天然藥物化學(xué)：第七章 三萜及其苷類

1、第七章 三萜及其苷類,2,目的要求：1 掌握三萜及其苷類的結(jié)構(gòu) 類型、性質(zhì)、檢識反應(yīng)和 提取分離方法； 2 了解三萜類化合物的化學(xué) 反應(yīng)和波譜特征提要； 了解結(jié)構(gòu)測定方法，熟悉三萜極其 苷類的生物活性,3,第一節(jié) 概述,三萜同前面講的單、二萜一樣是由MVA衍生而來，由30個碳原子組成,根據(jù)“異戊二烯規(guī)則”，多數(shù)三萜類化合物是由6個異戊二烯縮合而成的，他們有的游離存在于植物體，有的則與糖結(jié)合成苷的形式存在，三萜與糖結(jié)合成的苷叫三萜皂苷，皂苷可溶于水，其水溶液振搖后可產(chǎn)生膠體溶液，并且有持久性肥皂水溶液樣的泡沫故名三萜皂苷。,一 定義,4,經(jīng)典的皂苷從化學(xué)角度講是一類由螺甾烷與其生源相似的甾類化合

2、物衍生的低聚糖苷以及三萜化合物的低聚糖苷。 二 、研究概況： 三萜及其苷類，作為一類天然產(chǎn)物，100多年前就已為人們所認(rèn)識，但因其結(jié)構(gòu)復(fù)雜，分離、精制及結(jié)構(gòu)鑒定都很困難，發(fā)展比較緩慢。,二 、研究概況：,5,近年來，由于分離純化及結(jié)構(gòu)測定方法的進(jìn)展，使一些復(fù)雜三萜類的分離、結(jié)構(gòu)鑒定能較為順利的進(jìn)行，發(fā)現(xiàn)了不少新的化合物，同時又由于三萜類的生理生化活性的多樣性，如人參皂苷能促進(jìn)RNA蛋白質(zhì)的生物合成，調(diào)節(jié)機(jī)體代謝，增強(qiáng)免疫功能。柴胡皂苷有抑制中樞神經(jīng)系統(tǒng)和明顯的抗炎作用，并能減低血漿中膽固醇和甘油三酯的水平。七葉皂苷有明顯的抗?jié)B出，抗炎，抗淤血作用，能恢復(fù)毛細(xì)血管正常滲透性，提高毛細(xì)血管張力，控

3、制炎癥，改善循環(huán)，對腦外傷及心血管病有較好的治療作用,6,三萜及其苷類，廣泛分布與植物界，單子葉，雙子葉植物中均有分布，尤以薯蕷科，百合科，石竹科，五加科，豆科，七葉樹科，遠(yuǎn)志科，桔?？疲⒖频戎参镏蟹植甲钇毡?，含量也較高，許多常見的中藥如人參，甘草，柴胡，黃芪，桔梗，川楝皮，澤瀉，穿山龍，山藥等中均含皂苷。從真菌靈芝中也曾分離出許多的三萜成分，有些動物體中也有三萜類化合物，如從羊毛脂中分離出羊毛脂醇，從鯊肝臟中分離出鯊烯，另外海洋生物如海參，海星，軟珊瑚中也分離出各種類型的三萜化合物。,三 分布：,7,三萜皂苷由三萜皂苷元和糖或糖的衍生物組成，常見的三萜皂苷元有五環(huán)三萜和四環(huán)三萜。 1.糖

4、：組成皂苷常見的糖有：葡萄糖、半乳糖、鼠李糖、阿拉伯糖、木糖。糖的衍生物有糖醛酸（如葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸）、乙?；鸵阴０被堑?。糖鏈中所含糖的個數(shù)從1-10個。也可能與其他有機(jī)酸結(jié)合成苷。如桂皮酸、阿魏酸。,三 分布,四 三萜皂苷的化學(xué)構(gòu)成方式：,8,2.成苷方式：這些糖和糖醛酸先結(jié)合成低聚糖，再和皂苷元分子中-OH（或-COOH）縮合成的皂苷稱為單糖鏈皂苷；由兩個糖鏈分別和皂苷元分子中二個不同位置的-OH（或一個-OH，一個-COOH）縮合成的皂苷稱為雙糖鏈皂苷。近年來也發(fā)現(xiàn)有三糖鏈皂苷存在。三萜皂苷的結(jié)構(gòu)中也可能有其他基團(tuán)，如磺?；被?。,9,三萜皂苷中的糖基大多數(shù)是和皂苷元中C3-

