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文檔簡介
腸桿菌,1,腸桿菌科細菌,2,腸桿菌,概述埃希菌屬沙門菌屬志賀菌屬耶爾森菌屬枸櫞酸桿菌屬克雷伯菌屬腸桿菌屬、泛菌屬、哈夫尼亞菌屬沙雷菌屬變形桿菌屬、普羅威登斯菌屬及摩根菌屬,3,腸桿菌,一、分類二、細菌特性三、臨床意義四、鑒定原則,概述,返回,4,腸桿菌,返回,5,腸桿菌,腸桿菌科的共同特性,1.形態(tài)染色相似革蘭陰性桿菌2.培養(yǎng)特性相同普通培養(yǎng)基上生長良好3.生化反應(yīng)活潑發(fā)酵葡萄糖,氧化酶陰性,觸酶陽性,還原硝酸鹽為亞硝酸鹽,O/F試驗為發(fā)酵型。4.抗原構(gòu)造復(fù)雜5.抵抗力弱6.易變異,返回,6,腸桿菌,O-F試驗,7,腸桿菌,氧化酶試驗陽性:紫紅色陰性:無色,8,腸桿菌,硝酸鹽還原試驗陽性:紅色陰性:淡黃色,9,腸桿菌,腸桿菌科細菌抗原模式圖,返回,10,腸桿菌,致病物質(zhì)所致疾病,臨床意義,返回,11,腸桿菌,菌毛或菌毛樣結(jié)構(gòu)莢膜或微莢膜內(nèi)毒素外毒素,致病物質(zhì),12,腸桿菌,所致疾病,腸道感染腹瀉、食物中毒、腸熱癥腸道外感染鼠疫(烈性傳染病)、泌尿道感染、肺炎、腦膜炎、傷口化膿、菌血癥,返回,13,腸桿菌,鑒定原則,1.科間鑒別2.將腸桿菌科分為三大類3.屬、種、群、型的區(qū)分4.腸桿菌科細菌綜合鑒定流程,返回,14,腸桿菌,腸桿菌科與其它革蘭陰性桿菌區(qū)別,15,腸桿菌,苯丙氨酸脫氨酶試驗陽性:綠色陰性:黃色,16,腸桿菌,葡萄糖酸鹽試驗陽性:黃綠色陰性:藍色,返回,17,腸桿菌,埃希菌屬,一、分類二、細菌特性三、臨床意義四、微生物學(xué)檢驗,返回,18,腸桿菌,細菌特性,形態(tài)特征培養(yǎng)特性生化反應(yīng)抗原結(jié)構(gòu),19,腸桿菌,大腸埃希菌革蘭染色,20,腸桿菌,大腸埃希菌電鏡圖,21,腸桿菌,大腸埃希菌菌落特征(血平板),22,腸桿菌,大腸埃希菌菌落特征(MAC),23,腸桿菌,大腸埃希菌KIA(AA)MIU(),24,腸桿菌,大腸埃希菌IMViC試驗()右側(cè)為對照(),25,腸桿菌,大腸埃希菌抗原結(jié)構(gòu),26,腸桿菌,致病物質(zhì)所致疾病,臨床意義,27,腸桿菌,致病物質(zhì),侵襲力菌毛、K抗原內(nèi)毒素腸毒素耐熱腸毒素(ST)不耐熱腸毒素(LT),28,腸桿菌,所致疾病,腸道外感染泌尿道感染(最常見)膽道感染、腹膜炎、肺炎菌血癥、新生兒腦膜炎腸道感染ETEC、EPEC、EIEC、EHEC、EaggEC,29,腸桿菌,(一)檢驗程序(二)標(biāo)本采集(三)檢驗方法(四)耐藥性(五)結(jié)果分析與報告,微生物學(xué)檢驗,30,腸桿菌,大腸埃希菌檢驗程序,31,腸桿菌,檢驗方法,1.顯微鏡檢查2.分離培養(yǎng)3.鑒定ETECEPECEIECEHECEaggEC,32,腸桿菌,ST檢測(乳鼠灌胃試驗),33,腸桿菌,LT檢測(CHO細胞培養(yǎng)),34,腸桿菌,O157:H7菌落特征(MAC),35,腸桿菌,O157:H7菌落特征(山梨醇麥康凱瓊脂平板),返回,36,腸桿菌,沙門菌屬,一、分類二、細菌特性三、臨床意義四、微生物學(xué)檢驗,返回,37,腸桿菌,38,腸桿菌,細菌特性,形態(tài)特征培養(yǎng)特性生化反應(yīng)抗原結(jié)構(gòu),39,腸桿菌,傷寒沙門菌革蘭染色,40,腸桿菌,傷寒沙門菌菌落特征(MAC),41,腸桿菌,傷寒沙門菌菌落特征(SS),42,腸桿菌,傷寒沙門菌菌落特征(血平板),43,腸桿菌,傷寒沙門菌KIA(KA)MIU(),44,腸桿菌,沙門菌IMViC試驗(),45,腸桿菌,抗原構(gòu)造和分類1O抗原O抗原有許多組成成分,每組細菌帶有數(shù)種O抗原;不同種的細菌可有共同的O抗原。