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專題2 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用課題1微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng) 復(fù)習(xí) 微生物的類群 微生物 原核類 真核類 非細(xì)胞類 細(xì)菌 支原體 放線菌 藍(lán)藻 個(gè)體微小 結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單 酵母菌 霉菌 食用菌 真菌 原生生物 顯微藻類 原生生物 如 草履蟲 變形蟲等 病毒 類病毒 朊病毒 微生物的共同特點(diǎn) 一 微生物基礎(chǔ)知識(shí) 舉例1 細(xì)菌1 細(xì)菌的形態(tài) 細(xì)菌 單細(xì)胞不分枝微小而透明 染料染色后顯微鏡可見 細(xì)胞壁 成分肽聚糖 細(xì)胞膜 擬核 無(wú)染色體 無(wú)核膜 無(wú)核仁質(zhì)粒 小型環(huán)狀dna細(xì)胞器 只有核糖體 2 細(xì)菌的構(gòu)造 圖1 3細(xì)菌的結(jié)構(gòu) 細(xì)菌主要是以二分裂的方式進(jìn)行增殖 如右圖 3 細(xì)菌的繁殖 4 細(xì)菌的菌落 定義 單個(gè)或者少數(shù)細(xì)菌在固體培養(yǎng)基上大量繁殖時(shí) 會(huì)形成一個(gè)肉眼可見的 具有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞群體 叫做菌落 特征 大小 形狀 光澤度 顏色 硬度 透明度等 可以作為菌種鑒定的重要依據(jù) 幾種菌落及其形態(tài) 舉例2 病毒1 結(jié)構(gòu) 由核酸和蛋白質(zhì)構(gòu)成 sars病毒 禽流感病毒 朊病毒 蛋白質(zhì)病毒 吸附 注入 合成 釋放 組裝 2 病毒的繁殖 病毒的增殖一般可分五個(gè)階段 即 吸附 注入核酸 合成核酸和蛋白質(zhì) 組裝 釋放 3 病毒的營(yíng)養(yǎng)方式 寄生 舉例3 真菌 酵母菌 青霉菌 青霉素 二 培養(yǎng)基的概念 劃書p14 和種類 不加凝固劑 加凝固劑 如瓊脂 大量繁殖 觀察微生物的運(yùn)動(dòng) 分類鑒定 微生物分離 鑒定 活菌計(jì)數(shù) 保藏菌種 天然物質(zhì) 成分不明確 工業(yè)生產(chǎn) 培養(yǎng)基成分明確 分類 鑒定 在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì) 以抑制不需要的微生物的生長(zhǎng) 促進(jìn)所需要的微生物的生長(zhǎng) 培養(yǎng) 分離出特定微生物 在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品 用以鑒別不同種類的微生物 鑒別不同種類微生物 選擇培養(yǎng)基 液體培養(yǎng)基 半固體培養(yǎng)基 固體培養(yǎng)基最常用 液體培養(yǎng)基 表面生長(zhǎng) 均勻混濁生長(zhǎng) 沉淀生長(zhǎng) back 半固體培養(yǎng)基 是否運(yùn)動(dòng) 無(wú)動(dòng)力 有動(dòng)力 彌散 固體培養(yǎng)基 菌落 舉例1 血清中含有 多種蛋白質(zhì) 白蛋白 球蛋白 鐵蛋白等 多種金屬離子 激素 促貼附物質(zhì) 如纖粘蛋白 冷析球蛋白 膠原等 各種生長(zhǎng)因子 轉(zhuǎn)移蛋白 不明成分 舉例2 合成培養(yǎng)基 只能維持細(xì)胞生存 要想使細(xì)胞生長(zhǎng)和繁殖 還需補(bǔ)充一定量的天然培養(yǎng)基 如血清 舉例3 選擇培養(yǎng)基 加入青霉素的培養(yǎng)基 分離酵母菌 霉菌等真菌加入高濃度食鹽的培養(yǎng)基 分離金黃色葡萄球菌不加氮源的無(wú)氮培養(yǎng)基 分離固氮菌不加含碳有機(jī)物的無(wú)碳培養(yǎng)基 分離自養(yǎng)型微生物加入青霉素等抗生素的培養(yǎng)基 分離導(dǎo)入了目的基因的受體細(xì)胞加入氨基喋呤 次黃嘌呤和胸腺嘧啶核苷的選擇培養(yǎng)基 分離雜交瘤細(xì)胞 基本物質(zhì) 