水質(zhì)指標(biāo)測(cè)定原理、方法及注意事項(xiàng)

1、目錄水質(zhì)監(jiān)測(cè)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制 1溶解氧do 3化學(xué)需氧量（ cod ） 5bod5 7氮 9磷 10校準(zhǔn)曲線(xiàn) 11氮、磷測(cè)定簡(jiǎn)略步驟 12葉綠素chl-a 13懸浮物 15水質(zhì)監(jiān)測(cè)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制精密度控制：對(duì)均勻樣品，凡能做平行雙樣的分析項(xiàng)目，分析每批水樣時(shí)均須做10%的平行雙樣,樣品較少時(shí)，每批樣品應(yīng)至少做一份樣品的平行雙樣。測(cè)定的平行雙樣允許差符合規(guī)定質(zhì)控指標(biāo)的樣品， 最終結(jié)果以雙樣測(cè)試結(jié)果的平均值報(bào)出。平行雙樣測(cè)試結(jié)果超出規(guī)定允許偏差時(shí)，在樣品允許保存期內(nèi)， 再加測(cè)一次，取相對(duì)偏差符合規(guī)定質(zhì)控指標(biāo)的兩個(gè)測(cè)定值報(bào)出。水質(zhì)監(jiān)測(cè)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制指標(biāo)（建議）項(xiàng)目(mg/l)精密度0.0251.01.

2、050.020.10氨氮0.11.01.0 100.5 25硝氮0.544 150.025 25總磷0.0250.60.652.02.0 20準(zhǔn)確度控制：例行地表水質(zhì)監(jiān)測(cè)中，采用標(biāo)準(zhǔn)樣品或質(zhì)控樣品作為控制手段，每批樣品帶一個(gè)已知濃 度的質(zhì)控樣品。如果實(shí)驗(yàn)室自行配制質(zhì)控樣，要注意與國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)樣品比對(duì)，但不得使用與繪制校準(zhǔn)曲線(xiàn)相 同的標(biāo)準(zhǔn)溶液，必須另行配制。質(zhì)控樣品的測(cè)試結(jié)果應(yīng)控制在90%110%范圍，標(biāo)準(zhǔn)樣品測(cè)試結(jié)果應(yīng)控制在95%1 05%范圍。準(zhǔn)確度：常用以度量一個(gè)特定分析程序所獲得的分析結(jié)果（單次測(cè)定值或重復(fù)測(cè)定值的均值）與假定 的或公認(rèn)的真值之間的符合程度。一個(gè)分析方法或分析系統(tǒng)的準(zhǔn)確度是反

3、映該方法或該測(cè)量系統(tǒng)存在的系 統(tǒng)誤差或隨機(jī)誤差的綜合指標(biāo)，它決定著這個(gè)分析結(jié)果的可靠性。準(zhǔn)確度的評(píng)價(jià)方法：1、標(biāo)準(zhǔn)樣品分析：通過(guò)分析標(biāo)準(zhǔn)樣品，由所得結(jié)果了解分析的準(zhǔn)確度2、回收率測(cè)定：在樣品中加入一定量標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)測(cè)其回收率，這是目前實(shí)驗(yàn)室中常用的確定準(zhǔn)確度的方法。 回收率p （%）=（加標(biāo)試樣測(cè)定值-試樣測(cè)定值）/加標(biāo)量x100%對(duì)于常規(guī)樣品可憑經(jīng)驗(yàn)實(shí)施，對(duì)于未知樣品一般步驟為1） 了解樣品來(lái)源，初步估計(jì)待測(cè)物質(zhì)含量2）確定稀釋比和測(cè)試體積3）根據(jù)樣品性質(zhì)、分析方法選擇加標(biāo)方式（取相同體積的兩份樣品，其中一份加標(biāo)，一份不加標(biāo)，這是 最常用的加標(biāo)方式）4）確定加標(biāo)量加標(biāo)實(shí)驗(yàn)的一般原則1 加標(biāo)物的形

4、態(tài)應(yīng)該和待測(cè)物的形態(tài)相同。2 樣品與加標(biāo)樣同時(shí)按同一操作步驟和方法測(cè)定，保證實(shí)驗(yàn)條件一致。為提高準(zhǔn)確度，樣品和加標(biāo)樣可分別進(jìn)行平行測(cè)試。3 加標(biāo)樣中原始樣品的取樣體積、稀釋倍數(shù)及測(cè)試體積，盡可能與樣品測(cè)試時(shí)一致。4 加標(biāo)量應(yīng)與樣品中相應(yīng)待測(cè)物含量相近，一般為試樣含量的 0.52 倍，加標(biāo)后的測(cè)定值不應(yīng)超出方法的測(cè)量上限的90%；當(dāng)樣品中待測(cè)物濃度高于校準(zhǔn)曲線(xiàn)的中間濃度時(shí)，加標(biāo)量應(yīng)控制在待測(cè)物濃度的半量；對(duì)于低濃度樣品（接近測(cè)定下限 ，加標(biāo)量可適當(dāng)增加到試樣含量的 3 倍或 4 倍。5 加標(biāo)物的濃度宜高，加標(biāo)體積宜小，一般不超過(guò)原始試樣體積的 1% ，保持樣品的基體不變。17溶解氧doa碘量法原

