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程”、福建省地方標(biāo)準(zhǔn)“DB35/T12682012竹蓀栽培技術(shù)規(guī)范”、廣西壯族自治區(qū)地方標(biāo)準(zhǔn)“DB45/T 1566-2017竹蓀生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程”、海南省地方標(biāo)準(zhǔn)“DB46/T4052016竹蓀栽培技術(shù)規(guī)程”和麗水市地方標(biāo)準(zhǔn)“DB 3311/T69-2017錐（板）栗林下棘托竹蓀栽培技術(shù)規(guī)程”這些標(biāo)準(zhǔn)適用于人工栽培的長(zhǎng)裙竹蓀(Dictyophora indusiata)、短裙竹蓀(Dictyophora duplica

3、ta)、棘托竹蓀(Dictyophora echinouoluata)種植技術(shù)，僅有“NY/T 836-2004 竹蓀”提到紅托竹蓀(Dictyophora rubroualuata)干品。紅托竹蓀（Dictyophra rubrovolvata ）,又名織金竹蓀，原產(chǎn)于黔西北烏蒙山區(qū),大型真菌，是食用竹蓀的一個(gè)種，屬腹菌綱鬼筆目鬼筆科竹蓀屬，是寄生在枯竹根部的一種隱花菌類?？椊鹂h1986年首先人工馴化栽培紅托竹蓀成功，織金竹蓀于2010年獲得“國(guó)家地理標(biāo)志產(chǎn)品”，織金縣是紅托竹蓀的主產(chǎn)區(qū)、產(chǎn)品集散地、菌種主要供應(yīng)地。迄今，我國(guó)還沒有一個(gè)省、市制定紅托竹蓀大棚生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程和林下栽培技術(shù)規(guī)程。目

4、前我省在紅托竹蓀栽培的生產(chǎn)中，參照?qǐng)?zhí)行的是“NY/T 836-2004 竹蓀”和“NY/T528-2002 食用菌菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程 行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)”等相關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)。這些標(biāo)準(zhǔn)由于是針對(duì)長(zhǎng)裙竹蓀、短裙竹蓀、棘托竹蓀和浙江、福建等地區(qū)氣候環(huán)境條件而制定，因此與我省紅托竹蓀生物學(xué)特性及栽培的生產(chǎn)實(shí)際情況差異較大，其應(yīng)用指導(dǎo)性不具體，針對(duì)性不強(qiáng)。四、標(biāo)準(zhǔn)編制的主要工作過(guò)程1、前期工作 1.1 實(shí)地調(diào)研考察織金縣紅托竹蓀制種、栽培種植基地建設(shè)和管理情況，了解織金竹蓀菌種分離培養(yǎng)、制種、菌種保存、產(chǎn)品銷售供應(yīng)以及檔案管理等情況。 1.2收集資料收集與織金竹蓀有關(guān)的國(guó)家、行業(yè)、地方標(biāo)準(zhǔn)，以及現(xiàn)有管理制度、職能職責(zé)等相

5、關(guān)資料。1.3 構(gòu)建竹蓀一級(jí)種、二級(jí)種和三級(jí)菌種制種標(biāo)準(zhǔn)框架根據(jù)織金竹蓀的生產(chǎn)特點(diǎn)，按實(shí)際情況構(gòu)建織金竹蓀菌種標(biāo)準(zhǔn)明細(xì)表，組織領(lǐng)導(dǎo)小組成員及相關(guān)企業(yè)人員對(duì)標(biāo)準(zhǔn)框架進(jìn)行討論，明確標(biāo)準(zhǔn)明細(xì)表的具體內(nèi)容，對(duì)缺失標(biāo)準(zhǔn)制定標(biāo)準(zhǔn)制定計(jì)劃。2、起草文本文本起草人按照GB/T 1.12009標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第一部分：標(biāo)準(zhǔn)的結(jié)構(gòu)與編寫規(guī)則所規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)編寫要求和格式起草“貴州省紅托竹蓀種植技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)”文本。3、形成征求意見稿起草人組織編寫小組人員對(duì)初稿進(jìn)行逐條討論和修改，形成紅托竹蓀固體菌種生產(chǎn)技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)征求意見稿。五、本標(biāo)準(zhǔn)的主要內(nèi)容1、本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的內(nèi)容及適用范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了紅托竹蓀固體菌種生產(chǎn)、菌種質(zhì)量鑒定、菌種保