三 微生物需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及功能 1 碳源2 氮源3 無(wú)機(jī)鹽4 水 凡是能為微生物提供所需碳元素的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 無(wú)機(jī)碳源 co2 nahco3 碳酸鹽等 有機(jī)碳源 糖類 脂肪酸 蛋白質(zhì) 花生粉餅 石油等 概念 來源 不同微生物所利用的碳源不同 1 微生物的碳源 異養(yǎng)型微生物的碳源為 含碳有機(jī)物 有機(jī)碳 自養(yǎng)型微生物的碳源為 含碳無(wú)機(jī)物 無(wú)機(jī)碳 思考 為何基本成分歸納為這四類 滿足生物生長(zhǎng)發(fā)育需要的主要元素 c h o n p s c h o n90 無(wú)機(jī)氮源 n2 nh4 氨鹽 no3 硝酸鹽 nh3 有機(jī)氮源 尿素 牛肉膏 蛋白胨 氨基酸等 凡是能夠?yàn)槲⑸锾峁﹏元素的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 2 微生物的氮源 概念 來源 固氮微生物所利用的氮源是 3 特殊要求 培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)ph 特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 例如 生長(zhǎng)因子 即細(xì)菌生長(zhǎng)必需 而自身不能合成的化合物 如維生素 某些氨基酸 嘌呤 嘧啶 以及氧氣 二氧化碳 滲透壓等的要求 氮?dú)?含生長(zhǎng)因子 酵母膏 蛋白胨 動(dòng)植物組織提取液 思考 微生物有哪些營(yíng)養(yǎng)方式 代謝類型 你能各舉一例 是如何獲能的 同化作用 異養(yǎng)型 自養(yǎng)型異化作用 需氧型 厭氧型 自養(yǎng)型 光能或氧化無(wú)機(jī)物獲能 異養(yǎng)型 有機(jī)物中獲能 各種營(yíng)養(yǎng)類型微生物的碳源 能源比較 小結(jié) 微生物c源 能源 co2 co2 有機(jī)物 光能 nh3 化學(xué)能 化學(xué)能 藍(lán)細(xì)菌 硝化細(xì)菌 大腸桿菌 含c h o n的大分子有機(jī)物可做異養(yǎng)微生物的碳源 氮源 能源 可以 想一想 關(guān)于培養(yǎng)基 1 同一種物質(zhì)不可能既作碳源又作氮源 2 凡是碳源都能提供能量 3 除水以外的無(wú)機(jī)物僅提供無(wú)機(jī)鹽 4 無(wú)機(jī)氮源也能提供能量 多項(xiàng)選擇 1 下列細(xì)菌中 能利用含碳無(wú)機(jī)物作碳源的是a光合細(xì)菌b根瘤菌c硝化細(xì)菌d乳酸菌2 培養(yǎng)大腸桿菌的培養(yǎng)基中 必需含有的碳源和氮源是a糖 有機(jī)酸等b二氧化碳 碳酸鹽c蛋白質(zhì)d無(wú)機(jī)氮化物3 下列敘述不正確的是a培養(yǎng)基是為微生物的生長(zhǎng)繁殖提供營(yíng)養(yǎng)的基質(zhì)b液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基所含的最基本物質(zhì)不相同c微生物在固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)時(shí) 可以形成肉眼可見的單個(gè)細(xì)菌 a c a c b c 四 無(wú)菌技術(shù) 合作學(xué)習(xí)思考 1 獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是 2 如何避免雜菌污染 3 消毒和滅菌的區(qū)別 4 實(shí)驗(yàn)室常用的消毒和滅菌方法你能說出幾種滅菌方法 避免雜菌入侵 主要內(nèi)容 1 環(huán)境 空間 人 操作者衣物 手等 清潔消毒 2 用品 操作的儀器 培養(yǎng)基 滅菌3 操作過程 酒精燈火焰附近滅菌物品與環(huán)境物品 不接觸 消毒 溫和的理化因素殺死物體內(nèi)外的部分微生物 不含芽孢 孢子 滅菌 強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外的全部微生物 