生化分析儀的校準(zhǔn).ppt

生化分析儀的校準(zhǔn) 重慶醫(yī)科大學(xué)附一院陳宏礎(chǔ) 一個實驗室測定結(jié)果的可靠性是由其精密度 準(zhǔn)確性及可比性所決定的 一般必需從下幾方面著手 1 選好測定方法 2 購買質(zhì)量過硬的試劑盒 3 要有質(zhì)優(yōu)的測試儀器 必需進(jìn)行正確的校準(zhǔn) 還要規(guī)范化操作 搞好過硬的室內(nèi)質(zhì)量控制 積極參加室間質(zhì)評活動 還要有一支素質(zhì)高的隊伍 現(xiàn)就生化分析儀的校準(zhǔn)問題提出個人看法 一 校準(zhǔn)的重要性和必要性首先必須明確生化分析儀不論如何先進(jìn) 它還是一個比較器 它測試出來的標(biāo)本結(jié)果是隨著標(biāo)準(zhǔn)限的設(shè)置不同而變化的 二 確立測定系統(tǒng)的概念 對于一個臨床檢測項目 測定系統(tǒng)包括測定原理 試劑 儀器 校準(zhǔn)品四要素 在全自動生化分析儀上使用配套的試劑和標(biāo)準(zhǔn)品 即日立7170使用寶靈曼的試劑和校準(zhǔn)品 c f a s 在貝克曼CX 7生化分析儀上使用貝克曼的試劑和校準(zhǔn)品等 各儀器廠家均有自己的標(biāo)準(zhǔn)測定系統(tǒng) 對于校準(zhǔn)品不能亂用 如絕對不能用貝克曼的校準(zhǔn)品校準(zhǔn)日立生化儀 同樣也不能用寶靈曼的校準(zhǔn)品去校準(zhǔn)貝克曼生化儀 三 校準(zhǔn)品和質(zhì)控品 校準(zhǔn)品 Calibrationmaterials 含有已知量的欲測物 用以校準(zhǔn)該測定方法的數(shù)值 它與該方法及試劑 儀器是相關(guān)聯(lián)的 校準(zhǔn)品的作用是為了減少或消除儀器 試劑等造成的系統(tǒng)誤差 因此最好為人血清基質(zhì) 以減少基質(zhì)效應(yīng)造成的誤差 質(zhì)控品 Controlmaterials 只用于和待測標(biāo)本同時測定的 為了控制標(biāo)本的測定誤差 因此要求保存時間十分穩(wěn)定 前者是校準(zhǔn)其值而后者是控制誤差用的 四 校準(zhǔn)前準(zhǔn)備 1 了解燈泡已使用多久 檢查飄移是否合乎要求 2 檢查比色杯的清潔及磨損情況 必要時進(jìn)行更換 3 用清潔劑泡洗管道4 測定儀器的精密度及線性是否達(dá)到儀器性能要求 五 定值質(zhì)控血清是否可以校準(zhǔn)儀器 我們在相同條件下 同時用五個進(jìn)口產(chǎn)品 每家兩種不同濃度的定值如TP ALB UREA UA ALP GGT CK HBDH LD AMY等 表不同廠家定值質(zhì)控對TP ALB AST ALP結(jié)果與靶值比較 通過上述結(jié)果比較 說明不同廠家生產(chǎn)的定值質(zhì)控血清靶值之間有的相差較大 提示我們決不能用定值質(zhì)控血清代替校準(zhǔn)品作校準(zhǔn)用 六 校準(zhǔn)方法 例如日立 Hitachi 系列您必須購買寶靈曼 Boehringer 的試劑及其校準(zhǔn)品c f a s Calibratorforautomatedsystems 同時準(zhǔn)備10至20份新鮮血清 按寶靈曼試劑盒內(nèi)的說明書設(shè)置參數(shù) 用c f a s 校準(zhǔn)血清進(jìn)行校準(zhǔn) 即可獲得各項目的校準(zhǔn)K值 同時觀察一下各項目測定時反應(yīng)進(jìn)程圖 