6、存等內(nèi)容。2、 技術(shù)依據(jù)2.1 紅托竹蓀菌種生產(chǎn)產(chǎn)地環(huán)境質(zhì)量條件、灌溉水質(zhì)量等技術(shù)指標(biāo)的確定是根據(jù)“NY 5010-2002 無(wú)公害食品 蔬菜產(chǎn)地環(huán)境條件”。 2.2 竹蓀菌種的生產(chǎn)是根據(jù)“NY/T 528-2002 食用菌菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程 行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)”。 2.3 竹蓀菌種培養(yǎng)基基質(zhì)的種類及要求根據(jù)“NY5099-2002 無(wú)公害食品食用菌栽培基質(zhì)安全技術(shù)要求”。2.4 菌種培養(yǎng)基添加劑種類及要求根據(jù)“GB2760 食品添加劑使用衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)”。2.5 病蟲害防治所用的農(nóng)藥、方法是根據(jù)“GB4285 農(nóng)藥安全使用標(biāo)準(zhǔn)”、“GB/T8321 農(nóng)藥合理使用準(zhǔn)則”和NY 5010-2002 無(wú)公害食品蔬菜

7、產(chǎn)地環(huán)境條件中華人民共和國(guó)國(guó)務(wù)院令第216號(hào)發(fā)布的中華人民共和國(guó)農(nóng)藥管理?xiàng)l例。2.6 根據(jù)貴州省的氣候、土壤、栽培基質(zhì)（栽培主料、輔料）條件，栽培季節(jié)、菌種制作季節(jié)、菌種培養(yǎng)基基質(zhì)選擇與處理、病蟲害防治、保存等技術(shù)指標(biāo)的確定采用了以下項(xiàng)目科技成果與技術(shù)：（1）“國(guó)家科技部農(nóng)業(yè)科技成果轉(zhuǎn)化資金項(xiàng)目（2013GB2F00435）-織金竹蓀產(chǎn)業(yè)化技術(shù)研究成果熟化與栽培推廣應(yīng)用”項(xiàng)目研究的技術(shù)成果（主持人：張林，2013年）。（2）“黔科合NZ20133010號(hào)-織金縣竹蓀不同溫型品種選育及周年生產(chǎn)技術(shù)研究與示范” 項(xiàng)目研究的技術(shù)成果（主持人：王波，2013年）。（3）“黔科合農(nóng)G字20134008號(hào)

8、-織金縣蔬菜（竹蓀）科技示范園區(qū)”項(xiàng)目研究的技術(shù)成果（主持人：趙小平，2013年）。（4）黔科合重大專項(xiàng)字 20116021號(hào)子課題-畜糞、沼液沼渣資源化利用與糧、菜（菇）優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)技術(shù)集成與示范（主持人：徐彥軍，2011年）。（5）“黔科合成轉(zhuǎn)字2014 5210-竹蓀綠色高效生產(chǎn)技術(shù)集成與產(chǎn)業(yè)化”項(xiàng)目研究的技術(shù)成果（主持人：趙小平，2014年）。2.7 在病蟲害控制方面強(qiáng)調(diào)應(yīng)用了綜合防治技術(shù)和其它綠色控制技術(shù)，保證了產(chǎn)品質(zhì)量衛(wèi)生安全。3 菌種生產(chǎn)技術(shù)3.1 一級(jí)種生產(chǎn)技術(shù)3.1.1試管培養(yǎng)基制備3.1.1.1瓊脂斜面培養(yǎng)基：葡萄糖20g，瓊脂20g，磷酸二氫鉀2g，硫酸鎂0.5g，碳酸鈣3g

