標準解讀

《WS/T 231-2002 用于紙片擴散法抗生素敏感試驗的脫水 Mueller-Hinton 瓊脂的檢驗規(guī)程》是一項關(guān)于如何正確使用脫水Mueller-Hinton瓊脂進行抗生素敏感性測試的技術(shù)規(guī)范。該標準主要針對實驗室中常用的紙片擴散法（Kirby-Bauer法）對抗生素敏感性的測定，旨在確保實驗結(jié)果的一致性和準確性。

標準詳細規(guī)定了脫水Mueller-Hinton瓊脂的質(zhì)量要求、制備方法以及性能驗證流程。首先，在質(zhì)量控制方面，它明確了產(chǎn)品應(yīng)達到的基本物理化學(xué)性質(zhì)指標，比如pH值范圍應(yīng)在7.2至7.4之間；同時，還設(shè)定了對于特定抗生素而言，其在該培養(yǎng)基上生長出的標準抑菌圈直徑范圍，以此來評估瓊脂是否適合用于抗生素敏感性測試。

其次，關(guān)于制備過程，標準提供了詳細的指導(dǎo)步驟，包括但不限于稱量準確量的脫水培養(yǎng)基粉末、加入適量蒸餾水或去離子水溶解后加熱煮沸直至完全溶解，并通過適當方式冷卻凝固成平板等操作要點。此外，還強調(diào)了在整個過程中需要注意的一些關(guān)鍵事項，如避免污染、保證均勻混合等，以確保最終得到的培養(yǎng)基符合實驗需求。

最后，性能驗證部分則描述了一系列用來檢查新配制或購買回來的Mueller-Hinton瓊脂是否滿足預(yù)期功能的方法。這通常涉及到選取已知耐藥模式的細菌株作為對照，在特定條件下與一系列不同種類和濃度的抗生素紙片共同作用，觀察并記錄下形成的抑菌環(huán)大小，然后將這些數(shù)據(jù)與預(yù)設(shè)的標準值相比較，從而判斷該批號培養(yǎng)基是否合格。


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  • 2002-04-20 頒布
  • 2002-07-01 實施
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文檔簡介

C50中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標準WS/T231一2002用于紙片擴散法抗生素敏感試驗的脫水Mueller-Hintoni瓊脂的檢驗規(guī)程ProtocolsfortheevaluationofdehydratedMueller-Hintonagarinthediskdiffusionprocedureforantimicrobiallsusceptibilitytesting2002-04-20發(fā)布2002-07-01實施中華人民共和國衛(wèi)生部發(fā)布WS/T231-2002前本標準是在衛(wèi)生部頒發(fā)的全國臨床檢驗操作規(guī)程第二版)的基礎(chǔ)上，參考NCCLS標準，結(jié)合中國國情及衛(wèi)生系統(tǒng)的實際情況和要求而制定。本標準從2002年7月1日起實施。本標準由衛(wèi)生部醫(yī)政司提出。本標準的附錄A是標準的附錄，附錄B、附錄C都是提示的附錄。本標準由北京大學(xué)人民醫(yī)院負責(zé)起草。本標準主要起草人：張正、楊婧、趙曉濤本標準由衛(wèi)生部委托衛(wèi)生部臨床檢驗中心負責(zé)解釋。中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標準用于紙片擴散法抗生素敏感試驗的脫水WS/T231-2002Mueller-Hinton瓊脂的檢驗規(guī)程ProtocolsfortheevaluationofdehydratedMueller-Hintonagarinthediskdiffusionprocedureforantimicrobialsusceptibilitytesting1范圍本規(guī)程規(guī)定了評價Mueller-Hinton瓊脂(M-H瓊脂)產(chǎn)品批號的要求，包括制造商評價(M-H瓊脂)產(chǎn)品批號的規(guī)則及評價新的參考培基的規(guī)則、本規(guī)程僅適用于評價紙片擴散法抗生素敏感試驗用M-H瓊脂的檢驗，而不能保證M-H瓊脂在其他試驗中的質(zhì)量，例如瓊脂稀釋或抗生素梯度試驗。材料2.1質(zhì)控標準菌株用ATCC的凍干標準菌株制備質(zhì)控菌株，根據(jù)ATCC的規(guī)定復(fù)蘇菌種。所需的菌種有：金黃色葡萄球菌ATCC25923,大腸埃希菌ATCC25922，銅綠假單胞菌ATCC27853,類腸球菌ATCC33186(或ATCC29212），金黃色葡萄球菌ATCC43300和大腸埃希菌ATCC35218。2.2菌林TSA培基培養(yǎng)將質(zhì)控菌種的復(fù)蘇液接種于兩或三個含5%羊血的大豆-酪蛋白消化瓊脂(TSA)平板上，置35環(huán)境中孵育18h24h。2.3肉湯增菌孵育結(jié)束后檢查純度并收獲平板上的全部生長物。在含有15%甘油的大豆-酪蛋白消化肉湯（TSB)中懸浮。(15%TSB的制備：將脫水肉湯培養(yǎng)基30g溶于大約500ml.去離子水中，并添加150mL的甘油，定容至1L,混勾,12115min高壓滅菌)。2.4標準菌株復(fù)蘇接種平板的前一天，將所需的質(zhì)控菌種每種各融化一瓶，接種至含5%羊血的TSA平板上，在35環(huán)境中孵育18h24h。解育后，如果檢查純度滿意，這些菌林就可以用于接種待測M-H培養(yǎng)基，按WS/T1251999紙片法抗菌藥物敏感試驗標準操作。2.5質(zhì)控菌種的更新定期用ATCC的新鮮凍干標準菌株更新財存菌種。試驗方法及流程3.1嚴格按照我國已有標準(WS/T125)中規(guī)定的步驃和時間進行紙

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