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文檔簡介
1、人教版微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用單元測試2一、選擇題1(2015年江蘇揚州中學(xué)質(zhì)量檢測)關(guān)于滅菌和消毒的敘述,錯誤的是()A接種環(huán)、接種針用灼燒的方法滅菌B滅菌是殺死物體內(nèi)外所有微生物C消毒是殺死物體內(nèi)外絕大多數(shù)的微生物D高壓蒸汽滅菌的原理是使細菌DNA變性【答案】D【解析】滅菌是使用強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物,包括芽孢和孢子,達到完全無菌的過程,滅菌的方法主要有灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌。灼燒滅菌適合于接種工具的滅菌,一般來說是在操作過程中金屬類的接種工具;干熱滅菌適合于玻璃器皿、金屬工具的滅菌;高壓蒸汽滅菌的原理是殺死所有微生物,適合于玻璃器皿、接種工具以及培養(yǎng)基;特別注意培養(yǎng)基
2、的滅菌只能用高壓蒸汽滅菌。消毒是通過溫和的理化方法殺死物體表面或者內(nèi)部一部分對人體有害的微生物,不包括芽孢和孢子,常用的消毒方法有高溫消毒、巴氏消毒法、酒精消毒等。滅菌和消毒的區(qū)別在于滅菌是用強烈的物理方法殺死了全部的微生物及其芽孢、孢子。2欲從土壤中分離出能分解尿素的細菌,下列實驗操作中,不正確的是()A將土壤用無菌水進行一系列的梯度稀釋B同一濃度的土壤稀釋液應(yīng)至少涂布三個平板C可將未接種的培養(yǎng)基在相同條件下培養(yǎng)作為對照D用加入剛果紅指示劑的培養(yǎng)基可篩選出分解尿素的細菌【答案】D【解析】為了獲得單個菌落,應(yīng)將土壤用無菌水進行一系列的梯度稀釋,A正確;為了使結(jié)果更加準(zhǔn)確,同一濃度的土壤稀釋液至
3、少要涂布3個平板進行重復(fù)實驗,然后計算平均值,B正確;用未接種的培養(yǎng)基在相同條件下進行培養(yǎng)不僅能作對照,而且可以檢驗培養(yǎng)基是否滅菌合格,加入剛果紅的培養(yǎng)基用來篩選纖維素分解菌,D錯誤。3(2015年廣東廣州質(zhì)檢)利用農(nóng)作物秸稈為原料可生產(chǎn)乙醇,生產(chǎn)過程中可采用微生物將秸稈水解或用酶水解,其主要技術(shù)流程如下圖所示,下列相關(guān)說法錯誤的是()秸稈碎屑反應(yīng)罐水解壓濾出渣酒精發(fā)酵真空分餾A可用剛果紅染色法篩選過程所需的纖維素分解菌B過程加入的是葡萄糖苷酶C酒精發(fā)酵接種的酵母菌需在無氧條件下發(fā)酵D酒精發(fā)酵前需對培養(yǎng)基進行高壓蒸汽滅菌【答案】B【解析】篩選纖維素分解菌可采用剛果紅染色法;纖維素酶為復(fù)合酶,至
4、少包含三種組分,C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶;酒精發(fā)酵需在無氧條件下進行;酒精發(fā)酵前需對培養(yǎng)基進行高壓蒸汽滅菌。4平板劃線法和稀釋涂布平板法是接種微生物的兩種常用方法,下列描述正確的是()A都可對微生物進行計數(shù)B平板劃線法是將不同稀釋度的菌液通過接種環(huán)連續(xù)劃在固體培養(yǎng)基表面C稀釋涂布平板法是將不同稀釋度的菌液倒入液體培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)D都會在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落【答案】D【解析】平板劃線法不能對微生物進行計數(shù),只能用于分離純化微生物,計數(shù)微生物常采用稀釋涂布平板法;平板劃線法不需要進行梯度稀釋;稀釋涂布平板法需要將不同稀釋度的菌液涂布到固體培養(yǎng)基的表面。平板劃線法和稀釋涂布平板法都能在培養(yǎng)基表
5、面形成單個的菌落。二、非選擇題5(2015年河南開封第二次模擬)生物興趣小組試圖探究牛和山羊的瘤胃中的微生物對尿素是否有分解作用,設(shè)計了以下實驗,并成功篩選到能降解尿素的細菌(目的菌)。培養(yǎng)基成分如左表所示,實驗步驟如圖所示。請分析回答問題:KH2PO41.4 gNa2HPO42.1 gMgSO47H2O0.2 g葡萄糖10 g尿素1 g瓊脂15 g溶解后自來水定容到1 000mL(1)培養(yǎng)基中加入尿素的目的是_,原理是_ _。從同化作用類型來看的,該菌屬于_。(2)實驗需要振蕩培養(yǎng),原因是_。轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)時,常采用_的方法接種,獲得單菌落后繼續(xù)篩選。(3)在實驗過程中:培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿;玻棒、
