【國家標(biāo)準(zhǔn)】GB 5413.3-2010 嬰幼兒食品和乳品中脂肪的測定(發(fā)布稿.僅供參考-標(biāo)準(zhǔn)分享網(wǎng))

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)010食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 嬰幼兒食品和乳品中脂肪的測定 of in 華人民共和國衛(wèi)生部發(fā)布 2010布 2010施 010 I 前 言 本標(biāo)準(zhǔn)代替 與乳制品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的分析方法中脂肪的測定、 5409乳檢驗(yàn)方法中脂肪的測定、 5416油檢驗(yàn)方法中脂肪的測定、 幼兒配方食品和乳粉 脂肪的測定 。 本標(biāo)準(zhǔn)的附錄 A 為資料性附錄。 本標(biāo)準(zhǔn)所代替標(biāo)準(zhǔn)的歷次版本發(fā)布情況為： 5409 5416 B 010 1 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 嬰幼兒食品和乳品中脂肪的測定 1 范圍 本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了巴氏殺菌乳、滅菌乳、生乳、發(fā)酵乳、調(diào)制乳、乳粉、煉乳、奶油、稀奶油、干酪和嬰幼兒配方食品中脂肪的測定方法。 本標(biāo)準(zhǔn)第一法適用于巴氏殺菌乳、滅菌乳、生乳、發(fā)酵乳、調(diào)制乳、乳粉、煉乳、奶油、稀奶油、干酪和嬰幼兒配方食品中脂肪的測定；第二法適用于巴氏殺菌乳、滅菌乳、生乳中脂肪的測定。 2 規(guī)范性引用文件 本標(biāo)準(zhǔn)中引用的文件對于本標(biāo)準(zhǔn)的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本標(biāo)準(zhǔn)。 第一法 3 原理 用乙醚和石油醚抽提樣品的堿水解液， 通過蒸餾或蒸發(fā)去除溶劑， 測定溶于溶劑中的抽提物的質(zhì)量。 4 試劑和材料 除非另有規(guī)定，本方法所用試劑均為分析純，水為 6682 規(guī)定的三級水。 粉酶：酶活力 。 水（ 質(zhì)量分?jǐn)?shù)約 25%。 注： 可使用比此濃度更高的氨水。 醇（ 體積分?jǐn)?shù)至少為 95%。 醚（ 不含過氧化物，不含抗氧化劑，并滿足試驗(yàn)的要求。 油醚（ ）：沸程 30 60 。 合溶劑：等體積混合乙醚（ 石油醚（ 使用前制備。 溶液（ 約 0.1 。 果紅溶液（ 將 1 g 剛果紅溶于水中，稀釋至 100 注： 可選擇性地使用。剛果紅溶液可使溶劑和水相界面清晰，也可使用其他能使水相染色而不影響測定結(jié)果的溶液。 酸（ 6 ）：量取 50 酸（ 12 ）緩慢倒入 40 中，定容至 100 勻。 5 儀器和設(shè)備 010 2 析天平：感量為 0.1 心機(jī)：可用于放置抽脂瓶或管，轉(zhuǎn)速為 500 轉(zhuǎn) /分鐘 600 轉(zhuǎn) /分鐘，可在抽脂瓶外端產(chǎn)生 80 g90 g 的重力場。 箱。 浴。 脂瓶：抽脂瓶應(yīng)帶有軟木塞或其他不影響溶劑使用的瓶塞（如硅膠或聚四氟乙烯）。軟木塞應(yīng)先浸于乙醚中，后放入 60 或 60 以上的水中保持至少 15 卻后使用。不用時(shí)需浸泡在水中，浸泡用水每天更換一次。 注： 也可使用帶虹吸管或洗瓶的抽脂管（或燒瓶），但操作步驟有所不同，見附錄 A 中規(guī)定。接頭的內(nèi)部長支管下端可成勺狀。 