細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法和操作規(guī)程

1、*有限公司 標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 文件 名稱 細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法 文件 編號(hào) SOP/QC-043(1)-2015 共10 頁 第1頁 部門：QC 新訂： 替代：SOP/QC-043(1)-2013 起草人 審核人 批準(zhǔn)人 頒發(fā)部 門 QA 起草日 期 審核日 期 批準(zhǔn)日 期 生效日 期 分發(fā)部 門 總經(jīng)理、質(zhì)量部、QC 目的 建立細(xì)菌內(nèi)毒素檢查操作規(guī)程，保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。 適用范圍 所有原料、成品的細(xì)菌內(nèi)毒素檢查。 責(zé)任人 QC檢驗(yàn)員 內(nèi)容 1簡述 1.1 本法系利用鱟試劑來檢測或量化由革蘭陰性菌產(chǎn)生的細(xì)菌內(nèi)毒素，以 判斷供試品中細(xì)菌毒素的限量是否符合規(guī)定的一種方法。 1.2 細(xì)菌內(nèi)毒素檢查包括凝

2、膠法和光度測定法兩種方法。供試品檢測時(shí)可 使用其中任何一種方法。當(dāng)測定結(jié)果有爭議時(shí)，除另有規(guī)定外，以凝膠法 結(jié)果為準(zhǔn)。 1.3 本規(guī)范適用于凝膠法檢查。凝膠法系通過鱟試劑與內(nèi)毒素產(chǎn)生凝集反 應(yīng)的原理來檢測或半定量內(nèi)毒素的方法。 1.4 細(xì)菌內(nèi)毒素的量用內(nèi)毒素單位（EU）表示 1.5 細(xì)菌內(nèi)毒素國家標(biāo)準(zhǔn)品（NSE）系自大腸埃希菌提取精制而成，用于標(biāo) 定、復(fù)核、仲裁鱟試劑靈敏度和標(biāo)定細(xì)菌內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品的效價(jià)。 1.6 細(xì)菌內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品（WSE系以細(xì)菌內(nèi)毒素國家標(biāo)準(zhǔn)品為基準(zhǔn)標(biāo)定 其效價(jià)，用于試驗(yàn)中的鱟試劑靈敏度復(fù)核、干擾試驗(yàn)及各種陽性對(duì)照。 1.7 凝膠法細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水（BET水）系指內(nèi)毒

3、素含量小于 0.015Eu/ml滅菌注射用水。光度測定法用的細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水，其內(nèi)毒 素的含量應(yīng)小于0.005Eu/ml。 1.8 鱟試劑靈敏度復(fù)核試驗(yàn)在本檢查法規(guī)定的條件下，使鱟試劑產(chǎn)生凝 集的內(nèi)毒素 *有限公司 標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 名稱 編號(hào) 第2頁 的最低濃度即為鱟試劑的標(biāo)示靈敏度，用EU/ml表示。當(dāng)使用新批號(hào)的鱟試 劑或試驗(yàn)條件發(fā)生了任何可能影響檢驗(yàn)結(jié)果的改變時(shí)，應(yīng)進(jìn)行鱟試劑靈敏 度復(fù)核試驗(yàn)。 1.9 供試品干擾試驗(yàn)項(xiàng)用于建立新品種細(xì)菌內(nèi)毒素檢查方法以及供試品 的配方和生產(chǎn)工藝或試驗(yàn)環(huán)境有變化，鱟試劑來源不同或供試品陽性對(duì)照 結(jié)果呈陰性時(shí)確定供試品是否存在抑制或增強(qiáng)作用。 1.10 檢查

