三七中甲基對(duì)硫磷的提取純化及氣相色譜檢測(cè)本科畢業(yè)論文

1、本科生畢業(yè)論文三七中甲基對(duì)硫磷的提取純化及氣相色譜檢測(cè) 2015 annual graduation thesis (project) of the college undergraduate purification of acephate and aetection of parathion methyl by gas chromatography department: department of chemistry, college of sciencemajor: chemistrygrade:2012students name: student no.:tutor: may, 20

2、15畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)）原創(chuàng)性聲明本人所呈交的畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)）是我在導(dǎo)師的指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文（設(shè)計(jì)）不包含其他個(gè)人已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的研究成果。對(duì)本論文（設(shè)計(jì)）的研究做出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體，均已在文中作了明確說(shuō)明并表示謝意。 作者簽名： 日期： 畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)）授權(quán)使用說(shuō)明本論文（設(shè)計(jì)）作者完全了解紅河學(xué)院有關(guān)保留、使用畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)）的規(guī)定，學(xué)校有權(quán)保留論文（設(shè)計(jì)）并向相關(guān)部門(mén)送交論文（設(shè)計(jì)）的電子版和紙質(zhì)版。有權(quán)將論文（設(shè)計(jì)）用于非贏利目的的少量復(fù)制并允許論文（設(shè)計(jì)）進(jìn)入學(xué)校圖書(shū)館被查閱。學(xué)?？梢怨颊撐模ㄔO(shè)計(jì)）的全部或部分內(nèi)容。

3、保密的論文（設(shè)計(jì)）在解密后適用本規(guī)定。 作者簽名： 指導(dǎo)教師簽名：日期： 日期： 畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)）答辯委員會(huì)(答辯小組)成員名單姓名職稱(chēng)單位備注主席（組長(zhǎng)）摘 要 農(nóng)藥是農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的安全衛(wèi)士，每年使用化學(xué)農(nóng)藥為我國(guó)糧食產(chǎn)物挽回許多由病蟲(chóng)害而遭到的損失。農(nóng)藥是農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中必不可少的生產(chǎn)資料，保障了我國(guó)糧食的供應(yīng)。由此可見(jiàn)農(nóng)藥對(duì)我們生產(chǎn)生活的重要性。目前使用最為廣泛的是有機(jī)磷、有機(jī)氯、氨基甲酸酯等為代表的有機(jī)類(lèi)農(nóng)藥。有機(jī)磷殺蟲(chóng)劑是我國(guó)稻田最主要的農(nóng)藥,占所有使用農(nóng)藥的70%以上。其中,甲胺磷、乙酰甲胺磷、 敵敵畏、 氧樂(lè)果、 樂(lè)果、 對(duì)硫磷、馬拉硫磷、甲基對(duì)硫磷、毒死蜱等品種起著重要的作用。所以有機(jī)磷

4、類(lèi)農(nóng)藥的提純研究為實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)品的制備提供了依據(jù)，從而降低了實(shí)驗(yàn)的成本。本畢業(yè)論文主要探究一種快速高效分離、檢測(cè)三七中甲基對(duì)硫磷含量的方法。通過(guò)用丙酮作為溶劑利用超聲波提取法確定三七中甲基對(duì)硫磷的最佳提取時(shí)間、提取功率及提取劑量。為中草藥中甲基對(duì)硫磷農(nóng)殘檢測(cè)提供參考依據(jù)。關(guān)鍵詞： 三七；甲基對(duì)硫磷磷；超聲波提??；氣相色譜abstractchemical pesticides are widely used each year for agricultural products from many pests and diseases and restore the losses suffered.

5、 pesticides are an essential for agricultural products, and protect our food supply. organophosphorus pesticides are the main paddy pesticides in china, accounting for more than 70% of the use of pesticides. among them, methamidophos, acephate, dichlorvos, dimethoate oxygen, dimethoate, parathion, m

6、alathion, methyl parathion, chlorpyrifos and other varieties play an important role. this thesis explores an efficient separation, three younger duiliulin content of methyl method. through the use of ultrasonic extraction solvent, acetone, as to determine the best three younger duiliulin methyl time

7、, power and extraction doses. for chinese herbal medicine of methyl duiliulin detect pesticide residues to provide the reference.keywords: panax notoginseng; parathion methyl; ultrasonic extraction;gas chromatography目 錄1緒論21.1 引言21.1.1 三七簡(jiǎn)介21.1.2 有機(jī)磷類(lèi)農(nóng)藥的種類(lèi)21.1.3 有機(jī)磷類(lèi)農(nóng)藥的危害21.1.4、有機(jī)磷類(lèi)農(nóng)藥的提取、檢測(cè)方法研究21.2

