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2015全國一卷生物選修l:生物技術(shù)實(shí)踐(15分)已知微生物A可以產(chǎn)生油脂,微生物B可以產(chǎn)生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生產(chǎn)?;卮鹩嘘P(guān)問題:(1)顯微觀察時(shí),微生物A菌體中的油脂通??捎胈染色。微生物A產(chǎn)生的油脂不易揮發(fā),可選用_(填“萃取法”或“水蒸氣蒸餾法”)從菌體中提取。(2)為了從自然界中獲得能產(chǎn)生脂肪酶分微生物B的單菌落,可從含有油料作物種子腐爛物的土壤中取樣,并應(yīng)選用以_為碳源的固體培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。(3)若要測定培養(yǎng)液中微生物B的菌體數(shù),可在顯微鏡下用_直接計(jì)數(shù);若要測定其活菌數(shù)量,可選用_法進(jìn)行計(jì)數(shù)。(4)為了確定微生物B產(chǎn)生的脂肪酶的最適溫度,某同學(xué)測得相同時(shí)間內(nèi),在35、40、45溫度下降解10g油脂所需酶量依次為4mg、1mg、6mg,則上述三個(gè)溫度中,_條件下該酶活力最小。為了進(jìn)一步確定該酶的最適溫度,應(yīng)圍繞_設(shè)計(jì)后續(xù)實(shí)驗(yàn)。【答案】(1)蘇丹III染液或者蘇丹IV染液 萃取法(2) 脂肪(3) 血細(xì)胞計(jì)數(shù)板 稀釋涂布平板(4) 45 402016全國一卷生物選修l:生物技術(shù)實(shí)踐(15分)空氣中的微生物在重力等作用下,可以一定程度地沉降。某研究小組欲用平板收集教室空氣中的微生物,以了解教室內(nèi)不同高度空氣中微生物的分布情況。實(shí)驗(yàn)步驟如下:配置培養(yǎng)基(成分:牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O); 制作無菌平板; 設(shè)置空白對(duì)照組和若干實(shí)驗(yàn)組,進(jìn)行相關(guān)操作; 將各組平板置于37恒溫箱中培養(yǎng)一段時(shí)間,統(tǒng)計(jì)各組平板上菌落的平均數(shù)?;卮鹣铝袉栴}:(1)該培養(yǎng)基中微生物所需的氮來源于_。若要完成步驟,該培養(yǎng)基中的成分X通常是_。(2)步驟中,實(shí)驗(yàn)組的操作是_。(3)若在某次調(diào)查中,某一實(shí)驗(yàn)組平板上菌落平均數(shù)為36個(gè)/平板,而空白對(duì)照組的一個(gè)平板上出現(xiàn)了6個(gè)菌落,這種結(jié)果說明在此次調(diào)查中出現(xiàn)了_現(xiàn)象。若將30(即36-6)個(gè)/平板作為本組菌落數(shù)的平均值,該做法_(填“正確”或“不正確”)。【答案】(1)牛肉膏、蛋白胨 瓊脂(2)將各實(shí)驗(yàn)組平板分別放置在教室不同高度的位置上,開蓋暴露一段時(shí)間(3)污染 不正確2009寧夏卷生物選修l:生物技術(shù)實(shí)踐(15分)(1)在大腸桿菌培養(yǎng)過程中,除考慮營養(yǎng)條件外,還要考慮_、_和滲透壓等條件。由于該細(xì)菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡單、變異類型容易選擇、_、_等優(yōu)點(diǎn),因此常作為遺傳學(xué)研究的實(shí)驗(yàn)材料。(2)在微生物培養(yǎng)操作過程中,為防止雜菌污染,需對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行_(消毒、滅菌);操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和_;靜止空氣中的細(xì)菌可用紫外線殺滅,其原因是紫外線能使蛋白質(zhì)變性,還能_。(3)若用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)大腸桿菌活菌的個(gè)數(shù),要想使所得估計(jì)值更接近實(shí)際值,除應(yīng)嚴(yán)格操作、多次重復(fù)外,還應(yīng)保證待測樣品稀釋的_。