臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)CLSIEP文件

1、臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià),郭,健,衛(wèi)生部臨檢中心,方法選擇,方法評(píng)價(jià),常規(guī)分析前準(zhǔn)備,樣品,常規(guī)分析,方法發(fā)展,預(yù)防措施,統(tǒng)計(jì)質(zhì)控,報(bào)告結(jié)果,分析方法分級(jí),決定性方法,definitive method,經(jīng)詳盡,研究尚未發(fā)現(xiàn)不準(zhǔn)確度或不確定性原因,的方法,參考方法,reference method,經(jīng)詳盡研,究證實(shí)其不準(zhǔn)確度與不精密度可以忽略,的方法,常規(guī)方法,routing method,可滿(mǎn)足臨,床或其他目的需要的日常使用的方法,分,析,物,決,定,性,方,法,C,a,C,l,Fe,M,g,P,K,N,a,ID,M,S,電,量,滴,定,中,子,活,化,法,ID,M,S,ID,M,S,ID,M,S

2、,ID,M,S,中,子,活,化,法,重,量,分,析,法,中,子,活,化,法,參,考,方,法,原,子,吸,收,分,光,光,度,法,電,流,滴,定,法,沉,淀,蛋,白,后,亞,鐵,嗪,反,應(yīng),原,子,吸,收,分,光,光,度,法,火,焰,光,度,法,火,焰,光,度,法,分,析,物,A,l,b,T,P,C,r,e,a,U,r,e,a,U,A,B,i,l,G,l,u,C,h,o,l,T,G,決,定,性,方,法,參,考,方,法,免,疫,化,學(xué),法,雙,縮,脲,法,I,D,M,S,中,子,活,化,法,I,D,M,S,I,D,M,S,離,子,交,換,層,析,尿,素,酶,法,尿,酸,酶,法,重,氮,法,I,D,

3、M,S,I,D,M,S,I,D,M,S,己,糖,激,酶,法,膽,固,醇,氧,化,酶,法,酶,法,不同方法的關(guān)系,常規(guī)方法,參考方法,決定性,方法,標(biāo)準(zhǔn)品分級(jí),標(biāo)準(zhǔn)品,reference material,充分均勻并具有一,個(gè)或多個(gè)良好確定的特性值的材料或物質(zhì)，用來(lái)校,準(zhǔn)儀器設(shè)備、評(píng)估測(cè)定方法或給其它物質(zhì)賦值,一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品,原級(jí)參考物,穩(wěn)定、均一，由高度,準(zhǔn)確的若干方法定值，可用于校準(zhǔn)決定性方法及為,二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品定值,二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品,用一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品校準(zhǔn)，參考方法定值,校準(zhǔn)品,用二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品校準(zhǔn)，擬被用于校準(zhǔn)的常規(guī),方法定值。用于對(duì)常規(guī)方法和儀器的校準(zhǔn),準(zhǔn)確度的傳遞,一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品,決定性方法,參考方法,溯,源,

4、二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品,廠家方法,校,準(zhǔn),校,準(zhǔn),品,儀器參數(shù),試劑,常規(guī)分析,一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),人血清無(wú)機(jī)成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),GBW09135,血清膽固醇標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),GBW09138,二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),紅細(xì)胞微粒標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),GBW,E,090001,膽紅素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),GBW,E,090002,氰化高鐵血紅蛋白溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),GBW,E,090004,純化血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),GBW,E,090011,方法的評(píng)價(jià),評(píng)價(jià)內(nèi)容,初步評(píng)價(jià),NCCLS EP10,精密度,NCCLS EP5,對(duì)比及偏差,NCCLS EP9,線性,NCCLS EP6,抗干擾能力,NCCLS EP7,基質(zhì)效應(yīng),NCCLS EP14,臨床準(zhǔn)確度（敏感性和特異