8、甲基對(duì)硫磷41.2.1 甲基對(duì)硫磷理化性質(zhì)41.2.2 甲基對(duì)硫磷氣相色譜測(cè)定意義41.2.3 甲基對(duì)硫磷提取、純化及檢測(cè)方法綜述52 實(shí)驗(yàn)部分62.1 甲基對(duì)硫磷標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制62.1.1 試劑及儀器62.1.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制62.1.3 甲基對(duì)硫磷的氣相色譜測(cè)定62.1.4 甲基對(duì)硫磷標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制112.2 甲基對(duì)硫磷標(biāo)準(zhǔn)品的提取及純化122.2.1 試劑及儀器122.2.2 超聲波提取條件選擇122.2.3 提取劑的配制132.2.4 提取樣品的純化133 結(jié)果與討論143.1 提取條件的選擇143.1.1 提取時(shí)間選擇143.1.2 提取功率選擇143.1.3 提取溶劑劑量選擇15

9、3.1.4 三七樣品的處理153.1.5 三七樣品氣相色譜圖153.1.6 甲基對(duì)硫磷含量計(jì)算164 展望17參考文獻(xiàn)18致謝20 1緒論1.1 引言1.1.1 三七簡(jiǎn)介 三七（panax notoginseng），又叫田七，因枝分三叉，葉為七片，故稱(chēng)為三七。三七在春冬兩季采挖，又分為春七和冬七。云南文山是是全國(guó)的三七生產(chǎn)地和原產(chǎn)地，三七具有止血、活血化瘀、降低血脂、膽固醇、抑制動(dòng)脈硬化等多種功能，并且三七的花和根都可以入藥。到目前為止，從三七中分離得到的化學(xué)成分主要有皂苷、黃酮、揮發(fā)油、氨基酸、多糖、淀粉、蛋白質(zhì)等以及部分無(wú)機(jī)化學(xué)成分如氮、磷、鉀等大量元素和鈷、鉬、銫等微量元素。本實(shí)驗(yàn)所用的

10、樣品為三七粉（灰黃色），三七粉是用三七主根粉碎而成的粉。 圖11 產(chǎn)自云南文山的三七1.1.2 有機(jī)磷類(lèi)農(nóng)藥的種類(lèi) 有機(jī)磷農(nóng)藥是一種含有磷原子的有機(jī)脂類(lèi)化合物，在體內(nèi)與膽堿酯酶形成磷酸化膽堿酯酶，使膽堿酯酶活性受抑制，而產(chǎn)生毒性的一類(lèi)農(nóng)藥的總稱(chēng)。大多為磷酸脂類(lèi)和硫代磷酸酯類(lèi)。 其種類(lèi)主要為： 劇毒類(lèi)：ld5010mg/kg,甲拌磷，對(duì)硫磷，內(nèi)吸磷高毒類(lèi)：ld50:10-100mg/kg,甲基對(duì)硫磷，甲胺磷，氧樂(lè)果，敵敵畏中毒類(lèi)：ld50:100-1000mg/kg,樂(lè)果，乙硫磷，敵百蟲(chóng)低毒類(lèi)：ld50:1000-5000mg/kg,馬拉硫磷（ld50:大鼠經(jīng)口） 在三七種植過(guò)程中一些藥農(nóng)使用農(nóng)

11、藥的方式方法也不科學(xué)；有些藥農(nóng)片面追求產(chǎn)量，盲目過(guò)度使用農(nóng)藥，這些都給人工種植的中草藥的質(zhì)量造成一定的影響。而文獻(xiàn)報(bào)道多為食品、蔬菜、谷物、飼料、水果等有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量的測(cè)定方法，鮮有中草藥有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量測(cè)定方法的報(bào)道。為了把握中草藥的質(zhì)量，建立這些中草藥有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量的定性或定量分析方法是非常必要的。本論文主要側(cè)重研究三七中甲基對(duì)硫磷的提取、純化及檢測(cè)。1.1.3 有機(jī)磷類(lèi)農(nóng)藥的危害 有機(jī)磷農(nóng)藥是用于防治植物病、蟲(chóng)害的含有機(jī)磷農(nóng)藥的有機(jī)化合物。這一類(lèi)農(nóng)藥品種多、藥效高，用途廣，易分解，在人、畜體內(nèi)一般不積累，在農(nóng)藥中是極為重要的一類(lèi)化合物。但有不少品種對(duì)人、畜的急性毒性很強(qiáng)，在使用時(shí)特別