5、理水樣中加入硫酸鎰和堿性碘化鉀，水中溶解氧將低價(jià)鎰氧化成高價(jià)鎰，生成四價(jià)鎰的氫氧化物棕色沉 淀。加酸后，氫氧化物沉淀溶解并與碘離子反應(yīng)釋放出游離碘。以淀粉作指標(biāo)劑，用硫代硫酸鈉滴定釋放 出的碘，可計(jì)算溶解氧的含量。采樣用碘量法測(cè)定水中溶解氧，水樣常采集到溶解氧瓶中。采集水樣時(shí)，要注意不使水樣曝氣或有氣泡殘 存在采樣瓶中?？捎盟畼記_洗溶解氧瓶后，沿瓶壁直接傾注水樣或用虹吸法將細(xì)管插入溶解氧瓶底部，注 入水樣至溢流出瓶容積的1/31/2。水樣采集后，為防止溶解氧的變化，應(yīng)立即加固定劑于樣品中（ 1ml硫酸鎰溶液、2ml堿性碘化鉀溶液），并存于冷暗處。藥品1）硫酸鎰溶液：稱(chēng)取 480g硫酸鎰（mns

6、04 4h2。）或364g mnso4 h2o溶于水，用水稀釋至 1000ml;2）堿性碘化鉀溶液：稱(chēng)取 500g氫氧化鈉溶解于（300-400ml）水中，另稱(chēng)取150g碘化鉀（或135gnai） 溶于200ml水中，待氫氧化鈉溶液冷卻后，將兩溶液合并，混勻，用水稀釋至1000ml （該溶液呈強(qiáng)堿性，保存時(shí)切勿使用玻璃瓶塞的容器瓶，或在玻璃瓶塞外包一層濾紙）；3） 1%淀粉溶液：稱(chēng)取1g可溶性淀粉，用少量水調(diào)成糊狀，再用剛煮沸的水沖稀至100ml （淀粉溶液易變質(zhì)，最好在實(shí)驗(yàn)前配制）。4）硫代硫酸鈉溶液：稱(chēng)取 3.2g硫代硫酸鈉溶于煮沸冷卻的水中，加入0.2g碳酸鈉，用水稀釋至1000ml,貯

7、于棕色瓶中，使用前用0.025mol/l重銘酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)定；5）重銘酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液：稱(chēng)取重銘酸鉀1.2258g,溶于水，移入1000ml容量瓶中，用水稀釋至標(biāo)線(xiàn)，搖勻。硫代硫酸鈉標(biāo)定方法：于250ml錐形瓶中，加入100ml水和1g碘化鉀，加入10ml 0.025mol/l重銘酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液、5ml （1+5） 硫酸溶液，密塞，搖勻。與暗處?kù)o置 5min后，用硫代硫酸鈉溶液滴定至溶液呈淡黃色，加入 1ml淀粉溶 液，繼續(xù)滴定至藍(lán)色剛好褪去為止，紀(jì)錄用量v1。m = （10 x 0.025）/v1式中：m-硫代硫酸鈉溶液的濃度；v1-滴定時(shí)消耗硫代硫酸鈉溶液的體積步驟溶解氧的固定：加入 1 ml硫

8、酸鎰溶液、2ml堿性碘化鉀溶液（沿壁加入，切勿引起氣泡產(chǎn)生），蓋好瓶塞，顛倒混合數(shù)次，靜置。待棕色沉淀物降至瓶?jī)?nèi)一半時(shí)，再顛倒混臺(tái)一次，待沉淀物下降到瓶底。析出碘：輕輕打開(kāi)瓶塞，立即用吸管插入液面下加入2.0 ml硫酸。小心蓋好瓶塞，顛倒混合搖勻至沉淀物全部溶解為止，放置暗處5 min。滴定：移取100 m1上述溶液于250 ml錐形瓶中，用硫代硫酸鈉溶液滴定至溶液呈淡黃色，加入1 ml淀粉溶液，繼續(xù)滴定節(jié)藍(lán)色剛好褪去為止，記錄硫代硫酸鈉溶液用量。計(jì)算溶解氧（02, mg/l）=（m*v*8*1000）/100式中：m-硫代硫酸鈉溶液的濃度；v-滴定時(shí)消耗硫代硫酸鈉溶液體積b 溶解氧儀測(cè)定溶解