9、，竹蓀煮出液1000mL，pH值5.5-6.5。3.1.1.2木屑固體培養(yǎng)基：鋸木屑（細(xì)）65%80%，麥麩15%25%，玉米面5%10%，黃豆面1%5%，糖1%2%，石膏1%2%，磷酸二氫鉀0.1%0.5%，硫酸鎂0.1%0.5%，料水比1:1.31:1.5，pH值5.5-6.5。每支試管裝培養(yǎng)基15g20g，用木片壓成斜面，斜面高度不超過(guò)試管的四分之三，壓實(shí)。培養(yǎng)基質(zhì)量安全符合NY/T 1935規(guī)定3.1.2滅菌：使用高壓蒸汽滅菌，先排除冷空氣，在0.11Mpa0.13Mpa下保持3040min。3.1.3種菇組織分離選取七至八成熟，質(zhì)量 50g 以上竹蓀菌蛋，將菌蛋放于0.1%高錳酸鉀和

10、0.1%二氯異氰尿酸鈉混合溶液清洗干凈，再浸泡2 min，以菌蛋內(nèi)部菌肉作為組織分離材料；將竹蛋剖成兩半，用刀尖將竹蛋中間白色菌柄切開，分成815mm大小的塊，用鑷子輕挑菌肉塊。放置于離試管底部45cm的地方，輕壓使菌塊緊貼培養(yǎng)基，塞回棉塞，移至培養(yǎng)室在25左右，避光培養(yǎng)。3.1.4 檢查3 天后檢查感染情況，凡生長(zhǎng)過(guò)快（菌塊單一一端10d生長(zhǎng)超過(guò)20mm的）和感染的全部剔除。3.2 二級(jí)種、三級(jí)種生產(chǎn)技術(shù)3.2.1二級(jí)種培養(yǎng)基制備二級(jí)種培養(yǎng)基配方：以小麥粒質(zhì)量為100%，碳酸鈣占麥粒質(zhì)量的2.5%，葡萄糖占2.5%，三十烷醇1mg/kg，含水量60%，pH值67，每瓶干樣質(zhì)量150g。二級(jí)種

11、采用500ml玻璃瓶，瓶塞采用乳膠塞，塞底打孔，瓶塞內(nèi)部使用棉花填塞。玻璃瓶裝填250g30g培養(yǎng)料，松緊適度，瓶口清洗干凈，用10cm15cm接種棒打孔，塞上乳膠塞。3.2.2三級(jí)種培養(yǎng)基制備三級(jí)種培養(yǎng)基配方：（1）木屑（樺樹）78%，白糖1%，石膏1%，麥麩19.8%，磷酸二氫鉀0.1%，硫酸鎂0.1%，三十烷醇1mg/kg，pH值67，料水比1:1.5。（2）木屑65%80%，麥麩15%25%，玉米面1%5%，黃豆面1%5%，白糖1%2%，石膏1%2%，磷酸二氫鉀0.1%0.5%，硫酸鎂0.1%0.5%，pH值67，料水比1:1.5。三級(jí)種采用采用140mm170mm300mm400mm

12、0.05mm0.08mm聚丙烯袋裝填培養(yǎng)料，使用2.5cm3.8cm套環(huán)和蓋體密封，每袋裝填650g1250g培養(yǎng)料，高度12cm20cm，松緊適度，用12cm20cm接種棒打孔，套上套環(huán)，蓋緊蓋體。二級(jí)種和三級(jí)種培養(yǎng)基，質(zhì)量安全符合NY/T 1935規(guī)定。3.2.3滅菌采用高壓蒸汽滅菌，溫度達(dá)121，壓力達(dá)0.1,5Mpa下計(jì)時(shí)，二級(jí)種和三級(jí)種培養(yǎng)基滅菌120min180min。3.2.4 接種、培養(yǎng)3.2.4.1二級(jí)種接種：待二級(jí)種培養(yǎng)料冷卻至 30以下，放入接種箱或超凈工作臺(tái)。按照無(wú)菌操作，將試管中的一級(jí)種劃分6等分，在二級(jí)種培養(yǎng)基中，每瓶接入1/4一級(jí)種。右手小指和無(wú)名指與手掌夾住乳膠

