GB 5009.121-2016 食品安全國家標準 食品中脫氫乙酸的測定

016 前 言本標準代替003食品中脫氫乙酸的測定。本標準與003相比,主要變化如下:標準名稱修改為“食品安全國家標準 食品中脫氫乙酸的測定”;增加液相色譜法;液相色譜法采用233772009的方法;增加試樣分類;改進氣相色譜法中樣品的制備和提取方法;修改氣相色譜法的色譜條件。0161 食品安全國家標準食品中脫氫乙酸的測定1 范圍本標準規(guī)定了果蔬汁、果蔬漿、醬菜、發(fā)酵豆制品、黃油、面包、糕點、烘烤食品餡料、復合調味料、預制肉制品及熟肉制品中脫氫乙酸含量的測定方法。本標準適用于果蔬汁、果蔬漿、醬菜、發(fā)酵豆制品、黃油、面包、糕點、烘烤食品餡料、復合調味料、預制肉制品及熟肉制品中脫氫乙酸含量的測定,其他食品可參考執(zhí)行。第一法 氣相色譜法2 原理固體(半固體)樣品,沉降蛋白、經脫脂酸化后,用乙酸乙酯提取;果蔬汁、果蔬漿樣品經酸化后,用乙酸乙酯提取;用配氫火焰離子化檢測器的氣相色譜儀分離測定,以色譜峰的保留時間定性,外標法定量。3 試劑和材料除非另有說明,本方法所用試劑均為分析純,水為6682規(guī)定的二級水。酸乙酯(色譜純。己烷(色譜純。酸(酸鋅(氧化鈉(酸溶液(1+1,體積比):量取50 硫酸鋅溶液(120g/L):稱取12于水并稀釋至100 氫氧化鈉溶液(20g/L):稱取2于水并稀釋至100準品脫氫乙酸(820準品:純度氫乙酸標準貯備液(100乙酸乙酯溶解并定容。4保存,有效期為3個月。0162 氫乙酸標準工作液:乙酸乙酯稀釋并定容,00g/00g/保存,有效期為1個月。4 相色譜儀,配氫火焰離子化檢測器。平:心機:轉速4000r/聲波清洗器:功率35碎機。銹鋼高速均質器。4.7 蔬汁、果蔬漿:稱取樣品2g5g(置于50101)酸化后,搖提取2置分層,取上清液供氣相色譜測定。菜、發(fā)酵豆制品:樣品用不銹鋼高速均質器均質。稱取樣品2g5g(置于50入約15),用氫氧化鈉溶液(聲提取15移至25水定容。樣液移入離心管中,4000r/101)酸化后,搖2置分層,取上清液供氣相色譜測定。包、糕點、烘烤食品餡料、復合調味料、預制肉制品及熟肉制品:樣品用粉碎機粉碎或不銹鋼高速均質器均質。稱取樣品2g5g(置于50入約15),用氫氧化鈉溶液(聲提取15移至25水定容。樣液移入分液漏斗中,加入5搖1置分層,取下層水相置于離心管中,4000r/101)酸化后,搖2置分層,取上清液供氣相色譜測定。油:稱取樣品2g5g(置于50入約15),用氫氧化鈉溶液(聲提取15移至25水定容。樣液移入分液漏斗中,加入5搖1置分層,取下層水相置于離心管中,4000r/101)酸化后,搖2置分層,取上清液供氣相色譜測定。細管柱:極性毛細柱(化學鍵和聚乙二醇固定相,30m或相當者。溫升溫程序:初溫150,以10/20/保持2 進樣口溫度:240。測器溫度:300。0163 氣(量: 分流進樣,分流比為51,準曲線的制作將脫氫乙酸標準工作液(別注入氣相色譜儀中,測定相應峰面積,以標準工作液的濃度為橫坐標,峰面積為縱坐標,繪制標準曲線。(脫氫乙酸標準色譜圖見附錄A)。定將測定溶液注入氣相色譜儀中,以保留時間定性,同時記錄峰面積,根據標準曲線得到測定溶液中的脫氫乙酸濃度。白試驗除不加試樣外,空白試驗應與樣品測定平行進行,并采用相同的分析步驟分析。6 分析結果的表述果蔬汁、果蔬漿試樣中脫氫乙酸含量按式(1)計算:V1000m10001000(1)其他試樣中脫氫乙酸含量按式(2)計算:1000m0001000(2)式中:試樣中脫氫乙酸的含量,單位為克每千克(g/試樣溶液中脫氫乙酸的質量濃度,單位為微克每毫升(g/空白試樣溶液中脫氫乙酸的質量濃度,單位為微克每毫升(g/V乙酸乙酯定容體積,單位為毫升(m稱取試樣的質量,單位為克(g);試樣中脫氫乙酸的含量,單位為克每千克(g/試樣處理后定容體積,單位為毫升(萃取脫氫乙酸所取試樣液體積,單位為毫升(計算結果以重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的算術平均值表示,結果保留三位有效數字。