生物污染源控制管理規(guī)程.doc

生物污染源控制管理規(guī)程目的：無處不在的微生物對藥品原料、生產(chǎn)環(huán)境和成品的污染，是造成生產(chǎn)失敗、成品不合格，直接或間接對人類造成危害的重要因素。為了避免藥品在生產(chǎn)的過程中受到微生物或其他一些混如空氣中對藥品質(zhì)量有影響的物質(zhì)的污染。建立此生物污染源控制管理規(guī)程。內(nèi)容：1.藥品生產(chǎn)中的生物污染源一般指微生物污染源。藥品生產(chǎn)中微生物污染來源：空氣；環(huán)境；制藥用水；藥品原、輔料；設(shè)備；人員；藥品包裝材料。2.藥品生產(chǎn)中微生物污染防止措施：(1）潔凈室技術(shù)的應(yīng)用；(2)制藥用水質(zhì)量控制；(3)衛(wèi)生管理；(4)滅菌方法；2.1潔凈室技術(shù)的應(yīng)用 從操作環(huán)境中去除微生物，防止微生物在調(diào)配、分裝過程中進入最終成品。使藥品生產(chǎn)環(huán)境設(shè)施（車間、廠房）的微生物污染達到了藥品質(zhì)量所要求的水平。目前，潔凈廠房（室）已成為藥品生產(chǎn)的基本要求。2.11潔凈室技術(shù)的基本原理和系統(tǒng)效應(yīng)基本原理：空氣通過初效、中效、高效過濾器系列裝置，使空氣中的污染微粒被攔截、過濾、清除。 使?jié)崈舻目諝庖砸欢ǖ臏囟?、濕度、流向、速度及形成的一定正壓覆蓋受控環(huán)境，保護覆蓋區(qū)域不受微粒（生物性及非生物性）污染。2.15潔凈室（區(qū)）潔凈度驗證 按國家技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布的中華人民共和國國家標準 醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）懸浮粒子浮游菌和沉降菌的測試方法規(guī)定的方法和我國GMP（1998）標準進行定期監(jiān)測和驗證。名詞定義：潔凈室（區(qū)）clean room（area）對塵粒及微生物污染規(guī)定需進行環(huán)境控制的房間或區(qū)域。其建筑結(jié)構(gòu)、裝備及其使用，均具有減少對該區(qū)域內(nèi)污染源的介入、產(chǎn)生和滯留的功能。潔凈度cleanliness潔凈環(huán)境內(nèi)單位體積空氣中（1立方米）含大于或等于某一粒徑（0.5um）的懸浮粒子的允許統(tǒng)計數(shù)。單向流unidirectional air flow（曾稱為層流laminar flow）沿著平行流線，以一定流速、單一通路、單一方向流動的氣流。懸浮粒子airborne particles可懸浮在空氣中的尺寸為0.0011000微米的固態(tài)和液態(tài)或二者的混合物質(zhì)，包括生物性和非生物性粒子。 浮游菌airborne microbe懸浮在空氣中的活微生物粒子，通過專門的培養(yǎng)，在適宜的生長條件下，繁殖到可見的菌落數(shù)。 沉降菌settling microbe在測試點將制備好的培養(yǎng)皿打開蓋子，使培養(yǎng)基表面暴露0.5h，再蓋上蓋子后倒置，培養(yǎng)后，繁殖到可見的菌落數(shù)。