4、法項(xiàng)為供試品細(xì)菌內(nèi)毒素檢查方法。陰性對(duì)照、陽性對(duì)照和供 試品陽性對(duì)照必須同時(shí)進(jìn)行，否則試驗(yàn)結(jié)果無效。 2實(shí)驗(yàn)材料及用具 2.1 天平 供試品稱量用，感量為0.1mg以下。 2.2 電熱干燥箱 除外源性內(nèi)毒素用，溫度應(yīng)能維持 250 C以上至少一小 時(shí)。 2.3 恒溫水浴箱或適宜的恒溫器，應(yīng)能在 37 土 1C保持一小時(shí)。 2.4 水銀溫度計(jì)或酒精溫度計(jì)，精度在 1C以下。 2.5 旋渦混合器 2.6 鱟試劑（應(yīng)具有國家主管部門的批準(zhǔn)文號(hào)）及細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水（符 合規(guī)定）。 2.7 細(xì)菌內(nèi)毒素國家標(biāo)準(zhǔn)品（NSE），細(xì)菌內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品（WSE）除另有 規(guī)定外應(yīng)由中國藥品生物制品檢定所統(tǒng)一發(fā)放。

5、 2.8 實(shí)驗(yàn)用具 移液管（或刻度吸管，定量移液器）、凝集管（10 x 75mm）、 三角瓶、小試管（16 x 100mm、試管架、洗耳球、封口膜或金屬試管帽、時(shí) 鐘、脫脂棉、吸水紙、剪刀、砂輪所用玻璃器皿須經(jīng)250 C干烤至少1小 時(shí)。塑料用具應(yīng)使用其它適宜的除細(xì)菌內(nèi)毒素方法。 2.9 試劑75%乙醇、蒸餾水、5涯鉻酸鉀硫酸洗液。 3操作方法 3.1 試驗(yàn)準(zhǔn)備 3.1.1 洗液的配制 配制鉻酸洗液或其他適宜的細(xì)菌內(nèi)毒素滅活劑。 3.1.2 玻璃器皿的洗滌將被洗滌的玻璃器皿用洗滌劑和自來水洗凈并 空干水分后置洗液中浸泡4小時(shí)，取出將洗液濾干，用自來水將殘余的洗 液洗凈，再用新鮮蒸餾水沖洗干燥后

6、置適宜的密閉金屬容器中，迅速置烤 箱中。 *有限公司 標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 文件 細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法 文件 S0P/QC-043(1)-2015 共 第 10 頁 3 名稱 編號(hào) 頁 3.1.3 除去玻璃器皿表面可能存在的外源性內(nèi)毒素玻璃器皿置烤箱后 將烤箱調(diào)至250 C,待烤箱溫度升至設(shè)定的溫度后開始記時(shí)，須干烤至少1 小時(shí)。達(dá)到規(guī)定時(shí)間后，關(guān)斷電源。待烤箱溫度自然降至室溫，在不開啟 金屬容器的情況下，可在兩周內(nèi)使用，否則須再次加熱除去可能存在的外 源性內(nèi)毒素。 3.2 內(nèi)毒素限值的確定 藥品、生物制品的細(xì)菌內(nèi)毒素限值 (L) 一般按以下公式確定 L=K/M 式中L為供試品的細(xì)菌內(nèi)毒素限值，以 EU/

7、ml、EU/mg或EU/U(活性單 位) 表示； K為人每公斤體重每小時(shí)最大可接受的內(nèi)毒素劑量，以 EU/(kg h)表 示，注射劑，K=5EU/(kg h)，其中放射性藥品注射劑 K= 2.5EU/(kg h), 鞘內(nèi)用藥品，K=0.2EU/(kg h); M為人用每公斤體重每小時(shí)最大供試品劑量，以ml/(kg h)、mg/(kgh) 或U/(kg h)表示，人均體重按60kg計(jì)算，注射時(shí)間若小于l小時(shí)，按l 小時(shí)計(jì)。 按人用計(jì)量計(jì)算限值時(shí)，如遇特殊情況，可根據(jù)生產(chǎn)和臨床用藥實(shí)際 情況做必要調(diào)整，但需說明理由。 3.3 確定最大有效稀釋倍數(shù) (MVD) 最大有效稀釋倍數(shù)是指在試驗(yàn)中供試品溶液