5、OH相連，但少數(shù)情況C3-OH游離，糖基和其他位置羥基相連，即C23，C29，或C21-OH都可能與糖結(jié)合成苷。有時糖和皂苷元中-COOH相連形成酯苷鍵，這種帶有酯苷鍵的皂苷稱為酯皂苷。酯皂苷易酶解斷裂。酸水解，堿水解都可使皂苷轉(zhuǎn)變?yōu)榇渭壾眨@些次級苷稱為次皂苷。,10,由于三萜皂苷具有多種生物活性，顯示出廣泛的應(yīng)用前景，所以皂苷類化合物已成為天然藥物研究中的一個重要領(lǐng)域。如19631970年8年間報道的游離三萜為232個，19901994年5年間發(fā)現(xiàn)的新三萜類化合物約為330個，許多為新的骨架類型，19661972年7年間僅有30個皂苷的結(jié)構(gòu)被鑒定，而1987年1989年2年半中就有1000

6、多個新皂苷類化合物被分離鑒定。,11,第二節(jié) 三萜化合物的生物合成,生源：三萜化合物是由鯊烯通過不同方式環(huán)合形成的，而年鯊烯則是由倍半萜金合歡醇的焦磷酸酯尾尾縮合生成。,12,三萜類化合物結(jié)構(gòu)類型,三萜類化合物結(jié)構(gòu)類型很多，已發(fā)現(xiàn)達(dá)30多種，僅少數(shù)是無環(huán)三萜（鯊烯），二環(huán)三萜（榔色酸），三環(huán)三萜（龍涎香醇），主要是四環(huán)三萜和五環(huán)三萜。,13,第三節(jié)：四環(huán)三萜的結(jié)構(gòu)類型,具有環(huán)戊駢多氫菲的四環(huán)甾核，C17位上連有8個碳的側(cè)鏈，結(jié)構(gòu)與甾醇很相似，在甾核4，4，14位上比甾醇多三個甲基，也有認(rèn)為是植物甾醇的三甲基衍生物，包括,達(dá)瑪烷、 羊毛脂烷、 甘遂烷、 環(huán)阿屯烷（環(huán)阿爾廷烷）、 葫蘆烷、 楝苦素

7、,14,多氫萘,多氫菲,環(huán)戊烷并多氫菲 甾體母核,15,C17位上連有8個碳的側(cè)鏈，結(jié)構(gòu)與甾醇很相似，在甾核4，4，14位上比甾醇多三個甲基，,16,一. 達(dá)瑪甾烷型：,結(jié)構(gòu)特點：C8位有角甲基型，C13-H，C10-CH3，C14-CH3，C17側(cè)鏈，C2 0構(gòu)型為R或S。,17,五加科植物人參（Panax ginseng）為名貴的滋補(bǔ)強(qiáng)壯藥，國內(nèi)外對人參屬的植物研究十分活躍。人參的主根，側(cè)根，莖葉均含多種人參皂苷，主要分為三種類型，其中兩種是四環(huán)三萜類的達(dá)瑪烷型（A，B型），另一種是五環(huán)三萜含量較少（C型）。,18,A型皂苷元為20（S）-原人參二醇系20（S）Ra1，Ra2，Rb1，Rb

8、2，Rc。Rg1為20（R）構(gòu)型。,19,B型皂苷元為20（S）-原人參三醇系20（S）Re，Rf。,20,這兩類皂苷元，用緩和條件水解，如50%稀醋酸70加熱4小時， 20位苷鍵能斷裂生成次級苷，較難溶于水，進(jìn)一步再水解，則使3位苷鍵水解。若用鹽酸溶液加熱煮沸水解，水解產(chǎn)物中得不到原生的皂苷元。這是由于在鹽酸液中20（S）-原人參二醇或20（S）原人參三醇， 20位上甲基和羥基發(fā)生差向異構(gòu)化，由S型變?yōu)镽型，然后再環(huán)合生成人參二醇或人參三醇，具有三甲基四氫派喃環(huán)的側(cè)鏈。,21,22,因此要得到原來的皂苷元，須用緩和的方法進(jìn)行水解，例：先用過碘酸鈉氧化，水解后再用四氫硼鈉還原或在室溫下用鹽酸水