12、要注意安全，近年來(lái)，高效低毒的品種發(fā)展很快，逐步取代了一些高毒品種，使有機(jī)磷農(nóng)藥的使用更安全有效。我國(guó)農(nóng)藥污染面積大，影響范圍廣。我國(guó)是一個(gè)農(nóng)業(yè)大同，農(nóng)藥使用品種多，用量大，其中7080的農(nóng)藥直接散落到環(huán)境中，對(duì)土壤、地表水、地下水和農(nóng)產(chǎn)品造成污染。并進(jìn)一步進(jìn)入生物鏈，對(duì)整個(gè)環(huán)境生物和人類(lèi)自身都有影響。一旦產(chǎn)生危害，其后果不堪設(shè)想。所以繼續(xù)開(kāi)發(fā)高效、低殘、低毒農(nóng)藥尤為重要。開(kāi)發(fā)各種能消除環(huán)境中農(nóng)藥污染的技術(shù)和產(chǎn)品，將污染產(chǎn)生的危害和損失降到最低限度。加強(qiáng)農(nóng)藥在環(huán)境中遷移、轉(zhuǎn)化規(guī)律及毒理學(xué)研究，弄清農(nóng)藥對(duì)環(huán)境生態(tài)危害和人體毒害作用的機(jī)制。為農(nóng)藥環(huán)境安全管理、農(nóng)藥科學(xué)合理使用。新農(nóng)藥品種開(kāi)發(fā)等提供

13、科學(xué)依據(jù)。在有機(jī)磷類(lèi)農(nóng)藥中以甲基對(duì)硫磷為代表的氣相色譜測(cè)定，為有機(jī)磷類(lèi)農(nóng)殘檢測(cè)提供依據(jù)。1.1.4、有機(jī)磷類(lèi)農(nóng)藥的提取、檢測(cè)方法研究農(nóng)藥殘留分析的一般步驟為：提取純化檢測(cè)。在農(nóng)藥殘留測(cè)定之前要有適合于各種蔬菜食品和目標(biāo)物化學(xué)性質(zhì)的萃取、凈化、濃縮等前步驟，這些前處理過(guò)程在分析中起決定作用。鑒于不同食品或植物中的農(nóng)藥提取有各自的特殊性，因此針對(duì)不同的目標(biāo)物需采用不同的提取純化方法和不同的檢測(cè)方法。農(nóng)藥殘留采用有機(jī)溶劑提取目標(biāo)分析物，常用的提取純化方法有冷浸、熱回流、超聲波、微波等。目前主要研究最多的是各類(lèi)蔬菜、水果中農(nóng)殘的檢測(cè)，對(duì)于三七的研究還甚少。 微波提取方法的原理是在微波場(chǎng)中，吸收微波能力

14、的差異使得基體物質(zhì)的某些區(qū)域或萃取體系中的某些組分被選擇性加熱，從而使得被萃取物質(zhì)從基體或體系中分離，進(jìn)入到介電常數(shù)較小、微波吸收能力相對(duì)差的萃取劑中11；楊云等采用微波萃取，萃取率高達(dá)90%以上，且微波萃取具有設(shè)備簡(jiǎn)單、適用范圍廣、萃取效率高、重現(xiàn)性好、節(jié)省時(shí)間、節(jié)省試劑、污染小等特點(diǎn)。目前，除主要用于環(huán)境樣品預(yù)處理外，還用于生化、食品、工業(yè)分析和天然產(chǎn)物提取等領(lǐng)域12。超聲提取技術(shù)的基本原理主要是利用超聲波的空化作用加速植物有效成分的浸出提取，另外超聲波的次級(jí)效應(yīng)，如機(jī)械振動(dòng)、乳化、擴(kuò)散、擊碎、化學(xué)效應(yīng)等也能加速欲提取成分的擴(kuò)散釋放并充分與溶劑混合，利于提取。與常規(guī)提取法相比，具有提取時(shí)間

15、短、產(chǎn)率高、無(wú)需加熱等優(yōu)點(diǎn)。根據(jù)有機(jī)磷農(nóng)藥的化學(xué)特性和毒理學(xué)性質(zhì)，目前常用的檢測(cè)方法有紫外可見(jiàn)分光光度法、氣相色譜法、高效液相色譜法。 紫外可見(jiàn)分光光度法是根據(jù)有機(jī)磷農(nóng)藥中的一些官能團(tuán)或水解、還原產(chǎn)物與特殊的顯色劑在一定的條件下，發(fā)生氧化、磺酸化、酯化、絡(luò)合等化學(xué)反應(yīng)，產(chǎn)生特定波長(zhǎng)的顏色反應(yīng)來(lái)進(jìn)行定性或定量測(cè)定。它的檢測(cè)限雖然可以達(dá)到ug級(jí)，但波譜法一次只能測(cè)定一種或相同基團(tuán)的一類(lèi)有機(jī)磷農(nóng)藥，且此種方法靈敏度不高，一般只能作為鑒別方法粗選。 氣相色譜法具有分離效能高，選擇性高，靈敏度高，分析速度快和應(yīng)用范圍廣等特點(diǎn)。是有機(jī)磷農(nóng)藥測(cè)定的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法。其中應(yīng)用于有機(jī)磷檢測(cè)的檢測(cè)器主要有氯磷檢測(cè)器(

