影響坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本收縮 課件

細(xì)胞外Ca2 濃度對(duì)坐骨神經(jīng) 腓腸肌收縮的影響 實(shí)驗(yàn)組員 貝金玲 朱思佳 馬忠梅 張麗香 一 選題的意義 1 Ca2 是人體必需的常量元素 也是構(gòu)成人體骨骼的最基本原料 體液含鈣量少 但起的作用卻很大 鈣的其中一個(gè)作用就是抑制神經(jīng)肌肉的過(guò)度興奮性 2 Ca2 離子是維持機(jī)體細(xì)胞正常功能的非常重要的離子 它對(duì)于維持細(xì)胞膜兩側(cè)的生物電位 維持正常的神經(jīng)傳導(dǎo)功能 維持正常的肌肉收縮與舒張功能以及神經(jīng) 肌肉傳導(dǎo)功能都具有重要的作用 還有一些激素的作用均通過(guò)鈣離子表現(xiàn)出來(lái) 3 因此 細(xì)胞內(nèi)外鈣離子濃度的變化必然會(huì)引起細(xì)胞生理活性發(fā)生改變 本實(shí)驗(yàn)就不同濃度的Ca2 溶液對(duì)蟾蜍離體腓腸肌收縮性的影響進(jìn)行了研究 為進(jìn)一步探討Ca2 的作用及其原理提供實(shí)驗(yàn)依據(jù) 二 特色與創(chuàng)新之處 1 Ca2 是興奮 收縮的藕聯(lián)因子 其作用是正性的 2 但這是指在興奮發(fā)生之后 對(duì)于因快鈉通道開(kāi)放引起的鈉離子內(nèi)流而產(chǎn)生去極化為主的快反應(yīng)細(xì)胞來(lái)說(shuō) 鈣離子由于 膜屏障作用 的存在 細(xì)胞外高鈣使鈉離子內(nèi)流受到抑制 細(xì)胞興奮性有所下降 肌肉收縮的原理 滑行學(xué)說(shuō)滑行過(guò)程 AP Ca2 內(nèi)流 Ca2 i Ca2 與肌鈣蛋白結(jié)合 原肌球蛋白構(gòu)象改變 雙螺旋結(jié)構(gòu)扭轉(zhuǎn) 現(xiàn)出肌動(dòng)蛋白與橫橋結(jié)合的位點(diǎn) 肌動(dòng)蛋白與橫橋結(jié)合 扭動(dòng) 解離 橫橋循環(huán) 細(xì)肌絲不斷向暗帶移動(dòng) ATP分解 肌小節(jié)縮短 肌肉收縮 細(xì)胞外Ca對(duì)Na內(nèi)流有競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用稱為膜屏障效應(yīng) 細(xì)胞外Ca對(duì)Na去極產(chǎn)生阻礙 因此當(dāng)血液中Ca不足時(shí) 由于Na容易去極 細(xì)胞易興奮 值得一提的是 由于細(xì)胞內(nèi)終池中的Ca一般比較豐富 因此對(duì)骨骼肌收縮不會(huì)產(chǎn)生影響 所以興奮性增大了的細(xì)胞可引起頻繁的收縮 這也是缺Ca但仍會(huì)出現(xiàn)抽搐的原因 膜屏障效應(yīng) 所以 本組認(rèn)為鈣離子是細(xì)胞興奮抑制離子 當(dāng)細(xì)胞外低鈣時(shí) 鈣離子的 膜屏障作用 減弱 細(xì)胞興奮性增高 通過(guò)此次實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)去探討鈣離子的膜屏障作用具有重要意義 三 可行性分析 實(shí)驗(yàn)材料及儀器實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 蟾蜍實(shí)驗(yàn)器材 常用手術(shù)器械 蛙板 培養(yǎng)皿 滴管 紗布 粗棉線 任氏液 肌槽 毀髓針 玻璃解剖針 神經(jīng)屏蔽盒 大頭針 燒杯 RM6240B生理信號(hào)記錄儀 張力傳感器 膠頭滴管 移液管 任氏液配方各試劑 不同Ca2 濃度任氏液等 實(shí)驗(yàn)儀器和設(shè)備以及試劑都是實(shí)驗(yàn)室所具備的 