9、解，再加入消除試劑叔丁醇鈉。,23,由達(dá)瑪甾烷衍生的人參皂苷，生物活性有顯著的差異。如由20（S）-原人參三醇系衍生的皂苷有溶血作用，而由20（S）-原人參二醇衍生的皂苷有對抗溶血的作用，因此人參皂苷不能出現(xiàn)溶血的現(xiàn)象。人參皂苷Rg1有輕度神經(jīng)興奮作用及抗疲勞作用，人參皂苷Rb1則有中樞神經(jīng)抑制作用和安定作用。人參皂苷Rb1還有增強(qiáng)核糖核酸聚合酶的活性，而人參皂苷Rc則有抑制核糖核酸聚合酶的活性。,24,鼠李科植物酸棗（Zizyphus jujube Mill var.spinosa）的成熟種子為常用的中藥，具有養(yǎng)肝、寧心、安神之功效，由其中曾分離出多種皂苷均屬此類皂苷。 酸棗仁皂苷A經(jīng)水解得

10、到的伊比林內(nèi)酯。伊比林內(nèi)酯結(jié)構(gòu)中保留了A、B、C三個環(huán)系，從生源觀點看，環(huán)保留了D環(huán)空間，仍可列入四環(huán)三萜范疇，可視為達(dá)瑪甾烷型裂環(huán)衍生物。,25,26,二：羊毛甾烷型（Lanostane）：,特點：A/B、 B/C 、C/D均為反式，C10、C13位均有-CH3，C14位有-CH3，C17位為側(cè)鏈，C20位為R構(gòu)型（C20-H）。 在生源上是由鯊烯以椅船椅船構(gòu)象展開，再經(jīng)閉環(huán)而形成的。,27,羊毛甾醇主要來源于羊毛脂。大戟乳汁。,28,中藥黃芪、茯苓中的四環(huán)三萜皂苷屬此型，中藥茯苓為利尿、滲濕、健脾、安神藥，主要成分茯苓酸、塊苓酸為典型的羊毛甾烷型四環(huán)三萜類化合物。 靈芝為補(bǔ)中益氣、滋補(bǔ)強(qiáng)壯

11、、扶正固本、延年益壽的名貴中藥材，從靈芝中分離出四環(huán)三萜達(dá)100多種，屬羊毛甾烷高度氧化的衍生物。,29,30,三. 甘遂烷型（triucallane）,結(jié)構(gòu)特點；和羊毛甾烷型一樣，A/B、 B/C 、C/D均為反式, C10-CH3，C9-H，C13-CH3，C14-CH3，C17側(cè)鏈，是達(dá)瑪甾烷型的立體異構(gòu)體。 C8-H，C5-H。C20連有側(cè)鏈（20S）。 從藤桔屬植物Paramignya monophylla的果中分離得到5個甘遂烷型化合物。,31,四.環(huán)阿屯烷型（Cycliartane）,基本骨架與羊毛脂烷很相似，差別僅在于環(huán)阿屯烷19位脫氫形成三環(huán)。,32,藥典收載的膜莢黃芪（Aa

12、tragalus membranaceus）具補(bǔ)氣、強(qiáng)壯功效。從黃芪中分離鑒定的皂苷有近20個，絕大多數(shù)為環(huán)阿屯型四環(huán)三萜皂苷。多數(shù)皂苷的苷元為環(huán)黃芪醇（cycloastragenol ）。它在黃芪中與糖結(jié)合成單糖鏈、雙糖鏈、三糖鏈的皂苷而存在。黃芪皂苷即為黃芪甲苷，多數(shù)含黃芪的中成藥都以黃芪甲苷的含量來作為質(zhì)量控制指標(biāo)。,33,五： 葫蘆烷型（cucurbitane）,基本骨架可認(rèn)為是由羊毛甾烯8位進(jìn)行質(zhì)子化，在8位產(chǎn)生陽碳離子，然后19-CH3轉(zhuǎn)移只9位，9位H轉(zhuǎn)移到8位，而形成的，因此A環(huán)上的取代和羊毛甾烷型不同，有C8-H， C9-CH3，C10-H。,結(jié)構(gòu)特點；1 C8-H， C9-

