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文檔簡介

合作任務(wù)一：前情回顧,1、DNA重組技術(shù)的基本工具的名稱和作用 2、限制酶的特點(diǎn) 3、常見的基因載體,1、DNA重組技術(shù)的基本工具的名稱和作用,限制性核酸內(nèi)切酶 切割目的基因和基因載體 DNA連接酶 將目的基因與載體結(jié)合 基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體 將目的基因送入受體細(xì)胞并復(fù)制,2、限制酶的特點(diǎn),識(shí)別DNA分子的特定的核苷酸序列，并使特定部位的磷酸二酯鍵斷開,3、常見的基因載體,質(zhì)粒 噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒,合作任務(wù)二：新思考,1、限制酶的來源、作用部位、識(shí)別序列的特點(diǎn)、切割末端的特點(diǎn) 2、DNA連接酶的分類、特點(diǎn) 3、DNA連接酶與DNA聚合酶的區(qū)別 4、基因載體具備的條件及作用 5、繪制大腸桿菌質(zhì)粒載體的結(jié)構(gòu)模式圖,1、限制酶的來源、常見種類、作用部位、識(shí)別序列的特點(diǎn)、切割末端的種類,來源：從原核生物中分離純化出來 常見種類：EcoRI限制酶 SmaI限制酶 作用部位：磷酸二酯鍵 識(shí)別序列的特點(diǎn)：由6個(gè)（4、5或8個(gè)）核苷酸組成，反向?qū)ΨQ重復(fù)排列 切割末端：黏性末端或平末端,2、DNA連接酶的分類、特點(diǎn),分類：E.coliDAN連接酶 T4DNA連接酶 特點(diǎn)： E.coliDAN連接酶只能連接黏性末 端， T4DNA連接酶既能連接黏性末 端又能連接平末端,3、DNA連接酶與DNA聚合酶的區(qū)別,DNA連接酶連接DNA片段，不需要模板 DNA聚合酶需要模板，連接單個(gè)核苷酸,4、基因載體具備的條件及作用,1、有一個(gè)或多個(gè)限制酶切點(diǎn)，以便目的基因可以插入到載體上 2、在受體細(xì)胞中可以進(jìn)行自我復(fù)制，或者整合到受體染色體DNA上進(jìn)行復(fù)制，以便目的基因復(fù)制表達(dá) 3、有標(biāo)記基因，以便重組DNA的鑒定和選擇 4、必須是安全的，不會(huì)對(duì)受體細(xì)

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