將具有共同抗原的沙門菌歸為一組(group),現(xiàn)有42個O組。引起人類沙門菌病的細菌多屬AF組2H抗原沙門菌屬的H抗原有兩種,稱第1相(特異相)和第2相(非特異相)。具有兩種相抗原的細菌叫雙相菌;僅有其中一相者稱單相菌。按O抗原分組后,每一組沙門菌再根據(jù)H抗原分成不同的種或血清型。3Vi抗原Vi抗原有抗吞噬作用,并保護菌體不受抗體和補體的作用。Vi抗原的抗原性弱,刺激機體產(chǎn)生的抗體效價低。細菌在體內(nèi)不斷地刺激機體才有抗體產(chǎn)生;如果細菌消失則抗體也隨之消失。,生物學(xué)性狀,46,腸桿菌,變異性,S-RH-O位相變異V-W,47,腸桿菌,抵抗力,不強對膽鹽、煌綠有抵抗力,48,腸桿菌,致病物質(zhì)所致疾病,臨床意義,49,腸桿菌,致病物質(zhì),侵襲力Vi-Ag內(nèi)毒素腸毒素,50,腸桿菌,所致疾病,傷寒和副傷寒急性胃腸炎或食物中毒菌血癥(或敗血癥),51,腸桿菌,(一)檢驗程序(二)標(biāo)本采集(三)檢驗方法(四)耐藥性(五)結(jié)果分析與報告,微生物學(xué)檢驗,52,腸桿菌,沙門菌檢驗程序,、,53,腸桿菌,標(biāo)本菌血癥時取血,胃腸炎取糞便、嘔吐物或可疑食物。腸熱癥在病程不同階段采取不同標(biāo)奉:第1w取血或骨髓。第1w血培養(yǎng)陽性率達80以上;骨髓培養(yǎng)陽性率可達9095%以上:第2、3w以后取糞便、尿。糞便標(biāo)本應(yīng)做多次培養(yǎng);全程均可取骨髓培養(yǎng)。,微生物學(xué)檢查法,54,腸桿菌,55,腸桿菌,檢驗方法,1.顯微鏡檢查2.分離培養(yǎng)3.鑒定4.血清學(xué)診斷,56,腸桿菌,57,腸桿菌,沙門菌血清學(xué)鑒定,58,腸桿菌,微生物學(xué)檢查法,血清學(xué)診斷常規(guī)方法是肥達反應(yīng)(Widalreaction),即用已知的傷寒沙門菌O、H和甲、乙型副傷寒沙門菌H抗原與病人血清做定量凝集試驗。一般說,間隔5-7d重復(fù)采血,如凝集價隨病程延長而升高4倍以上,方有診斷價值。1正常凝集價一般情況下,傷寒沙門菌O抗體的凝集價應(yīng)在1:80以上,H抗體凝集價在1:160以上,甲、乙型副傷寒沙門菌H抗體凝集價在1:80以上有診斷意義。2病程。3H抗體與O抗體的性質(zhì)及其消長的意義1)若0與H凝集價均超過正常值,則傷寒的可能性很大;2)若二者均低于正常值,則可能性甚小;3)若O凝集價高而H低于正常值,則可能是感染早期或沙門菌屬中其他的細菌感染引起的O凝集的交叉反應(yīng);4)若O凝集價低而H高于正常值,則可能是以往預(yù)防接種的結(jié)果或非特異性回憶反應(yīng)。,59,腸桿菌,肥達反應(yīng)(Widaltest),O凝集(1:201:1280,效價1:80),H凝集(1:201:1280,效價1:320),返回,60,腸桿菌,志賀菌屬,一、分類二、細菌特性三、臨床意義四、微生物學(xué)檢驗,返回,61,腸桿菌,志賀菌屬分為A、B、C、D4群:A群為痢疾志賀菌(S.dysenteriae),B群為福氏志賀菌(S.flexneri),C群為鮑氏志賀菌(S.boydii),D群為宋內(nèi)志賀菌(S.sonnei)。