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文檔簡介
一、 實驗目的:學習直接測定和記錄家兔動脈血壓的急性實驗方法;觀察某些神經(jīng)、體液因素對心血管活性的影響。二、 實驗原理:動脈血壓的形成決定于兩個重要的因素:心室收縮射血和外周阻力。因此,反應想心室收縮射血和外周阻力的因素均可影響動脈血壓。動脈血壓的記錄可在頸總動脈內(nèi)插一玻璃管或硬塑料管,內(nèi)充抗凝液體,并與壓力換能器相連。壓力換能器將血壓信號轉(zhuǎn)換成電信號輸入生理信號記錄系統(tǒng)。三、 實驗材料:家兔、手術臺、止血鉗、眼科剪、生物機能分析系統(tǒng)、氣管插管、動脈套管、保護電極、照明燈、紗布、棉球、絲線。注射器、生理鹽水、肝素、烏來糖(麻醉劑)、腎上腺素、乙酰膽堿。四、 實驗步驟:1. 手術(1) 麻醉取家兔一只,稱重,耳緣靜脈注射麻醉劑(1g/kg)進行麻醉。麻醉過程要緩慢,當動物角膜反應遲鈍,掐其大腿無反應,即可停止注射,避免過度麻醉致死。(2) 將動物背位交叉固定,將頸部喉結下部毛剪掉。(3) 僅靠喉結下緣,沿頸部正中線做一長約5-7cm的皮膚切口,將皮下結締組織鈍性分離,至露出氣管,穿線,用手術刀在氣管上做一橫切口,插入氣管插管,結扎。(4) 分離頸部神經(jīng)血管:分離胸骨舌骨肌和胸骨甲狀肌及其周圍結締組織,在接近氣管外側,有一條較細,壁厚的血管,即為主動脈血管(可看出里面血流規(guī)律性搏動)。與主動脈伴行的有兩條較粗的神經(jīng),最粗的為迷走神經(jīng),其次為交感神經(jīng),兩者之間有一條很細的神經(jīng),減壓神經(jīng)。但減壓神經(jīng)的位置不固定,兩條較粗的神經(jīng)附近的細小神經(jīng)都有可能是減壓神經(jīng),可以進行刺激試探。確定迷走神經(jīng)和減壓神經(jīng)后,分離出減壓神經(jīng),迷走神經(jīng),主動脈血管,分別穿線備用。(5) 動脈套管插入:動脈套管插入前,需準備好壓力換能器記錄血壓的裝置。用注射器將肝素生理鹽水注入套管,至將其中所有空氣由插孔處排出,用肝素生理鹽水代替。注入處用止血鉗將膠管夾住。保證其中不能有空氣。準備好動脈套管裝置后,用動脈夾夾住近心端,遠心端動脈結扎,在兩者之間剪一小口,迅速插入動脈套管(動作迅速,否則動脈管腔急劇收縮,難以插入套管),用線將動脈插管固定于動脈內(nèi),并掛在套管(纏一圈膠布)上,以免滑脫。(6) 松開動脈夾,即可看到少量動脈血液沖入動脈套管。此時即可開始進行試驗,記錄曲線。2. 曲線描記(1) 描記一段正常曲線,識別一級波(心波),二級波(呼吸波)。(2) 提起另一側頸總動脈的備用線,動脈夾夾閉5-10s,觀察記錄血壓變化,分析原因。(3) 中等強度的點刺激刺激另一側減壓神經(jīng),觀察血壓變化。雙結扎后切斷,再刺激減壓神經(jīng)神經(jīng)的中樞端和外周端,觀察記錄血壓變化。(4) 對另一側迷走神經(jīng)進行同樣處理,分別觀察雙結扎切斷神經(jīng)前、后的血壓變化。(5) 耳緣靜脈注射腎上腺素,觀察血壓變化。(6) 耳緣靜脈注射乙酰膽堿,觀察血壓變化。五、 實驗結果:1、 正常心搏曲線: 2、 夾閉另一側頸總動脈: 3、 刺激減壓神經(jīng):(1) 剪斷神經(jīng)前: (2) 刺激減壓神經(jīng)中樞端:(3) 刺激減壓神經(jīng)外周端:4、 刺激迷走神經(jīng):(1) 剪斷神經(jīng)前:(2) 剪斷神經(jīng),刺激中樞端:(3) 刺激外周端:5、 腎上腺素對血壓的影響:6、 乙酰膽堿對動脈血壓的影響:六、 實驗討論:1、 對實驗結果的解釋:前幾項實驗均是對心血管的減壓反射的驗證。