8、被允許稀釋的最大倍數(shù)， 在不超過此稀釋倍數(shù)的濃度下進(jìn)行內(nèi)毒素限度的檢測。用以下公式來確定 MVD： MVD=CLA L 為供試品的細(xì)菌內(nèi)毒素限值； C表示供試品的濃度，或供試品復(fù)溶后所得溶液的濃度。當(dāng)L以EU/ml 表示時(shí)C為1.0ml/m1,當(dāng)L以EU/mg或 EU/u表示時(shí)，C單位需為mg/ml或 u/ml。如供試品為注射用無菌粉末或原料藥，則MVD取1,可計(jì)算供試品 的最小有效稀釋濃度C二入/L ; 入為在凝膠法中鱟試劑的標(biāo)示靈敏度（EU/ml）,或是在光度測定法中所 使用的標(biāo)準(zhǔn)曲線上最低的內(nèi)毒素濃度。 3.4 鱟試劑靈敏度復(fù)核 341內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備 341.1 取NSE或 WS一

9、支，輕彈瓶壁，使粉末落人瓶底，再用砂輪在瓶 頸上部輕輕 *有限公司 標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 共10 文件 細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法 文件 S0P/QC-043(1)-2015 頁 第4 名稱 編號(hào) 頁 劃痕，75%酒精棉球擦拭后啟開，防止玻璃屑落入瓶內(nèi)。 3.4.1.2 按標(biāo)準(zhǔn)品使用說明書用移液管加入規(guī)定量的BET水溶解其內(nèi)容 物，用封口 膜將瓶口封嚴(yán)。置旋渦混合器上混合15分鐘，然后制備成所需濃度的細(xì)菌 內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)溶液即2.0入、1.0入、0.5入、0.25入（入為所復(fù)核鱟試劑的標(biāo) 示靈敏度），每稀釋一步均應(yīng)在旋渦混合器上混合 30秒（詳細(xì)過程請(qǐng)參見使 用說明書）。若為NSE可按其使用說明書將其稀釋至規(guī)定濃度

10、后分裝并保 存。 例如使用NSE內(nèi)毒素含量為9000EU/支）時(shí)的方法如下： 復(fù)溶：準(zhǔn)確吸取BET水1ml加入NSE的安瓿內(nèi)，用封口膜將瓶口封嚴(yán)， 置旋渦混合器混合15分鐘，即為9000EU/ml內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)溶液。 稀釋：取0.3ml內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)溶液加上2.7mlBET水即為1-10稀釋液, 得到900EU/ml內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)溶液。 取 0.3mll -10 稀釋液，加上 2.7mlBET 水即為 1-100 稀釋液，得到 90EU/ml 內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)溶液。 往后依次類推。也可寫成下列格式： 0.3ml 0.3ml0.3ml 0.3ml 1ml1ml 9000EU/ml -900EU/ml-90EU/m

11、l-9EU/ml-lEU/ml -0.5EU/ml- 2.7ml 2.7ml2.7ml 2.4ml lmllml lml lmllml 0.25EU/ml -0.125EU/ml-0.0625EU/ml-0.03125EU/ml lml lmllml 在上述稀釋過程中，每稀釋一步，均須在旋渦混合器上混合 30 秒鐘。 3.4.2 待復(fù)核鱟試劑的準(zhǔn)備 3.4.2.1 在制備內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)溶液的同時(shí)，取 0.1ml/ 支的鱟試劑 18支輕彈 瓶壁，使粉末落入瓶底。用砂輪在瓶頸輕輕劃痕，75%乙醇棉球擦拭后啟開 備用，防止玻璃屑落人瓶內(nèi)，加入 0.1mlBET水復(fù)溶，使內(nèi)容物充分溶解， 避免產(chǎn)生氣泡 3

