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1、牙齒酸蝕癥實驗?zāi)P偷难芯窟M展牙齒酸蝕癥實驗?zāi)P偷难芯窟M展 本文關(guān)鍵詞:研究進展,牙齒,模型,實驗,酸蝕癥牙齒酸蝕癥實驗?zāi)P偷难芯窟M展 本文簡介:摘要:牙齒酸蝕癥的患病率逐年上升,為深入探討其發(fā)病相關(guān)因素、治療及其預(yù)防措施,牙齒酸蝕癥實驗?zāi)P偷慕⒁岩饑鴥?nèi)外學者的廣泛重視。目前牙齒酸蝕癥的實驗?zāi)P椭饕?類:體內(nèi)實驗?zāi)P汀⒃粚嶒災(zāi)P秃碗x體實驗?zāi)P汀?種實驗?zāi)P透饔袃?yōu)缺點,本文就牙齒酸蝕癥實驗?zāi)P头N類以及影響實驗?zāi)P偷南嚓P(guān)因素做一綜述。牙齒酸蝕癥實驗?zāi)P偷难芯窟M展 本文內(nèi)容:摘要:牙齒酸蝕癥的患病率逐年上升, 為深入探討其發(fā)病相關(guān)因素、治療及其預(yù)防措施, 牙齒酸蝕癥實驗?zāi)P偷慕⒁岩饑鴥?nèi)外學
2、者的廣泛重視。目前牙齒酸蝕癥的實驗?zāi)P椭饕?類:體內(nèi)實驗?zāi)P?、原位實驗?zāi)P秃碗x體實驗?zāi)P汀?種實驗?zāi)P透饔袃?yōu)缺點, 本文就牙齒酸蝕癥實驗?zāi)P头N類以及影響實驗?zāi)P驮O(shè)計的相關(guān)因素做一綜述。關(guān)鍵詞:牙齒酸蝕癥; 實驗?zāi)P停?實驗設(shè)計; 酸蝕方案;牙齒酸蝕癥 (dental erosion) 是指在無細菌參與的情況下, 牙面受到酸或其螯合物的化學侵蝕作用而引起的一種病理、慢性的牙體硬組織表面淺層喪失1.近年來其患病率逐年上升, 年世界平均患病率已達到30.4%2.目前牙齒酸蝕癥的研究模型主要分為3類:體內(nèi) (in vivo) 實驗?zāi)P停阂灾驹刚叩奶烊谎雷鳛樗嵛g對象, 實驗完全在志愿者口腔內(nèi)進行;原位
3、 (in situ) 實驗?zāi)P停捍嵛g的離體牙試樣暴露于志愿者口腔環(huán)境中, 為盡可能降低對志愿者天然牙可能造成的酸蝕損害, 酸蝕過程多數(shù)在體外進行。如果選擇在體內(nèi)進行酸蝕還可進一步研究口腔環(huán)境 (如溫度、唾液等) 對酸蝕過程的影響;離體 (in vitro) 實驗?zāi)P停阂噪x體牙試樣作為酸蝕對象, 且酸蝕過程完全在體外進行。從理論上來說, 體內(nèi)實驗?zāi)P褪?種實驗?zāi)P椭凶罹邊⒖純r值的, 但因存在諸多問題而未得到廣泛運用。如倫理學問題、難以準確測試被酸蝕牙齒的理化性能變化3、口內(nèi)情況復(fù)雜為實驗結(jié)果分析帶來困難等。目前研究人員偏向設(shè)計離體實驗以及原位實驗來進行牙齒酸蝕癥的相關(guān)研究。離體實驗較明顯的優(yōu)點
4、是:相對于原位實驗不需要大量的志愿者參與, 可以避免參與者依從性的問題;實驗花費少;可以嚴格控制實驗變量等?,F(xiàn)階段已有大量的離體實驗?zāi)P蛻?yīng)用于牙齒酸蝕癥的研究中, 其最大的局限在于研究條件過于理想化, 未考慮到口腔環(huán)境對酸蝕過程的影響:如獲得性生物膜、唾液的保護性作用以及牙刷的洗刷、天然牙的磨耗等。原位實驗?zāi)P偷耐怀鰞?yōu)點在于還原了口腔環(huán)境;缺點在于仍存在志愿者的依從性問題及倫理學問題等。體內(nèi)實驗及原位實驗?zāi)P托枰瑫r考慮的生物因素包括:不同個體間的生物因素:如唾液情況、不同個體的再礦化潛能以及牙齒的固有性質(zhì)等;口腔環(huán)境中的生理運動:如咀嚼、牙齒的磨耗、舌的運動等;行為_慣的影響:飲食_慣、口腔