13、 CH3，C10-H，（羊毛甾烷型為C8-H， C9-H，C10- CH3） C13-CH3，C14-CH3，C17側(cè)鏈，（這些取代基與羊毛甾烷型相同）,34,許多葫蘆科植物中都含有葫蘆烷型四環(huán)三萜皂苷類化合物，葫蘆科植物中所含的這類成分總稱為葫蘆苦素類。中藥雪膽的根中分離出來的雪膽甲素和雪膽乙 素就屬于葫蘆素類，臨床上主要用于極性痢疾、肺結(jié)核、慢性氣管炎的治療。 在研究過程中，有人想利用KOH-EtOH液將雪膽甲素水解，得到雪膽乙素，而實際上得到的卻是另一種產(chǎn)物。分子仍保留乙?；揖哂?二羰體系的烯醇結(jié)構(gòu)，這可能是由于雪膽甲素為叔醇酯，皂解反應(yīng)速度低，而C-12，C-23位碳在堿性條件下均

14、易形成碳負(fù)離子，其中23位的碳負(fù)離子對乙酰羰基進(jìn)行分子內(nèi)部的進(jìn)攻，反應(yīng)速度超過了皂解速度，因而酰基由氧向碳轉(zhuǎn)移，其反應(yīng)式如下：,35,36,六：楝烷型,楝科楝屬植物苦楝果實及樹皮中含多種三萜類成分，具苦味，總稱為楝苦素類成分，由26個碳構(gòu)成，屬于楝烷型（meliacane）.在蕓香目植物中大多數(shù)該類化合物和三萜化合物都具有甘遂烷骨架，因此甘遂烷認(rèn)為是楝烷型的前體。,37,齊墩果烷型 烏蘇烷型 羽扇豆烷型 木栓烷型,第四節(jié) 五環(huán)三萜的結(jié)構(gòu)類型,五環(huán)三萜類型數(shù)目較多，主要的五環(huán)三萜類化合物 包括,38,一.齊墩果烷型（oleanane）：,一. 又稱香樹脂烷型（-amyrane），此類三萜在植物界

15、分布極為廣泛，有呈游離狀態(tài)，有的成酯或以苷的方式存在，以齊墩果酸最常見。,39,齊墩果酸首先由木犀草科植物油橄欖（齊墩果）的葉子中分得，廣泛分布于植物界，如在青葉膽全草，女貞果實中游離存在，但大多數(shù)與糖結(jié)合成苷存在。齊墩果酸經(jīng)動物實驗有降低轉(zhuǎn)氨酶作用，對CCl4引起的大鼠急性肝損傷有明顯保護(hù)作用，促進(jìn)肝細(xì)胞再生，防止肝硬變。已用做治療肝炎有效藥物。,40,甘草為豆科甘草屬植物，作為藥用的有烏拉爾甘草（Glycyrrhiza uralensis）和光果及脹果甘草（G.glabra,G.inflata）之根莖。其有緩急、解毒、調(diào)和諸藥的作用，為常用中藥，從古至今廣為藥用，甘草酸及苷元甘草次酸為其主

16、要有效成分。,41,甘草次酸和甘草酸都有促腎上皮質(zhì)激素樣生物活性，臨床為抗炎藥，并用于胃潰瘍病的治療。 此類稠合方式：反-反-反-順。 另外，柴胡，商陸，遠(yuǎn)志等中藥中都含三萜皂苷。,42,二. 烏蘇烷型（ursane）：,又稱香樹脂烷(-amyrane)型，此類大多數(shù)是烏蘇酸(ursolic acid)的衍生物。,43,烏蘇酸又稱熊果酸，在植物界分布較廣，如在熊果葉，梔子果實，女貞葉，車前草，白花蛇舌草，石榴葉，果實，山芋肉等中均有存在。該成分在體外對G+、G-、酵母菌有抑菌活性，能明顯降低大鼠的正常體溫，并有安定作用。 另外，書上還介紹了地榆皂苷，積雪草苷等。(P289),44,三. 羽扇豆

17、烷型（Lupane）：,此類E環(huán)為五元環(huán)，且在E環(huán)C19位有-異丙基，五個環(huán)的稠合方式：都為反式。此類成分主要有羽扇豆種子中存在的羽扇豆醇，酸棗仁中的白樺醇。,45,四. 木栓烷型（friedlane）,在生源上是有齊墩果烯甲基移位演變而來的,46,雷公藤為衛(wèi)茅科植物，在我國作為民間用藥已有很長的歷史，近幾年來，臨床應(yīng)用日趨廣泛，特別是對類風(fēng)濕疾病有獨特療效，引起了國內(nèi)外廣泛重視。雷公藤酮就是一個典型的木栓烷型的五環(huán)三萜類化合物。,47,結(jié)構(gòu)總結(jié)：,1. 三萜皂苷結(jié)構(gòu)中通常存在的取代基有-CH3、 -OH、 2. 最常見的羥基在3-位，此外，在2，12， 15，16，17，1925位，2730