12、42.2 若待復(fù)核鱟試劑的規(guī)格不是 0.1ml/支時(shí)，按標(biāo)示量加入 BET水 復(fù)溶，將復(fù)溶后的鱟試劑溶液混勻后每 0.1m1分配到10mM 75mm凝聚管 中，要求至少分配18管 *有限公司 標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 共10 文件 細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法 文件 S0P/QC-043(1)-2015 頁 第5 名稱 編號(hào) 頁 備用（或取0.1ml/支的鱟試劑溶液的10mM 75mm試管或復(fù)溶后的0.1ml/ 支的鱟試劑原安瓿）。 3.4.3 加樣 將已充分溶解的待復(fù)核：鱟試劑18支（管）.放在試管架上，排成5列， 其中4支（管）4列分別加入2.0入、1.0入、0.5入、0.25入的內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)溶 液；2支（管）1列

13、分別加入BET水作為陰性對(duì)照。內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)溶液和BET水 的加樣量均為0ml/支。 3.4.4 加樣結(jié)束后、用封口膜封口，輕輕混勻，避免產(chǎn)生氣泡，連同試管 架放人37 士 l C水浴或適宜恒溫器中，試管架保持水平狀態(tài)，保溫60 2 分鐘，觀察結(jié)果。 3.4.5 將試管從恒溫器中輕輕取出，緩緩倒轉(zhuǎn)180,若管內(nèi)形成凝膠， 并且凝膠不變形、不從管壁滑脫者為陽性；未形成凝膠或形成的凝膠不堅(jiān) 實(shí)、變形、并從管壁滑脫者為陰性。保溫和拿取試管過程應(yīng)避免受到振動(dòng) 造成假陽性結(jié)果。 3.4.6 鱟試劑靈敏度復(fù)核實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算 當(dāng)最大濃度2.0入管均為陽性，最低濃度 0.25入管均為陰性，陰性 對(duì)照為陰性，試驗(yàn)方為

14、有效。按下式計(jì)算反應(yīng)終點(diǎn)濃度的幾何平均值，即 為鱟試劑靈敏度的復(fù)核結(jié)果（入c）。 -1 入 C=lg （x/4） 式中 X 為反應(yīng)終點(diǎn)濃度的對(duì)數(shù)值 （lg） 。反應(yīng)終點(diǎn)濃度是系列濃度遞減 的內(nèi)毒素溶液中最后一個(gè)呈陽性結(jié)果的濃度。 當(dāng)入c在0.5入 2入（包括0.5入和2入）時(shí)，方可用于細(xì)菌內(nèi)毒素檢查， 并以標(biāo)示靈敏度入為該批鱟試劑的靈敏度。 3.5 干擾試驗(yàn) 3.5.1 按表1制備溶液A B、C和D,使用的供試品應(yīng)為未檢驗(yàn)出內(nèi)毒素 且不超過最大有效稀釋倍數(shù)（MVD的溶液，按鱟試劑靈敏度復(fù)核試驗(yàn)項(xiàng)下操 作。 3.5.2 只有當(dāng)溶液A和陰性對(duì)照溶液D的所有平行管都為陰性，并且系列 溶液C的結(jié)果在鱟

15、試劑靈敏度復(fù)核范圍內(nèi)時(shí)，試驗(yàn)方為有效。按下式計(jì)算 系列溶液C和B的反應(yīng)終點(diǎn)濃度的幾何平均值（E。和E） * 有限公司 標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 文件 細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法 文件 SOP/QC-043(1)-2015 共 第 10 頁 6 名稱 編號(hào) 頁 Eo Ig 1( X/4) Ei lg 1( Xi/4) 式中Xo、X分別為系列溶液C和溶液B的反應(yīng)終點(diǎn)濃度的對(duì)數(shù)值(lg)。 當(dāng)Eo在0.5入2入(包括0.5入和2入)及Ei在0.5 Eo2 Eo(包括0.5 Eo和2 Ep)時(shí)，認(rèn)為供試品在該濃度下無干擾作用。若供試品溶液在小于MVD 的稀釋倍數(shù)下對(duì)試驗(yàn)有干擾，應(yīng)將供試品溶液進(jìn)行不超過MVD的進(jìn)一步稀 釋，