(4)通常,對(duì)獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對(duì)細(xì)菌進(jìn)行初步的_。(5)培養(yǎng)大腸桿菌時(shí),在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對(duì)于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測方法是_。(6)若用大腸桿菌進(jìn)行實(shí)驗(yàn),使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過_處理后才能丟棄,以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散?!敬鸢浮浚?)溫度酸堿度易培養(yǎng)生活周期短(2)滅菌消毒損傷DNA的結(jié)構(gòu)(3)比例合適(4)鑒定(或分類)(5)將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時(shí)間,觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生.(6)滅菌2013全國一卷生物選修l:生物技術(shù)實(shí)踐(15分)回答下列有關(guān)泡菜制作的問題(1)制作泡菜時(shí),所用鹽水需煮沸,其目的是_,為了縮短制作時(shí)間,有人還會(huì)在冷卻后的鹽水中加入少量陳泡菜液,加入陳泡菜液的作用是_。(2)泡菜制作過程中,乳酸發(fā)酵的過程即為乳酸菌進(jìn)行_的過程。該過程發(fā)生在乳酸菌細(xì)胞的_中。(3)泡菜制作過程中影響亞硝酸鹽含量的因素有_、_和_等。(4)從開始制作到泡菜品質(zhì)昂佳這段時(shí)間內(nèi),泡菜液逐漸變酸。這段時(shí)聞內(nèi)泡菜壇中乳酸菌和其他雜菌的消長規(guī)律是_,原因是_?!敬鸢浮浚?)殺滅雜菌增加乳酸菌的數(shù)量(2)無氧呼吸細(xì)胞質(zhì)(3)溫度腌制時(shí)間食鹽用量(4)乳酸菌數(shù)量增加,雜菌數(shù)量減少乳酸菌比雜菌更為耐酸2013寧夏卷生物選修l:生物技術(shù)實(shí)踐(15分)臨床試用抗生素前,有時(shí)需要做細(xì)菌耐藥實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)時(shí),首先要從病人身上獲取少量樣本,然后按照一定的實(shí)驗(yàn)步驟操作,以確定某致病菌對(duì)不同抗生素的敏感性?;卮鹣铝袉栴}:(1)為了從樣本中獲取致病菌菌落,可用_法或_法將樣本接種于固體培養(yǎng)基表面,經(jīng)過選擇培養(yǎng)、鑒別等步驟獲得。(2)取該單菌落適當(dāng)稀釋,用_法接種于固體培養(yǎng)基表面,在37培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h,使其均勻生長,布滿平板。(3)為了檢測該致病菌對(duì)于抗生素的敏感性,將分別含有A,B,C,D四種抗生素的濾紙片均勻置于該平板上的不同位置,培養(yǎng)一段時(shí)間后,含A的濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈,說明該致病菌對(duì)抗生素A_;含B的濾紙片周圍沒有出現(xiàn)透明圈,說明該致病菌對(duì)抗生素B_;含C的濾紙片周圍的透明圈比含A的小,說明_;含D的濾紙片周圍的透明圈也比含A的小,且透明圈中出現(xiàn)了一個(gè)菌落,在排除雜菌污染的情況下,此菌落很可能是抗生素D的_。(4)根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果,為達(dá)到抗菌目的,最好應(yīng)選擇抗生素_?!敬鸢浮浚?)劃線稀釋涂布(或涂布)(2)涂布(3)敏感不敏感該致病菌對(duì)C的敏感性比對(duì)A弱耐藥菌(4)A2013山東卷生物選修l:生物技術(shù)實(shí)踐(15分)胡蘿卜素是一種常用的食用色素,可分別從胡蘿卜或產(chǎn)生胡蘿卜素的微生物體中提取獲得,流程如下:(1)篩選產(chǎn)胡蘿卜素的酵母菌R時(shí),可選用_或平板劃線法接種。