NG-MAST在淋球菌耐藥監(jiān)測(cè)工作中的應(yīng)用 - 中國(guó)疾病預(yù)防控制中心 ...ppt課件

淋球菌耐藥機(jī)制的初步研究以及多抗原測(cè)序分型（NG-MAST）在耐藥監(jiān)測(cè)工作中的應(yīng)用,-中國(guó)CDC性病控制中心參比實(shí)驗(yàn)室陳紹椿,1,研究背景耐藥機(jī)制的初步研究NG-MAST在淋球菌耐藥監(jiān)測(cè)工作中的應(yīng)用研究,概要,2,高發(fā)病率，且在不斷增長(zhǎng)診斷、報(bào)病的不足導(dǎo)致發(fā)病率的低估嚴(yán)重危害健康：不孕不育，異位妊娠，增加HIV感染幾率抗生素耐藥！,淋病全球性公共衛(wèi)生問(wèn)題,WorldHealthOrganization(WHO).Globalincidenceandprevalenceofselectedcurablesexuallytransmittedinfections2008.Geneva,Switzerland;2012.,3,PenicillinsTetracyclinesQuinolones(Ciprofloxacin)Macrolides(Azithromycin)SpectinomycinCephalosporins(Ceftriaxone,cefixime),淋病的治療藥物,4,頭孢菌素敏感性下降和臨床治療失敗病例的出現(xiàn),WorldHealthOrganization(WHO).Antimicrobialresistanceglobalreportonsurveillance.Geneva,Switzerland;2014.,5,口服類Cefixime治療失敗病例：Japan,1Norway,2UnitedKingdom,3Austria,4France,5Canada,6andSouthAfrica.7頭孢曲松治療淋菌性咽炎失敗病例：Japan,8,9Australia,10-12Sweden,13andSlovenia14,治療失敗案例匯總,1.YokoiSetal.EmergInfectDis2007;13:1275-1277.2.UnemoMetal.EuroSurveill2010;15.3.IsonCAetal.EuroSurveill2011;16.4.UnemoMetal.EuroSurveill2011;16:pii=19998.5.UnemoMetal.AntimicrobialAgentsChemother2012;56:1273-1280.6.AllenVGetal.JAMA2013;309:163-170.7.LewisDAetal.JAntimicrobChemother2013;68:1267-1270.8.OhnishiMetal.EmergInfectDis2011;17:148-149.,9.OhnishiMetal.AntimicrobAgentsChemother2011;55:3538-3545.10.TapsallJetal.JMedMicrobiol2009;58:683-687.11.ChenMYetal.JAntimicrobChemother2013;68:1445-1447.12.ReadPJetal.SexHealth2013;10:460-462.13.UnemoMetal.July2010.EuroSurveill2011;16.14.UnemoMetal.EuroSurveill2012;17.15.CamaraJetal.JAntimicrobChemother2012;67:1858-1860.,6,超級(jí)淋球菌的出現(xiàn),第一株高度耐頭孢曲松的“超級(jí)淋球菌”H041：XDR,MLST7363,NG-MASTST4220咽部感染，1g頭孢曲松治療失敗,MIC1-2mg/L在法國(guó)和西班牙也發(fā)現(xiàn)了對(duì)頭孢菌素高度耐藥的淋球菌MLST1901NG-MASTST1407,7,URGENT!,8,應(yīng)對(duì)策略,9,1.深入了解耐藥機(jī)制2.加強(qiáng)淋球菌耐藥監(jiān)測(cè)：（1）加強(qiáng)已有淋球菌耐藥監(jiān)測(cè)網(wǎng)絡(luò)（2）分子流行病學(xué)方法應(yīng)用于淋球菌耐藥監(jiān)測(cè)（3）淋球菌臨床治療失敗病例的篩查,中國(guó)的應(yīng)對(duì)策略,10,耐藥機(jī)制的初步研究,11,UnemoM,NicholasRA.Emergenceofmultidrug-resistant,extensivelydrug-resistantanduntreatablegonorrhea.FutureMicrobiol2012;7:1401-1422.,淋球菌耐藥的可能機(jī)制,12,頭孢低敏耐藥菌株（MIC0.25g/ml）的特征,表1.MIC0.25g/ml菌株相關(guān)基因特征,13,頭孢低敏或耐藥相關(guān)基因突變篩查,CROS,isolateswithsusceptibilitytoceftriaxone;CROI/R,isolateswithdecreasedsusceptibilityorresistancetoceftriaxone;A,alanine;WT,wild-type;T,threonine;V,valine;G,glycine;S,serine;P,proline;L,leucine;D,asparticacid;I,isoleucine;H,histidine;Y,tyrosine;K,lysine;N,asparagine;*P0.05fort-test(comparisonbetweentwogroups),ANOVA(comparisonamongthreeormoregroups)orchi-squaretest.,表2.所有菌株根據(jù)不同基因突變分組后MIC均值比較及低敏耐藥與特定基因相關(guān)性研究,14,NG-MAST在淋球菌耐藥監(jiān)測(cè)工作中的應(yīng)用,15,1、追蹤特定菌株的傳播（如耐藥菌株）2、追蹤特定人群中菌株的傳播（如MSM人群)3、監(jiān)測(cè)菌株的爆發(fā)流行4、確定治療失敗病例和重復(fù)感染病例,NG-MAST分型的意義,16,一、分型表現(xiàn)：1、區(qū)分度2、結(jié)果可比性二、操作的可行性：1、耗時(shí)2、費(fèi)用3、操作難易程度：硬件+軟件,NG-MAST分型的優(yōu)點(diǎn),17,NG-MAST分型過(guò)程,臨床分離株,DNA提取,porB基因PCR,porB基因測(cè)序,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)序列選取490bp,NG-MAST網(wǎng)站獲取等位基因號(hào),tbpB基因PCR,tbpB基因測(cè)序,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)序列選取390bp,NG-MAST網(wǎng)站獲取等位基因號(hào),獲取ST型別,18,MIC值與NG-MAST型別的對(duì)應(yīng)關(guān)系,19,表3.某監(jiān)測(cè)點(diǎn)不同MIC值菌株的NG-MAST型別分布,19,全國(guó)不同監(jiān)測(cè)點(diǎn)2012年度NG-MAST型別分布,表4.全國(guó)不同監(jiān)測(cè)點(diǎn)NG-MAST優(yōu)勢(shì)型別分布,20,porB-908,tbpB-110:ST1407同一監(jiān)測(cè)點(diǎn)兩例，都為男性涂片陽(yáng)性，培養(yǎng)陽(yáng)性具有MosaicpenA結(jié)構(gòu)，penAA501-WT,G542-WT頭孢曲松MIC-0.016,MIC-0.060，PPNG，環(huán)丙沙星耐藥，大觀霉素敏感,ST1407菌株的發(fā)現(xiàn),21,總結(jié),1.淋球菌頭孢低敏耐藥菌株出現(xiàn)，需要進(jìn)行跟蹤監(jiān)測(cè)。2.頭孢低敏耐藥與以下氨基酸替換有關(guān)：A102Dalter