,62,腸桿菌,細菌特性,形態(tài)特征培養(yǎng)特性生化反應(yīng)抗原結(jié)構(gòu),63,腸桿菌,形態(tài)、染色、培養(yǎng)及生化反應(yīng)G-桿菌、無鞭毛、無動力,有些菌體周圍有菌毛。在S-S培養(yǎng)基上形成無色半透明光滑型菌落。分解葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣,大多數(shù)志賀菌不發(fā)酵乳糖??乖瓨?gòu)造與分類志賀菌屬缺少H抗原,其抗原結(jié)構(gòu)主要由O抗原和K抗原組成。根據(jù)生化反應(yīng)和O抗原結(jié)構(gòu)的差異,將志賀菌屬分為A、B、C、D4個群。抵抗力本屬細菌對理化因素抵抗力較弱,對酸性環(huán)境也較敏感。對多種抗生素易形成耐藥性(主要由R質(zhì)粒決定),并在菌間傳遞。,生物學(xué)性狀,64,腸桿菌,志賀菌革蘭染色,65,腸桿菌,志賀菌菌落特征(MAC),66,腸桿菌,志賀菌KIA(KA)MIU(),67,腸桿菌,志賀菌IMViC試驗(),68,腸桿菌,致病物質(zhì)所致疾病,臨床意義,69,腸桿菌,致病物質(zhì),侵襲力菌毛內(nèi)毒素外毒素志賀毒素(ST),70,腸桿菌,所致疾病,急性細菌性痢疾慢性菌痢帶菌者,71,腸桿菌,(一)檢驗程序(二)標(biāo)本采集(三)檢驗方法(四)耐藥性(五)結(jié)果分析與報告,微生物學(xué)檢驗,72,腸桿菌,志賀菌檢驗程序,73,腸桿菌,在抗生素使用前采集新鮮糞便中膿、血、黏液部分,床邊接種或立即送檢,不能及時接種者可用卡-布運送培養(yǎng)基送檢,昏迷不能排便病人可用肛拭取樣。,返回,74,腸桿菌,耶爾森菌屬,一、分類二、鼠疫耶爾森菌三、小腸結(jié)腸炎耶爾森菌四、其他耶爾森菌,返回,75,腸桿菌,其他尚有:假結(jié)核耶爾森菌(Y.pseudotuberculosis)奧氏耶爾森菌(Y.aldouae)伯氏耶爾森菌(Y.bercovieri)弗氏耶爾森菌(Y.frederiksenii)中間耶爾森菌(Y.intermedia)等9種耶爾森菌。均可從臨床標(biāo)本中分離得到,其相互之間的生化性狀相似,均能在4以及在CIN上生長,可在冷凍食品中增殖,并具有潛在的致病性。,76,腸桿菌,鼠疫耶爾森菌,(一)細菌特性(二)臨床意義(三)微生物學(xué)檢驗,77,腸桿菌,細菌特性,形態(tài)特征培養(yǎng)特性生化反應(yīng),78,腸桿菌,鼠疫耶爾森菌鏡下形態(tài)(Wayson染色),79,腸桿菌,鼠疫耶爾森菌菌落特征(MAC),80,腸桿菌,致病物質(zhì)所致疾病,臨床意義,81,腸桿菌,致病物質(zhì),侵襲力FI抗原(封套抗原)V/W抗原(毒力抗原)內(nèi)毒素鼠毒素,82,腸桿菌,所致疾病,甲類烈性傳染病鼠疫常見臨床類型:腺鼠疫敗血型鼠疫肺鼠疫,83,腸桿菌,84,腸桿菌,(一)檢驗程序(二)標(biāo)本采集(三)檢驗方法(四)結(jié)果分析與報告,微生物學(xué)檢驗,85,腸桿菌,一旦疑為本菌,應(yīng)立即向本地區(qū)疾病控制中心等部門報告,并將菌種送檢驗中心或?qū)I(yè)實驗室作進一步鑒定。診斷確立后除對患者進行隔離治療外,對疫區(qū)及有關(guān)人員須采取有效的預(yù)防隔離措施,防止疫情擴散。