9、氧的電極由一個(gè)附有感應(yīng)器的薄膜和一個(gè)溫度測(cè)量及補(bǔ)償?shù)膬?nèi)置熱敏電阻組成。電極的可滲透膜為選擇性薄膜，把待測(cè)水樣和感應(yīng)器隔開(kāi)，水和可溶性物質(zhì)不能透過(guò)，只允許氧氣通過(guò)。當(dāng)給感應(yīng)器供應(yīng)電壓時(shí)，氧氣穿過(guò)薄膜發(fā)生還原反應(yīng)，產(chǎn)生微弱的擴(kuò)散電流，通過(guò)測(cè)量電流值可測(cè)定溶解氧濃度。為進(jìn)行精確的溶解氧測(cè)量，要求水樣的最小流速為 0.3m/s ，水流將會(huì)提供一個(gè)適當(dāng)?shù)难h(huán)，以保證消耗的氧持續(xù)不斷地得到補(bǔ)充。當(dāng)液體靜止時(shí)，不能得到正確的結(jié)果。在進(jìn)行野外測(cè)量時(shí)，可用手平行搖動(dòng)電極進(jìn)行。在每次測(cè)量過(guò)程中，電極和被檢測(cè)水樣之間必須達(dá)到熱平衡，這個(gè)過(guò)程需要一定的時(shí)間?；瘜W(xué)需氧量（cod）a重銘酸鉀法原理在強(qiáng)酸并加熱條件下，用一

10、定量的重銘酸鉀氧化水樣中還原性物質(zhì)，過(guò)量的重銘酸鉀以試亞鐵靈作指 示劑，用硫酸亞鐵錢(qián)溶液回滴。根據(jù)硫酸亞鐵錢(qián)的用量算出水樣中還原性物質(zhì)消耗氧的量。適用范圍用0.25 mol/l濃度的重銘酸鉀溶液可測(cè)定大于50 mg/l的cod值，未經(jīng)稀釋水樣的測(cè)定上限是700mg/l。用0.025mol/l濃度的重銘酸鉀溶液可測(cè)定550mg/l的cod值，但低于10mg/l時(shí)測(cè)量準(zhǔn)確度較差（考慮使用高鎰酸鹽指數(shù)法）。在分析含cl-水樣時(shí)，罐內(nèi)加入水樣和含hg+消解液（硫酸汞）后，應(yīng)即時(shí)搖勻（約 1分鐘），待cl-與hg+充分反應(yīng)后，再加催化劑（保持硫酸汞：氯離子 =10: 1）。試齊i1）重銘酸鉀消解液（1/

11、6k2cr2o7 = 0.20 mol/l）：稱(chēng)取重銘酸鉀 9.806g,溶于500ml水中，邊攪拌邊慢慢加 入濃硫酸250ml,完全冷卻后移入1000ml容量瓶，稀釋至刻度（重銘酸鉀預(yù)先在120c烘干2h,干燥器中冷卻后稱(chēng)取）；2）硫酸亞鐵錢(qián)標(biāo)準(zhǔn)溶液（nh4）2fe（so4）2 6h2o =0.04 mol/l：稱(chēng)取6水硫酸亞鐵錢(qián)16.6g溶于水中，邊攪 拌邊慢慢加入20ml濃硫酸，冷卻后移入 1000ml容量瓶中，加水稀釋至刻度（配制過(guò)程易被污染）；3）試亞鐵靈指示液： 稱(chēng)取鄰菲羅咻1.458g,硫酸亞鐵0.695g溶于水中，稀釋至100ml,貯于棕色瓶?jī)?nèi)（藥 品不易溶，定溶后靜置1-2天

12、后使用）；4）硫酸-硫酸銀催化劑：于1000ml濃硫酸中加入10g硫酸銀，放置1-3天，不時(shí)搖動(dòng)使其溶解。需對(duì)硫酸亞鐵錢(qián)標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行標(biāo)定：1）吸取5ml重銘酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液于 150ml錐形瓶中，加水稀釋至約30ml,緩慢加入5ml濃硫酸，混均；2）冷卻后，加入2滴試亞靈指示劑，用硫酸亞鐵錢(qián)溶液滴定，溶液的顏色由黃色經(jīng)藍(lán)綠色至紅褐色即為終點(diǎn)，記錄滴定用量 v;3）硫酸亞鐵錢(qián)標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度（ mol/l）: c=（0.20 x 5.00）/ v-步驟：1）吸取5ml水樣于消解罐中，再加入 5ml重銘酸鉀消解液和 5ml硫酸-硫酸銀催化劑；旋緊密封蓋，將罐均勻置放入消解爐內(nèi)，離轉(zhuǎn)盤(pán)邊沿約2cm周?chē)蠈?duì)