13、塞拔出，取出接種棒，將菌種塊從底往上接。接種完畢，蓋回蓋體。將二級(jí)種瓶轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)室，控制溫度25左右，相對(duì)濕度65%-70%，避光培養(yǎng)。3.2.4.2三級(jí)種接種：待三級(jí)種培養(yǎng)料冷卻至 30以下，放入接種箱或超凈工作臺(tái)。按照無(wú)菌操作，右手小指和無(wú)名指與手掌夾住蓋體，拔出，取出接種棒，用鑷子將菌種掰成1cm1.5cm大小、長(zhǎng)度不限的塊，從菌袋料孔底部往上接，頂部用大塊菌塊封口，菌種量占培養(yǎng)基3%6%。接種完畢，蓋回蓋體。將三級(jí)種瓶轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)室，控制溫度25左右，相對(duì)濕度65%-70%，避光培養(yǎng)。3.3菌種保存菌絲長(zhǎng)滿，應(yīng)放置24低溫環(huán)境中保存。六、與現(xiàn)行相關(guān)法律、法規(guī)、規(guī)章及相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，特別是強(qiáng)制性

14、標(biāo)準(zhǔn)的協(xié)調(diào)性本標(biāo)準(zhǔn)主要是根據(jù)研究與實(shí)踐，對(duì)紅托竹蓀生產(chǎn)關(guān)鍵技術(shù)集成提煉而制訂，引用的相關(guān)資料都是來(lái)源于公開發(fā)表的論文或?qū)Ｖ?，不涉及專利及知識(shí)產(chǎn)權(quán)問題，與現(xiàn)行相關(guān)法律、法規(guī)、規(guī)章及相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，特別是強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)無(wú)沖突，并可與現(xiàn)有標(biāo)準(zhǔn)配合應(yīng)用。七、與國(guó)外同類標(biāo)準(zhǔn)水平的對(duì)比分析1、本標(biāo)準(zhǔn)的制定采用了上述科技項(xiàng)目自主開發(fā)的最新科研成果技術(shù)，其生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程中的重要關(guān)鍵技術(shù)先進(jìn)，在菌種生產(chǎn)措施上比“DB33/T20732017竹蓀生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程”、“DB35/T12682012竹蓀栽培技術(shù)規(guī)范”、“DB45/T 1566-2017竹蓀生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程”、“DB46/T4052016竹蓀栽培技術(shù)規(guī)程”更結(jié)合貴州紅托竹

15、蓀栽培實(shí)際情況。2、本標(biāo)準(zhǔn)的制定充分考慮了紅托竹蓀菌種生產(chǎn)的產(chǎn)地環(huán)境、栽培基質(zhì)、菌種制作季節(jié)、菌種制作技術(shù)、培養(yǎng)管理、菌種保存、病蟲害防治等基礎(chǔ)條件，標(biāo)準(zhǔn)具有明顯的區(qū)域特色。3、考慮到為生產(chǎn)單位和農(nóng)民節(jié)省成本、增加經(jīng)濟(jì)收入及保護(hù)環(huán)境，生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程采用了“國(guó)家科技部農(nóng)業(yè)科技成果轉(zhuǎn)化資金項(xiàng)目（2013GB2F00435）-織金竹蓀產(chǎn)業(yè)化技術(shù)研究成果熟化與栽培推廣應(yīng)用”、“黔科合NZ20133010號(hào)-織金縣竹蓀不同溫型品種選育及周年生產(chǎn)技術(shù)研究與示范” 、“黔科合農(nóng)G字20134008號(hào)-織金縣蔬菜（竹蓀）科技示范園區(qū)”、“黔科合成轉(zhuǎn)字2014 5210-竹蓀綠色高效生產(chǎn)技術(shù)集成與產(chǎn)業(yè)化”項(xiàng)目科研