,86,腸桿菌,鼠疫耶爾森菌檢驗程序,87,腸桿菌,標(biāo)本采集,1.臨床標(biāo)本淋巴結(jié)穿刺液、血液或痰標(biāo)本2.非臨床標(biāo)本尸檢取病變組織,鼠標(biāo)本應(yīng)嚴格消毒體表,再進行采集,返回,88,腸桿菌,小腸結(jié)腸炎耶爾森菌,(一)細菌特性(二)臨床意義(三)微生物學(xué)檢驗,89,腸桿菌,細菌特性,形態(tài)特征培養(yǎng)特性生化反應(yīng),90,腸桿菌,小腸結(jié)腸炎耶爾森菌革蘭染色,91,腸桿菌,小腸結(jié)腸炎耶爾森菌菌落特征(MAC),92,腸桿菌,小腸結(jié)腸炎耶爾森菌菌落特征(CIN瓊脂平板),93,腸桿菌,致病物質(zhì)侵襲力腸毒素所致疾病小腸炎、結(jié)腸炎、膽囊炎腹膜炎、菌血癥,臨床意義,94,腸桿菌,小腸結(jié)腸炎耶爾森菌檢驗程序,95,腸桿菌,KIA:AA-或KA-枸櫞酸鹽(-)脲酶(+)吲哚(-/+)鳥氨酸脫羧酶(+)動力、V-P反應(yīng)結(jié)果與孵育溫度有關(guān)(2225陽性,3537陰性)根據(jù)菌落特征,菌體形態(tài)染色特點、嗜冷性及典型生化結(jié)果即可初步診斷本菌。,返回,96,腸桿菌,枸櫞酸桿菌屬,一、分類二、細菌特性三、臨床意義四、微生物學(xué)檢驗,返回,97,腸桿菌,弗勞地枸櫞酸桿菌(C.freundii)異型枸櫞酸桿菌(C.diversus)無丙二酸鹽枸櫞酸桿菌(C.amalonaticus),98,腸桿菌,細菌特性,形態(tài)特征培養(yǎng)特性生化反應(yīng),99,腸桿菌,弗勞地枸櫞酸桿菌菌落特征(MAC),100,腸桿菌,枸櫞酸桿菌IMViC(),返回,101,腸桿菌,克雷伯菌屬,一、分類二、細菌特性三、臨床意義四、微生物學(xué)檢驗,返回,102,腸桿菌,肺炎克雷伯菌(K.pneumoniae)產(chǎn)酸(催娩)克雷伯菌(K.axytoca)解鳥氨酸克雷伯菌(K.ornithinolytica)植生克雷伯菌(K.planticola)土生克雷伯菌(K.terrigena)肺炎克雷伯菌又可分為3個亞種:肺炎克雷伯菌肺炎亞種(subsp.pneumoniae)肺炎克雷伯菌臭鼻亞種(subsp.ozaenae)肺炎克雷伯菌鼻硬結(jié)亞種(subsp.rhinoscleromatis),返回,103,腸桿菌,細菌特性,形態(tài)特征培養(yǎng)特性生化反應(yīng),104,腸桿菌,肺炎克雷伯菌革蘭染色,105,腸桿菌,肺炎克雷伯菌電鏡圖,106,腸桿菌,肺炎克雷伯菌莢膜染色,107,腸桿菌,肺炎克雷伯菌的菌落特征(血瓊脂平板),108,腸桿菌,肺炎克雷伯菌的菌落特征(MAC),109,腸桿菌,肺炎克雷伯菌粘絲試驗,110,腸桿菌,肺炎克雷伯菌KIA(AA)、MIU(),111,腸桿菌,肺炎克雷伯菌IMViC試驗(),112,腸桿菌,克雷伯菌屬的細菌多感染免疫力低下的人群,是醫(yī)院感染中最重要的條件致病菌。所致疾病:肺炎、腦膜炎、腹膜炎、泌尿系統(tǒng)感染、敗血癥,臨床意義,113,腸桿菌,(一)檢驗程序(二)標(biāo)本采集(三)檢驗方法(四)耐藥性(五)結(jié)果分析與報告,微生物學(xué)檢驗,114,腸桿菌,肺炎克雷伯菌易產(chǎn)生超廣譜-內(nèi)酰胺酶(ESBL),近年來文獻報道我國產(chǎn)酶率已達30%左右,產(chǎn)酶株對青霉素類、第1、2、3代頭孢菌素及單環(huán)-內(nèi)酰胺類抗生素均產(chǎn)生耐藥,而僅對頭霉素類、碳青霉烯類及酶抑制劑敏感。