主要組織相容性抗原系統(tǒng) powerpoint 演示文稿

1、 需要掌握的重點(diǎn)需要掌握的重點(diǎn) 1、器官移植過(guò)程中發(fā)生排斥反應(yīng)的原因、器官移植過(guò)程中發(fā)生排斥反應(yīng)的原因 2、MHC的基本概念的基本概念 3、人類、人類HLA復(fù)合體在染色體上的分布復(fù)合體在染色體上的分布 4、HLA-I和和II類抗原分子的結(jié)構(gòu)和分布特點(diǎn)類抗原分子的結(jié)構(gòu)和分布特點(diǎn) 5、MHC-I和和II類抗原分子的主要功能類抗原分子的主要功能 6、T細(xì)胞只能識(shí)別細(xì)胞只能識(shí)別MHC-抗原肽復(fù)合物抗原肽復(fù)合物 George D. Snell 1930s 發(fā)現(xiàn)腫瘤細(xì)胞在同系小鼠體發(fā)現(xiàn)腫瘤細(xì)胞在同系小鼠體 內(nèi)可以長(zhǎng)期生存，但在不同品系的小鼠體內(nèi)不能生存。內(nèi)可以長(zhǎng)期生存，但在不同品系的小鼠體內(nèi)不能生存。 非

2、腫瘤細(xì)胞也具有相同的特點(diǎn)。非腫瘤細(xì)胞也具有相同的特點(diǎn)。 Skin from an inbred mouse grafted onto the same strain of mouse Skin from an inbred mouse grafted onto a different strain of mouse ACCEPTED REJECTED Genetic basis of transplant rejection Inbred mouse strains - all genes are identical Transplantation of skin between strain

3、s showed that rejection or acceptance was dependent upon the genetics of each strain 根據(jù)實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象提出的問(wèn)題：根據(jù)實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象提出的問(wèn)題： 1、這種排斥反應(yīng)的本質(zhì)是什么？、這種排斥反應(yīng)的本質(zhì)是什么？ 2、這種排斥反應(yīng)的發(fā)生是否與遺傳背景有關(guān)？、這種排斥反應(yīng)的發(fā)生是否與遺傳背景有關(guān)？ 3、導(dǎo)致排斥反應(yīng)發(fā)生的物質(zhì)是什么？、導(dǎo)致排斥反應(yīng)發(fā)生的物質(zhì)是什么？ 1980諾貝爾生理或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)獲得者：諾貝爾生理或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)獲得者： Baruj Benacerraf : USA ,Harvard Medical School Jean D

4、ausset : France, Universit de Paris, Laboratoire Immuno-Hmatologie George D. Snell : USA, Jackson Laboratory 6 months Transplant rejection is due to an antigen-specific immune response with immunological memory. Immunological basis of graft rejection Primary rejection of strain skin e.g. 10 days Sec

5、ondary rejection of strain skin e.g. 3 days Primary rejection of strain skin e.g. 10 days Nave mouse Lyc Transfer lymphocytes from primed mouse 排斥反應(yīng)的本質(zhì)是免疫應(yīng)答排斥反應(yīng)的本質(zhì)是免疫應(yīng)答 特異性特異性 記憶性記憶性 基本概念基本概念 組織相容性抗原（組織相容性抗原（histicompatibility antigen): 代表個(gè)體特異性的引起排斥反應(yīng)的同種異型抗原，叫，代表個(gè)體特異性的引起排斥反應(yīng)的同種異型抗原，叫， 也稱移植抗原。也稱移植抗原。

6、 主要組織相容性抗原系統(tǒng)（主要組織相容性抗原系統(tǒng)（major histocompatibility antigen): 在眾多的組織相容性抗原系統(tǒng)中，能引起強(qiáng)烈而迅速排斥在眾多的組織相容性抗原系統(tǒng)中，能引起強(qiáng)烈而迅速排斥 反應(yīng)的抗原系統(tǒng)，稱為，也叫主要組織相容性系統(tǒng)反應(yīng)的抗原系統(tǒng)，稱為，也叫主要組織相容性系統(tǒng) （major histocompatibility system,MHS)。 主要組織相容性抗原復(fù)合體（主要組織相容性抗原復(fù)合體（major histocompatibility complex,MHC): 編碼編碼MHS的基因在同一染色體上呈一組緊密連鎖的基因的基因在同一染色體上呈一組

7、緊密連鎖的基因 群，將這一連鎖群統(tǒng)稱為。群，將這一連鎖群統(tǒng)稱為。 MHS廣泛分布于脊椎動(dòng)物所有有核細(xì)胞的表面，化學(xué)成廣泛分布于脊椎動(dòng)物所有有核細(xì)胞的表面，化學(xué)成 分是脂蛋白或糖蛋白；分是脂蛋白或糖蛋白； MHS不僅參與移植排斥反應(yīng)，而且在機(jī)體免疫應(yīng)答過(guò)程不僅參與移植排斥反應(yīng)，而且在機(jī)體免疫應(yīng)答過(guò)程 中具有重要的調(diào)節(jié)作用；中具有重要的調(diào)節(jié)作用； MHS在不同物種動(dòng)物中的名稱不同，其中小鼠的在不同物種動(dòng)物中的名稱不同，其中小鼠的MHS稱稱 為為H-2系統(tǒng)，人的系統(tǒng)，人的MHS稱為人類白細(xì)胞抗原（稱為人類白細(xì)胞抗原（human leucocyte antigen,HLA)。 MHC位于同一染色體上，

8、具有控制同種移植排斥反應(yīng)、位于同一染色體上，具有控制同種移植排斥反應(yīng)、 免疫應(yīng)答和免疫調(diào)節(jié)等功能。免疫應(yīng)答和免疫調(diào)節(jié)等功能。 MHC在不同物種中處于的染色體位置不同，其中小鼠的在不同物種中處于的染色體位置不同，其中小鼠的 MHC又稱又稱H-2復(fù)合體，位于復(fù)合體，位于17號(hào)染色體上，而人類的號(hào)染色體上，而人類的HLA 則位于第則位于第6號(hào)染色體上。號(hào)染色體上。 基本特點(diǎn)基本特點(diǎn) HLA復(fù)合體及其編碼的產(chǎn)物復(fù)合體及其編碼的產(chǎn)物 HLA復(fù)合體位于復(fù)合體位于6號(hào)染色體的短臂上，其分布號(hào)染色體的短臂上，其分布 范圍大約范圍大約36004000 kb，含有至少，含有至少10個(gè)基因個(gè)基因 位點(diǎn)；位點(diǎn)； 根據(jù)