16、fpd)，氮磷檢測(cè)器(npd)等。該方法是利用經(jīng)提取、凈化、濃縮后的有機(jī)磷農(nóng)藥注入氣相色譜柱，程序升溫后，不同的有機(jī)磷農(nóng)藥在固定相中分離，經(jīng)不同的檢測(cè)器檢測(cè)掃描繪出氣相色譜圖，通過(guò)保留時(shí)間來(lái)定性，通過(guò)峰或峰面積與標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)照來(lái)定量。一次可同時(shí)測(cè)定多個(gè)組分，簡(jiǎn)便快捷，靈敏度高，準(zhǔn)確性好13。 高效液相色譜法是在液相柱層析的基礎(chǔ)上，引入氣相色譜理論并加以改進(jìn)而發(fā)展起來(lái)的分析方法。與氣相色譜法比較，不僅分析效能好，靈敏度高檢測(cè)速度快，而且應(yīng)用面廣。對(duì)于氣相色譜法分析時(shí)熱不穩(wěn)定和極性較差以及易于在g c 柱上發(fā)生吸附的有機(jī)磷農(nóng)藥高效液相色譜法顯示出明顯的優(yōu)勢(shì)14。 氣相色譜中的fpd氯磷檢測(cè)器是針對(duì)有

17、機(jī)磷類(lèi)檢測(cè)最佳儀器，其檢測(cè)靈敏度為10。甲基對(duì)硫磷是有機(jī)磷類(lèi)的典型，故選用氣相色譜檢測(cè)較宜。1.2 甲基對(duì)硫磷1.2.1 甲基對(duì)硫磷理化性質(zhì) 英文通用名稱(chēng)： parathionmethyl 中文名稱(chēng)：甲基對(duì)硫磷 化學(xué)結(jié)構(gòu)式： 分子式：chopsn 相對(duì)分子質(zhì)量：263.13 理化性質(zhì)：甲基對(duì)硫磷是一種有機(jī)磷殺蟲(chóng)劑。純品是白色針狀晶體，有臭味。密度1.352。熔點(diǎn)3636.5，沸點(diǎn)158。工業(yè)品是黃色油狀液體，難溶于水和石油。易溶于苯、二甲苯、丙酮、二氯乙烷等。在堿溶液中較對(duì)硫磷更易水解，用途與對(duì)硫磷相象?？杉庸こ煞蹌?、可濕性粉劑和乳劑使用。其殺蟲(chóng)藥效與對(duì)硫磷相同，但對(duì)人畜的毒性較對(duì)硫磷小三倍。

18、1.2.2 甲基對(duì)硫磷氣相色譜測(cè)定意義 氣相色譜法具有分離效能高，選擇性高，靈敏度高，分析速度快和應(yīng)用范圍廣等特點(diǎn)。是有機(jī)磷農(nóng)藥測(cè)定的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法。其中應(yīng)用于有機(jī)磷檢測(cè)的檢測(cè)器主要有氯磷檢測(cè)(fpd)、氮磷檢測(cè)器(npd)等。該方法是利用經(jīng)提取、凈化、濃縮后的有機(jī)磷農(nóng)藥注入氣相色譜柱，不同的有機(jī)磷農(nóng)藥在固定相中分離，經(jīng)不同的檢測(cè)器檢測(cè)掃描繪出氣相色譜圖，通過(guò)保留時(shí)間來(lái)定性，通過(guò)峰或峰面積與標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)照來(lái)定量。一次可同時(shí)測(cè)定多個(gè)組分，簡(jiǎn)便快捷，靈敏度高，準(zhǔn)確性好。甲基對(duì)硫磷是有機(jī)磷類(lèi)農(nóng)藥中的典型農(nóng)藥，對(duì)其檢測(cè)可以檢測(cè)出各類(lèi)農(nóng)作物或中草藥中甲基對(duì)硫磷的含量，為甲基對(duì)硫磷的殘留量檢測(cè)檢測(cè)提供理論依據(jù)

19、，給食品安全檢測(cè)提供理論基礎(chǔ)。1.2.3 甲基對(duì)硫磷提取、純化及檢測(cè)方法綜述 根據(jù)甲基對(duì)硫磷理化性質(zhì)，以及目前已有的針對(duì)有機(jī)磷農(nóng)藥提取檢測(cè)方法的優(yōu)缺點(diǎn)，通過(guò)比較超聲波和微波的特點(diǎn)可以選超聲波提取法。三七粉中成分比較復(fù)雜含有脂肪、蠟質(zhì)、色素等雜質(zhì)。為了避免殘余雜質(zhì)的影響，采用柱層析法對(duì)提取液進(jìn)行凈化，硅藻土能大量吸附脂肪、蠟質(zhì)、色素等雜質(zhì)，凈化方法采用硅藻土和無(wú)水硫酸鈉兩者聯(lián)合裝柱。鑒于實(shí)驗(yàn)室條件，有機(jī)磷類(lèi)農(nóng)藥大都含有共軛雙鍵，采用光譜掃描時(shí)會(huì)有較大吸收峰且根據(jù)氣相色譜fpd檢測(cè)器對(duì)有機(jī)磷的檢出限較高，所以檢測(cè)方法選擇氣相色譜法進(jìn)行檢測(cè)。2 實(shí)驗(yàn)部分2.1 甲基對(duì)硫磷標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 2.1.1