含芽孢 孢子 小結(jié) 四 無(wú)菌技術(shù) 定義 泛指在培養(yǎng)微生物的操作中 所有防止外來雜菌的入侵方法 煮沸消毒法 100 煮沸5 6min 日常 巴氏消毒法 70 75 下煮30min或80 下煮15min 如牛奶 化學(xué)藥劑消毒法 用75 酒精 新潔爾滅等進(jìn)行皮膚消毒 氯氣消毒水源 紫外線消毒 空間 臺(tái)面 1 消毒的方法 一 常用的消毒與滅菌的方法 1 灼燒滅菌 伸入儀器內(nèi)的部分都要灼燒 接種環(huán) 接種針 試管口等的滅菌 二 滅菌的方法 2 干熱滅菌 160 170 下加熱1 2h 3 高壓蒸氣滅菌 100kpa 121 下維持15 30min 如玻璃器皿 金屬用具等的滅菌 如培養(yǎng)基 無(wú)菌水等的滅菌 4 輻射滅菌 紫外線燈管 環(huán)境空間 操作臺(tái) 小結(jié)本節(jié)內(nèi)容 一 微生物的基礎(chǔ)知識(shí)二 培養(yǎng)基定義 種類 成分 c n 水 無(wú)機(jī)鹽 生長(zhǎng)因子 能源 能源 碳源的比較 三 無(wú)菌技術(shù) 內(nèi)容 環(huán)境 空間 人 衣物 手用品 儀器 培養(yǎng)基 滅菌操作過程 火焰旁已滅菌的器具與環(huán)境物品不接觸消毒 滅菌的區(qū)別與種類 消毒 1 無(wú)菌技術(shù)除了用來防止實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染外 還有什么目的 2 請(qǐng)你判斷以下材料或用具是否需要消毒或滅菌 如果需要 請(qǐng)選擇合適的方法 1 培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿 2 玻棒 試管 燒瓶和吸管 3 實(shí)驗(yàn)操作者的雙手 答 無(wú)菌技術(shù)還能有效避免操作者自身被微生物感染 答 1 2 需要滅菌 3 需要消毒 旁欄思考 習(xí)題鞏固 1 獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是a 將用于微生物培養(yǎng)的器皿 接種用具和培養(yǎng)基等器具進(jìn)行滅菌b 接種純種細(xì)菌c 適宜環(huán)境條件下培養(yǎng)d 防止外來雜菌的入侵2 下列操作與無(wú)菌技術(shù)無(wú)關(guān)的是a 接種前用肥皂洗雙手 再用酒精擦拭雙手b 接種前用火焰燒灼接種針c 培養(yǎng)在50 左右時(shí)擱置斜面d 在酒精燈的火焰旁完成3 外科手術(shù)器械和罐頭食品的處理 要以能夠殺死什么為標(biāo)準(zhǔn)a 球菌b 桿菌c 螺旋菌d 芽孢 d c d 高壓蒸氣滅菌的原理是 a 高壓使細(xì)菌dna變性b 高壓使細(xì)菌蛋白質(zhì)凝固變性c 高溫燙死細(xì)菌 b 目的明確 營(yíng)養(yǎng)協(xié)調(diào) 理化條件適宜 經(jīng)濟(jì)節(jié)約 據(jù)不同的微生物的營(yíng)養(yǎng)要求配制針對(duì)強(qiáng)的培養(yǎng)基 培養(yǎng)基中各營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)之間的濃度配比也直接影響微生物的生長(zhǎng)繁殖和代謝產(chǎn)物的形成和積累 如 ph 五 實(shí)驗(yàn)操作 一 培養(yǎng)基配置原則 無(wú)菌技術(shù)的體現(xiàn)是什么 五 實(shí)驗(yàn)操作 二 倒平板 倒多少 5 10分中后倒平板 標(biāo)記 50 剛好不燙手 約1 3 為何如此進(jìn)行 何時(shí)開始 1 倒平板 接種完成后 平板都要倒置 2 倒平板過程中如果濺到皿壁上 該培養(yǎng)基能用嗎 最好不用 微生物可能在皿蓋與皿底之間生存 思考題 五 實(shí)驗(yàn)操作 三 純化大腸桿菌 平板劃線法1 無(wú)菌操作技術(shù)有哪些 2 定義 什么叫菌落 平板劃線法 目的是什么 3 平板劃線操作 平板劃線是如何操作的 你能將其總結(jié)成3步驟嗎 i 為何操作第一步 每次劃線之前都要灼燒菌環(huán) 操作完成后還要灼燒菌環(huán) 2 灼燒之后要等菌環(huán)冷卻后再劃線 3 在做第二次劃線之后的劃線操作 