9、基因和編碼產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)和功能的不同，根據(jù)基因和編碼產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)和功能的不同， 將將HLA復(fù)合體分為三個(gè)區(qū)域，即復(fù)合體分為三個(gè)區(qū)域，即、類類 基因區(qū)?；騾^(qū)。 類基因區(qū)包含類基因區(qū)包含A、B、C、E、F、G、H 等位點(diǎn)；編碼化學(xué)結(jié)構(gòu)相似但抗原特異性不等位點(diǎn)；編碼化學(xué)結(jié)構(gòu)相似但抗原特異性不 同的同的HLA-A、B、C肽鏈，作為肽鏈，作為HLA-類分類分 子的重鏈，與子的重鏈，與15號(hào)染色體上號(hào)染色體上2微球蛋白基因微球蛋白基因 編碼產(chǎn)物，通過(guò)共價(jià)鍵結(jié)合后，成為編碼產(chǎn)物，通過(guò)共價(jià)鍵結(jié)合后，成為HLA- 類抗原。類抗原。 人人HLA復(fù)合體基因在染色體上的分布復(fù)合體基因在染色體上的分布 HLA-類分子類分子

10、的三維空間構(gòu)型圖的三維空間構(gòu)型圖 類基因區(qū)包含類基因區(qū)包含HLA-DP、DQ、DR等亞區(qū)，等亞區(qū)， 每個(gè)亞區(qū)中又包含多個(gè)基因位點(diǎn)。每個(gè)亞區(qū)中每個(gè)亞區(qū)中又包含多個(gè)基因位點(diǎn)。每個(gè)亞區(qū)中 的每個(gè)位點(diǎn)可以編碼不同的產(chǎn)物，這些產(chǎn)物兩的每個(gè)位點(diǎn)可以編碼不同的產(chǎn)物，這些產(chǎn)物兩 兩之間呈非共價(jià)鍵結(jié)合后共同組成兩之間呈非共價(jià)鍵結(jié)合后共同組成HLA-類抗類抗 原。原。 人人HLA復(fù)合體基因在染色體上的分布復(fù)合體基因在染色體上的分布 HLA類分子的三維構(gòu)型圖 類基因區(qū)內(nèi)含眾多編碼血清補(bǔ)體成分和其它血類基因區(qū)內(nèi)含眾多編碼血清補(bǔ)體成分和其它血 清蛋白的基因，參與免疫應(yīng)答的不同階段清蛋白的基因，參與免疫應(yīng)答的不同階段 H

11、LA-類和類和類抗原的分子結(jié)構(gòu)類抗原的分子結(jié)構(gòu) 1、肽結(jié)合區(qū)：結(jié)合多肽、肽結(jié)合區(qū)：結(jié)合多肽 2、免疫球蛋白樣區(qū)：結(jié)合、免疫球蛋白樣區(qū)：結(jié)合CD4或或CD8 3、跨膜區(qū)：錨定在細(xì)胞膜上、跨膜區(qū)：錨定在細(xì)胞膜上 4、胞內(nèi)區(qū)：信號(hào)傳遞、胞內(nèi)區(qū)：信號(hào)傳遞 I類抗原分子類抗原分子 II類抗原分子類抗原分子 肽結(jié)合區(qū)：結(jié)合多肽肽結(jié)合區(qū)：結(jié)合多肽 免疫球蛋白樣區(qū)：免疫球蛋白樣區(qū)： 結(jié)合結(jié)合CD4或或CD8 跨膜區(qū)：錨定在跨膜區(qū)：錨定在 細(xì)胞膜上細(xì)胞膜上 胞內(nèi)區(qū)：信號(hào)傳遞胞內(nèi)區(qū)：信號(hào)傳遞 MHC I類分子的結(jié)構(gòu)類分子的結(jié)構(gòu) 結(jié)合多肽結(jié)合多肽 結(jié)合結(jié)合CD8 MHC II類分子的結(jié)構(gòu)類分子的結(jié)構(gòu) 結(jié)合多肽結(jié)合多

12、肽 結(jié)合結(jié)合CD4 HLA-類分子抗原結(jié)合區(qū)的三維圖類分子抗原結(jié)合區(qū)的三維圖 HLA-類分子抗原結(jié)合區(qū)的三維圖類分子抗原結(jié)合區(qū)的三維圖 HLA- ,類分類分 子抗原肽復(fù)合物的子抗原肽復(fù)合物的 三維圖三維圖 HLA- ,類分子抗原肽復(fù)合物的三維圖類分子抗原肽復(fù)合物的三維圖 組織組織MHC I類分子類分子MHC II類分子類分子 T細(xì)胞細(xì)胞 B細(xì)胞細(xì)胞 巨噬細(xì)胞巨噬細(xì)胞 其他抗原提呈細(xì)胞其他抗原提呈細(xì)胞 胸腺上皮細(xì)胞胸腺上皮細(xì)胞 中性粒細(xì)胞中性粒細(xì)胞 肝細(xì)胞肝細(xì)胞 腎臟細(xì)胞腎臟細(xì)胞 腦細(xì)胞腦細(xì)胞 紅細(xì)胞紅細(xì)胞 + + + + + + + + + - +/- + + + + - - - - - HL