16、再重復(fù)干擾試驗(yàn)。 3.5.3 表1凝膠法干擾試驗(yàn)溶液的制備 編 內(nèi)毒素濃度/配制內(nèi)毒 稀釋用液 稀釋倍 所含內(nèi)毒素的 平行管 號(hào) 素的溶液 數(shù) 濃度 數(shù) A 無/供試品溶液 - - - 2 2入/供試品溶液 供試品溶液 1 2入 4 2 1入 4 B 4 0.5入 4 8 0.25 入 4 2入/檢杳用水 檢杳用水 1 2入 4 C 2 1入 4 4 8 0.5入 0.25 入 4 4 D 無/檢杳用水 - - - 2 注：A為供試品溶液；B為干擾試驗(yàn)系列；C為鱟試劑標(biāo)示靈敏度的對(duì) 照系列；D為陰性對(duì)照。 3.5.4 可通過對(duì)供試品進(jìn)行更大倍數(shù)的稀釋或通過其他適宜的方法（如過 濾、中和、透析或

17、加熱處理等）排除干擾。為確保所選擇的處理方法能有效 地排除干擾且不會(huì)使內(nèi)毒素失去活性，要使用預(yù)先添加了標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)毒素再經(jīng) 過處理的供試品溶液進(jìn)行干擾試驗(yàn)。 3.6 供試品細(xì)菌內(nèi)毒素的檢查法。 3.6.1凝膠限量試驗(yàn) 361.1表2凝膠限量試驗(yàn)溶液的制備 *有限公司 標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 共10 文件 細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法 文件 SOP/QC-043(1)-2015 頁 第7 名稱 編號(hào) 頁 編號(hào) 內(nèi)毒素濃度/配制內(nèi)毒素的溶液 平行管數(shù) A 無/供試品溶液 2 B 2入/供試品溶液 2 C 2入/檢杳用水 2 D 無/檢杳用水 2 注：A為供試品溶液；B為供試品陽性對(duì)照；C為陽性對(duì)照；D為陰性 對(duì)照。 某些供試

18、品需進(jìn)行復(fù)溶、稀釋或在水性溶液中浸提制成供試品溶液。 一般要求供 試品溶液的pH值在6.08.0的范圍內(nèi)。對(duì)于過酸、過堿或本身有緩沖能 力的供試品，需調(diào)節(jié)被測溶液（或稀釋液）的pH值，可使用酸、堿溶液或鱟 試劑生產(chǎn)廠家推薦的適宜的緩沖液調(diào)節(jié) pH值。酸、堿溶液須用細(xì)菌內(nèi)毒素 檢查用水在已去除內(nèi)毒素的窗口容器中配制。緩沖液必須經(jīng)過驗(yàn)證不含內(nèi) 毒素和干擾因子。 361.2 檢查方法 按表2制備溶液A B、C和D。使用稀釋倍數(shù)為 MVD并且已經(jīng)排除干 擾的供試品溶液來制備A和B,按鱟試劑靈敏度復(fù)核試驗(yàn)項(xiàng)下操作。 取0.1ml/支的鱟試劑溶液的10mr 75mmi式管或復(fù)溶后的0.1ml/支的 鱟試劑

19、原安瓿8支，其中2支加入0.1ml按最大有效稀釋倍數(shù)（MVD的供試 品溶液（表2中的A）; 2支加入0.1ml用細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水將內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品制成的 2入濃度 的內(nèi)毒素溶液作為陽性對(duì)照管（表 2中C）; 2支加入0.1ml供試品陽性對(duì) 照溶液用供試品溶液將同一支（瓶）內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品制成的 2入濃度的 內(nèi)毒素溶液作為供試品陽性對(duì)照陽性對(duì)照管（表 2中B）, 2支加入0.1ml 細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水作為陰性對(duì)照管(表 2中D) 361.3 結(jié)果判斷 保溫60士 2分鐘后觀察結(jié)果。若陰性對(duì)照溶液D的平行管均為陰性(-)， 供試品陽性對(duì)照溶液B的平行管均為陽性(+)，陽性對(duì)照溶液C的平行管均 為