為何總是從第一次的末端開始劃線 4 劃線時(shí)為何不能劃破培養(yǎng)基 1 定義1 什么叫菌落 2 平板劃線法 一個(gè)細(xì)胞繁殖來的肉眼可見的子細(xì)胞群體 通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作使菌種分散到培養(yǎng)基的表面 五 實(shí)驗(yàn)操作 三 平板劃線 純化大腸桿菌 通過菌落來記數(shù) 活菌 2 平板劃線操作 討論題 i 為何操作第一步 每次劃線之前都要灼燒菌環(huán) 操作完成后還要灼燒菌環(huán) 2 灼燒之后要等菌環(huán)冷卻后再劃線 滅菌 接種前 污染菌環(huán)滅菌 劃線前 滅上一條線剩余的大腸桿菌接種后 滅菌環(huán)上的菌防感染操作者 污染環(huán)境 防殺死菌種 2 平板劃線操作 3 在做第二次劃線之后的劃線操作 為何總是從第一次的末端開始劃線 4 劃線時(shí)為何不能劃破培養(yǎng)基 劃線是為稀釋菌液 末端菌液細(xì)菌的數(shù)目比前端少?gòu)哪┒碎_始能使菌數(shù)隨著劃線次數(shù)的增而數(shù)目減少 得到單個(gè)菌 菌落 劃破將不能對(duì)菌鑒別 分離 記數(shù) 復(fù)習(xí)鞏固 1 為何平板要倒過來放置 2 倒平板如果倒到平皿的壁上 該培養(yǎng)基還能用嗎 3 平板劃線法與稀釋涂布法的目的是什么 4 在倒平板 平板劃線 稀釋涂布中無(wú)菌技術(shù)是什么 5 p18討論題 1 灼燒接種環(huán) 直至將接種環(huán) 2 在 旁冷卻接種環(huán) 并打開棉塞 3 試管口通過火焰 4 將已 的接種環(huán)伸入菌液中蘸取一環(huán)菌液 6 將皿蓋打開一條縫隙 將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi) 劃 條平行線 蓋上皿蓋 注意不要?jiǎng)澠婆囵B(yǎng)基 5 試管通過火焰 并塞上棉塞 火焰 冷卻 三至五 7 灼燒接種環(huán) 待其冷卻后 從第一區(qū)域劃線的 開始往第二區(qū)域內(nèi)劃線 重復(fù)以上操作 在三 四區(qū)域內(nèi)劃線 末端 燒紅 8 將平板 放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 倒置 兩區(qū)不可相連接 方法一 平板劃線操作 步驟 1 接種環(huán)灼燒滅菌2 接種 冷卻的菌環(huán)取菌 試管口過酒精燈后取菌 試管口過酒精燈上塞 劃線 火焰旁 前后灼燒菌環(huán) 3 結(jié)束后灼燒菌環(huán) 平板劃線法和稀釋涂布平板法 微生物的接種的常用接種方法有 小結(jié) 五 實(shí)驗(yàn)操作 三 平板劃線 純化大腸桿菌 方法二 稀釋涂布平板操作步驟閱讀思考 1 稀釋的目的是什么 2 涂布器為何在涂布前浸在酒精液中和在火焰上引燃 3 為何2步中要只加不超過0 1ml的菌液 五 實(shí)驗(yàn)操作 四 稀釋涂布法 純化大腸桿菌 使菌液含菌數(shù)少 以得到單個(gè)菌 菌落 滅菌徹底 便于得到單個(gè)菌 形成菌落 依次各取1ml 如何防稀釋液與無(wú)菌水混淆 菌液 0 1ml 冷卻8 10s 涂布 注意防火 1 編號(hào)1 6只試管9ml無(wú)菌水入6只試管2 1ml菌液試管1試管2試管3 試管6培養(yǎng)皿涂布平板 培養(yǎng) 取無(wú)菌水 取菌液 稀釋液 涂布 火焰旁 1ml 1ml 1ml 0 1ml 小結(jié) 四 稀釋涂布法 六 結(jié)果分析與評(píng)價(jià) 1 未接種的培養(yǎng)基表面是否有菌落生長(zhǎng) 如果有 說明什么 2 12h與24h菌落是否相同 分析差異的原因 應(yīng)無(wú) 如有說明無(wú)菌操作不合格或滅菌不合格 大小有明顯的差異 分裂次數(shù)不同導(dǎo)致菌的數(shù)量明顯不同 3 菌種培養(yǎng) 培養(yǎng)基倒置放入37 的恒溫箱中 4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果觀察 七 菌株的保存方法 固體斜面培養(yǎng)基 甘油管藏 擱置斜面 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng) 1 培養(yǎng)基 常用種類 成分 2 無(wú)菌技術(shù) 3 常用的消毒滅菌方法 實(shí)驗(yàn)操作 基礎(chǔ)知識(shí) 1 制備牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的步驟 計(jì)算 稱量 溶化 滅菌 倒平板 2 純化大腸桿菌方法 平板劃線法 稀釋涂布平板法 溫故知新 你能總結(jié)我們?cè)?