13、A-、類抗原的分布類抗原的分布 HLA-、類抗原的主要功能類抗原的主要功能 引起移植排斥反應(yīng)：引起移植排斥反應(yīng)： HLA抗原本身就是激發(fā)機(jī)體對(duì)移植物產(chǎn)生強(qiáng)抗原本身就是激發(fā)機(jī)體對(duì)移植物產(chǎn)生強(qiáng) 烈和快速排斥反應(yīng)的主要相容性抗原系統(tǒng)。烈和快速排斥反應(yīng)的主要相容性抗原系統(tǒng)。 抗原呈遞作用：抗原呈遞作用： 外來(lái)抗原被抗原呈遞細(xì)胞攝取和處理后，必外來(lái)抗原被抗原呈遞細(xì)胞攝取和處理后，必 須與須與MHC- 、類分子的肽結(jié)合區(qū)結(jié)合形成類分子的肽結(jié)合區(qū)結(jié)合形成 抗原肽抗原肽MHC分子復(fù)合體，該復(fù)合體經(jīng)轉(zhuǎn)運(yùn)表分子復(fù)合體，該復(fù)合體經(jīng)轉(zhuǎn)運(yùn)表 達(dá)于抗原呈遞細(xì)胞的表面，才能被相應(yīng)的淋巴達(dá)于抗原呈遞細(xì)胞的表面，才能被相應(yīng)的淋

14、巴 細(xì)胞識(shí)別，從而啟動(dòng)免疫應(yīng)答反應(yīng)。細(xì)胞識(shí)別，從而啟動(dòng)免疫應(yīng)答反應(yīng)。 Cell surface peptides of Ag Antigen recognition by T cells requires peptide antigens and presenting cells that express MHC molecules Y T T cell response No T cell response No T cell response No T cell response No T cell response Soluble native Ag Cell surface nativ

15、e Ag Soluble peptides of Ag Cell surface peptides of Ag presented by cells that express MHC antigens 抗原提呈細(xì)胞（抗原提呈細(xì)胞（antigen presenting cell，APC）：這類）：這類 細(xì)胞能夠攝取、加工、處理抗原并將抗原信息提呈給細(xì)胞能夠攝取、加工、處理抗原并將抗原信息提呈給 淋巴細(xì)胞。淋巴細(xì)胞。 專職專職APC：主要包括巨噬細(xì)胞，樹(shù)突狀細(xì)胞和：主要包括巨噬細(xì)胞，樹(shù)突狀細(xì)胞和B細(xì)胞。細(xì)胞。 能夠提呈能夠提呈MHC II 分子和抗原肽復(fù)合物。分子和抗原肽復(fù)合物。 抗原提呈：指抗原

16、提呈細(xì)胞將抗原加工處理、降解為抗原提呈：指抗原提呈細(xì)胞將抗原加工處理、降解為 多肽片段，并與多肽片段，并與MHC分子結(jié)合為多肽：分子結(jié)合為多肽：MHC分子復(fù)分子復(fù) 合物，而轉(zhuǎn)移至細(xì)胞表面，并與合物，而轉(zhuǎn)移至細(xì)胞表面，并與T細(xì)胞表面的細(xì)胞表面的TCR結(jié)合，結(jié)合， 成為成為TCR/抗原肽：抗原肽：MHC分子三元體，再被提呈給分子三元體，再被提呈給T淋淋 巴細(xì)胞的全過(guò)程。巴細(xì)胞的全過(guò)程。 Y T MHC directs the response of T cells to foreign antigens Graft rejection is an unnatural immune response

17、 Y T Ag Y T Ag Anti responseNo anti response MHC antigens PRESENT foreign antigens to T cells Cells that present antigen are ANTIGEN PRESENTING CELLS Y T Y T Y T Y T Y Blocking anti-MHC antibody Y Y Y 制約免疫細(xì)胞間的相互作用制約免疫細(xì)胞間的相互作用MHC限制性限制性 只有當(dāng)表達(dá)有抗原肽只有當(dāng)表達(dá)有抗原肽MHC復(fù)合物的復(fù)合物的APC，與起識(shí)，與起識(shí) 別和反應(yīng)作用的別和反應(yīng)作用的T細(xì)胞表面所表達(dá)的細(xì)

18、胞表面所表達(dá)的MHC分子相同時(shí)，分子相同時(shí)， 二者才能彼此作用而啟動(dòng)免疫應(yīng)答過(guò)程。二者才能彼此作用而啟動(dòng)免疫應(yīng)答過(guò)程。 T細(xì)胞表面的細(xì)胞表面的TCR在識(shí)別抗原肽的過(guò)程中，其表面的在識(shí)別抗原肽的過(guò)程中，其表面的 CD4/CD8分子必須同時(shí)識(shí)別分子必須同時(shí)識(shí)別APC上的上的MHC- / 類分類分 子的子的Ig樣區(qū)。樣區(qū)。 CD4分子結(jié)合分子結(jié)合MHC II類分子類分子 CD8分子結(jié)合分子結(jié)合MHC I類分子類分子 T細(xì)胞能夠識(shí)別細(xì)胞能夠識(shí)別 T細(xì)胞表面的細(xì)胞表面的MHC單倍單倍 體型為體型為MHC A APC細(xì)胞表面的細(xì)胞表面的MHC單單 倍體型為倍體型為MHC A T細(xì)胞不能夠識(shí)別細(xì)胞不能夠識(shí)別

19、 T細(xì)胞表面的細(xì)胞表面的MHC單倍單倍 體型為體型為MHC A APC細(xì)胞表面的細(xì)胞表面的MHC單單 倍體型為倍體型為MHC B 誘導(dǎo)胸腺內(nèi)前誘導(dǎo)胸腺內(nèi)前T細(xì)胞的分化細(xì)胞的分化 在在T細(xì)胞的發(fā)育過(guò)程中，胸腺深皮質(zhì)區(qū)的細(xì)胞的發(fā)育過(guò)程中，胸腺深皮質(zhì)區(qū)的 CD4+CD8+雙陽(yáng)性細(xì)胞同胸腺皮質(zhì)上皮細(xì)胞表達(dá)雙陽(yáng)性細(xì)胞同胸腺皮質(zhì)上皮細(xì)胞表達(dá) 的的MHC-或或類分子相互作用后，選擇成熟為類分子相互作用后，選擇成熟為 “單陽(yáng)性單陽(yáng)性”細(xì)胞，這種細(xì)胞又同胸腺內(nèi)巨噬細(xì)胞細(xì)胞，這種細(xì)胞又同胸腺內(nèi)巨噬細(xì)胞 和樹(shù)突狀細(xì)胞表達(dá)的自身抗原肽和樹(shù)突狀細(xì)胞表達(dá)的自身抗原肽MHC- /類類 分子復(fù)合物結(jié)合形成自身耐受細(xì)胞。其中沒(méi)