四 擬采用的研究方法 1 Ca2 溶液的配制方法 1 高濃度Ca2 溶液 氯化鈣的量是正常任氏液中氯化鈣含量的10倍 其它成分同任氏液 2 低濃度鈣離子溶液 氯化鈣的量是正常任氏液中氯化鈣含量的十分之一 其它成分同任氏液 任氏液成分 NaCl32 5g KCl1 4g CaCl2 1 2g NaH2PO4 1 0g NaHCO3 4 0g 葡萄糖 2 0g 以上物質(zhì)溶解在1000ml蒸餾水中配成任氏液 備注 實(shí)際實(shí)驗(yàn)各實(shí)際用量根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)及實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有情況來(lái)進(jìn)行計(jì)算 2 制備蟾蜍坐骨神經(jīng) 腓腸肌標(biāo)本 按常規(guī)方法用生長(zhǎng)狀況良好的成體蟾蛛制備坐骨神經(jīng)排腸肌標(biāo)本 并在肌肉端和神經(jīng)端分別結(jié)扎一根棉線備用 在任氏液中穩(wěn)定5min 每組均用標(biāo)準(zhǔn)任氏液作為對(duì)照后再分別浸泡到Ca2 濃度為0 12g L 低濃度 1 2g L 標(biāo)準(zhǔn) 12g L 高濃度 任氏液溶液浸潤(rùn)5min 3 儀器連接 如下圖所示 連接儀器裝置 注意保持標(biāo)本的濕潤(rùn) 4 刺激參數(shù)的設(shè)置 1 閾強(qiáng)度的測(cè)定 起始刺激 0 05V 增量 0 02V 刺激時(shí)間間隔 20mS 組間延時(shí) 4S 波寬 1mS 2 最適刺激強(qiáng)度的測(cè)定 起始刺激 閾強(qiáng)度 增量 0 02V 刺激時(shí)間間隔 20mS 組間延時(shí) 4S 波寬 1mS 備注 實(shí)際實(shí)驗(yàn)各參數(shù)值根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)來(lái)進(jìn)行設(shè)定 3 記錄閾強(qiáng)度和最適刺激強(qiáng)度由RM6240生理信號(hào)記錄儀自動(dòng)輸出刺激 記錄閾強(qiáng)度和最適刺激強(qiáng)度 4 記錄單收縮各參數(shù)收縮的幅度收縮和舒張的時(shí)程 5 實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄 五 預(yù)期實(shí)驗(yàn)結(jié)果 低于標(biāo)準(zhǔn)濃度的Ca2 可以使標(biāo)本興奮性升高 閾值降低 最適刺激強(qiáng)度降低 最適刺激強(qiáng)度下的收縮幅度升高 高于標(biāo)準(zhǔn)濃度的Ca2 可以使標(biāo)本興奮性降低 閾值升高 最適刺激強(qiáng)度升高 最適刺激強(qiáng)度下的收縮幅度降低 本實(shí)驗(yàn)探討了不同濃度Ca2 對(duì)坐骨神經(jīng) 腓腸肌收縮的影響 但由于實(shí)驗(yàn)條件和時(shí)間有限所用Ca2 濃度梯度較大 組數(shù)較少 可能會(huì)使所得結(jié)論局限在一定范圍內(nèi) 要想得到進(jìn)一步的結(jié)論 需做進(jìn)一步探究 六 試驗(yàn)中遇到的困難 七 參考文獻(xiàn)目錄 1 陳躍先 鈣的生理作用 J 福建醫(yī)藥雜志 2000 22 2 2 王玢 左明雪 人體及動(dòng)物生理學(xué) 第二版 M 北京 高等教育出版社 2002 3 解景田 趙靜 生理學(xué)實(shí)驗(yàn) 第二版 M 北京 高等教育出版社 2002 4 孫洪兆 水合氯醛對(duì)離體骨骼肌收縮性的影響 J 山東教育學(xué)院