其中潔凈室（區(qū)）空氣潔凈度級別符合下表規(guī)定：潔凈度級別塵粒最大允許數(shù)/立方米微生物最大允許數(shù)0.5um5um浮游菌/立方米沉降/皿100級3，50005110000級350，0002，0001003100000級3，500，00020，00050010300000級10，500，00060，000152.2制藥用水的質(zhì)量控制 水是藥品生產(chǎn)中使用最廣、用量最大的重要原料。水質(zhì)的優(yōu)劣直接影響藥品的質(zhì)量。2000年版中國藥典在收載純化水、注射用水的標準及使用范圍時，就防止微生物污染問題提出原則的要求：“由于各種生產(chǎn)方法存在不同污染的可能性，因此對各生產(chǎn)裝置要特別注意是否有微生物污染。對其各個部位及流出的水應(yīng)經(jīng)常監(jiān)測，尤其是當這些部位停用幾小時再使用時?！薄白⑸溆盟仨氃诜乐箖?nèi)毒素產(chǎn)生的設(shè)計條件下生產(chǎn)、儲藏及分裝”。中國藥典2000年版收載的制藥用水系指純化水、注視用水、滅菌注射用水三種。并規(guī)定：“制藥用水的原水通常為自來水或深井水，其質(zhì)量必須符合中華人民共和國國家標準GB57491985生活飲用水衛(wèi)生標準?！?我國飲用水標準GB57491985序號檢測項目名稱單位國家標準1色度度152渾濁度NTU3330（理化項目）略31細菌總數(shù)個/ mL10032總大腸菌群個/L33335略 這個標準中規(guī)定細菌總數(shù)100個/ml，總大腸桿菌3個/L。1制藥用水的污染途徑（1）水系統(tǒng)的外源性污染：原水的污染，國標中允許細菌總數(shù)100個/ml，總大腸桿菌3個/L儲罐的排氣口無保護措施或使用了劣質(zhì)的空氣過濾器；用于混合陰陽離子樹脂的壓縮空氣中污染微生物；水從污染的出口倒流；地漏有缺陷；更換活性炭和去離子樹脂時帶來的外界污染。（2）水系統(tǒng)的內(nèi)源性污染水系統(tǒng)中蒸餾水機、儲罐及管路所用材料的標準或安裝，不符合工藝規(guī)定要求，出現(xiàn)局部腐蝕、長菌。被吸附于活性炭、去離子樹脂、過濾膜和系統(tǒng)內(nèi)壁上的原水中的微生物，適應(yīng)了低營養(yǎng)環(huán)境而發(fā)生應(yīng)變形成生物膜，膜中的微生物受到膜的保護，使一般消毒劑對它不起作用，一些從生物膜中脫落的微生物可隨水流轉(zhuǎn)移到系統(tǒng)其他區(qū)域形成菌落，從而成為下游純化設(shè)備和分配系統(tǒng)的污染源。分配系統(tǒng)管道內(nèi)壁、閥門和其他區(qū)域形成的菌落大量繁殖，形成生物膜，從而成為持久性的污染源。使用濃度達百萬分之三百的（游離氯）氯水能消除生物膜。然而如此高濃度的氯會損傷管道、設(shè)備的內(nèi)表面，使粗糙而更有利于新生物膜的形成。2制藥用水系統(tǒng)微生物控制要點有序處理：過濾有機物去除器水軟化器除鈣、鎂離子交換反滲透除菌過濾蒸餾器過濾分深層過濾與篩網(wǎng)式過濾，常規(guī)用深層過濾，使水中粒子靠陷入介質(zhì)內(nèi)部曲折的孔道而被阻留。按順序：常規(guī)深層過濾微濾超濾反滲透，可將被過濾客體中的粒子由大小微得以去除。 反滲透膜是一種只允許水通過而不允許溶質(zhì)通過的半透膜。 按化學(xué)成分分主要有醋酸纖維素膜（簡稱CA膜）和芳香族聚酰胺膜兩大類。