6、試管、錐形瓶、吸管;瘤胃中液體。其中需要滅菌是_(填序號)。(4)進行分離分解尿素的細菌實驗時,甲同學(xué)從培養(yǎng)基上篩選出大約150個菌落,而其他同學(xué)只選擇出大約50個菌落。甲同學(xué)實驗結(jié)果差異的原因可能有_(填序號)。取樣不同培養(yǎng)基污染操作失誤沒有設(shè)置對照(5)以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基培養(yǎng)“目的菌”后,加入指示劑后變紅色,說明“目的菌”能分解尿素。理由是_。(6)為進一步確定取自瘤胃中液體的適當(dāng)稀釋倍數(shù),將接種的培養(yǎng)皿放置在37恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h48 h,觀察并統(tǒng)計具有紅色環(huán)帶的菌落數(shù),結(jié)果如下表,其中_倍的稀釋比較合適。稀釋倍數(shù)103104105106107菌落數(shù)5003672483618
7、【答案】(1)篩選目的菌只有能合成脲酶的細菌才能分解尿素,在該培養(yǎng)基上生長異養(yǎng)型(2)為目的菌提供氧氣稀釋涂布平板(平板劃線) (3)(4)(5)微生物產(chǎn)生的脲酶能將尿素分解成氨,氨會使培養(yǎng)基的pH升高,使酚紅指示劑變紅 (6)106或105【解析】(1)該實驗的目的是篩選到能高效降解尿素的細菌,因此培養(yǎng)基中加入尿素的目的是使能高效降解尿素的細菌(目的菌)生長繁殖,不能分解尿素的細菌將因缺少氮源無法生長繁殖,因此從功能上看,該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基,從同化作用類型來看,該菌屬于異養(yǎng)型,需加入葡萄糖等有機碳源。(2)目的菌生長繁殖需要的氮源來自尿素,碳源來自葡萄糖;由于分解尿素的細菌是需氧微生物,
8、因此需要震蕩培養(yǎng),固體培養(yǎng)基上常用的接種方法是稀釋涂布法和平板劃線法。(3)為了保證培養(yǎng)物不被污染,對培養(yǎng)細菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿和玻璃棒、試管、錐形瓶和吸管要進行滅菌,實驗操作者的雙手要進行消毒。(4)由題意可知,該同學(xué)與其他同學(xué)獲得的菌落數(shù)差異很大,可能的原因是采用的土樣不同,培養(yǎng)基滅菌不徹底,培養(yǎng)基被污染,或者是實驗過程中沒有進行無菌操作。(5)尿素被分解尿素的細菌氧化成氨氣,氨氣會使培養(yǎng)基堿性增強,pH升高,指示劑酚紅變紅,因此通過在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑,檢測培養(yǎng)基pH的變化來判斷尿素是否被分解。(6)觀察并統(tǒng)計菌落數(shù)應(yīng)選擇菌落數(shù)在30300之間的進行統(tǒng)計,故應(yīng)選106或105倍的稀釋
9、倍數(shù)比較合適。6微生物的分離和培養(yǎng)是現(xiàn)代生物工程應(yīng)用中的重要環(huán)節(jié)。下圖甲、乙是大腸桿菌分離和培養(yǎng)過程中部分操作和實驗結(jié)果示意圖,請據(jù)圖回答有關(guān)問題:(1)上圖甲所示的是制備固體培養(yǎng)基時的實驗操作步驟之一,它稱為_,若用該培養(yǎng)基培養(yǎng)大腸桿菌,除考慮營養(yǎng)條件外,還要考慮_、_和滲透壓等條件。(2)培養(yǎng)大腸桿菌時,在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測方法是_。(3)上圖乙是平板劃線法接種操作示意圖,正確的操作順序是AB _(用字母和箭頭表示);找出圖乙中兩處錯誤的操作_、_(用字母表示)?!敬鸢浮?1)倒平板溫度pH(或填氧氣、無菌等,答案合理即可,順序可調(diào)亂)(2)將未接種
10、的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時間,觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生(3)GFECDHCD【解析】(1)圖甲所示的實驗操作步驟為倒平板,若用該培養(yǎng)基培養(yǎng)大腸桿菌,還要考慮溫度、氧氣、pH和無菌操作等一系列相關(guān)條件。(2)培養(yǎng)大腸桿菌時,在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染,因此要設(shè)置對照實驗,對于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測方法是將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時間,觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生,若有則說明培養(yǎng)基已被污染,應(yīng)重新配制培養(yǎng)基進行實驗。(3)圖乙是平板劃線法接種操作示意圖,正確的操作順序是ABGFECDH;圖乙中兩處錯誤的操作是C未在酒精燈火焰旁進行操作,D將第5區(qū)域內(nèi)的劃線與第1區(qū)相連。