5、性,NCCLS GP10,ROC,曲線,NCCLS,文件,EP9-A,用患者樣本進(jìn)行方法對(duì)比,及偏差評(píng)估,批準(zhǔn)指南,1995,年,12,月,目的,引進(jìn)新方法前或用一種方法替代另一種方,法時(shí)進(jìn)行偏差分析,用途,評(píng)價(jià)兩種分析方法（同一分析項(xiàng)目,的偏差,評(píng)價(jià)要求,熟悉儀器操作,熟悉評(píng)價(jià)方案,質(zhì)控,足夠的數(shù)據(jù)（最少,5,個(gè)工作日,40,個(gè)樣本,實(shí)驗(yàn)樣本,來(lái)源于健康人或患者，無(wú)干擾，盡量避免貯存,對(duì)比方法,廠家要求的實(shí)驗(yàn)室常規(guī)方法或公認(rèn)的參考方法,具有好的精密度,沒(méi)有已知的干擾物,相同單位,相對(duì)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)或參考方法的偏差是已知的,測(cè)定范圍,醫(yī)學(xué)決定水平范圍內(nèi)（均勻分布,樣本數(shù),至少,40,例，增加可提高可

6、信性,測(cè)定方法,兩種方法分別做雙份測(cè)定,測(cè)定順序,每天,1,2,3,4,5,6,7,8,8,7,6,5,4,3,2,1,測(cè)定次數(shù),每天分別用兩種方法進(jìn)行測(cè)定,至少測(cè)定,5,天，共,40,個(gè)樣本,數(shù)據(jù)監(jiān)督,系統(tǒng)誤差、人為誤差,質(zhì)控,常規(guī)質(zhì)控,實(shí)驗(yàn)步驟,熟悉儀器及方法,收集數(shù)據(jù),檢查方法內(nèi)的離群點(diǎn),界限,雙份測(cè)定）相對(duì)差值均,值的,4,倍,繪圖,均值散點(diǎn)圖,X,Y,所有值散點(diǎn)圖,Yij,Xi,偏差圖,散點(diǎn)圖,Yij -Xij,Xi,表,1,病,人,樣,本,檢,驗(yàn),結(jié),果,B,E,C,K,M,A,N,Y,g,l,樣,品,號(hào),結(jié),果,1,Y,1,1,2,3,4,5,6,7,8,2,5,4,6,3,6,

7、3,9,1,4,3,2,2,7,4,2,結(jié),果,2,Y,2,2,5,4,7,3,6,4,0,1,4,3,2,2,8,4,3,均,值,Y,i,2,5,4,6,5,3,6,3,9,5,1,4,3,2,2,7,5,4,2,5,D,Y,i,結(jié),果,1,X,1,0,1,0,1,0,0,1,1,2,8,3,4,7,5,3,8,4,4,1,3,1,8,7,3,6,1,3,1,2,4,3,8,H,I,T,A,C,H,I,X,g,l,Y,i,結(jié),果,2,X,2,2,8,1,4,7,4,3,8,1,4,0,8,1,8,9,3,6,2,3,1,2,4,3,9,均,值,X,i,2,8,2,4,7,5,3,8,3,4,

8、1,1,1,8,8,3,6,2,3,1,2,4,3,9,D,X,i,X,i,0,2,0,1,0,2,0,5,0,2,0,1,0,0,1,3,2,1,2,3,0,6,4,8,4,2,3,7,1,4,33,34,35,36,37,38,39,40,平均數(shù),34,30,40,42,38,43,35,44,34,30,40,42,38,43,35,45,34,30,40,42,38,43,35,44.5,0,0,0,0,0,0,0,1,0.37,35.6,32.1,41.1,43.2,38.6,45,36.9,44.8,36.3,32.6,41,43.4,38.9,44.9,37,45.3,35.9,

9、32.3,41.1,43.3,38.7,44.9,36.9,45,0.3,0.5,0.1,0.2,0.3,0.1,0.1,0.5,0.41,1.9,2.3,1.1,1.3,0.7,1.9,1.9,0.5,2.7,均值散點(diǎn)圖,X,Y,y = 1.1722x - 9.0485,R = 0.9695,50,B,E,C,K,M,A,N,C,X,9,B,C,P,40,30,20,10,10,20,30,40,HITACHI 7170(BCG,50,偏差圖：每次測(cè)定的,Y,均值與,X,均值,之差,相應(yīng),X,均值圖,Yi-Xi對(duì)Xi偏倚圖,20,15,10,5,Y,i,X,i,30,40,50,0,5,10