ESBL檢測現(xiàn)已作為醫(yī)院細菌室常規(guī)檢測項目。,115,腸桿菌,肺炎克雷伯菌檢驗程序,116,腸桿菌,檢驗方法,1.顯微鏡檢查2.分離培養(yǎng)3.鑒定,117,腸桿菌,肺炎克雷伯菌莢膜腫脹試驗,返回,118,腸桿菌,腸桿菌屬,一、分類二、細菌特性三、臨床意義四、微生物學(xué)檢驗,返回,119,腸桿菌,產(chǎn)氣腸桿菌(E.aerogenes)陰溝腸桿菌(E.cloacea)日勾維腸桿菌(E.gergoviae)阪崎腸桿菌(E.sakazakii)中間型腸桿菌(E.intermedium)泰洛腸桿菌(E.taylorac)河生腸桿菌(E.amnigenus)阿氏腸桿菌(E.asburiac)致癌腸桿菌(E.cancerogenus)溶解腸桿菌(E.dissolvens)超壓腸桿菌(E.nimipressualis),120,腸桿菌,細菌特性,形態(tài)特征培養(yǎng)特性生化反應(yīng),121,腸桿菌,陰溝腸桿菌革蘭染色,122,腸桿菌,陰溝腸桿菌菌落特征(MAC),123,腸桿菌,產(chǎn)氣腸桿菌IMViC試驗(),124,腸桿菌,腸桿菌屬是腸桿菌科中最常見的環(huán)境菌群,醫(yī)院感染的重要病原菌。在臨床微生物室檢出率最高的是陰溝腸桿菌和產(chǎn)氣腸桿菌,可引起泌尿道感染、呼吸道感染、傷口感染以及敗血癥。,臨床意義,125,腸桿菌,(一)檢驗程序(二)標(biāo)本采集(三)檢驗方法(四)耐藥性(五)結(jié)果分析與報告,126,腸桿菌,IMViC試驗大腸埃希菌為+-腸桿菌屬細菌大多為-+動力和鳥氨酸脫羧酶試驗肺炎克雷伯菌為陰性腸桿菌屬多數(shù)為陽性,127,腸桿菌,腸桿菌科細菌常產(chǎn)生AmpC酶,尤以陰溝腸桿菌最為突出。它是導(dǎo)致革蘭陰性菌尤其是陰溝腸桿菌對13代頭孢菌素、單環(huán)-內(nèi)酰胺類、頭霉素類及含酶抑制劑的復(fù)合制劑耐藥的重要原因。產(chǎn)AmpC酶細菌的治療,首選4代頭孢(頭孢吡肟)和碳青霉烯類抗生素。近年來已有質(zhì)粒介導(dǎo)的AmpC酶出現(xiàn)。,返回,128,腸桿菌,泛菌屬與哈夫尼亞菌屬,一、泛菌屬(一)分類(二)細菌特性(三)臨床意義(四)微生物學(xué)檢驗二、哈夫尼亞菌屬(一)分類(二)細菌特性(三)臨床意義(四)微生物學(xué)檢驗,返回,129,腸桿菌,聚團泛菌(P.agglomerans)彌散泛菌(P.dispersa)聚團泛菌包括以前的典型聚團腸桿菌、草生歐文氏菌和雞血藤歐文氏菌。,130,腸桿菌,聚團泛菌菌落特征(普通瓊脂),131,腸桿菌,蜂房哈夫尼亞菌菌落特征(MAC),返回,132,腸桿菌,沙雷菌屬,一、分類二、細菌特性三、臨床意義四、微生物學(xué)檢驗,返回,133,腸桿菌,粘質(zhì)沙雷菌(S.marcescens)沙雷菌液化群(S.liquefaciensgroup)臭味沙雷菌(S.odorifera)普城沙雷菌(S.plymuthica)深紅沙雷菌(S.rubidaea)無花果沙雷菌(S.ficaria)嗜蟲沙雷菌(S.entomophila)居泉沙雷菌(S.fonticola),134,腸桿菌,粘質(zhì)沙雷菌菌落特征(普通瓊脂平板),135,腸桿菌,粘質(zhì)沙雷菌、液化沙雷菌和深紅沙雷菌都
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