水透過反滲透膜的作用機理目前有兩種理論：氫鍵理論，選擇吸附毛細流動理論 由于反滲透膜的孔徑小于1010-10m，因此能濾除各種細菌、病毒、熱原。至今在我國注射用水均采用蒸餾法，這與我國反滲透器的質(zhì)量有關(guān)。水系統(tǒng)消毒方法： 熱力消毒純蒸汽發(fā)生器消毒法、巴氏消毒法。能有效控制生物膜的生成和發(fā)展。 紫外消毒用波長254nm及185nm紫外線消毒。因在水中穿透力差而對浮游微生物 殺滅效果不好。常與巴氏消毒法和化學(xué)消毒法聯(lián)合使用。 化學(xué)消毒分氯類、氧類兩種。可形成氧化物和自由基氧化細菌和生物膜，也可直接 氧化細菌、病毒的核糖核酸、分解DNA、RNA、蛋白質(zhì)等而殺滅微生物。3、 驗證和監(jiān)控 制藥用水系統(tǒng)最大的問題是微生物和細菌內(nèi)毒素，如人為地接種入微生物和細菌內(nèi)毒素是不切實際的試驗方法。應(yīng)當采用（一） 定期監(jiān)測微生物，記錄常見污染菌種類及污染水平的波動范圍。（二） 在特定部位安裝監(jiān)控設(shè)備，對水各有關(guān)部位取樣檢驗以確保整個系統(tǒng)始終達標運行。（三）建立警戒限度和糾偏限度，設(shè)定消毒頻率確保系統(tǒng)在微生物受控狀態(tài)下運行。監(jiān)測標準：三次連續(xù)試驗所得數(shù)據(jù)的累計頻數(shù)95必須符合以下標準： 注射用水系統(tǒng)：小于100CFU/1000ml 純 水 系 統(tǒng) ： 小于10000CFU/1000ml水系統(tǒng)的再驗證： 定期監(jiān)測微生物定期監(jiān)測微生物有下述情況之一發(fā)生均需進行再驗證所用消毒劑配方改變消毒程序改變廠房設(shè)施于設(shè)備的涉及發(fā)生改變常規(guī)微生物監(jiān)測中發(fā)現(xiàn)異常變化趨勢（如出現(xiàn)耐受菌株）。4、監(jiān)測標準與糾偏限度的來源依據(jù)：純化水的 中、歐、美、現(xiàn)行藥典規(guī)定對比表中國藥典（2000版）歐洲藥典（2000增補版）USP24來源本品為蒸餾法、離子交換法、反滲透法或其他適宜方法制得由符合法定標準的飲用水經(jīng)蒸餾、離子交換或其他適宜方法制得由符合美國環(huán)境保護協(xié)會或歐共體或日本法定要求的飲用水或適宜方法制得性狀無色澄明液體，無臭，無味無色澄明液體，無臭，無味/酸堿度符合規(guī)定/氨0.3ug/ml/氯化物、硫酸鹽與鈣鹽、亞硝酸鹽、二氧化碳、不揮發(fā)物符合規(guī)定/硝酸鹽0.06ug/ml0.2ug/ml/重金屬0.5ug/ml0.1ug/ml/鋁鹽/用于生產(chǎn)滲析液時方控制此項目/易氧化物符合規(guī)定符合規(guī)定/總有機碳/0.5mg/L0.5mg/L電導(dǎo)率/4.3us/cm（20）符合規(guī)定細菌內(nèi)毒菌/0.25E.U./ml/無菌檢查/符合規(guī)定（用于制備無菌制劑時控制）微生物糾偏限度/100個/ml100個/ml中、歐、美、現(xiàn)行藥典均無純化水的微生物限度規(guī)定，但是歐、美藥典有微生物糾偏限度規(guī)定，為100個/ml。