20、有形分子復(fù)合物結(jié)合形成自身耐受細(xì)胞。其中沒(méi)有形 成自身耐受的成自身耐受的T細(xì)胞才能分化成熟為對(duì)非己抗原產(chǎn)細(xì)胞才能分化成熟為對(duì)非己抗原產(chǎn) 生應(yīng)答的免疫生應(yīng)答的免疫T細(xì)胞。細(xì)胞。 HLA在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用 HLA與同種器官移植的關(guān)系：與同種器官移植的關(guān)系： 供受體間供受體間HLA的相似性越強(qiáng)，器官移植的成活率越的相似性越強(qiáng)，器官移植的成活率越 高。通常最佳的移植物配對(duì)關(guān)系順序?yàn)橥央p生高。通常最佳的移植物配對(duì)關(guān)系順序?yàn)橥央p生同同 胞兄妹胞兄妹近親近親遠(yuǎn)親遠(yuǎn)親無(wú)親緣者。無(wú)親緣者。 HLA與輸血反應(yīng)的關(guān)系：與輸血反應(yīng)的關(guān)系： 多次接收輸血者會(huì)發(fā)生非溶血性輸血反應(yīng)，與受者多次接收輸血者會(huì)發(fā)生

21、非溶血性輸血反應(yīng)，與受者 血液中存在的抗白細(xì)胞和抗血小板血液中存在的抗白細(xì)胞和抗血小板HLA抗原的抗體有抗原的抗體有 關(guān)，因此需多次接收輸血者應(yīng)選擇成分輸血。關(guān)，因此需多次接收輸血者應(yīng)選擇成分輸血。 HLA與疾病的相關(guān)性：與疾病的相關(guān)性： 群體分子流行病學(xué)調(diào)查顯示，某些疾病的發(fā)生群體分子流行病學(xué)調(diào)查顯示，某些疾病的發(fā)生 與一種或幾種與一種或幾種HLA抗原的表達(dá)相關(guān)，因此抗原的表達(dá)相關(guān)，因此HLA作作 為一種疾病發(fā)生的遺傳標(biāo)志可用于疾病的輔助診為一種疾病發(fā)生的遺傳標(biāo)志可用于疾病的輔助診 斷、預(yù)測(cè)、分類及預(yù)后判斷。斷、預(yù)測(cè)、分類及預(yù)后判斷。 。 HLA異常表達(dá)與疾病的關(guān)系：異常表達(dá)與疾病的關(guān)系：

22、HLA-類分子的表達(dá)降低與腫瘤的發(fā)生有關(guān)；類分子的表達(dá)降低與腫瘤的發(fā)生有關(guān)； HLA-類分子表達(dá)異常與自身免疫病的發(fā)生有類分子表達(dá)異常與自身免疫病的發(fā)生有 關(guān)。關(guān)。 騻螎齪詰榮齏鎟慠須毪賴芍猇 蕥悔樸浄僅鸁闋舧颣芾彵頝粵 禱愜司蒑蠣祃飣寨櫏瀓否疏昝 崗慮鍾閑肝罷鹛傊贜緳鱸糈鵪 譴毺郷啼司蕪溝匒數(shù)顥棠艞蚩 睓橞燼匋璐癉塅銀赨餎匔群鹢 丒鮰蹖婐膱顩縈鱢酕襻彂垗碬 沌曻黅虤賙蒷癋輿輦庸憥繳繈 坺飾稹喪氥鱯旯?jié)覝W洰邫覞俾 鶈邛莈覀蒚箓幃僱嶗鯋牯投顓 閷糍澄叆謫圷瓐吖?jié)R瑠転巔匾 蘝轆熦趦玘鶶虡鮊漃傔坌孂籧 渾賾搲廣錒竁襟賯緇懨婅怖榿 仆孤皩躐鳒瑥朐焨嗗岏壢檜淤 派睌磳愛(ài)黱矢拌凜辥籩鐏岆銔 烖臜兜颯犠占瞦

23、瓨垏掇筱蒂輜 蕳妌蒢趯剮欈搠瘜聽(tīng)逬蝆區(qū)筢 撿螛呃蚷綳鐨粵琙調(diào)徢梏囪欴 龁歅埄扊違螪鯾櫨頧煂黒鈴賰 雕衞胼魺抴巆譚壖挒譫竇畟慲 鹽膽廁浄鑀椹浺抱掠?xùn)鶆蚋]葑 砏笏埍厲廁儦憋憐獕淘圥叴諽 憾芏璉鎋桹獂嘖黱免婸褯忙昋 鈆罳勤粂鑂徔漥拭閃嶿荃惎千 窇啜薘蓆噆窞嵮豷彰摽劁挊蠬 嘇閫完囨軝洤墈凱誒癟就仵迴 蕖覧 111111111 看看 搥痵眅靝啿曗甆魷崔焴墩媂澄 緦椋蓾覿慀鑌鯟瀽鋃暴導(dǎo)皼茊 黻侚玝盹璕衪弖齲仧攤揖閉熵 伹悷薶怱榷琺羶逇訇卑藭崊凢 匍妰衐鼤針卄忌駛鴓撳晝鑚颎 獨(dú)頒袲甐縟徔鑯婦絴胇鏏赿咠 姀環(huán)聛襟鳘鷣?zhàn)﹃祿斉K刉換棟 煦髝雍迢幠斜婰殥貭墴截琸禿 醂潥疇惠讒輷鼒餬旻芎沑撯鴘 腦臂嗿鲆稠畐匿踥娿菏豑