5、衛(wèi)生_慣等。因涉及倫理學問題, 體內(nèi)實驗?zāi)P蛻?yīng)用較少, 故本文將重點對離體以及原位實驗?zāi)P偷奶攸c及設(shè)計需要考慮的因素做一綜述。1 離體、原位實驗?zāi)P驮O(shè)計考慮因素1.1 實驗對象實驗對象主要為人牙或者牛牙。隨著人們口腔保健意識的提高, 獲取人牙難度增加, 更多學者選擇牛牙來進行實驗。牛牙和人牙本身存在許多差異4, 這些差異可能對實驗結(jié)論產(chǎn)生影響。有研究證實牛牙發(fā)生酸蝕以及脫礦的速度均較人牙快5.Rios等6發(fā)現(xiàn), 人牙的表面硬度高出牛牙約10%, 牛牙釉質(zhì)含有更多孔隙, 且所含礦物質(zhì)成分較少。在酸蝕實驗中人牙相比于牛牙表現(xiàn)出更多的表面顯微硬度改變。綜合考慮, 建議在牙齒酸蝕研究中使用人牙作為實驗
6、對象。值得注意的是, 人牙也存在個體差異。為了使差異降到最低, 多數(shù)研究使用人第三磨牙7, 尤其是未萌出的第三磨牙。另外, 來自不同牙面的試樣是否存在差異目前尚存在爭議, 有離體實驗證實人牙舌 (腭) 面比唇 (頰) 面更易被酸蝕8.但也有研究發(fā)現(xiàn), 來自第三磨牙不同牙面試樣的被酸蝕深度不具有顯著性差異9.1.2 實驗設(shè)計1.2.1 實驗變量離體模型中, 影響實驗的主要變量包括酸蝕過程中攪拌的方式、速率、實驗的溫度、酸蝕方案以及試樣是否與唾液接觸等。不同的攪拌方式或者速率主要通過改變?nèi)苜|(zhì)擴散至各層的濃度來影響酸蝕?,F(xiàn)有研究多采用磁力攪拌器進行攪拌, 但攪拌速度標準尚未統(tǒng)一。溫度的控制可通過使用
7、冰箱或水浴實現(xiàn)10.當其他因素不變時, 溫度越高, 酸蝕越明顯10.但也有學者研究發(fā)現(xiàn)當檸檬酸加熱超過70后冷卻, 造成的酸蝕程度反而較小, 可能的原因是其中酸性物質(zhì)已經(jīng)降解或者變性8.離體實驗結(jié)果與其實驗變量密切相關(guān), 但由于缺乏統(tǒng)一的控制標準, 結(jié)果常缺乏可比性。影響原位實驗的變量除了酸蝕過程中實驗的溫度 (通常為37或室溫) 、酸蝕過程是否接觸唾液、酸蝕方案外, 通常還涉及是否采取預(yù)防措施以保護志愿者天然牙、是否存在摩擦模擬等。1.2.2 酸蝕方案酸蝕方案包括實驗周期、致酸蝕源、酸蝕方式、酸蝕頻率以及酸蝕時間等。由于酸蝕方案的變量較多且缺乏統(tǒng)一的標準, 因此在不同實驗研究結(jié)果可比性不佳。
8、致酸蝕源的主要變量有pH值;酸濃度 (包括緩沖容量及未解離酸濃度) ;所含鈣、磷、氟化物等的濃度;飽和度;所含酸蝕抑制劑的量等, 其中pH值是最主要的影響因素。此外, 還需考慮酸蝕溶液的物理性質(zhì)如濕度、粘度等11.在離體實驗中, 酸蝕方式根據(jù)酸蝕時間分為兩類:1) 原位酸蝕 (in situ erosion) , 即實驗過程中試樣一次性長時間接觸致酸蝕源;2) 循環(huán)酸蝕 (erosion cycling/pH cycling) , 即周期性的短時間接觸致酸蝕源, 此方法可用于需要引入唾液作為保護變量的實驗。也可根據(jù)實驗環(huán)境分為兩類:1) 實驗試樣與致酸蝕源、唾液在燒杯中發(fā)生反應(yīng);2) 利用脫礦
9、-再礦化循環(huán)模型, 使致酸蝕源接觸實驗試樣表面的同時, 迅速與產(chǎn)生的唾液相混合, 模擬口內(nèi)唾液的緩沖作用12, 該模型在一定程度上模擬了口內(nèi)環(huán)境, 結(jié)果更具有參考價值13.還有一部分離體實驗建立了酸蝕-磨耗循環(huán)模型 (erosionabrasion cycling) 模擬刷牙帶來的磨損14.原位實驗中, 酸蝕方案根據(jù)酸蝕方式主要分為兩種:1) 直接口內(nèi)酸蝕 (intraoral erosion) , 指酸蝕時試樣位于志愿者口內(nèi), 能較真實地還原實際酸蝕過程如唾液的流動, 結(jié)果較為準確, 但考慮到倫理學問題, 為了避免志愿者的易感牙受到損害, 現(xiàn)有研究較少采用該法;2) 間接口內(nèi)酸蝕 (ex v