檢查各項目參數(shù)設(shè)置是否在最佳位置 如不在最佳位置應(yīng)予以重新設(shè)置并測定 此時得到的K值即為準(zhǔn)確的校準(zhǔn)K值 然后測定待測的10至20份新鮮血清三次取其平均值 應(yīng)該說此結(jié)果是用Hitachi Boehringer檢測系統(tǒng)所獲的測定值 然后用此血清值校準(zhǔn)其它測定系統(tǒng) 表日立7170 BM試劑每天進(jìn)行校準(zhǔn) n 81 K值的變化 表日立7170 BM試劑每天進(jìn)行校準(zhǔn) n 81 K值的變化 七 關(guān)于酶活性測定校準(zhǔn)問題 酶活力 u l A min V 106 v 1 令k V 106 v 則酶活力 u l A min k a 理論K值 根據(jù)理論摩爾消光系數(shù) 來計算 如NADH為6 22 103b 實測K值 由于儀器波長的精密及半寬度不同 而應(yīng)根據(jù)實測 值來設(shè)定K值c 廠家給的K值 廠家生產(chǎn)試劑盒說明書上提供的K值 有的廠家提供6 3 103 d 校準(zhǔn)K值 通過校準(zhǔn)物直接校準(zhǔn)得到的K值 常用K值有以下幾種 在日立7170A全自動生化分析儀上可以得到幾種不同的酶K值 見下表 在日立7170A全自動生化分析儀上可以得到幾種不同的酶K值 見下表 表日立7170A全自動生化分析儀上用不同方法得到幾種酶的K值 注 1校準(zhǔn)物為寶靈曼c(diǎn) f a s 試劑也用寶靈曼的配套試劑 2括號內(nèi)數(shù)字是該K值與理論K值相比的變化率825 8 9 以上摘自張克堅文章中 從上述K值中不難發(fā)現(xiàn)實測K值大于理論K值 這說明生化分析儀的測光系統(tǒng)還存在著一定誤差 如波長 半寬度及光徑等偏差 使儀器達(dá)不到理論上的最佳狀態(tài) 校準(zhǔn)K值與實測K值之間也存在一定的差距 即使指示物和儀器相同 其差異可能由試劑及校準(zhǔn)品造成的 作者認(rèn)為最好使用校準(zhǔn)K值 但必須由兩個先決條件 1必須使用配套的試劑 2必須使用配套的高質(zhì)量的校準(zhǔn)品 但校準(zhǔn)K值應(yīng)有其溯源性 關(guān)于酶活標(biāo)準(zhǔn)品 歐洲標(biāo)準(zhǔn)局 BCR 和美國國家標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)研究院 NIST 均發(fā)表了人血清基質(zhì)的酶活性標(biāo)準(zhǔn)物 相信不久將會有公認(rèn)的標(biāo)準(zhǔn) 校準(zhǔn) 品問世 八 必須擬訂校準(zhǔn)計劃 文件 校準(zhǔn)工作不是僅進(jìn)行一次就可萬事無憂一勞永逸 而必須經(jīng)常化 按照 臨床實驗室質(zhì)量控制 QC 的要求 草案 必須要求擬定校準(zhǔn)計劃 其內(nèi)容包括 1 建立校準(zhǔn)方法 選擇合適 配套 的校準(zhǔn)品 包括校準(zhǔn)品數(shù)目 類型和濃度 如有可能校準(zhǔn)品應(yīng)溯源到參考方法或參考物質(zhì) 確定校準(zhǔn)的頻度 至少每六個月進(jìn)行一次校準(zhǔn) 改變試劑的種類 或者批號更換了 如果實驗室能說明改變試劑批號并不影響結(jié)果的范圍 則可以不進(jìn)行校準(zhǔn) 儀器或者檢驗系統(tǒng)進(jìn)行一次大的預(yù)防性維護(hù)或者更換了重要部件 這些都有可能影響檢驗性能 質(zhì)控反映出異常