在頸動脈竇和主動脈弓分布的壓力感受器受到一定刺激后,會引起減壓反射。在整個心血管系統(tǒng)內(nèi)均有傳入神經(jīng)末梢分布,對管壁的被動擴張與收縮產(chǎn)生反應,位于動脈管壁內(nèi)的神經(jīng)末梢起監(jiān)視動脈側壓的作用,即壓力感受器。最重要的是頸動脈竇和主動脈弓壓力感受器。壓力感受器的傳入纖維組成頸動脈竇神經(jīng)和主動脈神經(jīng),在中樞與其他神經(jīng)通路發(fā)生一系列聯(lián)系,使得壓力感受器受到血管壁被動擴張的刺激后,神經(jīng)沖動發(fā)放增多,會抑制交感神經(jīng)活動,增強迷走神經(jīng)活動。(1)夾閉另一側頸總動脈后,血壓會升高。夾閉另一側頸動脈后,管壁的被動收縮,會使頸動脈竇血壓下降,從而壓力感受器沖動減少,竇神經(jīng)傳入沖動減少,使心迷走中樞抑制,心交感中樞興奮,并使縮血管中樞興奮。從而導致心跳的加快加強。交感神經(jīng)的興奮會使小血管收縮,從而增加回心血量,增加外周阻力,使血壓升高。(2)刺激減壓神經(jīng)后,血壓降低減壓神經(jīng),顧名思義,可以對動脈血壓進行調(diào)節(jié),當其興奮,可以降低動脈血壓。當減壓神經(jīng)傳入中樞的神經(jīng)沖動增加時,使得心迷走中樞興奮,交感中樞抑制,從而使心率減慢,心收縮力減弱,小血管舒張,外周阻力減小,回心血量減少,心輸出量減少,降低血壓。當將神經(jīng)剪斷,刺激中樞端時,神經(jīng)沖動可以正常的傳入中樞,但刺激外周端神經(jīng)沖動無法傳入,因而沒有任何效應產(chǎn)生。2刺激迷走神經(jīng),血壓先降低,后升高,再恢復迷走神經(jīng)興奮,其神經(jīng)末梢會釋放更多的乙酰膽堿增多,乙酰膽堿與心肌細胞膜上的M受體結合,使細胞膜內(nèi)cAMP降低,對鉀離子通透性增加,增大最大復極電位負值與閾電位之間的差值,興奮性降低;同時對鈣離子的通透性降低,產(chǎn)生負性變力,負性變傳導,負性變時作用。剪斷神經(jīng)后,與減壓神經(jīng)不同,從血壓變化的波形來看,當刺激停止后,動脈血壓迅速恢復,并且過程中出現(xiàn)一小的波峰。這是因為:迷走神經(jīng)屬混合神經(jīng),其中內(nèi)臟運動神經(jīng)纖維有分支分布于心肌,而內(nèi)臟感覺神經(jīng)纖維則終止于延髓的孤束核,而后者又有纖維與延髓腹內(nèi)側的“減壓區(qū)”聯(lián)系。當迷走神經(jīng)的內(nèi)臟運動神經(jīng)纖維興奮時,將導致心臟活動的抑制,具體表現(xiàn)為心肌興奮性降低,心率減慢,心肌收縮力減弱,血壓下降。故刺激迷走神經(jīng)外周端時,動脈血壓迅速下降,心率明顯減慢,而當刺激停止時,上述抑制效應停止,血壓也迅速恢復。當迷走神經(jīng)內(nèi)臟感覺神經(jīng)纖維興奮時,經(jīng)孤束核使延髓的“減壓區(qū)”興奮,經(jīng)“交互抑制”使延髓的“加壓區(qū)”活動受到抑制,再由傳出途徑抑制心臟和外周血管的活動,故血壓下降。因此,當刺激迷走神經(jīng)中樞端時,動脈血壓也應下降,但停止刺激后,由于延髓“減壓區(qū)”和“加壓區(qū)”的“交互抑制”現(xiàn)象的存在,所以動脈血壓的恢復較緩慢。