18、位都可能有基。 3. 酮基通常出現(xiàn)在11位，（如甘草酸），也可能出現(xiàn)在22位（如雪膽甲素） 4. 羧基通常出現(xiàn)在30位，27位，28位，29位等。 由于三萜皂苷大多數(shù)都具有羧基，所以三萜皂苷有酸性皂苷之稱。,48,第五節(jié) 理化性質(zhì),一.三萜極其皂苷類的性質(zhì) 性狀及溶解度： A：三萜類化合物大部分有較好的結(jié)晶形狀，能溶于親脂性有機(jī)溶劑，如石油醚，苯，乙醚，氯仿等有機(jī)溶劑，而不溶于水。當(dāng)三萜類化合物與糖結(jié)合成苷后年，極性增加（羥基數(shù)目增加），不宜結(jié)晶，因而皂苷多是白色或無色無定形粉末，可溶于水，易溶于熱水，稀醇、熱甲醇、和熱乙醇中，幾乎不溶于親脂性有機(jī)溶劑，如乙醚、石油醚、等，皂苷在含水丁醇或戊醇

19、中溶解度較好，提取和純化皂苷常采用。,49,B：三萜皂苷多數(shù)具有苦而辛辣味，其粉末對人體粘膜均有較強(qiáng)的刺激性，尤其鼻內(nèi)粘膜的敏感性最大，吸入鼻內(nèi)能引起噴嚏，但也有例外，如甘草皂苷有顯著而強(qiáng)的甜味，對粘膜的刺激性也弱，某些皂苷，內(nèi)服能刺激消化道粘膜，產(chǎn)生反射性粘液分泌，用于祛痰止咳。,50,C：皂苷大多具有吸濕性，在潮濕的空氣中放置，容易吸潮 D：三萜類化合物的mp都較高，常在熔融前就分解，因此無，明顯熔點，一般測得的大多是分解點，在200300之間。 E：皂苷由于糖的引入，一般都具有旋光性。,51,二：顏色反應(yīng) 三萜在無水條件下，與強(qiáng)酸（硫酸、磷酸、高氯酸），中強(qiáng)酸（三氯乙酸）或Lewis酸（

20、氯化鋅、三氯化鋁、三氯化銻）作用會發(fā)生呈色反應(yīng)或呈熒光。作用原理不很清楚，主要是使羥基脫水，增加雙鍵，雙鍵移位，雙分子縮合，生成共軛雙烯，又在酸作用下形成陽碳離子而呈色，所以產(chǎn)生一系列呈色變化。因此，全飽和的、-C3位又無羥基（酮基）的化合物呈陰性。有共軛雙鍵的化合物呈色很快，孤立雙鍵呈色較慢.,52,常見的呈色反應(yīng)有：, 醋酐-濃硫酸反應(yīng)（Liebermann-Burchard reaction）：將樣品溶于醋酐中，加濃硫酸-醋酐（1：20）可產(chǎn)生黃-紅-紫-藍(lán)等顏色變化，最后褪色。 五氯化銻反應(yīng)（Kahlenberg reaction）：將樣品的氯仿或醇溶液點于濾紙上，噴以20%五氯化銻氯

21、仿液（不含乙醇和水），干燥后60-70加熱，顯蘭色，灰蘭色，灰紫色斑點。,53, 三氯醋酸反應(yīng)（Rosen-Heimer reaction）：將樣溶液滴在濾紙上，噴25%三氯醋酸乙醇液，加熱至100，生成紅色漸變?yōu)樽仙?氯仿-濃硫酸反應(yīng)（Salkowski reaction）：樣品溶于CHCl3，加熱濃硫酸后，CHCl3層呈現(xiàn)紅色或蘭色，硫酸層有綠色熒光出現(xiàn)。 冰醋酸-乙酰氯反應(yīng)（Tschugaeff reaction）：樣品溶于冰醋酸中，加乙酰氯數(shù)滴及氯化鋅結(jié)晶數(shù)粒，稍加熱，則呈現(xiàn)淡紅色或紫紅色。,54,三：表面活性：,皂苷水溶液經(jīng)強(qiáng)烈振搖能產(chǎn)生持久性的泡沫，且不因加熱而消失，這區(qū)別于蛋白