20、陽性(+)，試驗(yàn)有效。 若溶液A的的兩個(gè)平行管均為陰性(-)，判供試品符合規(guī)定；若溶液A 的的兩個(gè)平行管均為陽性，判供試品不符合規(guī)定。若溶液A的的兩個(gè)平行 管中的一管為陽性，另一管為陰性，需進(jìn)行復(fù)試。復(fù)試時(shí)，溶液A需做4 支平行管，若所有平行管均為陰性，判供試品符合規(guī)定；否則判供試品不 符合規(guī)定。 *有限公司 標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 文件 細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法 文件 SOP/QC-043(1)-2015 共 第 10 頁 8 名稱 編號(hào) 頁 3.6.2凝膠半定量試驗(yàn) 本方法系通過確定反應(yīng)終點(diǎn)濃度來量化供試品中內(nèi)毒素的含量。按表3 制備溶液A B、C和D。按鱟試劑靈敏度復(fù)核試驗(yàn)項(xiàng)下操作。 3.6.2.1 結(jié)果

21、判斷 若陰性對(duì)照溶液D的平行管均為陰性，供試品陽性對(duì)照溶液B的平行 管均為陽性，系列溶液C的反應(yīng)終點(diǎn)濃度的幾何平均值在 0.5入2入之間， 試驗(yàn)有效。 系列溶液A中每一系列平行管的終點(diǎn)稀釋倍數(shù)乘以入，為每個(gè)系列的 終點(diǎn)反應(yīng)濃度 所有平行管反應(yīng)終點(diǎn)濃度的幾何平均值即為供試品溶液的內(nèi)毒素濃度按 公式CE=lg-1（刀X/2）。如果檢驗(yàn)時(shí)采用的供試品的稀釋液，則計(jì)算原始溶 液內(nèi)毒素濃度時(shí)要將結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。 如試驗(yàn)中供試品溶液的所有平行管均為陰性，應(yīng)記為內(nèi)毒素濃度小于 入（如果檢驗(yàn)的是稀釋過的供試品，則記為小于入乘以供試品進(jìn)行半定量試 驗(yàn)的初始稀釋倍數(shù)）。如果供試品溶液的所有平行管均為陽性，應(yīng)記為

22、內(nèi)毒 素濃度大于或等于最大的稀釋倍數(shù)乘以入。 若內(nèi)毒素濃度小于規(guī)定的限值，判供試品符合規(guī)定。若內(nèi)毒素濃度大 于或等于規(guī)定的限值，判供試品不符合規(guī)定。 3.622表3凝膠半定量試驗(yàn)溶液的制備 編 內(nèi)毒素濃度/配制內(nèi)毒 稀釋用液 稀釋倍 所含內(nèi)毒素的 平行管 號(hào) 素的溶液 數(shù) 濃度 數(shù) 無/供試品溶液 檢杳用水 1 - 2 2 2 A 4 - 2 8 - 2 B 2入/供試品溶液 1 2入 2 2入/檢杳用水 檢杳用水 1 2入 2 2 1入 2 C 4 0.5入 2 8 0.25 入 2 D 無/檢杳用水 - - - 2 *有限公司 標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 共10 文件 細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法 文件 SOP/QC-043(1)-2015 頁 第9 名稱 編號(hào) 頁 注：A為不超過MVD并且通過干擾試驗(yàn)的供試品溶液。從通過干擾試驗(yàn)的 稀釋倍數(shù)開始用檢查用水稀釋至1倍、2倍、4倍和8倍，最后的稀釋倍數(shù) 不得超過MVD B為2入濃度標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)毒素的溶液（供試品陽性對(duì)照）。 C為鱟試劑標(biāo)示靈敏度的對(duì)照系列。 D為陰性對(duì)照。 4 汪意事項(xiàng) 4.1實(shí)驗(yàn)前，須用肥皂洗手，用75臨醇棉球消毒 4.2 實(shí)驗(yàn)時(shí)，須戴工作帽和口罩。尤其在配制洗液和洗