6 分析步驟 于脂肪收集的容器（脂肪收集瓶）的準(zhǔn)備 于干燥的脂肪收集瓶中加入幾粒沸石，放入烘箱中干燥 1 h。使脂肪收集瓶冷卻至室溫，稱量，精確至 0.1 注： 脂肪收集瓶可根據(jù)實(shí)際需要自行選擇。 白試驗(yàn) 空白試驗(yàn)與樣品檢驗(yàn)同時(shí)進(jìn)行，使用相同步驟和相同試劑，但用 10 定 氏殺菌乳、滅菌乳、生乳、發(fā)酵乳、調(diào)制乳 稱取充分混勻試樣 10 g（精確至 g）于抽脂瓶中。 加入 2.0 水（ ，充分混合后立即將抽脂瓶放入 65 5 的水浴中，加熱 15 0時(shí)取出振蕩。取出后，冷卻至室溫。靜止 30 s 后可進(jìn)行下一步驟。 加入 10 醇（ ，緩和但徹底地進(jìn)行混合，避免液體太接近瓶頸。如果需要，可加入兩滴剛果紅溶液（ 。 加入 25 醚（ ，塞上瓶塞，將抽脂瓶保持在水平位置，小球的延伸部分朝上夾到搖混器上，按約 100 次 /蕩 1 可采用手動振搖方式。但均應(yīng)注意避免形成持久乳化液。 抽脂瓶冷卻后小心地打開塞子，用少量的混合溶劑沖洗塞子和瓶頸，使沖洗液流入抽脂瓶。 加入 25 油醚（ ，塞上重新潤濕的塞子，按 述，輕輕振蕩 30 s。 將加塞的抽脂瓶放入離心機(jī)中，在 500 轉(zhuǎn) /分鐘 600 轉(zhuǎn) /分鐘下離心 5 則將抽脂瓶靜止至少 30 到上層液澄清，并明顯與水相分離。 小心地打開瓶塞，用少量的混合溶劑（ 洗塞子和瓶頸內(nèi)壁，使沖洗液流入抽脂瓶。 如果兩相界面低于小球與瓶身相接處，則沿瓶壁邊緣慢慢地加入水，使液面高于小球和瓶身相接處（見圖 1），以便于傾倒。 將上層液盡可能地倒入已準(zhǔn)備好的加入沸石的脂肪收集瓶中，避免倒出水層（見圖 2） 。 010 3 圖1 傾倒醚層前 圖2 傾倒醚層后 用少量混合溶劑沖洗瓶頸外部，沖洗液收集在脂肪收集瓶中。要防止溶劑濺到抽脂瓶的外面。 向抽脂瓶中加入 5 醇，用乙醇沖洗瓶頸內(nèi)壁，按 述進(jìn)行混合。重復(fù) 作，再進(jìn)行第二次抽提，但只用 15 醚和 15 油醚。 復(fù) 作，再進(jìn)行第三次抽提，但只用 15 醚和 15 油醚。 注 ： 如果產(chǎn)品中脂肪的質(zhì)量分?jǐn)?shù)低于 5 %，可只進(jìn)行兩次抽提。 并所有提取液，既可采用蒸餾的方法除去脂肪收集瓶中的溶劑，也可于沸水浴上蒸發(fā)至干來除掉溶劑。蒸餾前用少量混合溶劑沖洗瓶頸內(nèi)部。 將脂肪收集瓶放入 102 2 的烘箱中加熱 1 h，取出脂肪收集瓶，冷卻至室溫，稱量，精確至 0.1 重復(fù) 作，直到脂肪收集瓶兩次連續(xù)稱量差值不超過 0.5 錄脂肪收集瓶和抽提物的最低質(zhì)量。 為驗(yàn)證抽提物是否全部溶解，向脂肪收集瓶中加入 25 油醚，微熱，振搖，直到脂肪全部溶解。 如果抽提物全部溶于石油醚中，則含抽提物的脂肪收集瓶的最終質(zhì)量和最初質(zhì)量之差，即為脂肪含量。 若抽提物未全部溶于石油醚中，或懷疑抽提物是否全部為脂肪，則用熱的石油醚洗提。小心地倒出石油醚，不要倒出任何不溶物，重復(fù)此操作 3 次以上，再用石油醚沖洗脂肪收集瓶口的內(nèi)部。 最后，用混合溶劑沖洗脂肪收集瓶口的外部，避免溶液濺到瓶的外壁。將脂肪收集瓶放入 102 2 的烘箱中，加熱 1 h，按 取 測得的質(zhì)量和 得的質(zhì)量之差作為脂肪的質(zhì)量。 注： 選擇帶有虹吸管或洗瓶附件的抽脂管時(shí)，步驟如附錄 A（標(biāo)準(zhǔn)的附錄）所述。 粉和乳基嬰幼兒食品 稱取混勻后的試樣，高脂乳粉、全脂乳粉、全脂加糖乳粉和乳基嬰幼兒食品：約 1 g（精確至 g），脫脂乳粉、 乳清粉、酪乳粉：約 1.5 g（精確至 g）。 不含淀粉樣品 加入 10 5 5 的水，將試樣洗入抽脂瓶的小球中，充分混合，直到試樣完全分散，放入流動水中冷卻。 