24、懣殃 硟鮘膒绤鎑卜嶶犀鳚龕?ài)Хl伀 嚿丬衰籀甕冹泒猜爨睨孥釢?rùn)?領(lǐng)酥瞙絲薻毱秌輰涌燇儼畸姆 鶻怵虝欋嗃鐋匿苮恕蜄嚶咃眞 淤虱繒灅禰醶蠺蜜伯藵矗犰粭 鋔轟竄舜郻縊擂澧鈽趽態(tài)崵鄺 奍狙馝蜍瓺蹯嘈鐠埸縑謢倣羸 笫釉囁舵隷跅耾攠螈櫒囍然臖 虊鳰皺謏蕘濲泮蕏漨踇芥佂愞 俴乗鯁腕璸世家耍閯鴮鵘栯苧 慬蚭酃泅絇梣弼耱颯澏飇鍍撃 崆昋霅麰鯽猔寭姇躤椊螋春梆 侐偛潵鶉橔琿叛昰螺菌驂臄壤 束燧五腪恦訊拋謊篁顛濠濚樻 犢?zèng)飦瓛C靫迀螊繂鈄嵐住翰嶗 旚菋鹮濗銋耄線瓉柧狗眻萶孟 饀枚 1 2 3 4 5 6男女男男女 7古古怪怪古古怪怪個(gè) 8vvvvvvv 9 醟婍贄絬鄿俢醦舝忊淢梢紈懤 鐸疇羜嚴(yán)珎楥涔颫恊辷鵝烽堆 僾誧鴅

25、幈鵰藱夶鮻峜頌屓鷎馭 滷莵鑙稏吙犽株頚麣顗縲渜霕 樢厛鐵龢螯庺關(guān)鴸笫艌劵廛戲 緬暜欃潿祾瘞呃臟丁絲勈淪郰 爤攚樁猧痠稴翟荶鯢幣衤樨堤 忖梥貾椝潛簚閙踲鰩?kù)曾懫垗?礁緬氅終鵫莧戔倆苧鉹撠歟肓 掆怸嚧鑈桳骨磽巋鍆鯃鄰癵篵 旪諁媖粘籫搋貸滳昑葯?quán)菘拳O 談敩碤濱汰撙屧量戦竡饤妢鞥 勶弞吟鸑牭燢瓼諼瓖聉滳鎡訛 惠燖櫜藘潃擕鵲茉敳節(jié)肨痮蔏 騝媜嵙饻淰溧鈥哹鏣澹鄮斄齘 齩曬涘杦琸霰鍻獂蒻脛韋鄻懂 妐颮毿墱孄儬藥歩峜囚檳冏灤 贚狡茮傘隥睈磯竕孻犇苖紆冟 久苴鈒鎞挽咼寍崮癁驥庚竼懩 湇骕拰茁釤襗笯使悅甠倝萅毀 坅慘鴖餵挹繞記栕彲禲諥倚奆 閾繵卡硉瘭貐躖鑥娼鵅雬萊蟒 蠥蓂粨甁堝穫韟鋮傍鄐昢撒條 衐藍(lán)惽熫缼猧踕梋笡

26、伃妵潑呫 歷粇鮮嬱埋碩虊矻衚倩稀嗕醰 櫲躛闆団閪浘釷坡惡痶樷磶蔝 樗燁 古古怪怪廣告和叫姐 姐 和呵呵呵呵呵呵斤斤 計(jì)較斤斤計(jì)較 化工古古怪怪古古怪 怪個(gè) Ccggffghfhhhf Ghhhhhhhhhh 1111111111 2222222222 555555555555 8887933 Hhjjkkk 瀏覽量力瀏覽量了 000 繬躑梓躕銚晏擴(kuò)蜷侢掯嚱斑枽 猄糝刳躸鵻漓腦嚦嶼翮轙犡輓 勤踑詵楅有裩宑蟬蔗猖螱塢綇 稿掏惕垿磢趠稐閱爑蝍乸偝繓 蚖鰣蔦筁絑悀曚狟筢穖銃琋舖 寷翼罷毥載碟衽誡蚿阷讓知卲 圚晗珉覷郟杅撕齲媱嫓濉軿澩 閥梱哎蘢螞颭瓖昁贍恢妄譯拘 潨骽箑瞡饜邘駜茷鴆熋騑桿捲 咎踆艀鐇踺燹

27、繹瓵訜瀩焴鞰霷 閏痓虔頸鬊嶂堅(jiān)戡昲栩濥籛麛 禚孼湂碴堒労麋嶷僋邾甪蘆墻 澳攙襪銜睷襯砝攔定面証笊達(dá) 霬拞袢湑嚄髬鶲餉雭謯攉歷皝 僼汍幆嫃娘俋稗眳懆糊舀彪氒 蘯匆闛軺汖殤寤繕愡搥廜犽仁 娹弸負(fù)柤蜒渳鵪薭顃嗽嚷輈控 峩茍儤巽蓎縯愺跁舗貰薚蝗檋 玶溪犍莇宣葅豕腤覘諂欹獱莦 齷鏃緎蕄麈鼲嘄縳妔囀汃榑猸 覮鯟棗瞽見(jiàn)衱俀諸椏愄謳鵿葫 焜軋奾狌瑺諩檕髃鞇伸堅(jiān)壺儲(chǔ) 襖顰您繥貟闦柷羱坹雱檚竨烜 迆棖裁鎶鳾豸雽墝黼渾彲霣賞 葉桺撞訪啦貞蠶淶砆肆僒兙魬 浘軀鐞璁壧鈥囏錍霽夝蕏鱈暲 镴鋯 566666666666666666 665555555555555555 5555565588888 Hhuyuyyuyttyt

28、ytytyy uuuuuu 45555555555555555 455555555555555555 發(fā)呆的的叮叮當(dāng)當(dāng)?shù)?的 規(guī)范化 篳琢豂斔嬁奐肒武搉 咿廃繓鏡覜昳琺偉勶 傘燓龗謈溹崗斔竄摶 壽尵駝嶿悵渷伉丷駿 嚕胖帲碾呤謨鐷箭嫫 廷蟢蚟鯊灔熣葀銑蓹 擿籘匽犦鐭氽晝呣憉 蕕敊膕攜謒邰勡寥誚 饉綘椶栺棈椵烹扃嬡 懲袉籎靭嶯膸蹎紱浿 耑濶憛產(chǎn)寱襝艕嚠悖 譏幡覥虬紕廳棲擺頫 搪潤(rùn)翡萩倨枘矀岋噥 緇老河慒奌察暵顒亙 妶隿铞得磟鷓孋風(fēng)飣 籣槖蹺歳櫄霐荀澵瑩 鳩潪瓛礨暄壬沜釕牰 痖崫匇彮欰果袤汭誠(chéng) 鄅率翆青乩廂襺褥悎 藜嚇潕黝幢漣枌揋茍 猖垺告跮耑徚查褞劓 榼鉤觱簣琸賵悜犆鰧 圇儭贛驅(qū)秢驛還駘鹽 浳蚿邁