22、質(zhì)和黏液質(zhì)。 皂苷由親脂性苷元和親水性糖組成，當(dāng)兩部分達(dá)到平衡就表現(xiàn)出了表面活性，可以降低水溶液表面張力，因此皂苷可作為清潔劑，乳化劑使用。也有例外，如甘草皂苷其泡性很弱，不易產(chǎn)生泡沫。皂苷的表面活性作用與其分子內(nèi)部親水性和親脂性結(jié)構(gòu)的比例相關(guān)，只有當(dāng)二者的比例適當(dāng)，才能較好地發(fā)揮出這種表面活性作興，某些皂苷由于親水性強(qiáng)于親脂性或親脂性強(qiáng)于親水性，就不呈現(xiàn)這種活性。,55,四： 溶血作用：,皂苷的水溶液大多能破壞紅細(xì)胞而有溶血作用，因此含有皂苷的藥物不能靜脈注射，肌肉注射也易引起組織壞死，故一般不作成注射劑，口服則無溶血作用。 溶血作用的強(qiáng)弱可用溶血指數(shù)表示。溶血指數(shù)是指在一定條件下，能使血液

23、中紅細(xì)胞完全溶解的最低濃度。如甘草皂苷的溶血指數(shù)為1：4000，薯蕷皂苷為1：40萬。利用溶血指數(shù)可以測定皂苷的粗略含量，同時還可以作為中草藥中皂苷的定性檢查。,56,例如：如果測得藥材浸出液的溶血指數(shù)為1：1M，而標(biāo)準(zhǔn)皂苷的溶血指數(shù)為1：100M，則該藥材中皂苷的含量約為1%。 注意：某些植物的樹脂，脂肪酸，揮發(fā)油等也能產(chǎn)生溶血作用。鞣質(zhì)能凝集血球而抑制溶血，因此要判斷是否由皂苷引起溶血，除進(jìn)一步提純再檢查外，還可以結(jié)合膽甾醇沉淀法來確證。,57,皂苷能溶血，是因為多數(shù)皂苷能與膽甾醇結(jié)合生成水不溶性分子復(fù)合物，當(dāng)皂苷水溶液與紅血球接確時，紅血球細(xì)胞壁上的膽甾醇與皂苷結(jié)合，生成不溶于水的復(fù)合物

24、沉淀，破壞了紅細(xì)胞的正常滲透，使細(xì)胞內(nèi)滲透壓增高而發(fā)生崩解，從而導(dǎo)致溶血現(xiàn)象。,58,也不是所有皂苷都能破壞紅細(xì)胞產(chǎn)生溶血現(xiàn)象，如前面講的人參總皂苷就無溶血作用，但經(jīng)過分離后，其中以人參萜三醇及齊墩果酸為苷元的人參皂苷具有顯著的溶血作用，而20（S）-原人參二醇衍生的皂苷有抗溶血作用。皂苷溶血作用還和糖部分有關(guān)，以單糖鏈皂苷作用明顯，某些雙糖鏈皂苷無溶血作用，但經(jīng)過酶解轉(zhuǎn)為單糖鏈皂苷就具有溶血作用。 苷元在A環(huán)上有極性基團(tuán)，而在D環(huán)或E環(huán)上有一中等極性基團(tuán)的三萜皂苷，一般有溶血作用。C3位有-OH，C16位有-OH或=C=O時溶血指數(shù)最高。如果D環(huán)或E環(huán)有極性基團(tuán)，如C28位糖鏈，或一定數(shù)量的

25、羥基取代，則可導(dǎo)致溶血作用消失。,59,五：沉淀反應(yīng),1.與甾醇形成分子復(fù)合物 三萜皂苷可與甾醇形成分子復(fù)合物（常用膽甾醇）沉淀，用乙醚回流，復(fù)合物分解，膽甾醇可溶于乙醚，而皂苷不溶，此法用于純化皂苷和檢查是否有皂苷類成分。甾體皂苷與甾醇形成的分子復(fù)合物比三萜皂苷穩(wěn)定。 2.皂苷的水溶液可以和一些金屬鹽類如鉛鹽、鋇鹽、銅鹽等產(chǎn)生沉淀。酸性皂苷（常指三萜皂苷）的水溶液加入硫酸銨、醋酸鉛或其他中性鹽即生成沉淀。中性皂苷（常指甾體皂苷）的水溶液則需加入堿式醋酸鉛或氫氧化鋇等堿形鹽才能生成沉淀。,60,第六節(jié) 提取分離,一 三萜苷元的提取分離 1.乙醇或甲醇提取，然后分離。 2.用醇類溶劑提取，提取物