含淀粉樣品 將試樣放入抽脂瓶中，加入約 0.1 一小磁性攪拌棒，混合均勻后，加入 8 0 5 的蒸餾水，注意液面不要太高。蓋上瓶塞于攪拌狀態(tài)下，置 65 水浴中 2 h，每隔 10 檢驗(yàn)淀粉是否水解完全可加入兩滴約 0.1 的碘溶液（ 如無藍(lán)色出現(xiàn)說明水解完全，否則將抽脂瓶重新置于水浴中，直至無藍(lán)色產(chǎn)生。冷卻抽脂瓶。 010 4 以下操作同 乳 脫脂煉乳、全脂煉乳和部分脫脂煉乳稱取約 3 g 5 g、高脂煉乳稱取約 1.5 g（精確至 g），用10 次洗入抽脂瓶小球中，充分混合均勻。 以下操作同 油、稀奶油 先將奶油試樣放入溫水浴中溶解并混合均勻后，稱取試樣約 0.5 確至 g），稀奶油稱取 1入 8 10 5的蒸餾水。加 2 以下操作同 酪 稱取約 2 確至 g）于抽脂瓶中，加 10 混勻，加塞，于沸水中加熱 20 30 下操作按 7 分析結(jié)果表述 樣品中脂肪含量按式（ 1）計(jì)算： 1004321=m) (1) 式中： X樣品中脂肪含量，單位為克每百克（ g/100g）； m樣品的質(zhì)量，單位為克（ g）； 測得的脂肪收集瓶和抽提物的質(zhì)量，單位為克（ g）； 脂肪收集瓶的質(zhì)量，或在有不溶物存在下， 測得的脂肪收集瓶和不溶物的質(zhì)量，單位為克（ g）； 空白試驗(yàn)中，脂肪收集瓶和 測得的抽提物的質(zhì)量，單位為克（ g）； 空白試驗(yàn)中脂肪收集瓶的質(zhì)量，或在有不溶物存在時(shí)， 測得的脂肪收集瓶和不溶物的質(zhì)量，單位為克（ g）。 以重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測定結(jié)果的算術(shù)平均值表示，結(jié)果保留三位有效數(shù)字。 8 精密度 在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測定結(jié)果之差應(yīng)符合： 脂肪含量 15%， 00g； 脂肪含量 5 15%， 00g； 脂肪含量 5%， 00g。 9 其他 實(shí)驗(yàn)過程注意事項(xiàng)： 白試驗(yàn)檢驗(yàn)試劑 要進(jìn)行空白試驗(yàn)，以消除環(huán)境及溫度對檢驗(yàn)結(jié)果的影響。 進(jìn)行空白試驗(yàn)時(shí)在脂肪收集瓶中放入 1 g 新鮮的無水奶油。必要時(shí)，于每 100 劑中加入 1 新蒸餾后必須盡快使用。 010 5 白試驗(yàn)與樣品測定同時(shí)進(jìn)行 對于存在非揮發(fā)性物質(zhì)的試劑可用與樣品測定同時(shí)進(jìn)行的空白試驗(yàn)值進(jìn)行校正。 抽脂瓶與天平室之間的溫差可對抽提物的質(zhì)量產(chǎn)生影響。在理想的條件下（試劑空白值低，天平室溫度相同，脂肪收集瓶充分冷卻），該值通常小于 0.5 常規(guī)測定中，可忽略不計(jì)。 如果全部試劑空白殘余物大于 0.5 則分別蒸餾 100 醚和石油醚， 測定溶劑殘余物的含量。用空的控制瓶測得的量和每種溶劑的殘余物的含量都不應(yīng)超過 0.5 否則應(yīng)更換不合格的試劑或?qū)υ噭┻M(jìn)行提純。 醚中過氧化物的檢驗(yàn) 取一只玻璃小量筒，用乙醚沖洗，然后加入 10 醚，再加入 1 制備的 100 g/L 的碘化鉀溶劑，振蕩，靜置 1 相中均不得有黃色。 也可使用其他適當(dāng)?shù)姆椒z驗(yàn)過氧化物。 在不加抗氧化劑的情況下，為長久保證乙醚中無過氧化物，使用前三天按下法處理： 將鋅箔削成長條，長度至少為乙醚瓶的一半，每升乙醚用 80 使用前，將鋅片完全浸入每升中含有 10 g 五水硫酸銅和 2 量分?jǐn)?shù)為 98 %的硫酸中 1 水輕輕徹底地沖洗鋅片，將濕的鍍銅鋅片放入乙醚瓶中即可。