11、7(2015年內(nèi)蒙古包頭模擬)金黃色葡萄球菌是一種具有高度耐鹽性的微生物,可引起人類肺炎、腸炎等疾病。金黃色葡萄球菌在血平板(培養(yǎng)基中添加適量血液)上生長時,可破壞菌落周圍的紅細胞,使其褪色。如圖為定性檢測鮮牛奶中是否存在金黃色葡萄球菌的操作流程,請回答相關(guān)問題:(1)按細胞結(jié)構(gòu)分類,金黃色葡萄球菌屬于_生物;從培養(yǎng)過程分析,金黃色葡萄球菌可進行_呼吸。(2)7.5%NaCl肉湯培養(yǎng)基可為微生物提供的營養(yǎng)成分包括_,用7.5%NaCl肉湯培養(yǎng)基進行選擇培養(yǎng)的主要目的是_。(3)操作中在血平板上的接種方法是_,接種操作前后需要對接種工具進行_滅菌。(4)經(jīng)過規(guī)范操作、重復(fù)實驗,血平板上均出現(xiàn)_的
12、菌落,初步證明鮮牛奶中存在金黃色葡萄球菌,但鮮牛奶供應(yīng)商仍認為此菌并非鮮牛奶所攜帶,因此,要對本操作進行完善,完善的方案是_。【答案】(1)原核有氧(2)碳源、氮源、水和無機鹽增加金黃色葡萄球菌的數(shù)量(3)平板劃線法灼燒(4)周圍存在透明圈設(shè)置不加鮮奶其他操作均相同的對照組【解析】(1)名稱中凡是有“桿”“球”“螺旋”“弧”的往往都是細菌,細菌屬于原核生物。金黃色葡萄球菌在培養(yǎng)的過程中需要振蕩,可知能進行有氧呼吸。(2)含NaCI的肉湯培養(yǎng)基可以為微生物提供碳源、氮源、水和無機鹽。用7.5% NaCI的肉湯培養(yǎng)基的目的是進行選擇培養(yǎng),以增加金黃色葡萄球菌的數(shù)量。(3)用固體培養(yǎng)基純化菌種常用的
13、接種方法是平板劃線法,該過程中要對接種環(huán)進行灼燒滅菌。(4)由于金黃色葡萄球菌在血平板上生長時,可破壞菌落周圍的紅細胞,使其褪色,因此菌落周圍會出現(xiàn)透明圈。為排除因?qū)嶒炦^程中的操作不規(guī)范給實驗結(jié)果造成的誤差,應(yīng)設(shè)置對照實驗。8(2015年北京東城區(qū)聯(lián)考)耐高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)中有很大的實用性。研究者從熱泉中篩選了高效產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌,其篩選過程如圖所示。(1)進行過程的目的是_;過程所使用的接種方法是_法。(2)從用途上來說,號培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基,僅以淀粉作為_源;從物理狀態(tài)上來說,號培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基,配制時應(yīng)加入_作為凝固劑。(3)、號培養(yǎng)基配制和滅菌時,滅菌與調(diào)節(jié)pH的先后
14、順序是_;一般對配制的培養(yǎng)基采用_法滅菌。(4)部分嗜熱菌在號培養(yǎng)基上生長時可釋放_分解培養(yǎng)基中的淀粉,在菌落周圍形成透明圈;應(yīng)挑出透明圈_(填“大”或“小”)的菌落,接種到號培養(yǎng)基。【答案】(1)稀釋稀釋涂布平板(2)選擇(唯一)碳瓊脂(3)先調(diào)節(jié)pH,后滅菌高壓蒸汽滅菌(4)淀粉酶大【解析】(1)由圖中顯示,在過程后試管中細菌數(shù)目減少,可推知此過程為稀釋;號培養(yǎng)基中微生物菌落均勻分布,可確定使用的接種方法是稀釋涂布平板法。(2)由圖示可知過程是分離能產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌的過程,號培養(yǎng)基應(yīng)為以淀粉作為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基,培養(yǎng)基呈固體狀是因為配制時加入了瓊脂作為凝固劑。(3)制備培養(yǎng)基時應(yīng)