26、依次用petrol-CHCl3-EtOAc提取，三萜苷元主要在CHCl3部分。 3.制備成衍生物再作分離，即將提取物先用乙醚提取，用重氮甲烷甲基化，制成甲酯衍生物，或?qū)⑻崛∥锇闯７ㄟM(jìn)行乙?；瞥梢阴Ｑ苌?，然后進(jìn)行分離。,61,4.許多三萜類化合物在植物體多以皂苷的形式存在，可由三萜皂苷水解后獲得，即將三萜皂苷進(jìn)行水解，水解產(chǎn)物用氯仿等溶劑萃取，然后進(jìn)行分離，但有些三萜皂苷水解時，由于水解反應(yīng)強(qiáng)烈，發(fā)生結(jié)構(gòu)變異而生成次生結(jié)構(gòu)，得不到原生皂苷元。如欲得到原生皂苷元，則應(yīng)采用溫和的水解條件，兩相酸水解、酶水解或Smith降解等方法。 5.分離常采用多次硅膠柱層析，以petrol-CHCl3，苯-E

27、tOAc， CHCl3-EtOAc， CHCl3-MeOH，EtOAc-丙酮為洗脫劑。,62,二、三萜皂苷的提取與分離 1. 常規(guī)法： 提取皂苷的通法，利用皂苷易溶于熱甲、乙醇，在含水丁醇或戊醇中溶解度較好的性質(zhì)進(jìn)行的。原料用乙醇或甲醇為溶劑提取，回收溶劑，將殘留物溶于水中，濾出不溶物，水溶液再用石油醚，乙醚，苯等親脂性有機(jī)溶劑萃取脂溶性成分，皂苷仍留在水中，與親脂性成分分開，水溶液再用正丁醇萃取，皂苷進(jìn)入正丁醇層，回收丁醇，即得總粗皂苷，如商陸，人參。,63,64,65,2.先用石油醚等親脂性溶劑處理植物原料，溶除親脂性雜質(zhì)，然后用乙醇為溶劑加熱，放冷，析出皂苷沉淀，例遠(yuǎn)志皂苷的提取。 3.

28、堿水提取法：利用某些酸性皂苷易溶于堿性水溶液，難溶于冷水的性質(zhì)，加堿水溶解皂苷，再加酸酸化，皂苷析出，如甘草皂苷的提取。,66,67,4.重金屬鹽沉淀法：,68,5.還可以用Girard試劑來實現(xiàn)具有羰基和不具有羰基的化合物的分離 三萜皂苷的分離，采用分配柱層析法要比吸附柱層析法好，常用硅膠為支持劑，以CHCl3-MeOH-H2O， CH2Cl2-MeOH-H2O，EtOAc-EtOAc-H2O，水飽和的EtOAc- MeOH等溶劑系統(tǒng)進(jìn)行梯度洗脫。,69,第七節(jié)化學(xué)反應(yīng),三萜類化合物結(jié)構(gòu)中常有-OH、=C=O、RCHO、-和COOH等功能基，由于功能基的種類、數(shù)目、位置不同，導(dǎo)致三萜類具有各

29、種不同的化學(xué)性質(zhì)，有脫水、雙鍵異構(gòu)化，環(huán)丙烷環(huán)反應(yīng)，氧化 ，還原，甲基位移，骨架重排，內(nèi)酯化，脫羧及水解。等反應(yīng)。,70,一.3-羥基脫水反應(yīng),71,二 雙鍵異構(gòu)化,72,第八節(jié) 皂苷苷鍵的裂解反應(yīng),除此之外，還有：環(huán)丙烷環(huán)的反應(yīng)、氧化、還原、甲基位移和骨架重排、內(nèi)酯化、脫羧及水解。,皂苷苷鍵的裂解，除可用一般苷類化合物苷鍵的裂解方法進(jìn)行，如酸催化水解，氧化裂解，酶解等，往往采用一些特殊的苷鍵開裂方法，主要用于常規(guī)方法水解易發(fā)生結(jié)構(gòu)變化的皂苷水解，如皂苷元往往會發(fā)生脫水，環(huán)合，雙鍵位移等。,73,一 光分解法 此法是利用紫外線，一般用500瓦高壓汞燈為光源，對皂苷進(jìn)行照射，將原皂苷元從皂苷中裂