20、試劑及儀器試劑：甲基對(duì)硫磷標(biāo)準(zhǔn)品（parathionmethyl 德國(guó)dr公司 純度99.5）；丙酮（分析純）；正己烷（分析純）；活性炭；電子天平。儀器：gc122氣相色譜帶fpd氫火焰離子檢測(cè)器（上海儀器三廠）； 分析天平(梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司，ar1140)；常規(guī)玻璃儀器：容量瓶10ml；錐形瓶100ml ；移液管2ml；移液管 1ml；量筒25ml；量筒20ml。2.1.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制由于農(nóng)殘檢測(cè)中甲基對(duì)硫磷濃度的不確定性所以標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度的配制需要有不同梯度（從高濃度到低濃度呈倍數(shù)稀釋?zhuān)７謩e配成濃度為：0.01102mg/ml、0.00511mgl/ml、0.0036

21、7 mg/ml、0.00276 mg/ml、0.00220 mg/ml。其濃度梯度分別是最高濃度（0.01102 mg/l）的、。從而繪制出甲基對(duì)硫磷的標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.1.3 甲基對(duì)硫磷的氣相色譜測(cè)定2.1.3.1 氣相色譜工作原理：是利用試樣中各組份在氣相和固定液液相間的分配系數(shù)不同，當(dāng)汽化后的試樣被載氣帶入色譜柱中運(yùn)行時(shí)，組份就在其中的兩相間進(jìn)行反復(fù)多次分配，由于固定相對(duì)各組份的吸附或溶解能力不同， 因此各組份在色譜柱中的運(yùn)行速度就不同，經(jīng)過(guò)一定的柱長(zhǎng)后，便彼此分離，按順序離開(kāi)色譜柱進(jìn)入檢測(cè)器，產(chǎn)生的離子流訊號(hào)經(jīng)放大后，在記錄器上描繪出各組份的色譜峰。2.1.3.2 甲基對(duì)硫磷標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

22、用電子天平準(zhǔn)確稱(chēng)取甲基對(duì)硫磷標(biāo)準(zhǔn)品0.0029g放于10ml容量瓶中，取10ml丙酮將甲基對(duì)硫磷稀釋成濃度為0.01102mg/l的標(biāo)準(zhǔn)樣液a號(hào)瓶。取a號(hào)瓶的標(biāo)準(zhǔn)樣1ml于10ml容量瓶中，在容量瓶中加入1ml丙酮，配成濃度為a號(hào)瓶濃度的。記為b號(hào)瓶。濃度為0.00551mg/ml。取a號(hào)瓶的標(biāo)準(zhǔn)樣1ml于10ml容量瓶中，在容量瓶中加入2ml丙酮，配成濃度為a號(hào)瓶濃度的，記為c號(hào)瓶。濃度為0.00367mg/ml。取a號(hào)瓶的標(biāo)樣1ml于10ml容量瓶中，在容量瓶中加入3ml丙酮，配成濃度為a號(hào)瓶濃度的，記為d號(hào)瓶，其濃度為0.00276mg/ml。取a號(hào)瓶的標(biāo)樣1ml于10ml容量瓶中，在容

23、量瓶中加入4ml丙酮，配成濃度為a號(hào)瓶濃度的，記為e號(hào)瓶，濃度為0.00220mg/ml。用一個(gè)潔凈、干燥的10ml容量瓶在其中加入10ml丙酮，作空白對(duì)照。將配制好的樣品封好口存放于冰箱中，備用。 2.1.3.2 色譜條件操作條件色譜柱：石英玻璃柱，內(nèi)徑2mm，長(zhǎng)3m。涂有1.0m 厚的氣相色譜用50%三氟丙基-甲基硅酮，老化 進(jìn)樣器：10ul 色譜柱溫度：200（通過(guò)多天的摸索固定溫度比程序升溫較利于測(cè)量，故選擇固定色譜柱溫度為200）進(jìn)樣器溫度：230檢測(cè)器溫度：230氮?dú)猓杭兌?9.9，70ml/min空氣：62ml/min氫氣：65ml/min2.1.3.3色譜測(cè)定用丙酮潤(rùn)洗10ul