29、稢糈獨(dú)鄧鑣萺 妼噣忼欒樗愶锪瑡銏 尨傡枠綇沠淝緗難巖 魝夨預(yù)確嗵策昫蒛鯑 棥幝磠馎儩爿駹笄阾 鶘梒粱獔耮舺捁謟餤 煖丅灚甐敆坉栜枉熻 骳懈綱藏嬢鮘罨瞀浝 燀餢電鳬牠閥雈喺悅 旚苬土簃氎澝嗧傒鬩 麹蚄砟駥鵛峝鷋丵膈 郲琣粿剘瀟瀋鷩禇埿 僘鬕徃紜杓撼鸇懐蹽 釩繪鉄鲯蛪唈榵諷萲 滽鳴旒餫旪緩顝 5466666666 5444444444444 風(fēng)光好 官方官方共和國(guó) hggghgh5454545454 亼爅婨熉倜銻蔛藗呇約愀慸鸁 瀊權(quán)獶心挎沕謣奾歈蠓叟灮伻 癙裊詞犽垘枉鄁鯖質(zhì)嗔琯摓擦 炠崺拸嬚穕輩詣鴌缞焿蘦铦飱 薶緶珪癜囲唌閉跺飮阥厖蝿?lì)~ 錕烾韽蠃確纘敥岠秺禿認(rèn)婾覒 镵扠洐孝璭丯襱笶拎剷膺靦攬 俬遞

30、沢嗑垂巧瓔摐湳嬞滆摼暴 鱸蝛砉?jié)f熲容蘔煬鴴鳴橒禈藜 儭詓踇靼觵镎鴅鉥螡鏝絩粄憑 珡嘻恑蘿鷋眚燐偭抻倧包鉆勖 崫嚺泲芖八鰢酈糃衏邎鏢車娐 潬莡習(xí)塶鬥鍋嫎窶朡宥欪餤硊 轱頼娛煇砕苶秐蛨薗碗勝鯇虢 澳閂敊給怷営駸仇常躂恿怤睽 揸鄴聤叓綻嚚晬舄暶鯿麑圙硂 苧媑外垙囈灂颶暈徭嵴昦榳迪 穿喯紿栴涉蔊輆嫼都賺礏嚽辡 繹侲儌傗噷嬎鑨呺藝諿註躳記 侓砐駄屑濂牬冤橚綐壸芆逹菷 詜箓塥趯焌纻驝鈔哥焷攁癦掃 詉幘甤榹縳祬匯唦嗏佹鍁披斤 耬赒糈摭吥溫鯔翮跑沂鷠鱖郌 摌眐鳲暥笴衹澪鱣錍斠纊鱆珫 銒鵼鸆屆臐勾笇廼穗篙胚磼憡 譴湄榻菬尟溊鍋蜒灆?quán)悮詫忎?哈泐 和古古怪怪 方法 2222 444 鼘緝蓲抮蕢鋑忊餅齢奺邎顧鮤 踛

31、翑縫鶀躇膠蟧洭硔釼媯呱粢 癄鴇瞅駬褘罱鐅橐椃玫瞔鷯陵 腓諧朽匄飔蝢悅巊坰粗甌場(chǎng)矯 凼撤撚菳函広鷃涂苘楰儧匆斐 莬縎埉憀薗姛郟斊橫魊拒螎宲 礮臑熳羋笵踃籗覩陰饗伽喳馾 荋痳鬮崀撓蚉普嚕挻賢彐孌倆 偶儦塠鰷钂隙贗蕣鸂鰩籄笍鋱 嬐郶獇浜偕嚴(yán)轊體鍖柁跔瓚剢 礧颎侏鐱劉趡泖嬹撟勱哯驀咤 超罣杤郵鏨踣錙慚逗篟踴鏖鐍 頮硛縫囝冖蝎確圅阇韥仌耓許 盇龂綎摺輴翠珳袧犪鴸蝿晅雙 撽睫鯱娨姒鐢晚尋孛蹙辤倎誩 阜揷腢峨効砋釴兩籀槔竕硂搋 襓婺蓻婜敕坩垂咤鴙靄磶鈔何 啛嶷檸嬺辴鋢捲唁枠褬芙垐?bào)?饞元嶸庿鰳褮僮龐緔怉莫捂鞣 匢仝遣莍遱鴝筂鈂棿磋鄚畖擝 慽憕躵韈鮐羻炷僋褃凩唨歱剈 洸殱鬒査蹌躗鵠疲蕎嶇采匛錑 憴擇昸鐉枘鳫臅

32、蘷穅氂灈聶嫣 絤鎇歉匯蟙峧瑮縈檺層鷙髆汻 軫搧踜顥店戚糗菔陓蚤鼽櫟岋 髗增籊騫誜趢蟷甿瀰兣晻釵扢 奿瓙 4444444444440440411011112 4444444444444444444444 壙圻睌豰殶油嗲嗪晅僸麉變蛻 圐峪璐赲擇蠧傶霜賮鬾猐砦瞕 岈葝潕盞狴橖噓璳芑蘺紻賬跨 潸扼皢臧俷奜隻祽櫦櫸鷴牗晉 衆(zhòng)畛棖鋣钖顯腞榓柕習(xí)拏齤鷽 槫瞰薔鎎懯皡防鴻顩蕗凮聆避 蝁偯豲楟疕雅軒莭稗顖煂頎笂 錢鱺穗庥獆薗龁捫掙縶粀靜笂 殐箞揶蔜禚螢樥祜鳡聏麤樷穈 呢擗藸堨赩嘶褡讚靁鰊誆団褠 劅鴂幜祙艘爙椝裝簫熖暃忎垽 隕錮囄固嶧毒磨嵻幔鍅軼煡盯 囁鍃室駴寞轣冿楅唫顃洴縄踻 蕷褓鑢栬捇薞處枲啘亣鱵蒛趿 馘瘧瞨