30、解出來，此法具有選擇性。 皂苷元（三萜或甾類）直接和葡萄糖醛酸，阿拉伯糖或半乳糖相連而成的單糖或多糖苷，才可用光分解法分離出原皂苷元。而且，葡萄糖醛酸皂苷對光反應(yīng)活性最高，直接照射即可獲得原皂苷元，而阿拉伯糖或半乳糖的皂苷，需將C2-OH轉(zhuǎn)變?yōu)橥庞泄夥磻?yīng)活性，且所得皂苷元為酮基衍生物。,74,二 四醋酸鉛-醋酐法 此法應(yīng)用于葡萄糖醛酸的裂解。先將皂苷進(jìn)行全甲基化，再部分水解丙酮液，將糖上-COOCH3水解為-COOH），此時葡萄糖醛酸上羧基游離，然后在苯中與Pb（AC）4-Ac2O反應(yīng)（-COOH被乙酰基取代），再用甲醇鈉堿解，可得原皂苷元乙?；铩?75,三 醋酐-吡啶分解法 此法只能

31、裂解多聚糖的葡萄糖醛酸皂苷。在葡萄糖醛酸的C2和C4位一定要與其他糖相連，C6位羧基要游離，最后得到皂苷元的乙酰酯。 上述三種方法，選擇性較高，應(yīng)用范圍窄，但作為葡萄糖醛酸與皂苷元直接相連的皂苷類的選擇性裂解，是十分有用的。因這種苷類一般水解條件要求比較劇烈，不易獲得原皂苷元。,76,四 土壤微生物淘汰培養(yǎng)法 取不同土壤樣品，加上皂苷在培養(yǎng)基中培養(yǎng)，淘汰，選擇出對皂苷水解能力強(qiáng)的菌株，再進(jìn)行大量培養(yǎng)，用TLC檢查水解進(jìn)行情況，培養(yǎng)物用溶劑提取，分離，精制，可得到原始皂苷元。此法特點是應(yīng)用范圍較廣，條件要求不嚴(yán)，方法比較簡便，如無特殊需要，不用保存菌種，直接用土壤樣品進(jìn)行就可以。,77,五 化學(xué)

32、修飾-水解法 為了獲得原始皂苷元，避免次生物質(zhì)的產(chǎn)生，將皂苷中的苷元部分，先進(jìn)行適當(dāng)?shù)幕瘜W(xué)改變（化學(xué)修飾），然后進(jìn)行水解。 例 人參皂苷的水解：將人參皂苷先進(jìn)行催化還原，使C17側(cè)鏈中雙鍵飽和，然后進(jìn)行水解，側(cè)鏈就不會產(chǎn)生環(huán)合，得二氫原人參二醇。如直接酸水解，則側(cè)鏈環(huán)合，得人參二醇，不是原始皂苷元。,78,第九節(jié) 波譜特征,1.UV和IR UV可用于判斷齊墩果烷三萜化合物中雙鍵類型，若只有一個孤立雙鍵，僅在205-250nm處有微弱吸收，若有、-不飽和羰基，最大吸收在242-250nm。 IR有二個區(qū)，A區(qū)：1355-1392cm-1，Bqu 3：1245-1330 cm-1，根據(jù)此二區(qū)來區(qū)別骨架類型。齊墩果烷型的A區(qū)有二個峰（1392-1379 cm-1，1370-1355 cm-1），B區(qū)有三個峰（1330-1315 cm-1，1306-1299 cm-1，1269-1250 cm-1）。烏蘇烷型A區(qū)有三個峰（1392-1386 cm-1，1383-1370 cm-1，1364-1359 cm-1），B區(qū)也有三個峰（1312-1308 cm-1，1276-1270 cm-1，1250-1245 cm-1）。四環(huán)三萜A、B區(qū)均只有一個峰。,79,2.質(zhì)譜 不飽和三萜化合物：反-Diels-Alder（RDA）裂解是普遍發(fā)生的。