24、進(jìn)樣器三次，然后從進(jìn)樣口注入10ul丙酮，通過(guò)氣相色譜檢測(cè)后其色譜圖為： 圖21 丙酮（f號(hào)瓶）氣相色譜圖將甲基對(duì)硫磷濃度為0.01102mg/ml的a號(hào)瓶通過(guò)氣相色譜測(cè)定，其色譜圖為： 圖22 a號(hào)瓶氣相色譜圖將甲基對(duì)硫磷濃度為0.00551mg/l的b號(hào)瓶通過(guò)氣相色譜測(cè)定，其色譜圖為： 圖23 b號(hào)瓶氣相色譜圖將甲基對(duì)硫磷濃度為0.00367mg/ml的c號(hào)瓶通過(guò)氣相色譜測(cè)定，其色譜圖為： 圖24 c號(hào)瓶氣相色譜圖將甲基對(duì)硫磷濃度為0.00276mg/ml的d號(hào)瓶通過(guò)氣相色譜測(cè)定，其色譜圖為： 圖25 d號(hào)瓶氣相色譜圖將甲基對(duì)硫磷濃度為0.00220mg/ml的e號(hào)瓶通過(guò)氣相色譜測(cè)定，其色

25、譜圖為： 圖26 e號(hào)瓶氣相色譜圖2.1.3.4 將圖22至圖27六個(gè)圖形中甲基對(duì)硫磷的峰高、濃度、保留時(shí)間做表格為： 表21 峰高、濃度樣品號(hào)甲基對(duì)硫磷濃度（mg/ml） 峰高甲基對(duì)硫磷保留時(shí)間（min） f(丙酮) 0 0 0 a 0.01102 17588.652 11.865 b 0.00551 8064.151 11.832 c 0.00367 5659.308 11.832 d 0.00267 5291.444 11.773 e 0.0022 3070.095 11.7982.1.4 甲基對(duì)硫磷標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 把甲基對(duì)硫磷的峰高與甲基對(duì)硫磷的濃度用作圖工具origin 7.5 作圖

26、得到甲基對(duì)硫磷氣相色譜標(biāo)準(zhǔn)曲線。用峰高、濃度作圖得到的甲基對(duì)硫磷標(biāo)準(zhǔn)曲線為： 圖27 甲基對(duì)硫磷濃度峰高標(biāo)準(zhǔn)曲線圖10線性擬合分析結(jié)果為：線性回歸方程為：y22.84558157465.4028x （21） r值為：0.999512.2 甲基對(duì)硫磷標(biāo)準(zhǔn)品的提取及純化2.2.1 試劑及儀器 試劑：市售三七粉（灰黃色）； 丙酮（分析純）； 正己烷（分析純）； 無(wú)水naso（分析純）； 硅藻土。 儀器：旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海愛(ài)朗儀器有限責(zé)公司，n-1001；) 分析天平(梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司，ar1140)； 超聲波振蕩清洗儀（上海科導(dǎo)超聲儀器有限公司）； 層析柱（25cm10mm i.d.

27、）；常規(guī)玻璃儀器：10ml容量瓶；100ml錐形瓶；2ml移液；1ml移液管；25ml量筒；20ml量筒。 2.2.2 超聲波提取條件選擇利用甲基對(duì)硫磷標(biāo)準(zhǔn)品配制成濃度在甲基對(duì)硫磷標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍濃度內(nèi)來(lái)檢測(cè)甲基對(duì)硫磷的最佳提取條件。回收率計(jì)算具體步驟為： 通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線找到c濃度下對(duì)應(yīng)的峰高h(yuǎn)； 利用超聲波提取后通過(guò)公式c1v1=c2v2計(jì)算出提取后甲基對(duì)硫磷濃度c2 ； 利用c2在標(biāo)準(zhǔn)曲線上找到對(duì)應(yīng)的峰高h(yuǎn)，h為提取前c1濃度下對(duì)應(yīng)的峰高。（或利用線性回歸方程帶入數(shù)據(jù)計(jì)算）； 回收率ph/h； （22） 回收率pv/v； （23） 利用式22、23求出回收率，將p、p求其平均值填入回收率表格中。

28、2.2.3 提取劑的配制 利用超聲波提取甲基對(duì)硫磷標(biāo)準(zhǔn)，選擇提取時(shí)間、提取功率、提取溶劑量三個(gè)因素提取正交實(shí)驗(yàn)。進(jìn)而得到最佳提取條件。 準(zhǔn)確稱(chēng)去甲基對(duì)硫磷標(biāo)準(zhǔn)品0.08203g于100ml容量瓶中用丙酮定容至刻度，其濃度為0.00312mg/ml（濃度范圍在標(biāo)準(zhǔn)曲線內(nèi)）。通過(guò)orgin上面找到濃度為0.03105mg/ml時(shí)對(duì)應(yīng)的峰高h(yuǎn)4909.60135。按照不同提取時(shí)間（20min、24min、26min、28min、30min、32min），不同提取功率（90、95、100）及不同提取劑量進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，得出結(jié)果并計(jì)算出回收率。2.2.4 提取樣品的純化、根據(jù)文獻(xiàn)得知提取樣品的純化一般選擇硅藻