13、稱(chēng)排放，消解 15分鐘；2）待冷卻后將反應(yīng)液轉(zhuǎn)移到250ml錐形瓶中，用蒸儲(chǔ)水沖洗消解罐帽2-3次，沖洗液并入錐形瓶中，控制體積在30ml;3）加入2滴試亞鐵靈指示劑，再用硫酸亞鐵錢(qián)標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定，溶液的顏色由黃色經(jīng)藍(lán)綠色至紅褐色即為 終點(diǎn)，記錄硫酸亞鐵錢(qián)標(biāo)準(zhǔn)溶液的用量；計(jì)算（結(jié)合式）：codcr（o2,mg/l） = （v0-v1） x cx 8x 1000/v2=（v 0-v1）x 8000/（v x v2）式中：c -硫酸亞鐵錢(qián)標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度（ mol/l）; v0-空白消耗硫酸亞鐵錢(qián)量（ ml）;v -標(biāo)定硫酸亞鐵俊量（ml）;v1-水樣消耗硫酸亞鐵俊量（ml）;v2-水樣體積（5ml）

14、;8 -氧（1/2 o）摩爾質(zhì)量（g/mol）。b 高錳酸鹽指數(shù)高錳酸鹽指數(shù)，亦稱(chēng)為化學(xué)需氧量的高錳酸鉀法，是指在酸性或堿性介質(zhì)中，以高錳酸鉀為氧化劑，處理水樣時(shí)所消耗的量，以氧的 mg/l 來(lái)表示。本實(shí)驗(yàn)室采用 酸性法 測(cè)定。原理水樣加入硫酸使呈酸性后，加入一定量的高錳酸鉀溶液，并在沸水浴中加熱反應(yīng)一定的時(shí)間。剩余的高錳酸鉀，用草酸鈉溶液還原并加入過(guò)量，再用高錳酸鉀溶液回滴過(guò)量的草酸鈉，通過(guò)計(jì)算求出高錳酸鹽指數(shù)值。適用范圍當(dāng)水樣的高錳酸鹽指數(shù)值超過(guò) 10mg/l 時(shí)，則酌情分取少量試樣，并用水稀釋后再行測(cè)定。采樣與保存水樣采集后，應(yīng)加入硫酸使ph 調(diào)至 c xmx 8m000/v2,式中，v

15、。為空白試驗(yàn)中高鎰酸鉀溶液消耗量(ml)、v2為分取水樣量(ml)、c為稀釋的水樣中含水的比值 (例如：10.0ml 水樣，加 90ml 水稀釋至 100ml ，則 c=0.90) 。bod5本實(shí)驗(yàn)室采用稀釋接種法。原理生化需氧量是指在規(guī)定條件下，微生物分解存在水中的某些可氧化物質(zhì)，特別是有機(jī)物所進(jìn)行的生物 化學(xué)過(guò)程中消耗溶解氧的量。此生物氧化全過(guò)程進(jìn)行的時(shí)間很長(zhǎng)，如在 20c培養(yǎng)時(shí)，完成此過(guò)程需 100多 天。目前國(guó)內(nèi)外普遍規(guī)定 20c1c培養(yǎng)5d,分別測(cè)定樣品培養(yǎng)前后的溶解氧，二者之差即為bod5值，以氧的毫克/升表示。對(duì)某些地表水及大多數(shù)工業(yè)廢水，因含較多的有機(jī)物，需要稀釋后再培養(yǎng)測(cè)定，

16、以降低其濃度和保證 有充足的溶解氧。稀釋的程度應(yīng)使培養(yǎng)中所消耗的溶解氧大干2 mg/l ,而剩余溶解氧在1 mg/l以上。為了保證水樣稀釋后有足夠的溶解氧，稀釋水通常要通入空氣進(jìn)行曝氣（或通入氧氣），使稀釋水中溶解氧接近飽和。稀釋水中還應(yīng)加入一定量的無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)鹽和緩沖物質(zhì)（磷酸鹽、鈣、鎂和鐵鹽等），以保證微生物生長(zhǎng)的需要。 適用范圍本法適用于測(cè)定 bod5大于或等于2mg/l,最大不超過(guò)6000mg/l的水樣。當(dāng)水樣bod 5大于6000mg/l , 會(huì)因稀釋帶來(lái)一定的誤差。試齊i1）磷酸鹽緩沖溶液：將 8.5g磷酸二氫鉀（kh 2p。4）, 21.75g磷酸氫二鉀（k2hpo4）, 33.4g