微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng) 中都學(xué)了什么知識(shí) 用較溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對(duì)人體有害的微生物 不包括芽孢和孢子 用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物 包括芽孢和孢子 煮沸消毒法 巴氏消毒法 化學(xué)藥劑消毒法 紫外線消毒法 灼燒滅菌法 干熱滅菌 高壓蒸汽滅菌 操作空間 液體 雙手等 接種環(huán) 接種針 玻璃器皿 培養(yǎng)基等 課題2 土壤中分解尿素細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù) 植物能吸收含氮的什么物質(zhì) 硝酸鹽 銨鹽 氨 co nh2 2 h2oco2 nh3教學(xué)目的 分離能分解尿素的細(xì)菌統(tǒng)計(jì) 細(xì)菌數(shù) g 脲酶 一 研究思路 閱讀思考p21 22 1 篩選菌株的思路是從哪種研究事項(xiàng)中獲得啟事的 熱泉對(duì)細(xì)菌起到什么作用 2 分析本課題中使用的培養(yǎng)基及牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中的c源 n源分別是什么物質(zhì) 3 p22的培養(yǎng)基的配方為何對(duì)細(xì)菌具有選擇性 4 什么叫選擇培養(yǎng)基 無(wú)機(jī)鹽 碳源 氮源 凝固劑 尿素是唯一氮源 只有能利用尿素的微生物才能生長(zhǎng) 一 研究思路 一 篩選菌株 二 統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目 閱讀思考 1 什么叫稀釋涂布平板法 2 為何計(jì)算菌落數(shù)目可以一定程度上代表計(jì)算細(xì)菌的個(gè)數(shù) 3 是否任何數(shù)量的菌落培養(yǎng)基都能用來統(tǒng)計(jì) 兩個(gè)同學(xué)的結(jié)果是否可以作為實(shí)驗(yàn)結(jié)果 上述事例說明什么 4 統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)目 該樣品的測(cè)定活細(xì)菌的實(shí)際數(shù)量 5 菌類的記數(shù)法只有哪些 小結(jié) 二 統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目 1 一個(gè)細(xì)菌 一個(gè)菌落 一般情況 2 選擇稀釋度 稀釋倍數(shù) 一般 10 10 10 測(cè)定細(xì)菌10 10 10 測(cè)定真菌第一次做實(shí)驗(yàn) 前后各增加1個(gè)梯度3 某一稀釋度 至少涂布3個(gè)培養(yǎng)基4 統(tǒng)計(jì)某一稀釋度各培養(yǎng)基的菌落數(shù)差距該不大 30 300 4 5 6 繁殖 2 3 4 為何稀釋的倍數(shù)不同 第 個(gè)同學(xué)實(shí)驗(yàn) 只涂布 個(gè)平板 帶有偶然性 不具說服力 第 個(gè)同學(xué) 其中 個(gè)平板與另外 個(gè)數(shù)目的差距太大 說明操作中存在差錯(cuò) 不能是簡(jiǎn)單的平均數(shù) 菌落數(shù) 實(shí)際數(shù)目 微生物記數(shù)的常用方法 稀釋涂布平板法 顯微鏡記數(shù)法 小結(jié) 二 統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目 三 設(shè)置對(duì)照 閱讀思考 1 如何才能證明a同學(xué)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果有無(wú)問題 