美國藥典有無菌檢查規(guī)定（用于制備無菌制劑時控制）注射用水歐、美、中現(xiàn)行藥典規(guī)定對比表中國藥典（2000版）歐洲藥典（2000增補版）USP24來源本為純品化水經(jīng)蒸餾所得的水為符合法定標準的飲用水或純水經(jīng)適當方法蒸餾而得由符合美國環(huán)境保護協(xié)會或歐共體或日本法定要求的飲用水經(jīng)蒸餾或反滲透純化而得性狀無色澄明液體，無臭，無味無色澄明液體，無臭，無味/PH5.0-7.0/氨0.2ug/ml/氯化物、硫酸鹽與鈣鹽、亞硝酸鹽、二氧化碳、不揮發(fā)物符合規(guī)定/硝酸鹽0.06ug/ml0.2ug/ml/重金屬0.5ug/ml0.1ug/ml/鋁鹽/用于生產(chǎn)滲析液時方控制此項目/易氧化物符合規(guī)定符合規(guī)定/總有機碳(TOC)/0.5mg/L0.5mg/L電導(dǎo)率/1.1us/cm（20）符合規(guī)定細菌內(nèi)毒菌0.25E.U./ml0.25E.U./ml0.25E.U./ml微生物糾偏限度（action limit）/10個/100ml10個/100ml 中國藥典2000版、歐洲2000版、美國藥典24版中注射用水的標準均沒有微生物限度標準規(guī)定：但是歐、美藥典有微生物糾偏限度標準，中國藥典中還沒有這點。如何理解歐美藥典中對純水和注射用水不規(guī)定微生物限度？是因為目前可采取的最現(xiàn)代化的微生物技術(shù)也至少需要48h才能獲得確切的結(jié)果，而獲得結(jié)果時，因生產(chǎn)不能等待水樣檢驗的結(jié)果，樣品所代表的水已經(jīng)用于生產(chǎn)了。如果在標準中規(guī)定了微生物指標，那么即使將檢驗“合格”的水放置到菌檢結(jié)果出來時，或許微生物污染狀況已經(jīng)發(fā)生明顯的變化，成為“不合格品”了。從藥監(jiān)法規(guī)角度來看，水是制藥業(yè)中使用最廣泛的原料，水的菌檢項目如出現(xiàn)“超標”，將會與“不合格原料”不得投入使用的原則相矛盾。這兩條是在純化水及注射用水（原料）專論中對微生物限度不作規(guī)定的原因。但是為了有效的控制制藥用水系統(tǒng)的運行狀態(tài)，歐美藥典設(shè)定了特殊的“警戒水平”和“糾偏限度”警戒水平（Alert Levels ）警戒水平是指微生物某一污染水平、監(jiān)控結(jié)果超過它時，表明制藥用水系統(tǒng)有偏離正常運行條件的趨勢。警戒水平的含義是報警，尚不要求采取特別的糾偏措施。應(yīng)作為企業(yè)的內(nèi)控標準糾偏限度（Action Levels）糾偏限度是指微生物污染的某一限度，監(jiān)控結(jié)果超過此限度時，表明制藥用水系統(tǒng)已經(jīng)偏離了正常的運行條件，應(yīng)當采取糾偏措施，使系統(tǒng)回到正常的運行狀態(tài)。警戒水平和糾偏限度的建立值得我國藥典借鑒。2.3原材料、輔料、設(shè)備、容器的滅菌和消毒處理。藥品生產(chǎn)中的微生物還來源于原材料、敷料、設(shè)備、容器等，要防止微生物污染必須對這些方面進行必要的滅菌或消毒處理。1、 滅菌利用物理或化學(xué)的方法徹底殺滅微生物的手段 滅菌方法和滅菌驗證 中國藥典2000年版在通則附錄中收載了滅菌法，為長期來滅菌的半定量控制納入定量控制創(chuàng)造了必要條件，滅菌方法包括： 濕熱滅菌法；干熱滅菌法；除菌過濾法；輻射滅菌法；環(huán)氧乙烷滅菌法。