17、七水合磷酸氫 二鈉（na2hpo4 7h2。）和1.7g氯化?。╪h4ci）溶于水中，稀釋至 1000ml。2）硫酸鎂溶液：將22.5g七水合硫酸鎂（mgso4 7o）溶于水中，稀釋至 1000ml。3）氯化鈣溶液：將 27.5g無(wú)水氯化鈣溶于水，稀釋至 1000ml。4）氯化鐵溶液：將 0.25g六水合氯化鐵（fecl3 - 6h2o）溶于水，稀釋至 1000ml。稀釋水在520l玻璃瓶?jī)?nèi)裝入一定量的水，控制水溫在20 c左右。然后用無(wú)油空氣壓縮機(jī)或薄膜泵將此水曝氣28h,使水中的溶解氧接近于飽和，也可以鼓入適量純氧。瓶口蓋以?xún)蓪咏?jīng)洗滌晾干的紗布，置于20c培養(yǎng)箱中放置數(shù)小時(shí)，使水中溶解氧含

18、量達(dá)8 mg/l左右。臨用前于每升水中加入氯化鈣溶液、氯化鐵溶液、硫酸鎂溶液、磷酸鹽緩沖溶液各1ml,并混合均勻。水樣的測(cè)定步驟：1）不經(jīng)稀釋水樣的測(cè)定：對(duì)于溶解氧含量較高、有機(jī)物含量較少的清潔地表水，可不經(jīng)稀釋?zhuān)苯右?虹吸法將約20c的混勻水樣轉(zhuǎn)移至兩個(gè)溶解氧瓶?jī)?nèi)，轉(zhuǎn)移過(guò)程中應(yīng)注意不使其產(chǎn)生氣泡。以同樣的操 作使兩個(gè)溶解氧瓶充滿(mǎn)水樣后溢出少許，加塞水封（瓶?jī)?nèi)不應(yīng)有氣泡）。立即測(cè)定其中一瓶溶解氧，將另一瓶放入培養(yǎng)箱中，在 20小 c培養(yǎng)5d后，測(cè)其溶解氧。2）需經(jīng)稀釋水樣的測(cè)定：對(duì)于污染的地表水和大多數(shù)工業(yè)廢水，需要稀釋后再培養(yǎng)測(cè)定。工業(yè)廢水可由 重銘酸鉀法測(cè)得的 codcr值確定。通常需

19、作三個(gè)稀釋比，使用稀釋水時(shí)，由 codcr值分別乘以系數(shù) 0.075、0.15、0.225,即獲得三個(gè)稀釋倍數(shù)。3）稀釋倍數(shù)確定后，以直接稀釋法進(jìn)行測(cè)定：取兩組溶氧瓶（標(biāo)準(zhǔn)體積為250ml）,用虹吸法加入部分稀釋水，再加入根據(jù)稀釋比例計(jì)算出的水樣量，然后再以虹吸法引入稀釋水至剛好充滿(mǎn)，加塞，勿留氣 泡于瓶?jī)?nèi)。其中一組當(dāng)天測(cè)定溶解氧，另一組在201c條件下培養(yǎng) 5天后測(cè)定溶解氧含量。另取兩個(gè)溶解氧瓶，用虹吸法裝滿(mǎn)稀釋水作為空白，分別測(cè)定5天前、后的溶解氧含量。4）當(dāng)樣品量太多時(shí)，考慮采用經(jīng)驗(yàn)值進(jìn)行稀釋?zhuān)匆?codcr值除以12 （將codcr控制在12mg/l以下） 獲得稀釋比。5） 碘量法測(cè)

20、定溶解氧：加入 1ml 硫酸錳溶液、 2ml 堿性碘化鉀溶液，蓋好瓶塞，顛倒混合數(shù)次，靜置；待棕色沉淀物降至瓶?jī)?nèi)一半時(shí)，再顛倒混合一次；打開(kāi)瓶塞，加入 2ml 濃硫酸，蓋好瓶塞，顛倒混合搖勻至沉淀物全部溶解為止，放置暗處5min ；移取 100ml 上述溶液于250ml 錐形瓶中，用硫代硫酸鈉溶液滴定至溶液呈淡黃色，加入 6 滴淀粉溶液，繼續(xù)滴定至藍(lán)色剛好褪去為止，紀(jì)錄硫代硫酸鈉溶液用量 v 。計(jì)算：溶解氧 (o2， mg/l)=(m*v*8*1000)/100m 硫代硫酸鈉溶液的濃度v 滴定時(shí)消耗硫代硫酸鈉溶液體積注：如果水樣中含有氧化性物質(zhì)（如游離氯大于0.1mg/l 時(shí)） ，應(yīng)預(yù)先于水樣