29、土柱層析法進(jìn)行提純分離。、層析柱（15cm10mm id ）的填充（自下而上）：層析柱（15cm10mm ）自下而上裝填：一層濾紙、3g無(wú)水硫酸鈉、4g硅藻土、3g無(wú)水硫酸鈉，用20ml正己烷預(yù)淋洗層析柱。 樣品洗脫：以10mlv(正己烷)v(二氯甲烷)=9：1的混合液洗滌圓底燒瓶，并將洗滌液轉(zhuǎn)入柱中；以10mlv(正己烷)v(丙酮)=6：4的混合液及10mlv(丙酮)v(甲醇)=1：1的混合液洗脫。、將市售三七粉通過(guò)提取處理后通過(guò)層析柱進(jìn)行過(guò)濾提純。 在甲基對(duì)硫磷標(biāo)準(zhǔn)品的 氣相色譜條件下進(jìn)行氣相檢測(cè)。 3 結(jié)果與討論3.1 提取條件的選擇 實(shí)驗(yàn)主要利用微波對(duì)不同提取時(shí)間、不同提取功率、不同提

30、取劑劑量的正交實(shí)驗(yàn)進(jìn)而得出最佳提取條件，通過(guò)實(shí)驗(yàn)其結(jié)果如下：3.1.1 提取時(shí)間選擇（谷物中甲基對(duì)硫磷提取時(shí)間為15min）表31 超聲波提取時(shí)間選擇提取樣品號(hào)提取時(shí)間（min）提取功率溶劑量（ml）提取后體積（ml）回收率（）110 9054.2685.25212 9054.3186.70314 9054.3787.254169054.4087.345189054.6092.356209054.3286.307229054.2885.57 通過(guò)上表可知提取時(shí)間在18min時(shí)，其回收率最高。3.1.2 提取功率選擇（平行三次實(shí)驗(yàn)取平均值計(jì)算功率） 表32 提取功率選擇提取樣品號(hào)提取時(shí)間（min

31、）提取功率（）溶劑量（ml）提取后體積（ml）回收率（）1 189054.5891.80218 9554.6292.06318 10054.8095.14通過(guò)表格中數(shù)據(jù)得知微波提取功率在95時(shí)回收率最高。3.1.3 提取溶劑劑量選擇 表33 提取劑量的選擇提取樣品號(hào)提取時(shí)間（min）提取功率（）溶劑量（ml）提取后體積（ml）回收率（）1 1895 21.80 90.342 1895 32.71 91.223 1895 43.70 92.30.4 1895 54.73 92.735 1895 64.95 92.14 從表三中可以看出在溶劑量為4ml、5ml、6ml時(shí)回收率較高，其回收率差別不大

32、。鑒于甲基對(duì)硫磷標(biāo)準(zhǔn)溶液的價(jià)格昂貴故選擇溶劑量選擇5ml較適宜。從圖上可以看出提取劑量多少對(duì)回收率影響不大。 通過(guò)對(duì)表1、表2、表3的正交實(shí)驗(yàn)分析得知，甲基對(duì)硫磷的提取最適宜條件為：采用微波提取功率95；提取時(shí)間為18min；提取試劑量為5ml。3.1.4 三七樣品的處理用分析天平稱(chēng)取1.2058g三七粉于三支離心管中，分別加入5ml丙酮于超聲波中提取18min（功率95）。將提取液放入3000轉(zhuǎn)/min的離心機(jī)中離心15min后取出，通過(guò)柱層析后，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀揮干約23ml左右，將濾液轉(zhuǎn)移至10ml容量瓶中用氣相色譜檢測(cè)。3.1.5 三七樣品氣相色譜圖通過(guò)對(duì)上述濾液的氣相色譜分析，其色譜圖為

33、（選取最好的出峰圖為）： 圖31 三七樣品峰氣相色譜圖3.1.6 甲基對(duì)硫磷含量計(jì)算 甲基對(duì)硫磷的標(biāo)準(zhǔn)品的平均出峰時(shí)間為： （31） 通過(guò)三七樣品提純氣相色譜圖及導(dǎo)出的數(shù)據(jù)得：在保留時(shí)間為11.820min左右時(shí)其峰高為370.154（其峰高不明顯）。 將峰高為370.154在標(biāo)準(zhǔn)曲線上找到其對(duì)應(yīng)的濃度為1.84287510mg/ml。 所以在三七樣品中甲基對(duì)硫磷殘留量為：m1.84287510 mg/ml 4 ml263.13g/mol=0.000194gs=0.194ug/g（含量較少）參考文獻(xiàn)1 沈群超，陳華才稻米中九種有機(jī)磷殺蟲(chóng)劑多殘留測(cè)定方法研究j安徽農(nóng)學(xué)通報(bào),anhui agri1