（1）濕熱滅菌 本法系指物質(zhì)在滅菌器內(nèi)利用高壓蒸汽或其他熱力學(xué)滅菌手段殺滅微生物的方法，是最有效、及用途最廣的方法。凡在高溫中與水分不發(fā)生作用或損壞的物質(zhì)均可以用本法滅菌。 濕熱滅菌法常用設(shè)備為高壓滅菌器。 滅菌機理 微生物在一定高溫條件下受熱時，蛋白質(zhì)分子內(nèi)氫鍵發(fā)生斷裂影響了分子空間構(gòu)型的重排，從而導(dǎo)致微生物的死亡。研究表明，細菌孢子，尤其是芽孢桿菌和梭狀芽孢具有耐熱性。耐熱孢子的破壞取決于在水份條件下孢子的水合作用以及核酸及蛋白質(zhì)的變性。飽和蒸汽的穿透性比干熱空氣及過熱蒸汽的穿透性要強得多。飽和蒸汽與微生物發(fā)生水合作用，從而加速了它們的死亡。 滅菌的對數(shù)規(guī)則 蒸汽滅菌過程中，微生物的死亡（被殺滅）規(guī)律：將活的微生物看作反應(yīng)物，將殺滅后的微生物看作生成物，孢子的死亡基本符合質(zhì)量作用定律。 濕熱滅菌的有關(guān)參數(shù)D值微生物的耐熱參數(shù)，系指一定溫度下將微生物殺滅90%（即使之下降一個對數(shù)單位）所需的時間，以分鐘表示。D值越大說明該微生物的耐熱性越強。不同微生物在不同的環(huán)境條件下具有各不相同的D值。Z值即滅菌溫度系數(shù)，系指使某種微生物的D值下降一個對數(shù)單位，滅菌溫度應(yīng)升高的值（），通常取10。FT值為滅菌程序所賦予待滅菌品在溫度T下的滅菌時間，以分鐘表示。由于D值是隨溫度的變化而變化，所以要在不同溫度下達到相同的滅菌效果，F(xiàn)T值將會隨D值的變化而變化。滅菌溫度高時FT就小，滅菌溫度低時所需滅菌時間FT大。F0值即標準滅菌時間，系滅菌過程所賦予待滅菌品在121下的等效滅菌時間，即T=121、Z=10時的FT值，121為標準狀態(tài)，F(xiàn)0值即為標準滅菌時間，以分鐘表示。滅菌率L系指在某溫度下滅菌1分鐘所相應(yīng)的標準滅菌時間（分鐘），即F0和FT的比值（L= F0/ FT）。藥典給出了當Z=10時，不同溫度下的L值表，和不同Z值下的滅菌率表。無菌保證值SAL被滅菌產(chǎn)品經(jīng)滅菌后微生物殘存概率的負對數(shù)值，表示物品被滅菌后的無菌狀態(tài)。按國際標準，規(guī)定濕熱滅菌法的無菌保證值不得低于6，即滅菌后微生物存活的概率不得大于百萬分之一。 藥典推薦的有效滅菌條件：115.5 30分鐘 121.5 20分鐘 126.5 15分鐘。 “無菌”的量化標準無菌的概念 最終滅菌產(chǎn)品“無菌”的標準：是每一百萬瓶中污染品（按理論計算并可用孢子試驗驗證）不得超過一瓶，（106）。百萬分之一污染概率的概念實例討論例A 某瓶產(chǎn)品121下污染菌的D值為1min，（污染微生物的耐熱參數(shù)，D值越大，該溫度下微生物的耐熱性越強）初始污染菌的量N0為10000個，121下滅菌時，存活數(shù)如下：滅菌時間 每瓶存活數(shù)指數(shù)表示式0100001041100010321001023101014110050.110-160.0110-270.00110-3 滅菌4min時，每瓶內(nèi)有1個菌，此批所有產(chǎn)品均屬污染品。經(jīng)7min滅菌后，每瓶產(chǎn)品中污染菌存活的概率達到10-3 ，即千分之一。