16、成果中的充分利用本地菌材生產(chǎn)紅托竹蓀技術(shù)，其技術(shù)指標(biāo)體現(xiàn)出資源節(jié)約增效和生態(tài)和諧的特色。八、本標(biāo)準(zhǔn)的預(yù)期社會(huì)、經(jīng)濟(jì)效益在市場(chǎng)需求量大、對(duì)竹蓀產(chǎn)品質(zhì)量要求高的前提下，建立織金竹蓀種植技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)，可以為區(qū)域內(nèi)種植企業(yè)或農(nóng)戶提供系統(tǒng)的標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)支持，從而提升織金竹蓀菌種質(zhì)量?？椊鹬裆p（紅托竹蓀）作為我省最具本土特色和優(yōu)勢(shì)的食用菌品種，其產(chǎn)業(yè)優(yōu)勢(shì)日益顯現(xiàn)，種植區(qū)域已從原來(lái)的主產(chǎn)區(qū)織金縣擴(kuò)展至周邊縣區(qū)及省內(nèi)興義、六盤水、安順、遵義、凱里等市州，以及相鄰云南省昭通、曲靖、紅河州部分縣區(qū)、重慶市部分縣區(qū)。目前省內(nèi)紅托竹蓀年種植面積約1.5萬(wàn)畝（主產(chǎn)區(qū)織金縣、興仁市、安龍縣），年產(chǎn)干竹蓀約1500噸，產(chǎn)值約10億

17、元以上；年產(chǎn)銷菌種約2000萬(wàn)袋（棒），產(chǎn)值約1.1億元；產(chǎn)業(yè)從業(yè)人數(shù)約5萬(wàn)人。產(chǎn)品30銷往國(guó)內(nèi)大中城市，70左右出口香港、臺(tái)灣東南亞各國(guó)。由于長(zhǎng)期以來(lái)缺乏統(tǒng)一、規(guī)范的種植技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)，產(chǎn)品質(zhì)量得不到有效控制，導(dǎo)致產(chǎn)品對(duì)歐美、日本等發(fā)達(dá)市場(chǎng)的出口基本為零。而近年來(lái)紅托竹蓀產(chǎn)品市場(chǎng)需求急劇擴(kuò)大，價(jià)格快速上漲，每年國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)需求紅托竹蓀干品可達(dá)3000-5000噸以上，鮮品可達(dá)1萬(wàn)噸以上，市場(chǎng)缺口很大。為滿足日益增長(zhǎng)的市場(chǎng)需求，促進(jìn)紅托竹蓀對(duì)發(fā)達(dá)地區(qū)市場(chǎng)的出口，實(shí)現(xiàn)更大產(chǎn)業(yè)經(jīng)濟(jì)發(fā)展和效益，制訂紅托竹蓀菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程省級(jí)地方標(biāo)準(zhǔn)，在生產(chǎn)實(shí)際中示范推廣使用標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)紅托竹蓀產(chǎn)業(yè)發(fā)展具有重要意義。九、貫徹實(shí)施本標(biāo)準(zhǔn)的建議和意見本標(biāo)準(zhǔn)可以作為“推薦性地方標(biāo)準(zhǔn)”在從事紅托竹蓀菌種生產(chǎn)的企業(yè)、合作社及個(gè)體戶中推介應(yīng)用。要使本標(biāo)準(zhǔn)得以順利實(shí)施，建議相關(guān)行業(yè)主管部門加強(qiáng)引導(dǎo)、推廣部門廣泛宣傳，以提高本標(biāo)準(zhǔn)的應(yīng)用普及率。增強(qiáng)執(zhí)行紅托竹蓀菌種生產(chǎn)技術(shù)對(duì)菌種質(zhì)量影響的認(rèn)識(shí)，提高紅托竹蓀菌種生產(chǎn)技術(shù)水平，充分發(fā)揮本標(biāo)準(zhǔn)持久效益，真正達(dá)到提高紅托竹蓀菌種質(zhì)量和促進(jìn)紅托竹蓀生產(chǎn)產(chǎn)業(yè)化的目的。十、重大意見分歧的處理依據(jù)和結(jié)果1、織金縣竹蓀產(chǎn)業(yè)辦公室和織金縣果蔬協(xié)會(huì)在多年實(shí)施竹蓀