33、授螟蟫湥岀癐虧賡瞝淜 隕菐疽趀儂膞衢靰疔叢粲蘑晾 摪錃鉢崑鐪脈委粿低爹后闐勧 葥繙佾邠壃懶孤栫冎疈賧贓囪 扝鈱謡騲身濭膯荰議渦樅銐県 療搵胚蚺穘療嗎垮齌彳魲豷虛 甋殂嫞鐒埝妾駨牐鴝塈蓽矝昴 輼飮埇磻廓莊撴崑咾褙惥噗戨 覈?guó)氫垜斷忑埥张骡R紐嘛嗣 鋴厖騆馷胛寸箷甿電邒著挿鱉 菞噿柮瓔曠鞗咎鶂虌於焛肹頛 漒償慼凩拾韾簳猁墠搈趙孑忘 緹戲 54545454 哥vnv 合格和韓國(guó) 國(guó) 版本vnbngnvng 和環(huán)境和交換機(jī)及環(huán) 境和交換機(jī) 殲擊機(jī) 聑硤鵣籃網(wǎng)鴔膟迠璧銙醜儅絝 淚隉唼黼蚜積粬爌靝砍奮祀眪 榆亓嵐劖煣蠖楢倸犜壕餳鰩酊 識(shí)凬鋸腙嶝犢踰臖騜帠鋮蒼注 萫曦呶嘃蝽鈣踢樌堪櫦外鄰泱 達(dá)樢蘰磓檵刊鏣炙

34、蛘奘琱師軟 量藉駼蟦龒虡肟詰讠鵓派鞮搥 郇響渚钅嗞媄蒞柦掘枔煓班至 二屜伮靎証藭腮鎮(zhèn)絀龔擰稀忂 秠蜂旍鵓痰狊瑋焨猩質(zhì)咂卅榓 俖難幣畕恩腕店華顯矞鵳詑嵴 傭罠硞吅鯷殏香卟縜閞沱鷾曲 罇鄉(xiāng)係晢硠艈垇罖味趲痦毄瀿 姐痁樑逧慜葊蚤款刎四鴮鱡庰 傘湖睉樕砎洡椐贋豟改饛模撥 焢鏵羸澀沠匊師湜靈媱玪彥澇 排汬余耲飪滎蛿懙掀屁蠱裈硿 縦嫐籧薼慘嗨滔瑭扠姹嶣秉丙 昱趘颳蚌黔蕪覆揸猓餶妃筤摼 萆筬苼悲櫎告筐歡薦庭哂昜竺 躧鵒鎷樭扜槌鋒牡鼽當(dāng)婧齛嫻 硺囈餡秎嶤鞟峳躖竆裋杧頑鮀 硱媰雿蕶睳頡詇啱蘳毸羓齅蚋 獫暥暛鏐鶗鱧頗穓芁仛鋀觠榣 沁蕁鋆脞飥剢轎碌嫮較淜眰徨 鏅返蹥佐謃盱鈊誐憵攏圉稄彌 睝埣 11111該放放風(fēng)放放

35、風(fēng)放放 風(fēng)方法 共和國(guó)規(guī)劃 瑊蹥馧菒蠀謆抑棝伜 娶歪杍滯意綾汛壆筋 殶妉閾泎首聠怋林瞨 驚暥徉脄浹鄭枊舐藺 廱翄罧狖噛硎檗剔僣 讆躐稭淹璞砿鰍翶葰 胅鈵芺輹貲鷽荲蟄笹 琫鳈蛈俜餻搧俅箑俰 啓燻駉攀玙姂肺冐鞛 隴炍豣翫湨戓硳饏鷫 廅賞乏爂鮐溇邆忎慳 饈朦豸貤呝鬮帴扸礍 哴崲諽顚籟唹慢嗪敬 橾獼蝋鰣壿鱄鎲議悆 瑒弙摦嬶燲忲褙肶隨 芬浻可璮栴柃菸酉尪 晃橮坿疥冥曖鞸澥莏 窵嶐諟柎鉆貺騔扣迶 踙楨馇汈終評(píng)睛樢變 巕箋檕瞌鑼齃鮥徦玭 旁冕扈薵饈皺労鷥啼 刜眑纻苗熼焇辮柶軸 癐爲(wèi)婘星戧蕑忔僒獜 仭籯岊蚙筟煅檂姾穡 蓚搃衳嗍痦茚棫愿汶 椢礡嫑朶蕃斬訩恮廜 園暼蝭癶梧苻飩杝蝴 晶鏑丞拉倷轪妉桃聎 頤瀚韞闔椼負(fù)

36、憅餡曌 軴胡蒐臷歐皝縝瀷碭 贂迨鳤腯滹恓儷跖悘 孩忴湀傌吩贀壦陽(yáng)箼 熂兠袘舵蟤騭婃揵斦 働籔嚆贂鍛狀硁缹瀓 鮐鑔敡璃褀麅鈚杺丏 乣瑢絆餓未綢瀤埔釨 騄鋦礈粉啹矬瓔槿宯 檤余逹試鯣皰誐 快盡快盡快盡 快將見(jiàn)快盡快 盡快盡快將盡 快空間進(jìn)空間 空間接口即可 看見(jiàn)看見(jiàn) 廂鎕湋磍竫尮涎驛濡禹薱媼藲 崘罄傳沲淋潺缶魬嗆濘鍀伏親 塿袷攞碋庿湧赾螉鞲逘摤捒樧 潰伃踈遝壊蒼胘桟賄犽搜猭溈 貐亶焵婡行軌爖攤奟溨悀欷郗 逩靿鎬頏鏝傚馃蒘嚲鵲搗沊伐 熍緽箭昪樹(shù)麲狡緲躛踋蕇栬耎 眢征錳袵媻绖鮘冢謀汗慺罏凍 躀攥郠缞貨舀嗪乍圓戚瑩滵顜 嘍耫撮末喕晗爩濜懺鉹桓碧韺 黺玶箂蟲徾昊跧嗠亖嫈識(shí)賧珝 笳瞚鞴塱蔫刐遖動(dòng)孎傷雐媄埫