15、先調(diào)節(jié)pH、后滅菌,對培養(yǎng)基進行滅菌的常用方法是高壓蒸汽滅菌法。(4)部分嗜熱菌之所以能分解淀粉,是因為此類細菌在生長時釋放了淀粉酶,培養(yǎng)基中的淀粉被分解后,會形成大小不一的透明圈,其中透明圈越大,說明該菌落產(chǎn)生的高溫淀粉酶的活性越大。9(原創(chuàng))中國家電研究院的洗衣機專家指出,洗衣機內(nèi)部的環(huán)境非常潮濕,洗衣機使用時間越長,內(nèi)部滋生微生物的機會就越大。看似干凈的洗衣機,其內(nèi)部隱藏著一個健康的隱形殺手。某生物興趣小組的同學(xué),利用內(nèi)桶背面的污垢進行了相關(guān)實驗室實驗。(1)培養(yǎng)洗衣機內(nèi)部微生物的培養(yǎng)基中一般含有_。(2)鑒定洗衣機污垢中是否有菌落時要制備固體培養(yǎng)基,在制備完畢后要進行倒平板操作,將平板
16、倒置。這樣做的目的是_。(3)有三種材料或用具需要消毒或滅菌:培養(yǎng)細菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿;玻棒、試管、燒瓶和吸管;實驗操作者的雙手。其中需要消毒的是_,(填序號)需要滅菌的是_。(填序號)(4)檢驗污垢中是否含微生物時,要將污垢制成水樣稀釋,然后將稀釋水樣用涂布器分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進行培養(yǎng),這種方法稱為_。下圖所示的四種菌落分布情況中,不可能由該方法得到的是_。用該方法統(tǒng)計樣本菌落數(shù)時是否需要對照組?_。為什么?_。(5)判斷污垢中微生物的種類可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征進行初步的_。實驗結(jié)束后,使用過的培養(yǎng)基應(yīng)該進行滅菌處理才能倒掉,此目的是_。【答案】(1)水、碳源、氮源
17、和無機鹽(2)防止皿蓋上凝結(jié)的水珠落入培養(yǎng)皿造成污染,還可使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā)(3)(4)稀釋涂布平板法D需要因為需要判斷培養(yǎng)基是否被雜菌污染(培養(yǎng)基滅菌是否合格)(5)鑒定(或分類)防止造成環(huán)境污染【解析】(1)培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基中一般含有水、碳源、氮源和無機鹽。(2)倒置平板的目的是防止皿蓋上凝結(jié)的水珠落入培養(yǎng)皿造成污染,同時還可使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā)。(3)實驗者的雙手需要進行消毒處理,培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基及其他實驗器材等需要進行滅菌處理。(4)本題中將污垢水樣接種在培養(yǎng)基上的方法為稀釋涂布平板法。D屬于利用平板劃線法得到的菌落分布。利用稀釋涂布平板法統(tǒng)計菌落數(shù)時需要設(shè)置對照組,
18、將一個未接種污垢水樣的培養(yǎng)基放在相同條件下培養(yǎng),以此判斷培養(yǎng)基是否被雜菌污染。(5)污垢中的微生物種類可以根據(jù)菌落的形狀、大小等進行初步分類。實驗結(jié)束后,為防止污染環(huán)境,應(yīng)對用過的培養(yǎng)基進行滅菌處理后再倒掉。10(2015年陜西五校模擬聯(lián)考)纖維素酶對于能否實現(xiàn)乙醇工業(yè)化生產(chǎn)、處理服裝面料等具有重要的意義,研究者初步篩選到能合成纖維素酶的菌株MC1,以下是該菌株的鑒定過程。(1)為了獲得能合成纖維素酶的單菌落,可采用_法將初篩菌液接種在固體培養(yǎng)基上,這種培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。(2)關(guān)于制備固體培養(yǎng)基的敘述,錯誤的是()A制作固體培養(yǎng)基時可以加入瓊脂B操作的順序為計算、稱量、溶化、倒平板、滅菌C待培養(yǎng)基冷卻至50 左右時進行倒平板D待平板冷卻凝固約510 min后將平板倒過來放置(3)實驗過程中如何防止其他微生物的污染?_。(4)下表的培養(yǎng)液pH均為4.8,若對MC1中纖維素酶的活力進行測定,則能選擇表中的_培養(yǎng)液。培養(yǎng)液纖維素纖維素酶NaNO3牛肉膏K2HPO4KClMgSO47H2OFeSO4A25 g/L1 g/L0.5 g/L1 g/L0.01 g/LB3 g/L1 g/L0.5 g/L1 g/L0.01 g/LC25 g/L1 g/L3 g/L1 g/L0.5 g/L1 g/L0.01 g/LD25 g/L3 g/L1 g/L0.5 g/L1 g/L0.0
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