實驗中刺激迷走神經(jīng)后血壓的變化正是由于迷走神經(jīng)內(nèi)臟運動、感覺神經(jīng)纖維共同興奮的結果,即刺激完整神經(jīng)所得的波形應是剪斷神經(jīng)后刺激中樞端和外周端兩波形的總和。家兔的減壓神經(jīng)為傳入神經(jīng)纖維,其上行至顱底后并入迷走神經(jīng)。故刺激減壓神經(jīng)中樞端后,血壓變化的波形與刺激迷走神經(jīng)中樞端類似(但本實驗中刺激中樞端所得到的波形并不理想)。而刺激減壓神經(jīng)外周端,血壓不變。2. 注射腎上腺素后,血壓升高腎上腺素可以與心肌細胞膜上的受體和血管上受體結合,由于靜脈注射以及血管上受體數(shù)量上的優(yōu)勢,注射腎上腺素后可以使全身血管廣泛收縮,從而使動脈血壓升高。3. 注射乙酰膽堿后,血壓降低靜脈注射乙酰膽堿的作用于刺激迷走神經(jīng)的機理是相同的,但體外注射的相對劑量較大,因此作用效果更強。結論:1. 從以上實驗分析中可以發(fā)現(xiàn),無論是血管壁的被動收縮還是刺激不同的神經(jīng),其本質(zhì)都是通過心交感神經(jīng)與心迷走神經(jīng)對心血管系統(tǒng)產(chǎn)生影響。即直接支配心血管活動的神經(jīng)為交感神經(jīng)和迷走神經(jīng)。各種心血管神經(jīng)都會經(jīng)傳入神經(jīng),將沖動傳至心血管中樞延髓,通過“接替站”孤束核,將沖動轉(zhuǎn)至交感神經(jīng)或迷走神經(jīng),從而達到控制心血管活動的目的。由于這兩種神經(jīng)節(jié)后神經(jīng)末梢分別釋放腎上腺素(去甲腎上腺素)和乙酰膽堿作為遞質(zhì),因此腎上腺素(去甲腎上腺素)和乙酰膽堿所產(chǎn)生的效應與刺激兩種神經(jīng)是相對應的。2. 從以上實驗分析中,可以總結出影響動脈血壓的因素:(1) 心輸出量:心輸出量由兩個因素決定:心搏出量和心率。新搏出量增加時,心臟射血增多,動脈血壓會升高(主要是收縮壓),心率增加時,心舒期縮短,流向外周的血液不充分,因此心舒末期留于主動脈的血量增多,致使血壓增大。心迷走神經(jīng)或心交感神經(jīng)興奮,作用于心肌細胞,控制心輸出量,會影響血壓的升降。(2) 外周阻力:外周阻力主要來源于小動脈和微動脈對血流的阻力。外周阻力增加時,心舒期血液流向外周的速度會減慢,因此心舒期末存留在主動脈的血量會增多,使舒張壓升高。血管都受到交感或副交感神經(jīng)纖維的支配,刺激交感或副交感神經(jīng)會是心血管舒張或收縮,從而降低或增加外周阻力,影響動脈血壓。(3) 主動脈和大動脈的彈性儲器作用:主動脈和大動脈的彈性儲器作用主要影響血壓的波動性。(4) 循環(huán)血量和血管系統(tǒng)容量的比例。當動物發(fā)生大出血,血量缺失過多,則血壓會明顯降低。實驗中若家兔泵出一定量的血,在不危機生命的情況下,在測量血壓,可以看出血壓值明顯降低。3. 壓力感受性反射是典型的負反饋調(diào)節(jié),并且具有雙向調(diào)節(jié)能力,當心輸出量、外周血管阻力、血量等突然變化的情況下,對動脈血壓進行快速調(diào)節(jié)。4. 刺激神經(jīng)與注射藥物分別涉及了神經(jīng)調(diào)節(jié)與體液調(diào)節(jié)。從二者作用的時長可以看出,刺激神經(jīng)時,發(fā)生反應的速度快,恢復也快,而靜脈注射藥物則發(fā)
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