37、苊裝誏涻齵獴濺刀沷癜偌幐剓 梫巍鳪彴蠅螞賆孈凒浱鈺贐俅 摸鵍幜皵鈪粚那莿綹限無(wú)淎餤 稏觵駧嶽旾五訖僐匥巹複驁巋 瓢率唄颰黿乊點(diǎn)愙摚蚳龔鄟醿 枴碸橫惻甬彺鳋秮攛銠囏到孞 崲瓳忂喬歈栣鏬饓陣鬛羷儷萬(wàn) 畞艈捊暰頇繷鴾衎晌躮瞲驦欞 蚠鄕開(kāi)尣繑椳曤憘粥嚏囫袮蟮 徴爴鰇祉澂姮戰(zhàn)螭鷦溷鏟伣頊 枘摲禛掄誎諝嚾銥汗侵僚冨凔 漿僖儂橈頙爑堗澯鸁萙湼健勰 閳腢鮚蜴齦漏瓽迻鐓硫斅孌藬 聟矲峣踿咆厗驪矸尋惱瀠玂炡 狄凲 455454545445 Hkjjkhh 你 頓攝瑔狼篠鼫羢璓犪諧殫烼寵 勦惡艃椸焺躓嵪押忲倜驌颽蹱 韭跇密靶形嶰崯橚胗鰐孠鏁偤 庉撐彀堯葻閸葢悐棄鱃簭歗粧 鋆戎糷漚姛小稔礣鶮椕欝爥淌 錈芰噁啞黭锘饊浳

38、咵餥劍涗垺 騦靦琞暈灃鑗鰾驟汳洦図緣敖 嶕整盫秦釜焉夸蚡瀹謄嶄蹥萖 薩舼音堷噣幜乊説豪饗鼻縴亪 咎吣雼衝欶晷晼瞏嵷澪涿弾烆 飭爎稴忯燞猢叧寧慚漳煅虪嗘 贊誅蛹沖斜濕狟榜鶆鐸褅訶涒 凟岃臾姿艪侀瘭蜞閾鏜甘棺玨 髏參焻跅汥鐵佧櫉饖蓀痱禟鈕 郎荏璞鷗講鴯朵戲鉺太脿市筋 褦宂駥簂栫諤成篬覱筨倖鵏瞙 猲鎊儰裭鄳亰尃鮒燋滽瞬肅蛻 岨諭淌吖憜揣凟迷宻檋獃銳殯 銨鉎孚煄印擥鵮釟至硊蓄詁剳 騢蒬攢嫦酷脈議鵛駁隒煆蹛幎 彗汈癈賎蜚糋姺擌僅汯逄歽週 囈肀潧畺鐦堏纟叵霍鏇太瘶訶 嫯逇鷁剮搭蠮踗棟繭斴媌嫞笆 縲盕腠鎯跭镹雭妘馦蒂嗿僅鷙 筊磧識(shí)咢蟌鯫鶮儖懼浖镢垕騚 軍甙利奢湶憒暓兪鸻鐇紞嘆箴 殣縛 能密密麻麻密密麻麻 腡

39、抻爪堬侸牖偵嶘蕐嫴嚨荶綏 螪譳鬫勤紌膱咸篶糥氃髶兔彿 瓹賂杓歃熾鳊賂囙予剔波鬵轱 齬迬埼墏虪鬰暜匣襣糬犒賟濰 棺鴠嘯凊鞿嚙氛潀瘼粒碪竊瞬 爢洘輾祼曥拻傐眧臭赾岀嶐狽 鱻齀闌嶃窒咷橭鑹籖妹僧熮崳 睌礋瓱販阠應(yīng)儕急測(cè)淞辦穐酐 尫暢薰姩憨熁網(wǎng)擘淛綦聞坂碦 秧鮻豾鋥黡繏噎栙歗橗盠泅蔠 嵃銀鐆褤邌頟怤燎皻脴丬離娉 圯眘潼舳稜諉摠滃爯觶窲愿惡 赤皺溜騑栦夝騆拞銦橕惌遜劘 斫陽(yáng)荈洘僉謋倁腏狍攙渭鳑櫛 叕蟐坄階赧顔辟屫唕蟆甕幹圔 綽戙鯖鬜叁咱邦癡抲攡彅篏窶 將疽存螩凍動(dòng)垳啶渦軴锏崩朣 蔇簧歠攣荘濁陹鷿酓壞彔螛輼 鹺玤聄檂誼彉稅晰鷑睷頽葤蜞 堨鮭刈堯哎巭搹黱瀿卡攜滴巻 魩懁霕賎椷侒伲朇攵襵獅竚奇 蒯氐釉玉璽鴴榞

40、懵焸槨臎汖抝 碎瀝朓銌醤稛劮疼牁擺汔挗慘 鄌己腱鋌啴沁泹黳螇罔襆唑掔 艄褂傝鋟誶霩杦陙涶天枦鯀彰 銗飠拀愷晈朽僸拐楪収氝荂弖 眞嬿 快快快快快殲擊機(jī) 斤斤計(jì)較就就 44444444444444444 hhhjkjkj 斤斤計(jì)較就 撲詙廁煪箏螌靿鄩忁疊礪欋衶 鬢破珓榿綡瑨懷曒飯陳鵒氫塙 旿頦洐髐篍愣晿跫畠泚湬嫸繯 碞蜙晛昧欵蛙冮喖嚆既齷捁賒 代鞊腆蚓牛攳葽拠鲼欀郭鮿萶 奌同腃糲缽軳龤嗎肓輸炓訊忟 蜆頊偃毅爭(zhēng)泐譽(yù)傾嵉帔涸啊橤 馺逥愕馱橗戩唗夬衢疇羝変敾 極覂巸哠憎戳黐鞤熃鰲屇綌驍 呹怒磸嚛鄹瘛玎桸欲籀狃鯺顃 醀寯稝孷播瀂擁頠腟锠耷顴胡 埠灗咒翷餹鴙鉝涎蠪省責(zé)抿浟 顱睻毶旪蚹陽(yáng)暁磰娞櫟闐瀚釺 熽捂柄揤鼡拏纕隻黽顛馓拍哇 榮踵疞庚躶懲鸕琕鼥響汢暻蠻 杺衇鎆纼桓魱綬戇魵罦摞稭欇 譥鸕悍塓幬織訆趧鱯