例B 某批產(chǎn)品為1000瓶，121下污染菌的D值為1min，初始污染菌的量N0為10000個/瓶，將這批產(chǎn)品中總的污染菌數(shù)看成一個整體，在121下滅菌時，這批產(chǎn)品中存活的微生物數(shù)如下：滅菌時間批存活菌數(shù)指數(shù)表示式01000000010711000000106210000010531000010441000103510010261010171100經(jīng)7min滅菌后，這批產(chǎn)品中只有一個活的菌，即污染品的概率為千分之一。A和B等價。如果初始污染程度相同，在相同的滅菌條件下，用對數(shù)規(guī)則計算得出的某一瓶產(chǎn)品中污染菌滅菌后存活的概率等于該批存在污染品的概率。所以，在某滅菌批中，如某瓶微生物存活的概率低于百萬分之一時，該批產(chǎn)品即達到了無菌（滅菌完全）的要求。應(yīng)當說明，滅菌后，每瓶已滅菌品中那怕只有一個污染菌時，污染概率均為100。滅菌驗證 一般來說，藥典上給出的方法及條件是不需要再進行驗證的，但是為證明自己產(chǎn)品的無菌保證值不低于設(shè)定的標準，必須在生產(chǎn)過程中連續(xù)地、嚴格地對污染微生物進行監(jiān)控。了解污染菌的D值微生物的耐熱參數(shù)。制定適宜的滅菌程序，保證滅菌效果。 在滅菌操作中用（1）生物指示劑（嗜熱芽孢桿菌）、（2）可靠的物理指示劑（如三M試紙）（3）經(jīng)校正過的留底溫度計作為滅菌驗證和日常的監(jiān)控的手段。結(jié)果應(yīng)附在滅菌操作記錄中隨產(chǎn)品發(fā)行。（2）干熱滅菌法 本法系指物品在干燥空氣中加熱達到殺滅微生物的的方法。玻璃、金屬制容器、纖維制品、固體試劑以及若干濕熱不宜穿透的物質(zhì)如：甘油、液狀石蠟、脂肪油等均可用本法滅菌。與高壓蒸汽滅菌法比較有滅菌受熱不均勻的缺點。 所用設(shè)備：恒溫干熱烤箱。滅菌條件： 160170 2小時以上 170180 1小時以上 250 45分鐘以上（3）除菌過濾法： 本法系利用細菌不能通過致密具孔濾材的原理，除去對熱不穩(wěn)定的藥品溶液或液體物質(zhì)中的細菌從而達到無菌要求。過濾器材通常有濾柱、濾膜等?？讖綖?.22微米。新置的濾器應(yīng)先用水洗凈。事先滅菌或作在線滅菌，在除菌濾過前后均應(yīng)作過濾器的完好性試驗，即壓力維持試驗或起泡點試驗。過濾器不得對被濾過成分有吸附作用，也不能釋放物質(zhì)；不得使用有纖維脫落的過濾器，禁用含石棉的過濾器。為保證濾過除菌效果，應(yīng)使用兩個滅菌過濾器串連濾過法，或在灌裝前再用已滅菌的無菌過濾器進行濾過的辦法。一個過濾器的使用時間應(yīng)根據(jù)品種驗證后決定，一般不應(yīng)超過8小時。用LRV（log reduction value）來表示過濾能力。LRV是表示在規(guī)定條件下，指定菌液通過濾器后截留在濾器上的孢子數(shù)的對數(shù)值。對0.22微米濾器而言其每1平方厘米有效過濾面積的LRV應(yīng)小于7。（4）輻射滅菌法： 本法系通過將最終產(chǎn)品的容器和包裝暴露在由適宜放射源（通常用60Co）輻射的射線或適宜的電子加速器發(fā)出的射線中達到殺滅微生物的目的。對上述三種方法不適應(yīng)的醫(yī)療器械、容器、不受輻射破壞的藥品等均可應(yīng)用。