34、sci1bull12007, 13 (7) : 72 742 張文玉論中藥材污染的防治與控制j藥學(xué)實(shí)踐雜志，2005，23(6)3363 明亮，婁遠(yuǎn)來(lái)國(guó)內(nèi)外農(nóng)藥劑型研究進(jìn)展及發(fā)展方向j江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2007(6):102-1054 呂寧，吳志鳳，劉邵仁農(nóng)藥助劑的管理需逐步完善j農(nóng)藥科學(xué)與管理，2007，25（1）：49255 林文化，羅惠明，蔡穎等蔬菜和水果中有機(jī)磷類(lèi)農(nóng)藥的雙柱氣相色譜測(cè)定法j 環(huán)境與健康雜志，2008年11月第25卷第11期6 高桂枝，王圣巍，王俏，呂俊芳等.殘留農(nóng)藥污染危害及其防治j延安大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)2002年01期7 梅文全，龔其萬(wàn)，佴注花椰菜中乙酰甲胺磷、氧化樂(lè)

35、果兩種農(nóng)藥殘留的分離測(cè)定j云南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2004年12月 第6期 第12卷8 柯華,劉巧,鄭申西等氣相色譜ecdfpd檢測(cè)器串接法測(cè)定蔬菜水果中農(nóng)藥殘留量j中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜質(zhì)，2006年9月 第16期 第9卷9 賀敏，鐵柏清，戴榮彩，陳莉，余平中等青油菜中乙酰甲胺磷、甲胺磷殘留量的gc/ms分析j農(nóng)藥agrochemicals，2008年2月第47卷 第2期10 馬麗娜，邵彥來(lái)，何貺，游永，王青霞，郝小磊等氣相色譜法測(cè)定黃瓜中9種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留方法研究，pesticide science and administrationj2006, 25( 7) 農(nóng)藥科學(xué)與管理11 隋吳彬中藥材中多種有

36、機(jī)磷農(nóng)藥殘留量測(cè)定方法研究j安徽農(nóng)業(yè)科學(xué), 2008,36(5):1942-194312 王慧，張朝輝，盧小宇等氣相色譜法測(cè)定韭菜中有機(jī)磷類(lèi)農(nóng)藥殘留量j 北京科技大學(xué)學(xué)報(bào)，2006年5月第5期第28卷13 陳智東，陳浩.一種快速測(cè)定蔬菜中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的氣相色譜前處理方法j.農(nóng)業(yè)科學(xué)與管pesticide science and administration 2008, 29( 10) 14 易軍，葉江雷，鄭文慧等氣相色譜法測(cè)定茶葉中的噻嗪酮、 甲胺磷、乙酰甲胺磷及三唑磷殘留j 廈門(mén)大學(xué)海洋與環(huán)境學(xué)院，2004年3月第二卷15415715 朱明華儀器分析(第三版) m高等教育出版社，第2章第3

37、節(jié)16 對(duì)硫磷原藥 parathion technical中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)m gb 2 8 9 7 一 199517 甲 胺 磷 原 藥 methamidophos technical中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)m.gb 15954-1995 18 出口水果中樂(lè)果、甲基對(duì)硫磷殘留量檢驗(yàn)方法jsno2919319 黃曉梅，錢(qián)翌氣相色譜法測(cè)定有機(jī)磷農(nóng)藥殘留方法研究j 陜西農(nóng)業(yè)科學(xué)2007(1) 20 高天兵,陳建民等.中藥中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量的毛細(xì)管氣相色譜測(cè)定方法j.1999,18(5):15-1721 中華人民共和國(guó)國(guó)家環(huán)境保護(hù)標(biāo)準(zhǔn)m.hj 77.1200822 楊磊，高彥華，祖元?jiǎng)?，祖述沖等.中壓硅膠柱層析連續(xù)純化茶葉中egcg及 ecg的研究j.林產(chǎn)化學(xué)與工業(yè)，第 27卷第 2期2007年 4月致謝 本論文是在易平導(dǎo)師悉心指導(dǎo)和幫助下完成的，易老師學(xué)識(shí)淵博，專(zhuān)業(yè)知識(shí)深刻。嚴(yán)謹(jǐn)?shù)慕虒W(xué)態(tài)度，平易近人的高尚師德。本論文從選題到完成，每一步都是在導(dǎo)師的指導(dǎo)下完成的，傾注了導(dǎo)師大量的心血。在此我對(duì)易老師不甚感激，謹(jǐn)向易平老師表示崇高的敬意和由衷的感謝。 我的論文能夠順利的完成還離不開(kāi)各位老師和同學(xué)們的幫助。感謝劉衛(wèi)老師給我這個(gè)們這個(gè)研究項(xiàng)目的機(jī)會(huì)，感謝李自靜老師悉心的幫我完成氣相色譜的測(cè)定，感謝閔勇老師給我們安排實(shí)驗(yàn)的地方，同時(shí)感謝白占鴻老師、肖銳敏老師對(duì)我