10、,15,HITACHI 7170（BCG,線性相關(guān)目測(cè)檢查,兩種方法間離群值目測(cè)檢查,界限,4,倍兩種方法間絕對(duì)偏差的均值,絕對(duì)差值允許范圍,相對(duì)差值允許范圍,適合范圍,計(jì)算,r,r,2,0.95,范圍適合,2,r,0.95,擴(kuò)大數(shù)據(jù)范圍,線性回歸,計(jì)算,均勻離散度的直觀檢查,X,最,適,范,圍,檢,查,相,關(guān),A,L,B,x,ij,x,(y,ij,y,i,j,N,2,r,x,ij,x,y,ij,y,2,i,j,i,j,N,2,N,2,2,r,0.96,95,回,歸,系,數(shù),評(píng),價(jià),計(jì),算,截,距,a = - 9.05,斜,率,b = 1.17,Y,1.17,X,9.05,預(yù)期偏差及可信范圍,

11、線性回歸方程,計(jì)算偏差（高、中、低,3,組,解釋實(shí)驗(yàn)結(jié)果并與內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)比較,BCP,與,BCG,法,測(cè),定,血,清,ALB,時(shí),結(jié),果,的,預(yù),期,偏,倚,估,計(jì),BPG,法,g/l,30,40,50,BCP,法,g/l,26.5,37.8,49.1,預(yù),期,偏,倚,g/l,相,對(duì),偏,倚,3.5,2.2,0.9,11.6,5.5,1.8,定量分析方法的線性評(píng)價(jià),Evaluation of The Linearity of,Quantitative Analytical Methods,EP6-P,目的,為實(shí)驗(yàn)室中采用定量分析方法的用戶(hù)提,供評(píng)價(jià)儀器或方法是否滿(mǎn)足廠家線性指,標(biāo)的評(píng)價(jià)方法,用戶(hù)可

12、為分析方法設(shè)定線性范圍,定義,Assay Range,Linear Range,The range of concentration or activity in,which the final output value of a system is,proportional to the analyte concentration or,activity within a stated tolerance,定義,Linearity,The measure of the degree to which a,curve approximates a straight line,It refers

13、 to overall system response (i.e,the final analytical answer rather than the,instrument output,Scope and Limitations,線性是分析方法的一個(gè)特征，不同于準(zhǔn),確性和精密度,線性實(shí)驗(yàn)應(yīng)該使用與待分析物基質(zhì)相似,的樣本,線性檢驗(yàn)系統(tǒng)反應(yīng)，包括校準(zhǔn)、線性化,技術(shù)、系數(shù)和儀器反應(yīng),使用者的需求,用簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn)來(lái)檢驗(yàn)廠家標(biāo)示的線性范,圍及定量分析方法的分析范圍,在實(shí)驗(yàn)室中作為方法學(xué)的信息（方法線,性,進(jìn)行線性評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn),儀器的熟悉過(guò)程,執(zhí)行分析過(guò)程的實(shí)驗(yàn)室人員必須掌握儀,器操作和維護(hù)程序、樣本準(zhǔn)備

14、方法和校,準(zhǔn),對(duì)較簡(jiǎn)單的設(shè)備需要,5,天或更少時(shí)間,對(duì)較復(fù)雜的多通道設(shè)備需要,5,天或更長(zhǎng)時(shí),間,實(shí)驗(yàn)周期,在完成儀器熟悉過(guò)程后開(kāi)始實(shí)驗(yàn)并收集,數(shù)據(jù),全部實(shí)驗(yàn)和數(shù)據(jù)采集應(yīng)在同一工作日內(nèi),完成,線性評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn),樣本要求,最少,4,個(gè)濃度水平，推薦,5,個(gè)水平,基質(zhì)效應(yīng),應(yīng)使用與病人樣本相似的樣本或注明,基質(zhì)類(lèi)型,可以使用的樣本,病人混合血清,理想的樣本基質(zhì),高值樣本：高于上限,30,低值樣本：線性低限或更低,可以使用的樣本,Patient-Sample Pool Spiked with Analyte,加入品在沒(méi)有干擾物存在時(shí)不需高純度,Pool Diluted with Treated Pool