21、中加入硫代硫酸鈉去處。即淀粉作指示劑，用硫代硫酸鈉溶液滴定至藍(lán)色剛褪，記下用量（相當(dāng)于去處游離氯的量）中，加入同樣量的硫代硫酸鈉溶液，搖勻后，按操作步驟測(cè)定。用兩個(gè)溶解氧瓶各取一瓶水樣，在其中一瓶加入5ml （1+5）硫酸和1g碘化鉀，搖勻，此時(shí)游離出碘。以o于另一瓶水樣氮a 總氮水樣采集后，用硫酸酸化到 ph 2 ，在 24 h 內(nèi)進(jìn)行測(cè)定。在 120的堿性介質(zhì)條件下，用過(guò)硫酸鉀作氧化劑，不僅可將水樣中的氨氮和亞硝酸鹽氮氧化成硝酸鹽， 同時(shí)將水樣中大部分有機(jī)氮化合物氧化為硝酸鹽。 而后， 用紫外分光光度法分別于波長(zhǎng)220 nm 與 275nm 出測(cè)定其吸光值。適用范圍檢測(cè)下限為 0.05 m

22、g/l ，上限為 4 mg/l 。步驟1）取10 ml水樣，或取適量水樣（使氮含量為2080閔）于25 ml具塞刻度管中，加 5 ml堿性過(guò)硫酸鉀溶液，加塞后管口包一小塊紗布并用線(xiàn)扎緊，以免加熱時(shí)玻璃塞沖出。將具塞刻度管放在大燒杯中，置于高壓蒸汽鍋中 120加熱 30 min 。2） 消解完成后取出比色管冷卻至室溫。加入（ 1+9）鹽酸 1ml ，用超純水稀釋至25 ml 標(biāo)線(xiàn)。3） 在紫外分光光度計(jì)上，以超純水作參比，用石英比色皿分別在 220 nm 及 275 nm 波長(zhǎng)處測(cè)定吸光值。b 硝酸鹽氮原理利用硝酸根離子在 220 nm 波長(zhǎng)處的吸收而定量測(cè)定硝酸鹽氮。 溶解的有機(jī)物在 220

23、nm 處也會(huì)有吸收，而硝酸根離子在275 nm 處沒(méi)有吸收。因此，在 275 nm 處作另一次測(cè)量，以校正硝酸鹽氮值。步驟1）采集的水樣立即經(jīng)0 45微孔濾膜過(guò)濾（24h內(nèi)，無(wú)須加酸）。2） 取 5 ml 水樣，或取適量水樣于25 ml 具塞刻度管中，用超純水稀釋至25ml 標(biāo)線(xiàn)。3） 加入 0.5 ml 1 mol/l 鹽酸， 在紫外分光光度計(jì)上， 以超純水作參比， 用石英比色皿分別在220 nm 及 275nm 波長(zhǎng)處測(cè)定吸光值。c 氨氮原理本實(shí)驗(yàn)室采用 納氏試劑光度法 。碘化汞和碘化鉀的堿性溶液與氨反應(yīng)生成淡紅棕色膠態(tài)化合物。適用范圍最低檢出濃度為 0.025 mg/l ，測(cè)定上限為 2

24、 mg/l 。步驟1）采集的水樣立即經(jīng)0 45 dm微孔濾膜過(guò)濾（24h內(nèi)，如需要可加硫酸調(diào)ph 0.9990回歸方程y=a+bx,其中截距a應(yīng)與0作t檢驗(yàn)，當(dāng)a與0有顯著性差異時(shí)，表示校準(zhǔn)曲線(xiàn)的回歸方程 計(jì)算結(jié)果準(zhǔn)確度不高，直接使用必將給測(cè)定結(jié)果引入差值相當(dāng)于截距a 的系統(tǒng)誤差；在完全相同的分析條件下，僅由于操作中的隨機(jī)誤差所導(dǎo)致的斜率變化，分子吸收分光光度法要求其相對(duì)差值小于5% 。1、硝酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液：(1)標(biāo)準(zhǔn)貯備液(kno 3=100 g/ml)：稱(chēng)取0.7218g硝酸鉀溶于蒸儲(chǔ)水中，移至 1000ml容量瓶中，定容。(2)硝酸鉀標(biāo)準(zhǔn)使用液(kno 3=100ml)：將貯備液用蒸儲(chǔ)水稀

25、釋10倍。2、磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液：(1)磷酸鹽貯備液(kh2p04=500ml):稱(chēng)取0.2197g磷酸二氫鉀溶于水中，移入 1000ml容量瓶中，加(1+1 )硫酸 5ml ，用水稀釋至標(biāo)線(xiàn)；(2)磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)使用液(kh2p。4=2聞/ml):吸取10ml磷酸鹽貯備液于 250ml容量瓶中，用水稀釋至標(biāo)線(xiàn)。3、銨標(biāo)準(zhǔn)溶液：( 1)銨標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液(nh4cl=1.0mg/ml ) ：稱(chēng)取 3.819氯化銨溶于水中，定容至1000ml ；(2) 銨標(biāo)準(zhǔn)使用溶液( nh 4cl=0.01mg/ml ) ： 移取 5ml 銨標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液于500ml 容量瓶中， 用水稀釋至標(biāo)線(xiàn)。方法(參考) ：總氮：分別吸