常用滅菌最小吸收劑量為25KGY（千拉德），當劑量小于25KGY（千拉德）時，應(yīng)在照射前后增加微生物檢測。（5）環(huán)氧乙烷滅菌法： 本法系將產(chǎn)品暴露在充有環(huán)氧乙烷的環(huán)境中，使之達到滅菌的目的。本方法適用于氣體中穩(wěn)定的物質(zhì)。由于環(huán)氧乙烷本身具有毒性，且與空氣以一定比例混合時有爆炸的危險，因此滅菌程序的控制具有一定難度。整個滅菌過程應(yīng)在有技術(shù)熟練的人員監(jiān)督下進行，并應(yīng)具有微生物試驗的足夠設(shè)備。應(yīng)注意本方法僅適用于與該滅菌氣體適合的供試品。通過用分布在物體周圍的生物指示劑監(jiān)控滅菌效果，并對滅菌后的殘留量加以監(jiān)控。 在WHO 的GMP(1992)及歐盟GMP指南中要求除“濾過滅菌法”外其他幾種滅菌法都應(yīng)當達到低于百萬分之一的無菌保證水平。濾過滅菌法的結(jié)果與產(chǎn)品配方有關(guān)，特別是藥液的黏度、PH值 ，因此，應(yīng)當考慮的驗證方法是用缺陷假單孢菌（P diminuta ATCC 19146）作微生物挑戰(zhàn)試驗。可由企業(yè)與供貨商共同做。 2 、對不能采取滅菌的物品進行消毒處理消毒利用化學(xué)藥品抑制微生物生長、繁殖的手段。常用于環(huán)境、設(shè)備、無菌操作人員的手、鞋等無法滅菌處理的部位和物品。消毒劑的品種520倍稀釋的碘伏水溶液、0.1%新潔爾滅溶液、1：50的84消毒液、75%乙醇溶液、3%碘酒溶液、5%石炭酸（來蘇兒）消毒溶液、2%戊二醛水溶液、尼泊金酒精消毒液等。消毒劑的使用消毒劑濃度與實際消毒效果密切相關(guān)，應(yīng)按規(guī)定準確配制。為防止微生物耐受性，應(yīng)定期更換消毒劑品種。應(yīng)注意每種消毒溶液的消毒容量（能力），及需消毒物的污染程度，一般每1.5L消毒劑所檫洗面積不得大于2.5平方米，以確保清潔、滅菌效果。（四）建立防止人員微生物污染的規(guī)章制度和操作規(guī)范。 是的重要的軟件管理（1）衛(wèi)生管理制度和清潔驗證制度 廠房清潔 人員清潔 人員培訓(xùn) 清潔用具 非清潔區(qū)每次使用結(jié)束后應(yīng)用清水洗凈，每周一次用清潔劑洗滌并干燥萬級及十萬級區(qū)每次使用后均應(yīng)用清潔劑洗滌、干燥、消毒后放在潔凈塑料袋內(nèi)備用無菌操作區(qū)按萬級及十萬級區(qū)的要求進行，并且要經(jīng)過高壓釜滅菌 注：三十萬級區(qū)要求同十萬級區(qū)；無菌操作區(qū)目前多數(shù)企業(yè)為萬級，少數(shù)企業(yè)為整體百級及整體百級下的局部單向流，相當于WHO GMP（1992版）中的B級及A級。 消毒劑管理 定期環(huán)境滅菌 清潔驗證 建立書面的、確定的清洗方法即清潔規(guī)程。 采集足夠的數(shù)據(jù)，以證明按規(guī)定方法清潔后的設(shè)備，能始終如一地達到預(yù)定的清潔標準。 科學(xué)、完整的清潔驗證有以下幾個工作階段：選定清潔方法，制定清潔規(guī)程；制定驗證方案，確立合格標準，制定取樣和檢驗方法；開展試驗獲取數(shù)據(jù)評價結(jié)果得出結(jié)論 。如驗證結(jié)果表明清潔規(guī)程無法確保設(shè)備清潔達標，則需修改規(guī)程并重新驗證。（2）建立潔凈區(qū)（室）的管理制度。