2 設(shè)置對(duì)照的目的是什么 3 根據(jù)以往做過的實(shí)驗(yàn)?zāi)隳芰信e出多少種對(duì)照實(shí)驗(yàn)的方法 4 上述例子說明什么問題 小結(jié) 三 設(shè)置對(duì)照 1 如何才能證明a同學(xué)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果有無(wú)問題 1 土樣不同 取與a相同土樣的同學(xué)為對(duì)照結(jié)果相同 a無(wú)誤結(jié)果不同 a培養(yǎng)基配制有誤2 培養(yǎng)基配制有誤 污染 空白對(duì)照排除選擇培養(yǎng)基接種 選擇培養(yǎng)基不接種2 設(shè)置對(duì)照的目的是什么 排除非測(cè)試因素對(duì)實(shí)驗(yàn)的影響提高實(shí)驗(yàn)的可信度3 上述例子說明什么 設(shè)置對(duì)照必不可少 3 你能列舉出多少種對(duì)照實(shí)驗(yàn)的方法 1 空白對(duì)照 不給對(duì)照組任何處理因素 例 培養(yǎng)基的接種與不接種2 自身對(duì)照 同一實(shí)驗(yàn)對(duì)象實(shí)驗(yàn)前后對(duì)照 例 植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離3 相互對(duì)照 不單設(shè)對(duì)照組 幾個(gè)實(shí)驗(yàn)組相互對(duì)照 例 溫度或ph值對(duì)酶活性的影響 小結(jié) 復(fù)習(xí)補(bǔ)充 設(shè)置對(duì)照 閱讀p23 25討論 1 你如何設(shè)計(jì) 分離和計(jì)數(shù)土壤中分解尿素的細(xì)菌 的實(shí)驗(yàn)步驟 2 你認(rèn)為此實(shí)驗(yàn)?zāi)男┢骶吲c過程需要無(wú)菌技術(shù) 二 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì) 統(tǒng)計(jì)土壤中尿素細(xì)菌的記數(shù) 過程與步驟 一 儀器滅菌 信封 培養(yǎng)基 培養(yǎng)皿 無(wú)菌水 移液管 二 土壤取樣 肥沃 濕潤(rùn)處3cm下 裝入滅菌的信封 三 制備培養(yǎng)基 牛肉蛋白胨 5個(gè) 人 選擇培養(yǎng)基 15個(gè) 人 5個(gè)梯度 四 接種 稀釋涂布平板法 火焰旁 小結(jié) 二 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì) 統(tǒng)計(jì)土壤中尿素細(xì)菌的記數(shù) 對(duì)照 三重復(fù)組求平均值使結(jié)果更準(zhǔn)確 做好增加空白對(duì)照 排除無(wú)關(guān)變量的干擾 證明因變量是由自變量引起的 小結(jié) 二 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì) 統(tǒng)計(jì)土壤中尿素細(xì)菌的記數(shù) 計(jì)算公式每克樣品中的菌落數(shù) c v m 其中c代表某一稀釋度下平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù) v代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積 ml m代表稀釋倍數(shù) 4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果的觀察 結(jié)果 酚紅指示劑變 初步鑒定該細(xì)菌能夠分解尿素 分析 細(xì)菌能分解尿素產(chǎn)生 使培養(yǎng)基呈堿性 氨增加ph升高 酚紅由無(wú)色變?yōu)榧t色 操作 在以 為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑 尿素 鑒別培養(yǎng)基 紅色 氨 5 實(shí)驗(yàn)結(jié)果的鑒定 課題3 分解纖維素的微生物的分離 一 纖維素的分解 纖維素 多聚葡萄糖 酶 酶 葡萄糖苷酶
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