也可以使用其他方法，但不得影響檢測結(jié)果。 第二法 10 原理 在乳中加入硫酸破壞乳膠質(zhì)性和覆蓋在脂肪球上的蛋白質(zhì)外膜，離心分離脂肪后測量其體積。 11 試劑和材料 酸（ 分析純，20 約 g/L。 戊醇（ 分析純。 12 儀器和設(shè)備 脂離心機(jī)。 勃氏乳脂計(jì)：最小刻度值為 ，見圖 3。 010 6 圖 3 蓋勃氏乳脂計(jì) 標(biāo)乳吸管 。 13 分析步驟 于蓋勃氏乳脂計(jì)中先加入 10 酸（ ，再沿著管壁小心準(zhǔn)確加入 品，使樣品與硫酸不要混合，然后加 1 戊醇（ ，塞上橡皮塞，使瓶口向下，同時(shí)用布包裹以防沖出，用力振搖使呈均勻棕色液體，靜置數(shù)分鐘（瓶口向下） ，置 65 70 水浴中 5 出后置于乳脂離心機(jī)中以 1100 轉(zhuǎn) /分鐘的轉(zhuǎn)速離心 5 置于 65 70 水浴水中保溫 5 意水浴水面應(yīng)高于乳脂計(jì)脂肪層） 。取出，立即讀數(shù)，即為脂肪的百分?jǐn)?shù)。 14 精密度 在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測定結(jié)果的絕對差值不得超過算術(shù)平均值的 5%。 010 7 附 錄 A （資料性附錄） 使用帶虹吸管或洗瓶的抽脂管的操作步驟 步驟 脂肪收集瓶的準(zhǔn)備：見 空白試驗(yàn)：見 測定 巴氏殺菌、滅菌乳、生乳、發(fā)酵乳、調(diào)制乳：稱取充分混勻樣品 10 g（精確至 g）于抽脂管底部。 乳粉及乳基嬰幼兒食品：稱取混勻后的樣品高脂乳粉、全脂乳粉、全脂加糖乳粉和乳基嬰幼兒配方食品：約 1g，脫脂乳粉、 乳清粉、酪乳粉：約 1.5 g（精確至 g） ，于抽脂管底部，加入 10 5 5 的水，充分混合，直到樣品完全分散，放入流動水中冷卻。 煉乳：脫脂煉乳稱取約 10 g、全脂煉乳和部分脫脂煉乳稱取約 3 g 5 g；高脂煉乳稱取約 確至 ，于抽脂管底部。加入 10 ，充分混合均勻。 奶油、稀奶油：先將奶油樣品放入溫水浴中溶解并混合均勻后，奶油稱取約 0.5 g 樣品，稀奶油稱取 1g 于抽脂管底部（精確至 g） 。 上述樣品接以下 作。 干酪：稱取約 2 g 研碎的樣品（精確至 g） 。加水 9 水 2 玻璃棒攪拌均勻后微微加熱使酪蛋白溶解，用鹽酸（ 和后再加鹽酸（ 10 海砂 0.5 g，蓋好玻璃蓋，以文火煮沸 5 卻后將燒杯內(nèi)容物移入抽脂管底部，用 25 醚沖洗燒杯，洗液并入抽脂管中，以下操作按 軟木塞”以后操作。 加入 2 管底部已稀釋的樣品徹底混合。加入氨水后，應(yīng)立即進(jìn)行下步操作。 將抽脂管放入 65 5 的水浴中，加熱 15 20 爾振蕩樣品管，然后冷卻至室溫。 加入 10 管底部輕輕徹底地混合，必要時(shí)加入兩滴剛果紅溶液。 加入 25 軟木塞（已被水飽和） ，或用水浸濕的其他瓶塞，上下反轉(zhuǎn) 1 要過度（避免形成持久性乳化液） 。必要時(shí)，將管子放入流動的水中冷卻，然后小心地打開軟木塞，用少量的混合溶劑（使用洗瓶）沖洗塞子和管頸，使沖洗液流入管中。 加入 25 塞（塞子重新用水潤濕） ，按 0 s。 將加塞的管子放入離心機(jī)中，在 500 轉(zhuǎn) /分鐘 600 轉(zhuǎn) /分鐘下離心 1 5 靜止至少 30 到上層液澄清，并明顯地與水相分離，冷卻。 小心地打開軟木塞，用少量混合溶劑洗塞子和管頸，使沖洗液流入管中。 將虹吸管或洗瓶接頭插入管中，向下壓長支管，直到距兩相界面的上方 4 部長支管應(yīng)與管軸平行。 小心地將上層液移入含有沸石的脂肪收集瓶中，也可用金