15、 Material,用于降低分析物濃度，如：透析、熱處,理、層析,可以使用的樣本,Pool Diluted with Saline,在線性實(shí)驗(yàn)中使用此類(lèi)樣本可掩蓋不同的基質(zhì),效應(yīng),Commercial Control/Calibrator Material,此類(lèi)樣本由于不是正常的生理形式，可掩蓋實(shí),際的線性結(jié)果,可以使用的樣本,Underdiluted/Overdiluted Commercial,Control Material,Aqueous Solutions,一般無(wú)基質(zhì)效應(yīng),Solution in Other Solvents,基質(zhì)效應(yīng)與,有機(jī)溶劑相似,推薦的樣本添加材料,ALB,白蛋

16、白干粉,human fraction V,乙醇：無(wú)水乙醇,ALP,純酶,AMS,腮腺或胰腺提取物,BIL,膽紅素純品,Ca: CaCO,3,Cl: NaCl,推薦的樣本添加材料,CHOL,膽固醇純品或稀釋質(zhì)控品,CO,2,CaCO,3,CREA,標(biāo)準(zhǔn)液或高值血清,ALT,純酶,GLU,右旋糖,AST,純酶,ALT,純酶,推薦的樣本添加材料,HBD,純酶,LDH,純酶,Lipase,胰腺提取物,Mg,MgCl,2,P: K(H,2,PO,4,或,Na(H)PO,4,TP,白蛋白干粉、人或牛的成份,V,UA,在得不到高值病人樣本時(shí)，使用標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液或,干燥尿酸,BUN,在得不到高值病人樣本時(shí)，使用標(biāo)

17、準(zhǔn)儲(chǔ)備液或,干燥尿素,樣本分析順序,分析序列應(yīng)為隨機(jī)排列,有顯著攜帶污染時(shí)，應(yīng)用空白隔開(kāi)樣本,每個(gè)實(shí)驗(yàn)組內(nèi)應(yīng)至少分析,4,個(gè)（最好是,5,個(gè)）不同濃度水平的樣本,樣本濃度范圍,應(yīng)覆蓋待評(píng)線性范圍的上、下限,評(píng)價(jià)結(jié)果不滿(mǎn)意時(shí)應(yīng)重新設(shè)定濃度,線性范圍內(nèi)至少應(yīng)保留有,4,個(gè)濃度,樣本的準(zhǔn)備,足量的混合血清,低濃度混合血清,No1,；高濃度混合血,清,No5,血清,No2,3,份,No1,1,份,No5,血清,No3,2,份,No1,2,份,No5,血清,No4,1,份,No1,3,份,No5,樣本濃度計(jì)算,C1,V1 + C5,V5,濃度,V1 + V5,數(shù)據(jù)收集,x1 y1-1 y1-2 y1-3

18、 y1-4,x2 y2-1 y2-2 y2-3 y2-4,x3 y3-1 y3-2 y3-3 y3-4,x4 y4-1 y4-2 y4-3 y4-4,x5 y5-1 y5-2 y5-3 y5-4,數(shù)據(jù)評(píng)價(jià),觀察有無(wú)明顯的數(shù)據(jù)錯(cuò)誤,若有明顯異常時(shí)應(yīng)判斷是否為離群點(diǎn),如離群點(diǎn)超出,2,點(diǎn)，則保留全部數(shù)據(jù)或重,做全部實(shí)驗(yàn),離群點(diǎn)檢查,用于特定濃度,Y,值離群點(diǎn)的檢驗(yàn),將,4,個(gè)重復(fù)值從大到小排列,Y1,到,Y4,計(jì)算,D = Y1,Y4,若,Y1,可能是離群點(diǎn)，計(jì)算,D1,Y1,Y2,D,若,Y4,可能是離群點(diǎn)，計(jì)算,D4,Y3,Y4,D,離群點(diǎn)判斷,判斷值,Critical value,0.05,0.765,0.01,0.889,繪圖和評(píng)價(jià),線性,X-Y,圖,X,軸為分析物濃度,反應(yīng)值或儀器輸出值為,Y,軸,目測(cè)離群值,Y= aX + b,目測(cè)線性判斷是否符合要求,進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)判斷和評(píng)價(jià),注意,統(tǒng)計(jì)學(xué)標(biāo)準(zhǔn)和臨床可接受限不同,慎用方法學(xué)線性范圍從,0,開(kāi)始,有臨床意義的濃度應(yīng)在線性評(píng)價(jià)中,最小的線性濃度,醫(yī)學(xué)決定水平,最大的線性濃度,參考文獻(xiàn),Dixon W.J. and Massey F.J. introduction to,rd,statistical a