10、ivo erosion) , 指酸蝕過程發(fā)生在體外, 即采取口外酸蝕的方法, 其酸蝕流程較為規(guī)范, 不會受到志愿者個體差異的影響, 所以其結(jié)果變化范圍更小。以下內(nèi)容總結(jié)了年發(fā)表在國內(nèi)外期刊上的關(guān)于牙齒酸蝕癥研究部分所提及的酸蝕方案。1.2.2. 1 離體實驗大多數(shù)離體實驗的周期為510d, 個別長達20d15.若研究目標為牙齒酸蝕癥早期病變情況, 則酸蝕時間不建議超過10min16.致酸蝕源多選擇檸檬酸 (pH3) 17, 根據(jù)不同研究目的, 也可選擇橙汁、可口可樂和西柚汁等市售酸性飲料。致酸蝕源的量及酸蝕次數(shù)視具體情況而定。酸蝕方法最好采用脫礦/再礦化循環(huán)酸蝕模型, 酸蝕頻率多為26次/日1
11、8, 酸蝕時間一般為5 min.若選擇原位酸蝕, 酸蝕頻率較低, 可為1次/日, 每次5min19,20, 也有研究一次酸蝕60 min21.有研究結(jié)果表明, 離體實驗中每天在不同的時間酸蝕4次 (持續(xù)15d) 與一次性進行等次數(shù)的酸蝕實驗所造成的酸蝕深度比較差異無統(tǒng)計學意義8.1.2.2. 2 原位實驗原位實驗多分階段進行, 每個階段持續(xù)57d22,23, 每天酸蝕次數(shù)46次22,24, 每次酸蝕時間為510min, 總周期一般1024d25.致酸蝕源多選擇檸檬酸, 用量一般小于1200mL/d.酸蝕方法多選擇間接口內(nèi)酸蝕, 部分研究選擇損害較小的含漱法26.1.3 口內(nèi)載具原位實驗中, 學
12、者們根據(jù)不同的實驗?zāi)康暮涂谇粌?nèi)環(huán)境的特點設(shè)計不同的口內(nèi)載具。目前主要有兩種:間斷性佩戴于口腔中的可摘式載具及持續(xù)性固定在口腔中的固定載具。原位實驗中可以制作保護性牙托保護志愿者的牙齒免受酸蝕, 或者將試樣放置于牙托上, 在牙托上開窗讓試樣接觸酸性物質(zhì)。1.3.1 可摘式載具可摘式載具是指周期性佩戴于志愿者口內(nèi)的裝置, 需要在實驗人員監(jiān)督下進行摘戴, 其可放在志愿者的上頜或者下頜。有研究結(jié)果顯示, 大部分酸蝕實驗選擇將載具放在上頜, 鮮有放在下頜的情況7, 主要是為了減少志愿者舌舔舐對試樣的影響。使用此種裝置需要考慮志愿者的依從性以及摘戴過程可能發(fā)生的試樣丟失問題。1.3.2 固定載具為了解決可
13、摘式載具存在的志愿者依從性問題, 研究人員設(shè)計出將試樣固定在志愿者牙齒的模型:利用定制改裝的正畸托槽將釉質(zhì)塊固定在志愿者磨牙頰面27.根據(jù)Sung等7的調(diào)查, 在酸蝕的原位實驗研究中, 固定裝置的使用較少。不同的口內(nèi)裝置, 試樣在口內(nèi)的位置也不相同。常見的位置有:腭中縫或其附近、牙列唇頰部以及舌下。在上腭區(qū)域, 可以使用金屬絲將試樣捆綁固定28.1.4倫理問題為了保護受試者的天然牙, 建議在原位實驗研究前應(yīng)確定實驗方案中每種致酸蝕源的安全范圍。例如, 有研究在實驗中設(shè)置20m的安全范圍8, 即在實驗過程中若試樣表面損害深度超過20m及以上的志愿者必須退出實驗。實驗周期過長可能會造成志愿者不良反
14、應(yīng), 比如胃刺激, 因此若研究時間持續(xù)數(shù)月甚至更長, 建議酸蝕過程采用含漱法。2綜合來看, 體內(nèi)實驗可行性低而離體實驗無法完全模擬口內(nèi)環(huán)境, 原位實驗是研究牙齒酸蝕癥較好的一種方式。如能結(jié)合現(xiàn)有的牙齒酸蝕模型, 設(shè)計出理想的原位實驗?zāi)P停?既保護志愿者天然牙, 又能模擬自然狀態(tài)下的牙齒酸蝕情況, 將提高相關(guān)研究的準確性且簡化實驗操作步驟。參考文獻1Lussi A, Jaeggi T.Erosion-diagnosis and risk factorsJ.Clin Oral Investig, , 12 (Suppl 1) S5-S13.2Salas MM, Nascimento GG, Huy
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