采用平板劃線法接種時(shí)需要先灼燒接種環(huán)其目的是_。(2)培養(yǎng)酵母菌R時(shí),培養(yǎng)基中的蔗糖和硝酸鹽可以分別為酵母菌R提供_和_。(3)從胡蘿卜中提取胡蘿卜素時(shí),干燥過程應(yīng)控制好溫度和_以防止胡蘿卜素分解;萃取過程中宜采用_方式加熱以防止溫度過高;萃取液濃縮前需進(jìn)行過濾。其目的是_。(4)紙層析法可用于鑒定所提取的胡蘿卜素。鑒定過程中需要用胡蘿卜素標(biāo)準(zhǔn)品作為_?!敬鸢浮浚?)稀釋涂布平板法滅菌(防止雜菌污染)(2)碳源氮源(3)時(shí)間水浴濾去不溶物(4)(實(shí)驗(yàn))對(duì)照2009廣東卷生物選修l:生物技術(shù)實(shí)踐(10分)材料:飼料原料中的磷元素有相當(dāng)一部分存在于植酸中,豬、禽等動(dòng)物由于缺乏有關(guān)酶,無法有效利用植酸,造成磷源浪費(fèi),而且植酸隨糞便排除后易造成環(huán)境有機(jī)磷污染。植酸酶能催化植酸水解成肌醇和磷酸,因此成為目前重要的飼料添加劑之一。(1)商品化植酸酶主要來自微生物。在產(chǎn)酶菌株篩選過程中,常在基本培養(yǎng)基中添加不溶于水的植酸鈣制成固體平板,植酸鈣被植酸酶分解后可在平板上產(chǎn)生_,可根據(jù)其大小選擇目的菌株,所得菌株需要進(jìn)一步測定植酸酶活性?;钚詼y定可以植酸鈉作為底物,活性可用一定條件下單位時(shí)間_表示。(2)利用上述所得菌株制備植酸酶的流程如下圖:純酶透析純化粗提物()透析離心發(fā)酵液 含酶的發(fā)酵液 菌體去除 透析液()去除中的主要成分為_;中包含植酸酶等多種蛋白質(zhì)。請(qǐng)寫出一種純化得到植酸酶的方法及其依據(jù)。(3)為建設(shè)基因工程菌,可用PCR等技術(shù)從上述菌株中克隆植酸酶基因。PCR反應(yīng)包含多次循環(huán),每次循環(huán)包括三步:_。反應(yīng)過程中打開模板DNA雙鏈的方法是_。(4)植酸酶外,微生物還能應(yīng)用在哪些酶的生產(chǎn)中?(至少寫兩種)【答案】(1)透明圈 植酸鈉的消耗量(減少量)或磷酸(肌醇)的生成量(2)小分子雜質(zhì) 凝膠色譜法:根據(jù)蛋白質(zhì)之間的分子大小、吸附性質(zhì)等差異進(jìn)行純化(或電泳法:根據(jù)蛋白質(zhì)之間的電荷、分子大小等差異進(jìn)行純化)(3)變性、復(fù)性和延伸(長) 加熱(或高溫處理)(4)蛋白酶、脂肪酶、纖維素酶2013全國一卷生物選修l:生物技術(shù)實(shí)踐(15分)回答下列有關(guān)泡菜制作的問題:(1)制作泡菜時(shí),所用鹽水需煮沸,其目的是_。為了縮短制作時(shí)間,有人還會(huì)在冷卻后的鹽水中加入少量陳泡菜液,加入陳泡菜液的目的是_。(2)泡菜制作過程中,乳酸發(fā)酵的過程即為乳酸菌進(jìn)行_的過程。該過程發(fā)生在乳酸菌細(xì)胞的_中。(3)泡菜制作過程中影響亞硝酸鹽含量的因素有_、_和_等。(4)從開始制作到泡菜品質(zhì)最佳這段時(shí)間內(nèi),泡菜液逐漸變酸,這段時(shí)間內(nèi)泡菜壇中乳酸菌和其他雜菌的消長規(guī)律是_,原因是_?!敬鸢浮浚?)殺滅雜菌 增加乳酸菌數(shù)量 (2)無氧呼吸 細(xì)胞質(zhì) (3)溫度 腌制時(shí)間 食言用量 (4)乳酸菌數(shù)量增多,雜菌數(shù)量減少 乳酸菌比雜菌更為耐酸2011新課標(biāo)全國卷生物選修l:生物技術(shù)實(shí)踐(15分)有些細(xì)菌可分解原油,從而消除由原油泄漏造成的土壤污染,某同學(xué)欲從污染的土壤中篩選出能高效降解原油的菌株?;卮饐栴}:(1)在篩選過程中,應(yīng)將土壤樣品稀釋液接種于以_為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上,從功能上講,該培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。(2)純化菌種時(shí),為了得到單菌落,常采用的接種方法有兩種,即_和_。(3)為了篩選出高效菌株,可比較單菌落周圍分解圈的大小,分解圈大說明該菌株的降解能力_。