26、取0、 0.5、 1 、 2、 3、 5、 7、 8ml 硝酸鉀標(biāo)準(zhǔn)使用液于25ml 比色管中，用蒸餾水稀釋至10ml 標(biāo)線(xiàn)，步驟同總氮測(cè)定；氨氮：分別吸取銨標(biāo)準(zhǔn)使用液0、 0.5、 1、 3、 5、 7、 10ml 于 50ml 比色管中，加水至標(biāo)線(xiàn)，步驟同氨氮測(cè)定；硝氮：分別吸取0、 0.25、 0.5、 1 、 1.5、 2、 2.5、 3ml 硝酸鉀標(biāo)準(zhǔn)使用液于25ml 比色管中，加水稀釋至25ml ，步驟同硝氮測(cè)定；正磷：分別取磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)使用液0、 0.5、 1、 3、 5、 7、 10、 15ml ，加水至 50ml ，步驟同磷酸鹽測(cè)定。注：校準(zhǔn)曲線(xiàn)選取的濃度可按照所測(cè)水樣濃度而另

27、行調(diào)整。如水樣濃度低時(shí)，選取質(zhì)量可降低。計(jì)算總氮、硝氮：a 校 =a 220-2*a 275 ；式中： a 220220nm 波長(zhǎng)測(cè)得吸光度； a 275275nm 波長(zhǎng)測(cè)得吸光度；求得吸光度的校正值( a 校 )后，從校準(zhǔn)曲線(xiàn)中查得相應(yīng)的硝酸鹽氮量，除以水樣體積即為水樣測(cè)定結(jié)果( mg/l ) 。氨氮、總磷、正磷：氮、磷酸鹽( mg/l ) =m/v式中： m從校準(zhǔn)曲線(xiàn)上查得的含氮量； v所取水樣體積；氮、磷測(cè)定簡(jiǎn)略步驟水樣比色管氧化劑消解顯色劑波長(zhǎng)總氮tn取2ml水樣于25ml 比色管中，稀釋至10ml加入5ml 堿性過(guò) 硫酸鉀120 c消解30分鐘加入1ml （ 1+9）鹽 酸，再用蒸儲(chǔ)

28、水稀釋 至 25ml220、275nm氨氮nh3-n抽濾取10ml水樣于50ml比色管中，稀釋至50ml加入1ml酒后酸鉀鈉 溶液，再加入 1.5ml 納氏試劑420nm硝氮no3-n抽濾取5ml水樣于25ml 比色管中，稀釋至25ml加入 0.5ml 1mol/l 的鹽酸220、275nm亞硝氮no2-n抽濾取5ml水樣于50ml 比色管中，稀釋至50ml加入1ml磺胺溶液， 放置2-8分鐘后再加 入1ml乙二胺溶液， 混勻，放置10分鐘543nm總磷tp取10ml水樣于50ml比色管中，稀釋至25ml加入4ml 過(guò)硫酸 鉀120 c消解30分鐘稀釋至50ml后加入1ml抗壞血酸，30秒 后

29、加入2ml鋁酸鹽700nm可溶性 正磷抽濾取10ml水樣于50ml比色管中稀釋至50ml后加入 1ml抗壞血酸，30秒 后加入2ml鋁酸鹽700nm可溶性 總磷抽濾取10ml水樣于50ml比色管中，稀釋至25ml加入4ml 過(guò)硫酸 鉀120 c消解30分鐘稀釋至50ml后加入 1ml抗壞血酸，30秒 后加入2ml鋁酸鹽700nm試齊i：1、堿性過(guò)硫酸鉀：稱(chēng)取 40g過(guò)硫酸鉀（k2s2。8）, 15g氫氧化鈉，溶于超zfek中，稀釋至 1000ml,溶液存 放在聚乙烯瓶?jī)?nèi)，可貯存一周，顏色變紅需重新配制（過(guò)硫酸鉀生產(chǎn)過(guò)程中易殘留含氮雜質(zhì)，可使用進(jìn)口過(guò)硫酸鉀或?qū)⑦^(guò)硫酸鉀重結(jié)晶提純；氫氧化鈉易吸水溶