7 精密度在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不得超過算術平均值的10%。8 00g/蔬汁、果蔬漿取樣量5g,他試樣取樣量5g,樣液定容體積25100164 第二法 液相色譜法9 原理用氫氧化鈉溶液提取試樣中的脫氫乙酸,經脫脂、去蛋白處理,過膜,用配紫外或二極管陣列檢測器的高效液相色譜儀測定,以色譜峰的保留時間定性,外標法定量。10 試劑和材料除非另有說明,本方法所用試劑均為分析純,水為6682規(guī)定的一級水。醇(色譜純。酸銨(優(yōu)級純。氧化鈉(己烷(酸(酸鋅(酸銨溶液():于水并稀釋至1L。氧化鈉溶液(20g/L):稱取20于水并稀釋至1L。酸溶液(10%):量取10水90勻。酸鋅溶液(120g/L):稱取120于水并稀釋至1L。醇溶液(70%):量取70水30勻。準品脫氫乙酸(820準品:純度氫乙酸標準貯備液(10010解,用水定容。4保存,有效期為3個月。氫乙酸標準工作液:00水定容。00g/00g/保存,有效期為1個月。11 效液相色譜儀:配有紫外檢測器或二極管陣列檢測器。析天平:碎機。0165 銹鋼高速均質器。聲波清洗器:功率35旋混合器。心機:轉速4000r/1.8 18固相萃取柱:500用前用50柱子保持濕潤狀態(tài))。12 蔬汁、果蔬漿:稱取樣品2g5g(置于50入約10氫氧化鈉溶液(移至50水稀釋至刻度,搖勻。置于離心管中,4000r/20甲酸溶液(容到2555甲醇溶液(脫,收集洗脫液2旋混合,高效液相色譜測定。菜、發(fā)酵豆制品:樣品用不銹鋼高速均質器均質。稱取樣品2g5g(置于25入約10用氫氧化鈉溶液(移至25水稀釋至刻度,搖勻。置于25聲提取10000r/高效液相色譜測定。包、糕點、焙烤食品餡料、復合調味料:樣品用粉碎機粉碎或不銹鋼高速均質器均質。稱取樣品2g5g(置于25需過固相萃取柱則用50,加入約10液,用氫氧化鈉溶液(移至25需過固相萃取柱則用50,加水稀釋至刻度,搖勻。置于離心管中,超聲提取10移到分液漏斗中,加入10搖1置分層,棄去正己烷層,加入10下層水相置于離心管中,4000r/高效液相色譜測定。若高效液相色譜分離效果不理想,取2010%的甲酸(容到2555甲醇溶液(脫,收集洗脫液2旋混合,高效液相色譜測定。油:稱取樣品2g5g(置于25需過固相萃取柱則用50,加入約10液,用氫氧化鈉溶液(移至25需過固相萃取柱則用50,加水稀釋至刻度,搖勻。置于離心管中,超聲提取10移到分液漏斗中,加入10搖1置分層,棄去正己烷層,加入10下層水相置于離心管中,4000r/高效液相色譜測定。若高效液相色譜分離效果不理想,取2010%的甲酸(容到2555甲醇溶液(脫,收集洗脫液2旋混合,高效液相色譜測定。譜柱:m,250徑)或相當者。動相:甲醇+乙酸銨(10+90,體積比)。速:溫:30。0166 樣量:10L。測波長:293性分析依據保留時間一致性進行定性識別的方法,根據脫氫乙酸標準樣品的保留時間,確定樣品中脫氫乙酸的色譜峰(參見附錄B)。必要時應采用其他方法進一步定性確證。準曲線的制作將脫氫乙酸標準工作液(別注入液相色譜儀中,測定相應的峰面積,以標準工作液的濃度為橫坐標,峰面積為縱坐標,繪制標準曲線。定將測定溶液注入液相色譜儀中,測得相應峰面積,根據標準曲線得到測定溶液中的脫氫乙酸濃度。白試驗除不加試樣外,空白試驗應與樣品測定平行進行,并采用相同的分析步驟分析。13 分析結果的表述試樣中脫氫乙酸含量按式(3)計算:X=(V10000001000(3)式中:X試樣中脫氫乙酸的含量,單位為克每千克(g/試樣溶液中脫氫乙酸的質量濃度,單位為微克每毫升(g/空白試樣溶液中脫氫乙酸的質量濃度,單位為微克每毫升(g/V試樣溶液總體積