(4)通常情況下,在微生物培養(yǎng)過程中,實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法有灼燒滅菌、_和_。無菌技術(shù)要求實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈_附近?!敬鸢浮?(1)原油 選擇(2)平板劃線法 稀釋涂布平板法(3)強(qiáng) (4)干熱滅菌法 高壓蒸汽滅菌法 火焰 2012全國新課標(biāo)生物選修l:生物技術(shù)實(shí)踐(15分)為了探究6-BA和IAA對(duì)某菊花品種莖尖外植體再生叢芽的影響,其研究小組在MS培養(yǎng)基中加入6-BA和IAA,配制成四種培養(yǎng)基(見下表),滅菌后分別接種數(shù)量相同、生長狀態(tài)一致、消毒后的莖尖外植體,在適宜條件下培養(yǎng)一段時(shí)間后,統(tǒng)計(jì)再生叢芽外植體的比率(m),以及再生叢芽外植體上的叢芽平均數(shù)(n),結(jié)果如下表。培養(yǎng)基編號(hào)濃度/mgL-1m/n/個(gè)6-BAIAA10.5076.73.120.177.46.130.266.75.340.560.05.0回答下列問題(1)按照植物的需求量,培養(yǎng)基中無機(jī)鹽的元素可分為_和_兩類。上述培養(yǎng)基中,6-BA屬于_類生長調(diào)節(jié)劑。(2)在該實(shí)驗(yàn)中,自變量是_,因變量是_,自變量的取值范圍是_。 (3)從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知,誘導(dǎo)叢芽總數(shù)最少的培養(yǎng)基是_號(hào)培養(yǎng)基。(4)為了誘導(dǎo)該菊花試管苗生根,培養(yǎng)基中一般不加入_ (填“6-BA”或“IAA”)。【答案】(1)大量元素 微量元素 細(xì)胞分裂素 (2)1AA濃度 再生叢芽外植體的比率(m)和再生叢芽外植體的叢芽平均數(shù)(n) 00.5 mgL-1(3)1 (4)6-BA2013新課標(biāo)全國卷生物選修l:生物技術(shù)實(shí)踐(15分)臨床使用抗生素前,有時(shí)需要做細(xì)菌耐藥實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)時(shí),首先要從病人身上獲取少量樣本,然后按照一定的實(shí)驗(yàn)步驟操作,以確定某致病菌對(duì)不同抗生素的敏感性?;卮鹣铝袉栴}:(1)為了從樣本中獲取致病菌單菌落,可用_法或_法將樣本接種于固體培養(yǎng)基表面,經(jīng)過選擇培養(yǎng)、鑒別等步驟獲得。(2)取該單菌落適當(dāng)稀釋,用_法接種于固體培養(yǎng)基表面,在37培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h,使其均勻生長,布滿平板。(3)為了檢測該致病菌對(duì)于抗生素的敏感性,將分別含有A、B、C、D四種抗生素的濾紙片均勻置于該平板上的不同位置,培養(yǎng)一段時(shí)間后,含A的濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈,說明該致病菌對(duì)抗生素A_;含B的濾紙片周圍沒有出現(xiàn)透明圈,說明該致病菌對(duì)抗生素B_ ;含C的濾紙片周圍的透明圈比含A的小,說明_;含D的濾紙片周圍的透明圈也比含A的小,且透明圈中出現(xiàn)了一個(gè)菌落,在排除雜菌污染的情況下,此菌落很可能是抗生素D的_。(4)根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果,為達(dá)到抗菌目的,最好應(yīng)選用抗生素_?!敬鸢浮浚?)劃線 稀釋涂布(或涂布) (2)涂布 (3)敏感 不敏感 該致病菌對(duì)C的敏感性比對(duì)A弱 耐藥菌 (4)A2015新課標(biāo)全國卷生物選修l:生物技術(shù)實(shí)踐(15分)回答與胡蘿卜素有關(guān)的問題:(1)胡夢卜含有的胡蘿卜素中,最主要的是_(填“-
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