30、解，稱(chēng)量時(shí)需使用小燒杯而不用稱(chēng)量紙）；2、過(guò)硫酸鉀：5g過(guò)硫酸鉀溶于 100ml蒸儲(chǔ)水中（溶解過(guò)硫酸鉀時(shí)可利用水浴法，但水浴溫度不可超過(guò)60c）；3、抗壞血酸：溶解10g抗壞血酸于水中，定容至 100ml,貯存在棕色玻璃瓶中，顏色變黃重配；4、鋁酸鹽溶液：溶解13g鋁酸錢(qián)于100ml水中，溶解0.35g酒石酸睇氧鉀于100ml水中；在不斷攪拌下， 將鋁酸俊溶液徐徐加到 300ml （1+1）硫酸中，加酒石酸睇氧鉀溶液并且混和均勻，貯存在棕色玻璃瓶 中；5、酒石酸鉀鈉溶液：稱(chēng)取 50g酒石酸鉀鈉溶于100ml水中，加熱煮沸以除去氨，放冷，定容至100ml;6、納氏試劑：稱(chēng)取16g氫氧化鈉，溶于5

31、0ml水中，充分冷卻至室溫；另稱(chēng)取 7g碘化鉀和10g碘化汞溶 于水，然后將此溶液在攪拌下徐徐注入氫氧化鈉溶液中，用水稀釋至100ml,貯于聚乙烯瓶中，密塞保存（納氏試劑易產(chǎn)生沉淀，取藥時(shí)應(yīng)盡量避開(kāi)沉淀或重新配藥；因有汞，配藥及測(cè)定氨氮時(shí)最好戴上手套）；7、磺胺溶液：稱(chēng)取5g對(duì)氨基苯磺酰胺（磺胺），溶于50ml濃鹽酸和約350ml水的混合液中，稀釋至500ml; 8、乙二胺溶液：稱(chēng)取 0.5gn- （1泰基）乙二胺二鹽酸鹽溶于500ml水中，貯于棕色瓶?jī)?nèi)。chl-a-凍融法原理以90%丙酮為萃取劑，利用反復(fù)凍融使藻類(lèi)細(xì)胞破碎，采用分光光度法測(cè)定葉綠素a。反復(fù)凍融-浸提法在操作上方法簡(jiǎn)單，不用水

32、浴升溫、超聲波振蕩，不存在高溫條件下葉綠素a 被破壞的問(wèn)題，利用細(xì)胞內(nèi)冰粒的形成和細(xì)胞液濃度的增高引起溶漲，使胞壁結(jié)構(gòu)破碎引起葉綠素溶出。提取效率的提高主要通過(guò)反復(fù)凍融對(duì)胞壁的破壞和浸提時(shí)間的延長(zhǎng)來(lái)實(shí)現(xiàn)。水樣的采集與保存可根據(jù)需要進(jìn)行分層采樣或混合采樣。水樣采集后應(yīng)放在蔭涼處，避免日光直射。最好立即進(jìn)行測(cè)定的預(yù)處理，如需經(jīng)過(guò)一段時(shí)間（ 448h ）方可進(jìn)行預(yù)處理，則應(yīng)將水樣保存在低溫（ 04）避光處。在每升水樣中加入 1%碳酸鎂懸濁液1ml ，以防止酸化引起色素溶解。步驟1、 過(guò)濾濃縮水樣：在抽濾器上裝好乙酸纖維濾膜（0.7mm, 0.45um ，光面朝上），準(zhǔn)確量取100500ml 水樣（視

33、水樣藻濃度而定）進(jìn)行抽濾。取樣前先將水樣充分搖勻，抽濾時(shí)用黑色袋子將樣品罩住，待抽濾完后繼續(xù)抽 12min 。把膜對(duì)折存放于定性濾紙中包好，在濾紙外用鉛筆清楚標(biāo)記樣品信息（時(shí)間、名稱(chēng)、過(guò)濾水樣體積） ，同時(shí)在實(shí)驗(yàn)本上做好記錄。向包好樣品的濾紙上加幾滴純水使膜濕潤(rùn)。用黑色塑料袋包裹樣品。2、把膜放于-20 c冰箱冰凍1224h（經(jīng)驗(yàn)是，隔夜即可，-20c避光可保存一個(gè)月），然后于室溫下融化 510min （使膜不重疊以便膜充分融化，嚴(yán)格避光，使膜變軟即可） ，再于 -20下冰凍不小于30min ，此往復(fù)過(guò)程進(jìn)行35 次后，把濾膜取出一一放入 10ml 離心管中，加入 10ml 90%丙酮，振搖使膜充分溶解后于4c冰箱中避光浸提 812 h,浸提過(guò)程中需振搖 12次。3、 于 4500r/min 離心 10min 。 兩石英比色皿均盛90%丙酮調(diào)0， 取樣品上清液讀取750nm、 663nm、 645nm和 630nm 波長(zhǎng)的吸光值。全過(guò)程嚴(yán)格避光。計(jì)算葉綠素 a （mg/m3） =（11.64x （d663-d75o）-2.16 x （d645-d75o）+0.10