確定清潔頻率、滅菌方法、驗收標準；紫外燈、高效頭的更換周期（3）潔凈度的定期驗證檢測制度。檢測方法的操作規(guī)范和記錄檔案。（4）不同潔凈度區(qū)的工作服清洗、整理，消毒或滅菌制度。（5）實驗人員進入不同潔凈室（區(qū)）更衣的制度。實驗人員進入潔凈室（區(qū)）不得化妝、帶手表、戒指等首飾，及吃東西、嚼口香糖。應(yīng)先清潔洗手后。進入三十萬級及十萬級區(qū)：脫去個人外衣洗手烘干消毒手穿上該區(qū)域指定的工作服、帽、口罩、和工作鞋（不能讓頭發(fā)、衣袖、等暴露在外面）洗手烘干消毒手戴上無菌手套進入該區(qū)。進入萬級及百級區(qū)：沖淋沫浴脫去第一更工作鞋跨過分界臺換上第二雙無菌隔離鞋脫去第一更衣、帽、口罩、洗手烘干消毒手穿上第二潔凈工作服、帽、口罩（不能讓頭發(fā)、衣袖、等暴露在外面）洗手烘干消毒手換第二雙上滅菌手套再經(jīng)風(fēng)淋室30秒風(fēng)淋后進入該區(qū)；（所用工作服、帽、手套、口罩均應(yīng)滅菌過，隔離鞋可滅菌或消毒過）（6）人員無菌操作驗證制度（手套、無菌隔離衣的定期接觸碟培養(yǎng)無菌驗證、及通過培養(yǎng)劑無菌灌裝試驗的操作考核）（7）制藥用水定期驗證檢測制度。檢測方法的操作規(guī)范和記錄檔案（8）滅菌設(shè)備的管理、操作規(guī)范和驗證、記錄、檔案等管理制度。 我國GMP中具體提到各項規(guī)章制度的必要。結(jié)合各廠情況制定出具體的防止微生物污染的規(guī)章制度和操作規(guī)范是通過GMP認證的必需條件。2.4無菌灌裝系統(tǒng)、凍干機系統(tǒng)防止微生物污染的清潔驗證、無菌驗證無菌灌裝系統(tǒng)及凍干粉針劑系統(tǒng)是環(huán)境要求和工藝條件要求很高的制劑系統(tǒng)。在其生產(chǎn)驗證要點20項中涉及防止微生物污染的驗證主要有四點：（一）清潔驗證 （二）在線滅菌 （三）培養(yǎng)劑灌裝試驗 （四）無菌操作人員（一）清潔驗證 無菌灌裝系統(tǒng)及凍干機系統(tǒng)如帶在線清潔設(shè)備的，可以最終淋洗水（注射用水）達中國藥典要求作為標準。一般主要測微生物、熱源、電導(dǎo)或 PH、氯化物、銨鹽。也可測前批殘留物、或總有機碳。 取樣方法：選擇淋洗線路相對最下游的一個或幾個為取樣口，按微生物檢驗樣品取樣規(guī)程，收集清潔程序最后一步淋洗即將結(jié)束時的水樣1000ml；或者在淋洗完成后的設(shè)備中加入一定量的注射用水，用量必須小于最小生產(chǎn)批量，使其在系統(tǒng)內(nèi)循環(huán)后在相應(yīng)的位置取樣。采用后一種取樣法，結(jié)果的可靠性要好一些。 檢驗方法：按中國藥典中微生物限度檢查法檢查。 標準： 水樣微生物計數(shù)不得大于100個/1000 ml。 設(shè)備表面微生物計數(shù)（接觸碟法）不得大于1個/25cm2。（二）在線滅菌： 無菌灌裝系統(tǒng)及凍干機系統(tǒng)如帶在線滅菌設(shè)備的（蒸汽滅菌、環(huán)氧乙烷滅菌），可按中國藥典滅菌法要求驗證，如沒有帶在線滅菌設(shè)備只能靠消毒劑消毒的，應(yīng)通過驗證確定清潔及消毒程序，標準可參照我國規(guī)范中對百級潔凈區(qū)/室微生物的控制要求。（三）培養(yǎng)劑灌裝試驗： 按WHO GMP（1992